全 文 ：第 15 卷 第0 1期
19 80 年 10 月
药 学 学 报
A C T A PH A R 五I A C E U T I C A S IN I C A
V o l
.
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10
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.
9 80
山苍子油平喘与抗过敏药理研究
钱伯初 龚维桂 陈 迁
张吟秋 许衡钧 张罗修 ’
(浙江人民卫生实验院药物研究所药理室 , 杭州 )
提要 本文报告山苍子油的平喘与抗过敏药理研究结果 。 山 苍子油能松弛豚鼠离体气管平滑
肌 , 增加豚鼠离体肺灌流量 。 对豚鼠因吸入致痉剂所致药物性哮喘有明显保护作用 。 对大鼠被动,
皮肤过敏反应 ( P c A )有抑制作用 。 能保护豚鼠过敏性休克和抑制豚鼠离体回肠过敏性 收缩 。 对慢
反应物质 ( s R s- A ) 引致豚鼠离体回肠收缩有阻断和拮抗作用 。 山苍子油上述药理作用为其对慢性
支气管炎的良好疗效提供了依据 。
山苍子油系樟科植物山鸡椒 [ L i t s e a c u b e b a ( L o u r . ) p e r s 〕果实山苍子所含挥发油 。 I右末
千余例观察证明 口服对慢性支气管炎有较好疗效 , 并能明显改进肺活量和肺通气功能 “ ’ , · 鼻
吸疗法对喘息型慢性支气管炎和支气管哮喘有明显的即时止喘作用 ( 2’ 。 为阐明其疗效原理 ,
我们进行了有关平喘与抗过敏药理研究 、 现将结果报告如下 。
方 法 和 结 果
(一 》 平喘作用
1
. 对豚鼠离体气管平滑肌的作用
将体 重 3 0 0~ 5 0 0 9 的 豚 鼠 处 死 后 取出气管 , 按 C a s t i l l o & d e B e e r 氏法 ` 3 ,制备离体
气管链 , 悬于含 37 ’ c K er sb 液 20 m l 的离体器官浴槽中 ,静置 30 分钟后 , 描记药物反应曲线
于烟鼓 , 测定被试药物对气管平滑肌的松弛作用 。
( D 山苍子油对豚鼠离体气管平滑肌的松弛作用
经 6 只标本观察表明 , 当浴槽中山苍子油浓度为 90 川 /。 l 时 , 对正常 气 管平滑肌及乙
酞胆碱或组织胺 20 拼g /m l 所致的气管平滑肌收缩有完全的松弛作用 , 预先加山 苍 子油可阻
断乙酸胆碱或组织胺的收缩 。 山苍子油的气管松弛作用不能被心得安阻断 。
( 2 ) 山苍子油含醛部分与去醛部分作用比较
以加药前的描记曲线为参照 , 测得加药后 20 分钟时的气管松弛值 , 随即加人 盐酸婴粟
碱 2 拼g / m l, 以再经 20 分钟后测得气管松弛值作为 10 。% , 计算被试药物松弛值占气管总松
弛值的百分率 , 比较作用强度。 加人浴槽中之山苍子油两部分的浓度同前 。 结果表明山苍子
油含醛部分的作用显著强于去醛部分 ( P < 0 . 0 0 1 ) (表 1 ) 。
( 3) 不同柠檬醛含量山苍子油的作用比较
以加药前的描记曲线为参照 , 测定加药后气管平滑肌自然张力的最大松弛值 , 观察柠檬
醛含量为 62 % 和 95 %两种山苍子油的作用 , 结果见表 2 。
上述结果表明 , 两种不同柠檬醛含量山苍子油的气管平滑肌松弛作用各 自似均有浓案依
本文于 1 97 9 年 6 月 1 1 日收到 。
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1980. 10. 002
1 0 期 药 学 学 报
表 1 山苍子油含醛部分与去醛部分对豚鼠离体气管平滑肌作用比较
, 、 } 、 ` , ` } 松 弛 . 百 分 率
_ _ “ “
} ” 本 ” } 一 ’场 e叔 se 厂 -山竺舌伸含芒邻“ 一 } ` 6’ … - 8 5一山苍于 “ 云” “ ” { 6 ` t .
表 2 不同柠檬醛含量山苍子油对豚鼠离体气管平滑肌的松弛作用
山苍 子油中的柠檬醛含量 (产 I / m l ) 标 本 数 最 大 松 弛 数
( m m )
( m e a n 士 s e )
1 3
.
8土 1。 5
1 3
.
1土 2 . 8*
7
.
0土 1 . 7*
n八UnU 1nùù勺心`,人
18
.
0土 2 . 1`
9
.
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5
.
2土 1 . ::
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n甘亡」O山.`
* 两组比较 P < 。 . 05 ` 两组比较 P < 。 . 0 25
赖关系 , 但比较两种不同柠檬醛含量山苍子油的作用 , 各浓度组间均未见显著差异 。
2
. 对豚鼠离体肺灌流量的影响
肺灌流方法按文献 ` 4 ’略加更改 。 豚鼠处死后即取出气管及整只肺胜 , 用 37 O c 恒温 L OC ke
氏液在恒压下灌流 , 调节流量至 50 滴 /分 , 以灌流量评价药物作用 。
先用 L oc ke 氏液灌流待流量恒定后 , 换以含山苍子油 0 . 1川 / m l 的 L oc ke 氏 液 灌 流 10
分钟 , 测定流量 。 6 只标本的均值表明山苍子油能显著增加正常豚鼠离体肺灌流量 , 至第 4 ·
分钟时与加药前比较已有显著差异 ( P < 0 . 0 2 5) (表 3 ) 。
表 ` 3 山苍子油对豚鼠离体肺灌流量的影响 (。 l/ m恤 )
一奥垫 .擎川—第 1 分 }第 “ 分 ! 第 ” 分 }第 1 分 {第 “ 用 药 后 流 量 (m ea D 土 s e)分 l第 3 分 第姗 }第 5 分 }第 6 分 }第 7 分 }第 8 分 1第 。分 }第 10 分2 3 。 6 1 25 28 。 1
士 4 。 1
3 ,
`
,
}
3`
土 4 。 8 1 土 5
3 5
.
8 { 3 8
.
1 1 3 8
。
3
土 2 . 8 1 土 2 . 6 1 土 3 . 1 土 6 . 0 1 土 6 . 4 1 土 6 . 4
月了JU2土,上n乙2土
八托ù
序了.
;
自21士
3
. 对豚鼠实验性哮喘的保护作用
实验用体重 15 0~ 2 0 9 的豚鼠 , . 药物弓l喘法按文献 ( 5 ,略加更改 。 密闭 玻 璃 罩内装两个
喷头 , 喷雾给药组用其中一只喷山苍子油 1分钟 , 口服组按 0 . 3 m l/ k g 灌胃 , 腹 腔给 药 按
0
.
l m l/ k g 注人 , 然后用另一喷头喷 0 . 25 %组织胺和 2%乙酞胆碱 ( 1 : 2) 的混合液 30 秒钟 。
药物引喘逐只迸行 , 观察 6分钟 , 以惊厥前时间和喘息倒下动物数评价药物作用 , 6 分钟内
不倒者以 36 0 秒计算 。 山苍子油用 2%吐温 一 80 稀释 , 对照组喷雾或给予等量 2% 吐温一 80 盐
水 , 结果见表 4 、 民 、 、 _
结果表明山苍子油灌胃后 3小时 ; . _ 腹腔注射后半小时 、 2 小时及气雾后即刻对喷雾组织 .
胺和乙酸胆碱所致支气管痉挛有明显保护作用 。 喷雾给药后即刻试验当山苍子油稀释至 10 允
时仍有明显作用 。
· 一~
、 J 尹 一
(二 ) 抗过敏作用
药 学 学 报 1 5 卷
表 4 山苍子油灌胃和腹腔用药对豚鼠实验性哮喘的保护作用
用 药后时 间 . 1 动 倒 下 动 物 数 惊 厥 前 时 间 (s ec )用 药 途 径
(rn ln )
物 数
(只 )(只 )m e a 乃 士 s e
6 7
.
71 土 4 . 79
9 6
.
3 3 土 4 . 2 5
23 1
.
83 土 4 6. 1 6
男。 1 6土 5 4 。 3 60 6
> 0
.
0 5
< 0
.
0 5
< 0
.
0 5
< 0
.
0 5
On甘Unó一00介O,曰
` .几.上
照胃对油
腹腔注射
, 对照组用两种用药途径给等量盐水各 4 只 , 混合统计
药 物 浓 度
表 5
用 药 后时 间
山苍子油喷雾给药对豚鼠实验性哮喘的保护作用
动 物 数
(只 )
倒 下动 物数 惊 厥 前 时 .间 ( s ec )
( n 〕 I n ) (只 ) m e a n 土 s e
八U
40
心`,自
44
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对 照
1 0 0%
10 4
.
5 0上 1 0 . 0 8
即刻
6 0
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2 0%
1 0%
即刻
) 3 6 0
13 2
.
5 0土 11 . 3 1
> 3 6 0
2 9 8
.
8 3士 4 2 . 7 2
2 8 1
.
2 5土 4 6 . 1 6
< 0
.
0 1
> 0
.
0 5
( 0
.
0 1
( 0
.
0 1
( 0
.
0 1
1
. 对大鼠被动皮肤过敏反应 ( P C A )的影响
致敏 : 取体重 巧。~ 2 0 9 健康雄性大鼠 , 每只给卵白蛋白 1 m g 分别肌注于两后腿 , 同
.时腹腔注射百 日咳菌苗 2 x 1 0 ’ ”个 /只使之致敏 `“ ) , 12 天后断颈取血 , 分离抗 血清 置低温冰
箱备用 。
被动皮肤过敏反应 : 取正常大鼠 , 将背部脊柱两侧的毛剃去 , 沿背部正中线两侧以一定
间距分别皮内注射用生理盐水稀释成不同浓度的抗血清 。 , 1 m l , 随后分为三组 , 每组 5 只 。
对照组不用药 , 山苍子油组按 0 . 3 m l/ k g 灌胃 , 每 日一次 , 共三次 , 于末次给药后 1小时攻
击 ; 色甘酸钠组按 20 m g / k g 静脉注射后 1分钟攻击 。 被动致敏 72 小时后每 只 静 脉注射卵
.L万,L
2015105
斑直皮径
l u n l ) 王山苍子油
卜一向 一+ · 、 . 、 卜 . _ . _ . _ ,一 色甘酸铃
1 ; 孟 1 ; 2 1 ; 4 1; 8 1 : 16 1 : 32
抗血清稀释度
图 1 各组动物的被动皮肤过敏反应
白 蛋 白 10 m g 和 0 . 5% E v a ns 蓝 盐水 Z m l 进
行攻击 , 30 分钟后处死动物 , 翻转背部皮肤 ,
侧量蓝色反应皮斑直径 。
结果 : 三组木同浓度抗血清皮斑平均直径
见图 1 。 以各浓度的皮斑直径总均值按公式 :
抑制率 (% ) 二 1 0 0 ( 1一 a/ b )计算用药组 的 P C A
反应抑制率 , 式中 a 为用药组均值 , b 为 对照
组均值 。 山苍子油的抑制率为 4 7 . 43 士 4 . 59 % ,
色甘酸钠组为 9 3 . 1 0上 4 . 64 % , 两组与对照组
比较均有显著差异 ( P < 0 . 0 1 ) 。
2
、 对豚鼠过敏性休克的保护作用
豚鼠体重 1 50 ~ 2 50 9 , 雌雄兼有 , 鼠龄 50 余天 , 腹腔注射 5%新鲜鸡蛋清盐水 o . s m l/
10 0 9
, 隔 日一次共两次使动物致敏 , 15 天后逐只喷雾 10 %新鲜鸡蛋 清 盐 水 30 秒 , 观察惊
1 0期 药 学 学 报
厥前时间 。 用药组喷山苍子油每次 5 秒共三次 , 每次间隔 5 分钟 , ,对照组 用 相 同方法喷盐
水 。 各组 5 只 .动物 。
对照组倒下动物数为 6 / 6 , 用药组为 ` 2 / 6, 对照组的平均惊厥前 时 间 为 12 , . 2士 9 . 4秒
( m e a n 土 s e ) , 用药组为 2 7 7 . 0土 5 1 . 5 秒 ( P < 0 . 0 2 5 ) 。
.3 对豚鼠离体回肠过敏性收缩的抑制作用 `
.参照文献 ( 8 ’方法 , 取上述致敏 15 .天豚鼠的末端回肠约 2 c m 长悬于充有 37 ’ c T y r o d e 氏
液 15 _ m l 的离体器官洛中 , 描记肠蠕动曲线于烟鼓 。 山苍子油用 2%吐温一 80 稀释 。
7 只对照标本当加入 1。一冬浓度的鸡蛋清 0 . 5 ,。 l 后即引起明显痉挛性收缩 ; 2 只对照标本
当加人 2% 吐温一80 0 一 5 m l 不能抑制过敏性收缩 ; 2 只正常动物标本证明鸡蛋清不 能引起正
常肠段收缩 。 ’ . 10 只标本当先和山苍子油 30 一沁 /二 l 接触 3 分钟后 , 再加人与前等量蛋清 , 其
中 8 只过敏性收缩完全抑制 , 2 只部分抑制 。 上述结果证明山苍子油对致敏豚鼠肠段的过敏
性收缩呈明显阻断作用 。 . 、… ` 一 . 小4 . _ 对慢反应物质 (s R s 一 A )所致豚鼠离体回肠收缩的影响
` 取体重 2 k g 左右的健康雄性家兔 , 腹腔注射 1% (W / v ) 结晶卵蛋白盐水 。 . 4 m l, 隔 日
一次共三次 , `末次注射后 4~ 8 周内放血处死 , 取出肺脏按文献` , ’ 方法制备 S R S一 A : 经肺动
脉灌注 37 ’ C T yr od e 氏液以除去肺血管中残余血液 , 然后擦干称重 , 将肺组织剪成直径 1 m m
左右的碎块 , 按 2 m l / g 肺组织之比例加人预先通氧 、 PH 7 . 8~ 8 . 0 、 并含有卵蛋白 1 m g / m l
的 T y or d e 氏液 , 在 37 O G水浴中振荡 10 分钟后迅速取出 , 于低温下过滤离心 , 上 清 液即含
S R S 一 A 。
` , _ ` . 、
按文献“ 。 ,方法用正常豚鼠离体回肠测定培养液中的 S R S一 A .含量 , 并 观 察 山 苍子油对
S R S 一 A 所致回肠反应的影响 。 离体器官浴中先加入含有阿托品 1 群g / m l 的 T yr o de 氏液 , 一 以
测定标本对组织胺弓I致回肠收缩的高度 , ’ 待测得稳定的反应高度后 , 换入含有阿托品及扑尔
敏 ( 0 . 06 产g / m l) 的 T yr od e 氏液 , 以测定 S R S 二 A 的收缩高度 。 加人培养液后之收缩高度与 5
n g /m l 组织胺之收缩高度相当 , 则计算为含 1单位 S R S一 A 。 测定时 , 组织胺与 标 本接 触 1
分钟 , s R S 一 A 与标本接触 3~ 4 分钟 , 洗脱后间隔 5 分钟进行下一次观察。 观察山苍子油对
s R S
一 A 反应的影响时 , 一先加人山苍子油使与标本接触 90 秒 , 再加人与前等量的 s R S 一 A , 测
定肠段收缩高度 , 与单加 S R S一 A 之收缩高度比较 。 .
翻翩姗姻朋翻。s酬卿!山蒯
限冲、擂凶蒯.J/淤·。
卿
8次试验结果表明 , 山苍子油浓度为 4 5琳 /m l
时 , 其中 5 次能完全 阻 断 1 0 u/ m l r s且 S一 A 引
致回肠之收缩作用 , 其余 3次为部分阻断 。 如浓
度减为 4 . 5 川 / m l , 则显 示较弱阻断作用 。 山苍
子油 45 川 / m l 对正常肠段多数不 呈明显作用 ,
少数呈轻度抑制作用 。 山苍子油 45 川 / 。 l 对 S R S -
A 引致肠段持续收缩亦有明显对抗作用 (图 2) 。
图 2 山苍子油对 S R S 一 A 引致豚鼠离体 回肠
收缩的影响
一 S R S一 A 10 0 u /m l 个山苍子油 4 5 产 l /m 宜
讨 一 论
本研究表明山苍子油能松弛豚鼠离体正常气管平滑肌及组织胺或乙酞胆碱致痉的气管平
滑肌 , 能增加豚鼠离体肺灌流量 , 对豚鼠因吸人致痉剂所致实验性哮喘有明显保护作用 。 文
献报告山苍子油中柠檬醛含量占 62 . 5% “ i ’ , 为明确其是否系有效成分 , 我们比 较了山苍子
油含醛部分与去醛部分的作用 , 提示含醛部分强于去醛部分 , 表 明含醛部分为主要有效成分
药 学 学 报 15 卷
所在 , 另外 ,观察两种不同柠檬醛含量山苍子油的作用 , 提示两者的作用强度均呈浓度依赖关
系 , 但比较两种不同柠檬醛含量山苍子油的作用 , 各浓度组之间 , 均未见显著差异 , 表明柠
檬醛非唯一有效成分 。 确实 , 山苍子油所含香叶醇 ` ’ 2 , 、 芳樟醇 ` ’ 3 , 、 香草醛 ` , 4 , 、 樟脑 ( `幻等
成分亦具有不同程度的平喘作用 。
本实验室还证明山苍子油对小鼠有祛痰作用 , 且亦以含醛部分强于去醛部分 `” , 此与文
献“ “ ,报告家兔吸人低剂量柠檬醛能增加呼吸道液体排出量的结果相符 。 文献 报 告 柠檬醛对
金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性细菌和霉菌有抑制作用 ` ’ 7 ) , 我们亦证实山苍子 油在 体 外对金
黄色葡萄球菌 、 大肠杆菌 、 伤寒杆菌和痢疾杆菌有较高的抑菌作用 ( ` ’ 。
近年来 , 认为慢性支气管炎尤以喘息型慢性支气管炎和速发型过敏反应有密切关系 , _且
提示经 工g E 介导而释放的组织胺和 s R S 一 A 等过敏介质参与喘息的发作及持续过程 ` ’ “ , ’ g , , 慢
性支气管炎患者痰中经常能测出组织胺和 S R s 一 A , 且提示它们的含量和最大呼气 流 速呈明
显负相关 ` 2 “ , 。 在本文所用大鼠被动皮肤过敏试验 、 豚鼠过敏性休克和豚鼠离 体 回 肠过敏试
验等整体 、 离体模型 , 山苍子油呈明显抗过敏作用 , 同时对 S R S 一 A 所致豚鼠 肠段 收缩亦有
明显的阻断和对抗作用 。 表明山苍子油的疗效原理除支气管扩张作用 (此作用得到临床证实 )
外 , 可能还作用于过敏介质形成与释放的某些环节及对抗过敏介质的药理效应 。 ` ·
综上所述 , 山苍子油对呼吸系平滑肌有显著松弛作用 , 又具明显抗过敏作用 , 此为其临
床应用提供了依据 , 对 S R S一 A 的阻断和拮抗作用在防治慢性支气管炎和哮喘中尤 有意义 ,
值得深人研究 。
致谢 本所植化室吴凤梧 、 程保族同志提供山苍子油含醛部分和去醛部分 , 本室副主任张永基副研究
员审阅本文 , 谨致谢 。
参 考 文 献
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J
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T u r汕 u ll L W , e t a l : V a r i a t i o n s i n e 五 e m i e a l 价 e d i a t o r s o f h y p e r s e n s i t i v i t y i n t 五 e s p u t u m o f e h r 、
o n i c b r o n e h i t i e s : e o r r e la t i o n w i t h p e a k
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