全 文 ：[ 基金项目] 湖南省卫生厅科研基金课题(编号:B2005-017)　[ 作者简介] 许利敏 ,女 ,硕士研究生, 电话:0731-4327460 　[ 通讯作者] 李新中,
男 ,主任药师 ,电话:0731-4327454 , E-mail:xylixin@medmai l.com.cn
齐墩果酸聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊在小鼠体内的肝靶向研究
许利敏1 , 2 ,李新中1 , 2 ,肖菁1 , 2 ,刘韶1 , 2 ,雷鹏1 , 2 　(1.中南大学湘雅医院 , 湖南 长沙 410008;2.中南大学药学院 , 湖南 长
沙 410078)
[ 摘要] 　目的:研究齐墩果酸聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊(OA-PBCA-NC)在小鼠体内的肝靶向性。 方法:小鼠尾静脉注射
OA-PBCA-NC 试验组及齐墩果酸(OA)对照组 , H PLC 法测定小鼠心 、肝 、脾 、肺 、肾各脏器及血浆中 OA 的含量 , 比较两组体
内分布特点 ,并进行靶向性评价。结果:秩和检验结果表明静脉注射 OA-PBCA-NC 试验组与 OA 对照组比较 ,其在肝脏的分
布差异有显著性 , OA-PBCA-NC 静脉注射给药后能显著增加 OA 在肝脏的分布。试验组各肝靶向指标结果均优于对照组。
结论:OA-PBCA-NC 能增加 OA 的肝靶向性 。
[ 关键词] 　齐墩果酸;聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊;肝靶向
[中图分类号] R966　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213(2007)09-1198-03
Study on the liver targeting of oleanolic acid loaded polybutylcyanoacrylate nanocapsules in mice
XU Li-min1 , 2 , LI Xin-zhong 1 , 2 ,XIAO Jing1 , 2 , LIU Shao1 , 2 ,LEI Peng1 , 2(1.Xiangya Hospital of Central South Uni-
versity ,H unan Chang sha 410008 , China;2.Depar tment of Pharmacy , Hunan Chang sha 410008 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the liver targ eting of oleano lic acid lo aded polybutylcy anoacry late nanocapsules(OA-PB-
CA-NC)in mice.METHODS　Injecting OA-PBCA-NC and o leanolic acid(OA)respective ly to the tail vein of mice , the concen-
tration o f OA in the hea rt , liv er , spleen , lung , kidney and blo od were determined by H PLC.The distribution o f OA in mice w as
studied.And the targ eting prope rty o f OA w as evaluated.RESULTS　The re sults o f rank sum te st show ed tha t the test g roup
was evidently different from the contr ol g roup , which could evidently increase the distribution o f OA in live r.And the targ eting
index of the test g roup w as mo re excellent than tha t of the contro l g r oup.CONCLUSION　The OA-PBCA-NC has good liver
targ eting prope rty.
KEY WORDS:oleano lic acid;polybutylcy anoacry late nanocapsules;live r tar geting
　　齐墩果酸(oleano lic acid ,OA)是一种五环三萜
类的中药活性成分 ,临床上主要用于治疗急性黄疸
型和慢性中毒型肝炎 ,并作为抗癌辅助药物[ 1] 。聚
氰基丙烯酸正丁酯(po lybutylcyanoacry late ,PBCA)
具有人体可亲和性 ,生物可降解 ,缓释性和无毒的特
点。粒径为 200 nm 左右的载药聚氰基丙烯酸正丁
酯纳米粒(PBCA-NC)经静脉注射后 ,易被巨噬细胞
吞噬而集中分布在网状内皮系统丰富的肝 、脾等器
官 ,从而实现药物的肝靶向性[ 2] 。我们用界面聚合
法制得了齐墩果酸聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊
(OA-PBCA-NC)[ 3] ,其平均粒径为 220 nm ,平均载
药量为(26.8±0 .6)%。现将其肝靶向性研究结果
报道如下 。
1　材料
Agilent1100型高效液相色谱仪(安捷伦科技有
限公司);FSH-2可调高速匀浆机(江苏金坛荣华仪
器制造有限公司);齐墩果酸对照品(中国药品生物
制品检定所 ,批号 110709-200304);大黄酚对照品
(中国药品生物制品检定所 ,批号 0796-200208);齐
墩果酸原料(自制 ,经高效液相测定其纯度≥97 %);
齐墩果酸聚氰基丙烯酸正丁酯纳米囊冻干粉(自
制);其余药品 、试剂均为药用或分析纯;昆明种小
鼠 , ♀♂各半 ,18 ～ 22 g ,动物证号:SCXK(沪)2003-
0003(中南大学湘雅医学院实验动物学部)。
2　方法
2.1　色谱条件 　色谱柱:DiamonsilTM C18柱(250
mm ×4.6 mm ,5 μm);流动相:乙腈-0 .05%磷酸(92
∶8);流速:1.0 mL·min-1 ;检测波长:215 nm;柱温:
30 ℃。
2.2 　给药及样品采集方法 　分别称取一定量的
OA-PBCA-NC冻干粉及 OA ,用适量生理盐水分
散 ,后者调 pH 使其溶解 。取昆明种小鼠 170只 ,随
机分成两组 ,每组 85只 。试验组按 90 mg·kg-1的
OA剂量尾静脉注射 OA-PBCA-NC ,对照组小鼠给
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予同等剂量的 OA 。各组分别于给药后 0.083 ,
0.167 , 0 .25 , 0.333 , 0 .50 , 0.667 , 0 .833 , 1 , 1.25 ,
1.5 , 1.75 ,2 ,4 , 6 , 8 , 12 , 24 h 断头取血 ,并取出心 、
肝 、脾 、肺 、肾 , 每个时间点 5 只小鼠 。将血样
4 500 r·min-1离心 20 min ,取血浆。各脏器用纯化
水冲洗干净 ,用滤纸吸干 ,称重。各样品均置-50
℃超低温冰箱冻存。
2.3　样品处理及测定方法　血浆取0 .3 mL或各脏
器加 3 倍量的纯化水匀浆 , 分别取 0.3 mL(脾取
0.2 mL),加内标大黄酚 79 mg·L-1 10 μL ,加 1 mL
醋酸乙酯 ,漩涡振荡 1 min ,4 500 r·min-1离心 20
min ,取有机层 ,氮气吹干 ,加乙腈 50 μL 溶解 ,取 20
μL 进样 。记录 OA色谱图 ,内标法定量。
2.4　线性范围　配制 872 .0 g·L-1的 OA 储备液 ,
并稀释成 87.2 , 34 .88和 8.72 mg·L-1的工作液备
用。分别取小鼠的空白心 、肝 、脾 、肺 、肾的匀浆液
0.3 mL(脾取0 .2 mL),分别加入不同浓度的适量
工作液 ,配制成不同浓度的标准液 ,按照“2 .3”项下
从“加内标大黄酚 79 mg·L-1 10 μL”进行处理 ,得
各标准曲线。
2.5　方法回收率与精密度　配制高 、中 、低不同浓
度的 OA 血浆及匀浆样品各 5份 ,按照“2.3”项下处
理 ,计算回收率 。各浓度于日内不同时间测定 3次 ,
计算日内精密度 。连续测定 3 d ,计算日间精密度 。
2.6　统计分析方法[ 4] 　采用秩和检验分别对试验
组与对照组在小鼠体内各器官中的浓度进行统计学
分析 。
2.7　体内靶向性评价方法[ 5-6] 　以峰浓度比 Ce ,靶
向效率 te ,相对摄取率 re ,总靶向效率 T EC ,相对总
靶向效率 RTEC为靶向指标 ,评价OA-PBCA-NC 的
体内靶向性。
Ce =(Cmax)NC/(Cmax)OA
te =(AUC)tissue/(AUC)blood
re =(AUC i)NC/(AUC i)OA
TE
C =[(AUC0※∞)i/ ∑(AUC0※∞)i] ×100%
RTEC =[(TECNC -T ECOA)/ TECOA ] ×100 %
每个组织 Ce 表示纳米粒改变药物分布的效果 ,
Ce 大于 1则具有靶向性 ,越大则表明改变药物分布
的效果越明显;te 表示待测物对靶器官的选择性 , te
>1则该物质对靶器官有选择性 , te 越大 ,选择性越
强;re表示某器官OA-PBCA-NC组和 OA 组药时-
曲线下面积的比值 , re >1表示 OA-PBCA-NC 在该
组织有靶向性 , re值越大 ,靶向性越强;TEC的分母
是包括靶组织在内的所有组织接受药物的总和 ,某
器官 TEC增加越多 ,其靶向性越强;RTEC表明以总
的药物分布情况 ,各组织中的分布比例变化情况 ,提
示在该组织中有无靶向性。
3　结果
3.1　线性范围　结果见表 1。
表 1　齐墩果酸在各脏器 、血液中的回归方程
Tab 1　The reg ression equa tion of OA in diffe rent org ans
and blo od
组织 回归方程 相关系数 线性范围/μg·mL -1
血 y=0.015 3C-0.004 8 r=0.999 31.16 ～ 159.87
心 y=0.017 9C+0.003 2 r=0.997 3 1.16 ～ 87.20
肝 y=0.019C+0.002 5 r=0.992 8 1.16 ～ 159.87
脾 y=0.012 3C+0.003 8 r=0.994 2 1.16 ～ 159.87
肺 y=0.010 7C+0.001 7 r=0.997 9 1.16 ～ 87.20
肾 y=0.018 7C+0.006 6 r=0.995 2 1.16 ～ 87.20
3.2　方法回收率及精密度　各脏器及血浆的方法
回收率均≥90%,日内精密度均≤7%,日间精密度
均≤11%。
3.3　静注 OA-PBCA-NC 试验组及 OA 对照组在
小鼠体内各脏器及血浆中不同时间的浓度分布结果
　见图 1。
图 1　试验组和对照组小鼠静脉注射后各脏器及血浆浓度均值变化
曲线
A.心;B.肝;C.脾;D.肺;E.肾;F.血液
— △—试验组 , — □—对照组
Fig 1 　The average concent rat ion-time curve of OA in viscera and
plasma af ter iv.administ ration of test and cont rol group
A.hw art;B.li ver;C.sp leen;D.lu ng;E.kidney;F.blood
— △— the test g rou p , — □— the cont rol group
3.4　浓度的比较统计分析结果　统计分析结果显
示 , OA-PBCA-NC 试验组与 OA 对照组在肝脏的分
布差异有显著性(P <0 .01),OA-PBCA-NC 静脉注
射给药后能显著增加 OA在肝脏的分布。两组在脾
脏 、肺脏的分布差异有显著性(P <0 .05),而在心
脏 、肾脏和血中的分布差异无显著性(P >0.05)。
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3.5　体内靶向性评价指标　各项指标均显示 OA-
PBCA-NC具有良好的肝靶向性 ,见表 2 。
表 2　体内靶向性评价指标
Tab 2　Results of index o f evalua tion for targ eting in v ivo
总计 心 肝 脾 肺 肾 血
(Cmax)1 124.0 595.0 242.7 192.6 117.7 262.7
(Cmax)OA 138.2 172.0 362.8 292.4 168.9 341.5
Ce 0.9 3.5 0.7 0.7 0.7 0.8
(AUC)1 635.2 3 358.2 1 998.3 804.8 453.4 428.4
(AUC)OA 530.6 1 165.1 1 225.2 643.8 362.7 320.8
te -OA 1.6 3.6 3.8 2.0 1.1 1.0
te -NC 1.5 7.8 4.7 1.9 1.1 1.0
re 1.2 2.9 1.6 1.2 1.2 1.3
TECOA 12.5 27.4 28.8 15.2 8.5 7.6
TECNC 8.3 43.7 26.0 10.5 5.9 5.6
RTEC -33.8 59.5 -9.8 -30.8 -30.8 -26.1
注:1为 OA-PBCA-NC
4　讨论
TEC反映了药物在体内的动态过程 ,基于假设
参与药物分布 、代谢和消除的所有组织都被测定了 ,
所以测定的组织数越多 ,就更能客观的反映全身的
分布 ,但这意味着巨大的实验工作量。现仅比较两
个制剂的靶向性 ,测定主要脏器的 AUC 就可对两
者的靶向性作出恰当的评价。
体内靶向性评价指标结果显示 , OA-PBCA-NC
能够明显改变 OA 在小鼠体内的分布情况 ,从而获
得较为理想的肝靶向性:①肝脏的峰浓度比 Ce为
3.46(>1),而其他组织的 Ce均小于 1;②OA-PB-
CA-NC经静脉给药后肝 te有最大值7.84 ;③肝 r e值
(2.88)大于其他组织;④试验组 TEC是对照组的
1.59倍 ,增加了59.74%,而心 、脾 、肺 、肾 、血的 T EC
均减小;⑤试验组 RTEC(59.47)比对照组有增加 ,
而其他组织中 RTEC均为负数。各评价指标均反映
出 OA-PBCA-NC 试验组具有较好的肝靶向性。
AUC与吸收入体循环的药量成比例 ,反映进入
体循环药物的相对量。给予相同剂量的 OA 、OA-
PBCA-NC 试验组的 AUC远远大于 OA 对照组 ,说
明将 OA 制备成 OA-PBCA-NC 可使其体内代谢发
生改变 ,进入体循环的药物相对增多 ,消除时间延
长 ,在体内滞留的药量增多 ,更加有利于其药效的充
分发挥。
纳米囊属于一类由天然或合成高分子材料制成
的纳米级固态胶体载药微粒 ,具有无毒 、稳定 、生物
相容性好 、可生物降解等特点 ,并可作为异物被网状
内皮系统吞噬而表现出一定的被动靶向功能[ 7] 。本
实验中用界面缩聚法所制备得到的 OA-PBCA-NC
经体内试验表明具有良好的肝靶向性 ,为进一步的
制剂研究提供了依据。
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[收稿日期] 2007-01-22
[ 基金项目] 江苏省药学会奥赛康临床药学研究基金课题(编号:200205)　[ 作者简介] 徐进 ,男 , 学士 ,副主任药师 ,电话:025-83117371 , E-
m ail:xujin cn@163.com
新生儿的万古霉素血药浓度监测及安全性评价
徐进 ,许静 ,李燕 ,赵幽燕 ,谭家风 ,徐英美 ,赵真龄　(南京医科大学附属南京儿童医院 ,江苏 南京 210008)
[ 摘要] 　目的:建立以高效液相色谱(H PLC)法测定万古霉素血药浓度的方法 , 探讨万古霉素在新生儿的血药浓度与临床疗
效 、不良反应之间的关系。方法:采用 Hypersil-ODS 柱 , 流动相为乙腈-磷酸二氢钾(0.05 mol·L-1 , pH 3.21)(10∶90), 检测波
长为 236 nm ,流速为1.00 mL·min -1 ;新生儿重症感染病例 30 例 , 用万古霉素治疗 7 ～ 14 d , 给药剂量按每次 10 ～ 15 mg·
kg -1 ,观察给药前后患儿肝 、肾功能指标(ALT、AST 、T-Bil、D-Bil 、BUN 、CCr)及不良反应情况;监测患儿万古霉素的峰(坪)浓
度和谷浓度。结果:30例患儿治疗中未见明显不良反应 ,万古霉素的谷浓度的平均值为(5.8±3.4)mg·L-1 ,峰(坪)浓度的平
均值为(30.9±12.0)mg·L-1 , 给药前后肝 、肾功能指标比较差异无显著性。 结论:万古霉素对治疗新生儿重症感染疗效确
切 ,临床应用时必须严格掌握适应症 、剂量 ,在血药浓度的监测下个体化治疗。
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