全 文 ：＊基金项目:广东省中医药局立项课题(编号:1050124);江门市新会区科技局立项课题(编号:0535)。
　作者简介:李景新(1954-),男 ,主任医师;研究方向:蛇伤及骨科疾病的研究。
南蛇簕抗眼镜蛇毒的实验研究＊
李景新 ,蒋三员 ,唐荣德 ,张健民
(广东省江门市新会中医院 ,广东江门　529100)
Experimental Study of Nanshele for Anti-Cobratoxin Action
LI Jing-xin , JIANG San-yuan , TANG Rong-de , ZHANG Jian-min
(Xinhui Hospital of Traditional Chinese Medicine , Jianmen , Guangdong , 529100 , China)
Abstract:　Objectiv e 　T o explo re the t reatment effects of the Nanshelei for anti-cobrato x-
in.　Methods 　The limulus reagent me thod w as used in anti-cobratoxin tests.　Resul ts 　
The concentration for cobrato xin to produce agg lutination reaction is above 7.81μg/ml in ac-
tion wi th 0.5EU/ml limulus reagent.The nanshelei concentration in 0.5g/ml has 10 times
agg lutination reaction of anti-cobratox in 　Conclusion 　The nanshelei has bet te r action o f
anti-cobratoxin.
Key words:　N anshele;Nnti-cobrato xin;effect
[摘要] 　目的　探讨南蛇簕抗眼镜蛇毒的作用。 　方法　抗眼镜蛇毒采用鲎试剂试验法。 　结果 　眼镜蛇
毒与 0.5EU/ ml鲎试剂产生凝集反应的浓度在 7.81μg/ ml以上;南蛇簕提取液(含生药)为 0.5g/ml浓度时可
抗 10倍量眼镜蛇毒的凝集反应。 　结论　草药南蛇簕有较强的抗眼镜蛇毒作用。
[关键词] 　南蛇簕;抗眼镜蛇毒 ;效果
[中图分类号] 　S996.3　　[ 文献标识码] 　A　　[ 文章编号] 　1001-5639(2006)02-0096-02
南蛇簕是我国南方地区民间常用的草药 ,为豆
科云实 属植物 喙荚 芸实 (Caesalpinia minax
Hance),以根 、茎 、叶和种子入药。性味苦 、凉;具
清热解暑 、消肿的作用。用于治疗跌打损伤 、骨折 、
疮疡肿毒 、皮肤瘙痒 、毒蛇咬伤。因此 ,本文进行了
南蛇簕醇提液抗眼镜蛇毒的实验研究 ,以探讨其抗
毒效果 ,现报告如下。
1　材料与仪器
南蛇簕采自江门市新会区郊区。鲎试剂 , 批
号:041045 , 0.5EU/ml(每支 0.5EU);溶解水 , 批
号:040201 ,均为厦门鲎试剂厂产品 。眼镜蛇毒由
广州蛇毒研究所提供。电热恒温水浴箱 ,湖北黄石
医疗器械厂生产。超净化工作台 ,苏州市净化设备
厂生产。小试管 、注射器等经除热原处理。
2　方法与结果
2.1　供试液的制备　取南蛇簕饮片 1000g 加水适
量 ,超过药面 2 ～ 3cm ,煎煮 2次 ,每次 1h ,滤过 ,合
并煎液浓缩至(950ml)流膏状 ,加 95%乙醇使含醇
量达 65%,静置过夜 ,滤过。醇液挥去乙醇 ,加蒸
馏水至 250ml ,滤过(加水后有不溶物所以滤过),
得醇提水溶液(含生药浓度为 4g/ml)。
2.2　眼镜蛇毒的制备 　精密称取眼镜蛇毒(干
毒)37mg ,加鲎试剂溶解水 18.5m l溶解(浓度为
2mg/ml=2000μg ),摇匀备用 。
2.3　鲎试剂的灵敏度复核[ 1] 　按照《中国药典》
2000年版附录 BET 法的规定 ,复核的鲎试剂灵敏
度结果见表 1 ,二批鲎试剂均在 0.5 ～ 2.0λ范围 ,
符合标示的灵敏度要求 。
表 1　鲎试剂灵敏度复核结果
TAL
批号
细菌内毒素浓度(EU/ml)
1.0　0.5　0.25　0.125　NC (EU/ml)λc＊(EU/ ml) 结果
020628 　 　---- 　---- 　-- 0.50 0.50 合格
041045 　 　---- 　---- 　-- 0.50 0.50 合格
＊:λc为灵敏度的测定值。
2.4　眼镜蛇毒与鲎试剂的凝集反应试验　(1)取
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2006 年第 18卷第 2期 蛇志 JOURNAL OF SNAKE Vol.18 No.2 , 2006
2.2眼镜蛇毒液(2000μg/ml )0.5m l ,分别置 1 、2
号消毒具塞试管中 ,2号管加鲎试剂溶解水 0.5ml ,
摇匀备用。(2)取 0.5EU/ml 鲎试剂加溶解水
0.1ml ,加眼镜蛇毒液 0.1ml ,胶布封口 ,每个浓度
设 2管 ,并作阴性 、阳性对照 。结果:阴性对照为阴
性 、阳性对照为阳性;眼镜蛇毒管呈阳性 ,眼镜蛇毒
与鲎试剂产生凝集反应 。
2.5　眼镜蛇毒与鲎试剂产生凝集反应的浓度试验
　(1)取 2.2眼镜蛇毒液(2000μg/ml)1m l置装有
1m l鲎试剂溶解水的消毒具塞 1 号试管中 ,摇匀 ,
取 1m l加入已装有 1ml鲎试剂溶解水的 2号试管
中 ,按此稀释至第 5号管。从第 4号管中取 1ml加
鲎试剂溶解水至 10ml ,分别取 1.0 、0.9 、0.8 、0.7 、
0.6 、0.5 、0.4 、0.3 、0.2 、0.1m l加鲎试剂溶解水至
1m l。蛇毒浓度分别为 12.5 、11.3 、10 、8.8 、7.5 、
6.3 、5 、3.8 、2.5 、1.3μg/ml。(2)取 0.5EU/ml的鲎
试剂 ,加 0.1ml鲎试剂溶解水溶解 ,分别加入上述
不同浓度的眼镜蛇毒液 0.1ml ,每个浓度设 2管 ,
轻轻摇匀 ,胶布封口 ,置(37±1)℃恒温水浴箱中保
温(60±1)min ,观察结果见表 2。
表 2　眼镜蛇毒对鲎试剂凝集反应浓度试验结果
编号 眼镜蛇毒浓度(μg/ml) 结果
1 12.5
2 11.3
3 10.0
4 8.8
5 7.5
6 6.3
7 5.0
8 3.8 --
9 2.5 --
10 1.3 --
NC 　 --
PC 　
2.6　抗眼镜蛇毒试验 　(1)取眼镜蛇毒液
(2000μg/ml)1m l ,加鲎试剂溶解水至 10ml ,摇匀 ,
取 6ml 加鲎试剂溶解水至 12m l(浓度为 100μg/
ml),摇匀备用;(2)取南蛇簕醇提水溶液(4g/ml)
1m l于 1 、2号消毒具塞试管中 ,在 2号管内加入鲎
试剂溶解水 1m l ,摇匀 ,取 1ml加入已装有 1m l鲎
试剂溶解水的 3号试管中 ,摇匀。按此法作倍比稀
释至第 5管 ,备用;(3)在不同浓度的南蛇簕药液中
加入眼镜蛇毒液 1m l ,摇匀 ,备用。(4)取 0.5EU/
ml的鲎试剂 ,加 0.1m l鲎试剂溶解水溶解 ,分别加
入南蛇簕药液与眼镜蛇毒混合液 0.1ml ,每个浓度
设 2管 ,轻轻摇匀 ,胶布封口 ,置(37±1)℃恒温水
浴箱中保温(60±1)min ,观察结果见表 3。
表 3　不同浓度南蛇簕药液抗眼镜蛇毒试验结果
编号 眼镜蛇毒浓度(μg/ml) 南蛇簕药液浓度(g/ml) 结果
1 50 4 --
2 50 2 --
3 50 1 --
4 50 0.5 --
5 50 0.25
3　讨论
　　鲎试剂是一种能与生物毒素产生凝集反应的
生化试剂。在眼镜蛇毒与鲎试剂的凝集反应试验
中 ,产生凝集反应的浓度在 5.0μg/ml 以上 , 低于
5.0μg/ml则为阴性反应 ,表明鲎试剂对眼镜蛇毒
产生凝集反应的灵敏度为 5.0μg/ml。
　　在抗眼镜蛇毒的试验表明 ,南蛇簕提取液在
(含生药)0.5g/ml 浓度时能抗眼镜蛇毒 50μg/ml
浓度(是产生凝集反应的 10 倍)的鲎试剂凝集反
应 ,显示有良好的抗眼镜蛇毒作用 。证明民间将南
蛇簕用于治疗毒蛇咬伤是有效的 。
[ 参考文献]
[ 1] 　国家药典委员会.中国药典[ M].第 2 部.北京:化
学工业出版社 , 2000.86.
　　 　　　 　　　 　　　 　　
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