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齐墩果酸口服自微乳在大鼠体内的药动学研究
谢 珺1， 温 明2， 刘建明3
(1. 南昌大学第一附属医院药剂科 江西 南昌 330006;2. 南昌大学医学院药学系 江西 南昌 330006;
3. 江西医学院上饶分院 江西 上饶 334000)
收稿日期:2011-05-12
作者简介:谢 珺(1978—) ，女，主管药师，主要从事临床药学工作。Tel:13767331322，Email:wm667788@ 163. com
摘要:目的 研究大鼠口服齐墩果酸自微乳给药系统后齐墩果酸的药动学特征。方法 将 24 只 SD大鼠随机分成齐墩
果酸自微乳实验组和市售齐墩果酸片剂对照组，运用高效液相色谱-质谱联用法测定不同时间点血浆中齐墩果酸的质量
浓度，使用 DAS2. 0 统计软件分析。结果 经胃肠给予齐墩果酸自微乳给药系统和市售齐墩果酸片剂后，t1 /2β、Cmax和
AUC0-24分别为(4. 172 ± 0. 861)h 和(10. 076 ± 2. 019)h，(201. 33 ± 56. 01)ng /mL 和(70. 09 ± 14. 88)ng /mL，(1749. 29
± 401. 22)ng·h /mL和(416. 25 ± 80. 34)ng·h /mL，结果之间均有显著性差异(P ＜ 0. 05)。结论 与普通片剂比对，齐墩
果酸自微乳给药系统显著提高了生物利用度。
关键词:齐墩果酸;自微乳给药系统;药代动力学;高效液相色谱-质谱联用法
中图分类号:R969. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)02-0257-04
Pharmacoknietic study of oleanolic acid oral self-microemulsifying system in rat
XIE Jun1， WEN Ming2， LIU Jian-ming3
(1. Department of Pharmacy，the First Hospital Affiliated to Nanchang University，Nanchang 330006，China;2. Department of Pharmacology，Medical
College of Nanchang University，Nanchang 330006，China;3. Shangrao Branch of Jiangxi Medical College，Shangrao 334000，China)
ABSTRACT:AIM To determine the pharmacokinetic parameters of oleanolic acid oral self-microemulsifying drug
delivery system (OA-SMEDDS)in rats． METHODS Twenty-four SD rats were randomly divided into control group
with tablet and experimental group with OA-SMEDDS． Plasma concentrations of OA in rats were assayed by HPLC-
MS method． The pharmacokinetic parameters were computed by DAS2. 0. RESULTS The main parameters of OA-
SMEDDS and OA tablet:t1 /2β were (4. 172 ±0. 861)h and (10. 076 ±2. 019)h，respectively． Cmax were (201. 33 ±
56. 01)ng /mL and (70. 09 ± 14. 88)ng /mL，respectively． AUC0 －24 were (1749. 29 ± 401. 22)ng·h /mL and
(416. 25 ± 80. 34)ng·h /mL，respectively． CONCLUSION The self-microemulsifying drug delivery system im-
proves the bioavailability of OA in rat significantly．
KEY WORDS:oleanolic acid;self-microemulsifying drug delivery system;pharmacokinetics;HPLC-MS
齐墩果酸(oleanolic acid，OA)为一种五环三萜
类化合物，以游离体和配糖体的形式广泛分布于青
叶胆、女贞子等双子叶植物的 60 个科约 190 种植物
中［1］。齐墩果酸具有多种药理作用:抗炎、抗肿瘤、
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降血脂和血糖、强心、抗高血压等［2］。但是由于齐
墩果酸的水不溶性及溶出速度很慢、口服生物利用
度差，限制其在临床上的应用。有研究表明，大约有
50%的口服药物和近 40%的候选新药由于水溶性、
透膜性差以及 P-糖蛋白外排等因素的影响，造成口
服生物利用度低、个体差异大，而影响药物的疗
效［3-6］。为解决这一问题，国内外学者采用了各种
技术，包括:微粉化技术、固体分散体技术、环糊精包
合物、合成水溶性前体药物、纳米粒、聚合物胶束、微
乳等［7-9］。其中自微乳化给药系统(self-microemulsi-
fying drug delivery system，SMEDDS)就是一种较常
用的新型制剂，且能显著提高某些药物的生物利用
度。本研究制备齐墩果酸-口服自微乳 (OA-
SMEDDS) ，以市售齐墩果酸片剂(oleanolic acid tab-
let，OA-T)为对照组，研究齐墩果酸-口服自微乳口
服给药后大鼠体内的药动学，为下一步的临床前研
究提供基础支持，现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 药品与试剂 齐墩果酸标准品(中国药品生
物制品鉴定所，批号 110709-200505) ，内标罗红霉
素(roxithromycin，ROX，中国药品生物制品检定所，
批号 130351-0608) ，齐墩果酸-口服自微乳(南昌大
学医学院药学系) ，市售齐墩果酸片(四川康福来药
业集团有限公司，批号 20090506) ，甲醇及乙腈均为
色谱纯，试验用水为娃哈哈纯净水，其余药品、试剂
为分析纯。
1. 2 仪器 LCMS-2010A液质联用仪(岛津公司) ，
色谱柱为 Shimadzu Pack VP-ODS C18(5 μm × 150
mm ×2. 0 mm岛津公司) ，GS-15R 型高速冷冻离心
机，N-EVAP112 型干浴加热氮吹仪(Organomation 公
司，美国)。
1. 3 动物 健康 SD 大鼠，雄性，体质量 180 ～ 220
g，南昌大学医学院实验动物中心提供，合格证号:
SCXK(赣)2006-0001。
1. 4 HPLC-MS 色谱条件 流动相为乙腈-水(含
0. 1%冰醋酸铵)= 53 ∶ 47(V /V) ，体积流量为 0. 2
mL /min，柱温为 35 ℃，采用选择性离子监测，选择
正离子及电喷雾离子化，齐墩果酸的 m/z 为
455. 70，内标罗红霉素的 m/z 为 734. 30，检测电压
为 1. 6 kV，雾化气体体积流量为 2. 0 L /min，曲型脱
溶剂装置及加热块温度均为 300 ℃。
1. 5 血浆样品采集 取 12 只健康 SD 大鼠，随机
分为 2 组，每组 6 只，实验前禁食 12 h，自由饮水，再
分别灌胃给予齐墩果酸-口服自微乳 (50 mg /kg)和
相应剂量的市售齐墩果酸片(均配置成流体状 1
mL)。分别于 0、0. 25、0. 5、1、2、3、4、6、12、24 h时间
点对大鼠眼眶取血 0. 3 mL，采样过程中注意给动物
补充适当水份。血样于肝素化的试管内，5 000
r /min离心 5 min，取血浆于 － 20 ℃低温保存。
1. 6 样品处理 量取血浆 0. 1 mL，精密量取 20 μL
内标罗红霉素(0. 8 μg /mL) ，再加入 0. 1 mol /L
Na2CO3 溶液 40 μL，混匀后加乙酸乙酯 4. 0 mL，振
荡 5 min，4 000 r /min离心 8 min，取上清液 3. 0 mL，
置于 45 ℃水浴锅氮气吹干，残渣用 0. 3 mL 甲醇溶
解，再经 15 000 r /min 离心 10 min，取上清液进样
5 μL。
1. 7 统计分析及数据处理 使用 DAS2. 0 药动学
计算机程序处理齐墩果酸-口服自微乳和齐墩果酸
片的药动学数据。并计算相对生物利用度，所得参
数进行统计分析。
2 结果
2. 1 专属性考察 由图 1 可见，在此液相条件下，
血浆中杂质不干扰样品的测定，内标罗红霉素峰保
留时间为 1. 9 min，齐墩果酸峰保留时间为 1. 5 min。
2. 2 线性及最低定量下限 于试管内分别精密加
入不同量的齐墩果酸标准溶液 20 μL，加入空白血
浆 180 μL，配置成 10、25、50、100、200、400、600、
1 200 ng /mL的标准含药血浆，按 1. 6 项下操作，测
定并记录谱图，求算齐墩果酸面积(Aa)和内标罗红
霉素峰面积(Ai)的比值。并将该比值(Aa /Ai)与理
论质量浓度 C 进行线性回归，回归方程为 Y =
0. 013 43X － 0. 062 63(r = 0. 999 7)。结果表明在
10 ～ 1 200 ng /mL 范围内线性良好，血浆中齐墩果
酸的最低定量限为 10 ng /mL。
2. 3 回收率及精密度 配制质量浓度分别为 50、
400、1 000 ng /mL低、中、高 3个质量浓度的齐墩果酸
标准血样，按 1. 6 项下操作，低、中、高质量浓度各平
行操作 5份，依法测定回收率及日内、日间精密度，结
果见表 1。
2. 4 稳定性考察 配制质量浓度分别为 50、400、1
000 ng /mL低、中、高 3 个质量浓度的齐墩果酸标准
血样，分别经血样处理后，于室温放置 0、6、12 h 及
在 － 20 ℃冷冻保存 3 d 后，测定齐墩果酸的质量浓
度，结果表明具有良好的稳定性。
2. 5 药动学结果 两组大鼠分别单次灌胃 50
mg /kg齐墩果酸-口服自微乳和齐墩果酸片后，测定
的平均血药浓度-时间曲线图见图 2，药动学参数见
表 2。
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图 1 空白血浆(A)、血浆中加入齐墩果酸、内标罗红霉素(B)及给药 0. 5 h加入内标(C)的图谱
Fig． 1 Chromatograms of negative plasma(A)，plasma with OA and ROX(B)and plasma after 0. 5
hour of injection
表 1 大鼠血浆中齐墩果酸的精密度与回收率实验 (n =6)
Tab． 1 Precision and recovery of OA in plasma (n =6)
质量浓度 /
(ng·mL －1)
日间 日内
(珋x ± s)/(ng·mL －1) 回收率 /% RSD /% (珋x ± s)/(ng·mL －1) 回收率 /% RSD /%
50 44. 42 ± 2. 86 88. 82 6. 43 43. 95 ± 2. 30 87. 90 5. 24
400 347. 85 ± 24. 66 86. 96 7. 09 356. 87 ± 30. 94 89. 22 8. 67
1 000 872. ． 32 ± 79. 82 87. 23 9. 15 865. 65 ± 55. 83 86. 56 6. 45
图 3 齐墩果酸片剂和脂质体大鼠灌胃给药后的血药
浓度-时间曲线图 (珔x ± s，n =6)
Fig． 3 Plasma concentration-time curve of OA after
intragastric administration of OA-SMEDDS
and OA-T (珔x ± s，n =6)
表 2 齐墩果酸的药动学参数 (珔x ± s，n =6)
Tab． 2 Pharmacokinetic parameters of OA (珔x ± s，n =6)
参数 单位 齐墩果酸片剂 自微乳化给药系统
t1 /2α h 1. 097 ± 0. 371 3. 304 ± 0. 852
t1 /2β h 10. 076 ± 2. 019 4. 172 ± 0. 861
Cmax ng·mL －1 201. 33 ± 56. 01 70. 09 ± 14. 88
Tmax h 2. 92 ± 0. 09 2. 02 ± 0. 05
AUC0 －24 mg·h·mL －1 416. 25 ± 80. 34 1 749. 29 ± 401. 22
AUC0 － ∞ mg·h·mL －1 453. 24 ± 82. 17 1 796. 67 ± 412. 09
由主要药代动力学参数表明，齐墩果酸-口服自
微乳较之齐墩果酸片剂的 Cmax显著增加，齐墩果酸-
口服自微乳与齐墩果酸片剂的相对生物利用度为
402. 24%，与市售对照片剂相比，齐墩果酸-口服自
微乳的口服生物利用度有了很大的提高。
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3 讨论
本研究采用目前生物样本常用的 HPLC-MS法进
行齐墩果酸血药浓度的测定，内源性物质与齐墩果酸
能得到较好分离，并且选用了合适的内标，测定结果
准确，重复性好，符合生物样品分析要求。药动学结
果表明，齐墩果酸-口服自微乳与齐墩果酸片剂的
Cmax比值为 2. 87，且随着时间延长，血药浓度仍保持
较高的水平，具有一定的缓释作用这表明自微乳化给
药系统能显著提高齐墩果酸的口服生物利用度。
此外，本研究采用了大鼠眼眶取血，每次取 0. 3
mL，与此前一些研究对比［10］，较好的保证了大鼠能
顺利的完成实验，保证了大鼠药动学数据的可靠性。
但是本实验采血方面仍存在一些不足:虽然实验过
程中大鼠被适当的补充了水分，但实验中第 10 个采
血点个别大鼠血量仍少，无法采足血量，可能引起实
验偏差，采血较困难可能会导致部分药动学参数可
靠性下降。另外分析发现:齐墩果酸-口服自微乳能
提高齐墩果酸口服生物利用度的一个重要原因可能
是因为自微乳化给药系统能改善齐墩果酸在水性介
质中的溶出，根据此前齐墩果酸-口服自微乳的制剂
学溶出度实验表明:自微乳化给药系统在 pH6. 8 的
水性介质中药物能快速完全溶出，齐墩果酸原料药
及齐墩果酸片剂溶出很少，这也提示，齐墩果酸-口
服自微乳较好地改善药物在小肠(pH为 5 ～ 7)中的
溶出，从而增加了齐墩果酸的口服生物利用度。此
外自微乳化给药系统在肠道吸收后能经淋巴转运，
避免经肝的首过效应，也是提高药物的口服生物利
用度的原因［11-12］。
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星点设计-效应面法优化雷公藤微乳透皮给药系统研究
王 霄， 方晓玲， 顾吉晋， 沙先谊*
(教育部和全军智能化递药重点实验室 复旦大学药学院药剂教研室，上海 201203)
收稿日期:2011-06-22
基金项目:上海市中药现代化项目(09dZ1971100) ;上海市青年科技启明星项目(10QA1400800)
作者简介:王 霄(1987—) ，男，硕士在读，药物新剂型与新技术。Tel:(021)51980071，E-mail:naturalconan@ 163. com
* 通信作者:沙先谊(1976—) ，男，副教授，药物新剂型与新技术。Tel:(021)5190073，E-mail:shaxy@ fudan． edu． cn
摘要:目的 优化雷公藤微乳透皮给药系统的处方。方法 以累积透皮量及 4 h炎症抑制率为评价指标，采用星点设计-效
应面法，确定优化处方。结果 优化处方中油相油酸比例为 0. 12、表面活性剂(Labrasol 和磷脂)和助表面活性剂(乙醇和
Pharmasolve)的比例为 0. 59，水相比例为0. 29。这时微乳累积透皮量为35. 87 mg /mL，4 h炎症抑制率为61. 56%。结论 使
用星点设计-效应面法能够快捷便利地得到雷公藤微乳透皮给药系统的优化处方，且所建立的模型具有良好的预测性。
关键词:雷公藤;微乳透皮给药系统;星点设计-效应面法
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