全 文 ：收稿日期:2010-02-26;　修订日期:2010-09-30
基金项目:广西壮族自治区自然科学基金(No.0899012)
作者简介:李　江(1970-),男(汉族),四川金堂人 ,现任桂林医学院附属
医院副主任药师 ,硕士学位 ,主要从事临床药学及中药新药开发工作.
三叶青藤醇提物的急性毒性及抗炎作用研究
李　江 ,邓　航 ,付　翔 ,黄桂红 ,罗昱澜
(桂林医学院附属医院 ,广西 桂林　541001)
摘要:目的 对三叶青藤醇提物的急性毒性及抗炎作用进行研究。 方法 三叶青藤醇提物以最大浓度及最大给药体积的
药液对实验组小鼠灌胃给药 ,对照组给予等体积的溶媒 ,连续观察 14 d, 记录小鼠毒副反应情况。采用二甲苯致小鼠耳
廓肿胀法 、角叉菜胶致大鼠足肿胀法观察三叶青藤醇提物的抗炎作用。结果 观察 14 d后 , 给药组与对照组全部动物健
存 , 对照组及给药组小鼠体质量平均增长分别为 38.40%, 36.29%, 无明显差异(P>0.05), 未见任何急性毒性反应 , 小
鼠灌胃三叶青藤醇提物的最大耐受量为 3 063 mg/kg。三叶青藤醇提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致大鼠
足肿胀有显著的抑制作用。结论 三叶青藤醇提物毒性较小并有显著的抗炎作用。
关键词:三叶青藤醇提物;　急性毒性;　抗炎
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.02.021
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)02-0312-02
StudyontheAcuteToxicityandAnti-inflammatoryEffectoftheEthanolExtractofIl-
ligerarhodanthaHance.
LIJiang,DENGHang, FUXiang,HUANGGui-hong, LUOYu-lan
(DepartmentofPharmacology, TheAfiliatedHospitalofGuilinMedicalColege, GuangxiGuilin541001, Chi-
na)
Abstract:ObjectiveTostudytheacutetoxicityandanti-inflammatoryeffectoftheethanolextractofIlligerarhodantha
Hance.MethodsMiceinexperimentalmedicinegroupwereintragastricalyadministeredtheethanolextractofIligerarhodantha
Hance.bythethickestconcentrationandthelargestvolumepermittedandwereadministeredtheequalsolventincontrolgroup,
theacutetoxicityreactionofmicewasobservedinthesuccessive14 days.Theanti-inflammatoryeffectofthedrugwasstudied
withtheswelingofearinducedbyxyleneinmiceandtheedemaofpawinducedbycarrageenininrats.ResultsAfter14 days,
allmiceintheexperimentalmedicineandcontrolgroupssurvivedandtheincreasingratesofweightinthetwogroupswererespec-
tively38.40% and36.29% (P>0.05), noacutetoxicitywasobservedinbothgroups.Themaximaltolerantdose(MTD)of
theethanolextractofIlligerarhodanthaHance.byiginmicewas3063mg/kg.Theswelingofearinducedbyxyleneinmice, the
edemaofpawinducedbycarrageenininratscouldbeinhibitedsignificantlybytheethanolextractofIligerarhodanthaHance.
ConclusionTheethanolextractofIlligerarhodanthaHance.haslittleacutetoxicityinmiceandsignificantanti-inflammatory
effect.
Keywords:TheethanolextractofIlligerarhodanthaHance.;　Acutetoxicity;　Anti-inflammation
　　三叶青藤为青藤科植物红花青藤 IlligerarhodanthaHance.
的干燥地上部分 , 为壮医常用药材 , 在广西有较长的使用历史。
其性味微甘 、辛 、涩 、温 ,功能祛风散瘀 、消肿止痛 , 壮族民间用于
风湿性关节炎 、跌打肿痛 、小儿麻痹后遗症等的治疗 [ 1] 。本课题
以三叶青藤为研究对象 ,对其口服急性毒性及抗炎作用进行了初
步研究 , 为三叶青藤的临床开发应用 、质量控制提供科学依据。
1　材料与仪器
1.1　药物 三叶青藤 , 购自广西玉林市药材市场 , 经桂林医学院
药学系天然药物化学教研室唐爱莲副教授鉴定为青藤科植物红
花青藤 IligerarhodanthaHance.的干燥茎。药材粉碎后过 10 ～
20目筛 ,采用 10倍量 95%乙醇加热回流提取 , 1.5h/次 ,共 3次 ,
过滤后合并滤液 , 减压回收乙醇 , 继续减压浓缩至稠膏状 , 在
50℃真空干燥 , 干燥物得率为 2.64%,临用时用吐温 -80和纯化
水适量溶解配制成所需浓度的药液。
吲哚美辛肠溶片 , 广东华南药业集团有限公司 , 批号
081108,用 1%羧甲基纤维素钠配成混悬液。
1.2　动物 昆明种小鼠 , SPF级 , 雌雄各半 , 体质量(20±2)g;SD
大鼠 , SPF级 , 雄性 ,体质量(140±10)g, 购自桂林医学院实验动
物中心 ,实验动物使用许可证号:SCXK2007-0001。
1.3　试剂 角叉菜胶(Carageenin), 上海贝基生物工程技术有
限公司 , 批号 GS0622B5092,临用时用生理盐水配成 1%的溶液;
二甲苯等其它试剂均为分析醇。
1.4　仪器 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);小型真空干燥
箱(郑州长城科工贸有限公司);电热恒温水浴箱(上海医疗器械
七厂)。
2　方法
2.1　口服急性毒性实验 [ 2] 取小鼠 40只 , 雌雄各半 ,随机分为对
照组和给药组 , 每组 20只 , 禁食 12 h不禁水。 给药组以三叶青
藤醇提物可配制成的最大浓度和最大给药容量对小鼠灌胃给药 ,
1次 /d, 对照组给予等体积的溶媒。给药后常规饲养 14 d, 记录
动物体质量变化 、饮食 、外观 、行为 、分泌物 、排泄物及中毒反应等
情况。第 14天 ,称重 , 处死 ,解剖小鼠 , 肉眼观察其心 、肝 、脾 、肺 、
肾的外观。
2.2　对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 [ 3] 小鼠 50只 , 雌雄各半 , 随
机分为空白对照组(灌胃 5%吐温 -80溶液)、阳性对照组(消炎
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时珍国医国药 2011年第 22卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.2
痛 20mg· kg-1)和三叶青藤醇提物高 、中 、低剂量组(240, 120,
60 mg· kg-1)共 5组 , 每组 10只。灌胃给药 , 1次 /d, 连续 3 d。
末次给药 30min后在小鼠右耳廓两面用微量进样器均匀涂抹二
甲苯 0.03 ml致炎 , 致炎 30 min后 , 颈椎脱臼处死小鼠 , 沿耳廓基
线剪下两耳 , 用直径 8 mm打孔器分别在两耳的同一部位取下耳
片 , 分别称重 ,计算鼠耳肿胀度和耳肿胀抑制率。
2.3　对角叉菜胶诱导大鼠足肿胀的影响 雄性大鼠 50只 , 随机
分为空白对照组(灌胃 5%吐温 -80溶液)、阳性对照组(消炎痛
15 mg· kg-1)和三叶青藤醇提物高 、中 、低剂量组(160, 80, 40 mg
· kg-1)共 5组 , 每组 10只。灌胃给药 , 1次 /d,连续 3d。末次给
药后立即于每只大鼠右后足爪部皮下注射 1%角叉菜胶 0.1ml/
只致炎 , 分别于致炎前和致炎后 1, 2, 3, 4 h用毛细管放大法测量
右后足容积 , 计算足爪肿胀率。
3　结果
3.1　口服急性毒性实验 三叶青藤醇提物可配制成的药液最大
浓度为 102.10 mg/ml,实验中小鼠允许的最大给药容量为 0.3,
ml/10g体质量 ,以此剂量给药 1次后 , 在连续 14 d观察中 , 小鼠
全部健存 , 动物的外观 、食欲 、行为活动 、排泄等均未见异常;处死
后进行解剖 , 各器官未见异常。因此 , 小鼠对三叶青藤醇提物的
最大耐受量为 3 063 mg/kg, 各组小鼠体质量增长情况见表 1。
3.2　对二甲苯诱导小鼠耳肿胀度的影响 由表 2可见 , 三叶青藤
醇提物中 、高剂量组对二甲苯所致小鼠耳肿胀有显著抑制作用。
表 1　三叶青藤醇提物对小鼠体质量的影响( x±s)
组别 给药前体质量 m/g
给药 14d后
体质量 m/g
体质量增长的
百分率(%)
空白对照 19.50±1.27 26.99±1.26 38.40
三叶青藤醇提物 20.40±1.17 27.80±1.05 36.29
　　n=10
表 2　三叶青藤醇提物对二甲苯诱导小鼠耳肿胀度的影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
耳肿胀度
m/mg 抑制率(%)
空白对照 - 11.21±3.57 -
消炎痛 20 7.12±2.85＊ 36.49
三叶青藤醇提物低剂量 60 9.88±3.62 11.86
三叶青藤醇提物中剂量 120 7.14±3.40＊ 36.31
三叶青藤醇提物高剂量 240 7.70±4.41＊ 31.31
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=20
3.3　对角叉菜胶诱导大鼠足肿胀的影响 由表 3可见, 三叶青藤醇
提物中、高剂量组对角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀有显著的抑制作用。
表 3　三叶青藤醇提物对角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 正常足容积 V/ml 注射后不同时间的足肿胀率(%)
60min 120min 180min 240min
空白对照 - 1.20±0.16 39.55±20.04 52.60±18.87 54.75±20.08 46.69±15.55
消炎痛 15 1.13±0.13 25.04±10.41＊ 31.94±13.08＊ 28.83±11.79＊＊ 26.48±7.87＊＊
三叶青藤醇提物低剂量 40 1.05±0.08 46.39±16.82 60.20±14.67 58.10±17.01 50.77±18.93
三叶青藤醇提物中剂量 80 1.17±0.15 25.82±11.92 34.29±10.42＊ 33.20±16.44＊ 29.77±15.06＊
三叶青藤醇提物高剂量 160 1.21±0.15 24.47±10.75＊ 41.50±15.01 28.66±16.45＊＊ 28.29±17.02＊
　　与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
4　讨论
三叶青藤作为一种传统的抗风湿壮药 ,过去是以白酒浸泡或
水煎冲酒服的方式入药 ,患者应用很不方便 ,并且对于一些对酒
精有禁忌的患者无法采用这种方式给药。因此 ,需要对三叶青藤
进行深入研究 , 明确其有效成分并进行剂型改造。目前 , 国内外
对三叶青藤的研究多限于其生药学鉴定方面 [ 4 , 5] ,尚未有三叶青
藤药理学毒理学方面的研究资料 ,因而限制了这种传统壮药的进
一步的开发利用。急毒实验表明:小鼠对三叶青藤醇提物的最大
耐受量为 3 063 mg/kg, 如果按照生药材换算 , 相当于 116022.73
mg(按生药材计)/kg。而三叶青藤成人(体重以 60 kg计)日口
服最大剂量以 1990年版的《广西中药材标准》规定 15 g计算 , 小
鼠的最大耐受量是人用剂量的 464.095倍 ,据此可认为三叶青藤
在常用剂量范围内是安全的。
急毒实验时发现 , 若以 0.4 ml/10 g对小鼠进行灌胃给药 ,
小鼠容易发生腹部剧烈收缩抽搐并迅速死亡。分析是因药液粘
稠度较大而使胃及肺的运动受限 , 引起死亡。这种情况 , 往往并
非药物的毒性所致 [ 6] 。因此 , 本实验选择最大给药容量为 0.3
ml/10 g体质量进行小鼠灌胃。
本研究初步证实了三叶青藤醇提物确有显著的抗炎作用 , 为
三叶青藤的后续研究提供了实验依据 , 有关三叶青藤抗炎的有效
成分及其它药理学作用有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ] 　广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准 , 1990年版 [ S] .南宁:广
西科学技术出版社 , 1992:10.
[ 2 ] 　国家食品药品监督局.中药 、天然药物急性毒性研究技术指导原则
[ S].2005:1.
[ 3 ] 　徐叔云 ,卞如濂 ,陈　修.药理实验方法学 ,第 3版 [ M] .北京:人民
卫生出版社 , 2002:882.
[ 4 ] 　王　民.三叶青藤及易混品的鉴别 [ J] .广西医学 , 2000, 22(6):
1408.
[ 5 ] 　朱　华 ,张可锋 ,高　雅 ,等.三叶青藤生药学研究 [ J] .海峡药学 ,
2008, 20(1):55.
[ 6 ] 　王瑞国 ,林久茂 ,郑良朴 ,等.余甘子的最大耐受量试验 [ J] .福建中
医学院学报 , 2004, 14(3):36.
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