全 文 ：— 43 —现代中药研究与实践2015年第29卷第3期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.3
基金项目：广西壮族自治区卫生厅中医药科技专项 -瑶药复方南蛇簕胶囊的研发 （GXYZ1219）
作者简介：刘振杰（1983-），男，硕士，助理研究员，研究方向：药物分析学、中药化学。
通讯作者：唐炳兰（1979-），女，硕士，助理研究员，研究方向：药理学、中药化学。E-mail: 365473227@qq.com
正交试验优选南蛇簕胶囊提取工艺
刘振杰 ， 周小雷 ，莫单丹， 樊溪源， 唐炳兰 *
（广西壮族自治区药用植物园，广西 南宁 530001）
摘　要：目的　优选南蛇簕胶囊提取工艺。 方法　采用 L9 (34) 正交试验法，以青蒿素提取量为指标，
对乙醇浓度、料液比、提取次数、提取时间进行优选。 结果　最佳提取工艺为药材加 95% 乙醇提取 3次，
料液比 2 : 40，提取时间 120 min。 结论　优选的工艺合理，重复性好，样品质量稳定。
关键词：南蛇簕胶囊； 正交试验；醇提取工艺； 青蒿素
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)03-44-04
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.03.015
Optimization of the Extraction Process of Artemisine from Nanshele Capsules By
Orthogonal Test
LIU Zhen-jie, ZHOU Xiao-lei, MO Dan-dan, FAN Xi-yuan, TANG Bing-lan*
(Guangxi Medicinal Botanical Garden, Nanning 530001, China)
Abstract: Objective To study the optimum extraction process of artemisine in Nanshele capsules. Methods
Ethanol concentration, solid-liquid ratio, extraction times, extraction time were optimized by L9(3
4) orthogonal
test. Results The optimal extraction process was as follows: 20 times of 95% Alcohol addition of the capsules,
extracting 2 times, each time for 2 h . Conclusion The optimized process is reasonable with good repeatability and
stable quality in samples．
Key words: Nanshele capsules; orthogonal test; alcohol extraction process; artemisine
瑶药“复方南蛇簕”的组方为疗效确切的广西民
族药流感验方，该方主要由南蛇簕、山芝麻、青蒿等
广西特色药材组成，具有解表、清热解毒之功效，民
间用于治疗流感，外感风热、咳嗽等 [1-3]。本研究拟
在原汤剂应用疗效确切的基础上，通过提取、浓缩、
干燥等工艺，制备成医疗机构制剂，以胶囊剂用于临
床，达到既能保持汤剂吸收较快、作用迅速的特点，
又克服汤剂临用时煎煮不便、服用量大、易霉败变
质等缺点，为临床流感患者提供新的用药选择 [4]。本
文以青蒿素提取量为考查指标，筛选最佳提取工艺，
现报道如下：
1　仪器与试药
1.1　仪器
安捷伦 1200 型（美国 Agilent 公司），KQ-5200
型数控超声波清洗器 ( 昆山市超声仪器有限公司 )，
电子分析天平（CP2250D，Sartorius ），101-1 型电热
鼓风干燥箱（上海沪南科学仪器联营厂）；W201 型
恒温浴锅（上海申生科技有限公司）；高速万能粉碎
机（天津泰斯特仪器有限公司）。
1.2　试药
青蒿素（中国药品生物制品检定所，批号：
100202-201004）；南蛇簕、青蒿、山芝麻药材购自民
间瑶医（由广西药用植物园药用资源保护与遗传改良
中心赵以民博士鉴定）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为
超纯水，甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯为分析纯。
2　方法与结果
2.1　单因素实验
2.1.1　不同溶剂对提取效果的影响　　称取 6份复方
南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。分别加入甲醇、
乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚和水各 50 ml，于超
声仪中超声提取 60 min。将提取液分别过滤，蒸干后
用蒸馏水溶解，石油醚萃取2次。取石油醚层蒸干后，
用色谱甲醇溶解于 10 ml 量瓶内，并定容至 10 ml。
测定青蒿素含量，结果见表 1。
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表 1 不同提取溶剂对青蒿素含量的影响
Tab. 1 Effects of different extraction agents on content of artemisine
含量
(mg·g-1)
提取溶剂
甲醇 乙醇 丙酮 乙酸乙酯 石油醚 水
青蒿素 　　 2.046 2 2.006 0 1.669 8 1.772 2 1.409 4 0.417 0
从表 1 可见，溶剂对提取效果影响较大，其中甲
醇、乙醇的提取效果最好 ，考虑到甲醇具有毒性及
易挥发性，而乙醇安全、无毒、无污染、价格低，故
选择乙醇为提取剂。
2.1.2　乙醇不同体积分数对提取效果的影响　　称
取 8份复方南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。分别
加入不同体积分数的乙醇各 50 ml，于超声仪中超声
提取 60 min。将提取液分别过滤，蒸干后用蒸馏水溶
解，石油醚萃取 2次。取石油醚层蒸干后，用色谱甲
醇溶解于 10 ml 量瓶内，并定容至 10 ml。测定青蒿
素含量，结果见表 2。
表 2 不同乙醇体积分数对青蒿素含量的影响
Tab.2 Effects of ethanol concentration on content of artemisine
含量
(mg·g-1)
提取乙醇不同体积分数
20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 95%
青蒿素 0.489 0 0.563 1 0.652 7 0.974 1 1.140 9 1.339 0 1.675 2 2.185 4
从表 2 可知，随着乙醇体积分数的增大，青蒿素
的含量增高。当乙醇体积分数为 95% 时提取效果最
好，因此确定体积分数为 95%的乙醇为提取剂。
2.1.3　不同提取方法对提取效果的影响　　称取 6
份复方南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。分别加入
95%的乙醇各 50 ml，不同提取方法提取 30 min。将
提取液分别过滤，蒸干后用蒸馏水溶解，石油醚萃取
2次。取石油醚层蒸干后，用色谱甲醇溶解于 10 ml
量瓶内，并定容至 10 ml。测定青蒿素含量，结果见
表 3。
表 3 不同提取方法对青蒿素含量的影响
Tab.3 Effects of temperature on content of artemisine
含量
(mg·g-1)
不同提取方法
　　　　　　回流提取法 　 超声提取法　 浸渍法
青蒿素 　　　 1.987 1 　　 　 1.903 7 　　 0.471 7
从表 3 可见，不同提取方法对提取效果影响显
著，采取回流提取和超声提取方法，有利于青蒿素的
浸出。从操作的简便程度考虑，选用超声提取作为提
取方法。
2.1.4 不同的料液比对提取效果的影响　　称取 8份
复方南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。分别加入
95%的乙醇不同体积，于超声仪中超声提取 30 min。
将提取液分别过滤，蒸干后用蒸馏水溶解，石油醚萃
取 2次。取石油醚层蒸干后，用色谱甲醇溶解于 10
ml 量瓶内，并定容至 10 ml。测定青蒿素含量，结果
见表 4。
表 4 提取剂用量对青蒿素含量的影响
Tab. 4 Effects of amount of extraction agents on content of artemisine
含量
(mg·g-1)
提取溶剂的用量
2 : 10 2 : 20 2 : 30 2 : 40 2 : 50 2 : 60 2 : 70 2 : 80
青蒿素 0.728 9 1.488 5 1.374 5 1.913 5 1.444 6 1.631 5 1.773 2 1.281 7
从表 4 可见，当溶剂量太小时，提取不完全，青
蒿素含量较低。随着溶剂量的增大， 青蒿素的含量增
大，但当固液比达到 2 : 40 后，增加溶剂量，青蒿素
含量都不再增加。所以从提取效果，减小浓缩负荷，
经济效益方面综合考虑，溶剂量不宜过大，故固液比
定为 2 : 40 为宜。
2.1.5　提取时间对提取效果的影响　　称取 5份复方
南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。分别加入 95%的
乙醇各 40 ml，于超声仪中超声不同的时间。将提取
液分别过滤，蒸干后用蒸馏水溶解，石油醚萃取 2次。
取石油醚层蒸干后，用色谱甲醇溶解于10 ml量瓶内，
并定容至 10 ml。测定青蒿素含量，结果见表 5。
表 5 提取时间对青蒿素含量的影响
Tab. 5 Effects of auxiliary supersonic wave treatment time on content of
artemisine
含量
(mg·g-1)
提取时间
30 60 90 120 150
青蒿素 1.763 1　 1.839 4 2.046 7 　 1.650 5 1.696 7
从表 5 可见，随提取时间的增加青蒿素含量会逐
渐增大，但达到 90 min 后，青蒿素含量会逐渐降低。
所以从提取效果考虑，提取时间为 90 min，提取效果
较好。
2.1.6　提取次数对提取效果的影响　　称取 1份复方
南蛇簕药材，每份 2 g，精密称定。加入 95%的乙醇
40 ml，于超声仪中超声提取 90 min。将提取液分别
过滤，蒸干后用蒸馏水溶解，石油醚萃取 2次。取石
油醚层蒸干后，用色谱甲醇溶解于 10 ml 量瓶内，并
定容至 10 ml。测定青蒿素含量。结果表明，提取两
次青蒿素就可以提取完全，见表 6。
表 6 提取次数对青蒿素含量的影响
Tab. 6 Effects of extraction times on content of artemisine
含量
(mg·g-1)
提取次数
　　　　一次 　　 二次 　　 三次 　 　 四次
青蒿素 　　 2.006 9 　　 0.315 7 　　 0 　　 0　　
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2.2 　正交实验
在单因素试验的基础上，选择不同的乙醇浓度、
料液比、提取次数、提取时间为影响因素，正交试验
方案及结果见表 7。
表 7 因素水平表
Tab. 7 Factors and level
因素水平 A乙醇浓度（%） B 提取次数 C 提取时间 (min) D 料液比 (g·ml-1)
　　1 　　　 70 　　 1 　　 60 　　　　 2: 30
　　2 　　　 80 　　 2 　　 90 　　　　 2: 40
　　3 　　　 95 　　 3 　　 120 　　　　 2: 50
2.3　青蒿素含量测定
2.3.1　色谱条件　　色谱柱 : 伊力特 ODS C18（4.6
mm×250 mm，5μm），乙腈和 0.3% 磷酸水为流动
相，检测波长为 210 nm ，柱温为 30℃ ，流速为 0.8
ml·min-1 进样量体积为标准品 5μl，样品 20μl。
流动相比例如下 : 0 min ( 乙腈 : 水 = 40 : 60 ) ；0 ~ 25
min ( 乙腈 : 水 = 80 : 20) ；25-30 min( 乙腈 : 水 = 80 :
20)；30 ~ 32 min( 乙腈 :水 = 40 : 60)；32 ~ 35 min( 乙腈 :
水 = 40 : 60)。
2.3.2　供试品溶液的制备　　称取 9份复方南蛇簕药
材，每份 2 g，精密称定。分别加入溶剂，于超声仪
中超声不同的时间。将提取液分别过滤，蒸干后用蒸
馏水 8 ml 溶解，石油醚 8 ml 萃取 2 次。取石油醚层
蒸干后，用色谱甲醇溶解于 10 ml 量瓶内，并定容至
10 ml，摇匀，即得。
2.3.3　对照品溶液的制备　　精密称取青蒿素标准
品 21.32 mg 置 10 ml 量瓶中，加色谱甲醇溶解并稀释
至刻度，摇匀，得对照液（浓度 2.132 mg·ml-1）。
2.3.4　系统适应性　　另取按处方比例并以相同制
备工艺制备不含青蒿药材的阴性样品，再按供试品
溶液的制备方法制得阴性对照品。按选定色谱条件，
分别取对照品溶液 5μl、阴性对照品溶液和供试品
溶液 20μl，加入高效液相色谱仪，测定，结果供试
品的液相色谱中，在与对照品色谱相应的位置上有相
同保留时间的色谱峰，而阴性对照品在此保留时间上
无干扰。理论塔板数按青蒿素峰计不低于 4 000，青
蒿素色谱峰与相邻峰之间分离度大于 1.5。
2.3.5　线性关系考察　　分别精密吸取 2.132 mg·
ml-1 青蒿素对照品溶液 1, 3, 5, 7, 9, 11μl 进样，测
得峰面积，以峰面积（A）为纵坐标，进样量（C）
为横坐标进行回归，得标准曲线方程为 A = 3.94 C +
61.84， r = 0.999 9（n = 6），结果表明，青蒿素对进样
量在 2.132 ～ 23.452μg 范围内，其进样量与色谱峰
面积之间有良好的线性关系。
2.3.6　精密度试验　　取对照品溶液进样 5μl，重复
进样 6 次，测定峰面积，结果RSD = 0.464 3％，表
明仪器的精密度良好。
2.3.7　重复性试验　　取复方南蛇簕样品，共 6份，
按 “2.3.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条
件测定青蒿素的含量，峰面积的RSD 值为 4.58 %。
2.3.8　稳定性考察　　精密吸取供试品溶液，于 0，
2，4，8，10 h 进样 20μl，按上述色谱条件测定峰面积，
RSD = 0.263％，结果表明，供试品溶液在10 h内稳定。
表 8 正交实验结果
Tab. 8 Result of L9（34）orthogonal experiment
试验号 因 素 青蒿素 (mg.g-1)A 　　 B　　 C 　　 D
　　　1 　　 1 1 1 1 0.967 8
　　　2 1 2 2 2 1.250 9
　　　3 1 3 3 3 1.341 9
　　　4 　　 2 1 2 3 1.743 9
　　　5 2 2 3 1 2.131 2
　　　6 2 3 1 2 2.202 0
　　　7 3 1 3 2 1.936 3
　　　8 3 2 1 3 2.198 7
　　　9 3 3 2 1 2.195 3
　　　K1 1.187 1.549 1.790 1.765
　　　K2 2.026 1.860 1.730 1.796
　　　K3 2.110 1.913 1.830 1.761
　　　R 0.923 0.364 0.073 0.035
表 9 方差分析
Tab. 9 Analysis of variance procedure
来源 偏差平方和 　 自由度 　 均方 　 F 值 显著性
　　　A　　　　 1.563 2 0.782 781.500 ＜ 0.01
　　　B 　　　　 0.232 2 0.116 116.000 ＜ 0.01
　　　C 　　　　 0.009 2 0.005 4.500
　　　D（误差） 　　 0.002 2 0.001 1.000
3　讨论
3.1　考察指标的选择
流行性感冒是流感病毒引起的急性呼吸道感
染。青蒿水提物及溶媒提取物有非常明显的解热、耐
高温、抗炎作用和一定的镇痛、抑菌作用。青蒿素类
药物还可以治疗手足癣、流行性结膜炎、霉菌性肠
炎、脑梗死、川崎氏病、老年类风湿多肌痛等多种疾
病 [5]。因此本研究选择青蒿素作为含量测定的指标。
3.2　最佳工艺的确定
采用正交设计的方法对南蛇簕胶囊的提取工艺
进行优化筛选，各因素对青蒿素含量的影响顺序依次
为 A＞ B＞ C＞ D，从方差分析可知，A乙醇浓度、
B提取次数具有显著性影响，故关键因素是 A和 B，
C和 D是次要因素，最佳提取条件为 A3B3C3D2。即青
蒿素的最佳提取工艺是：95%乙醇，料液比 2 : 40，
提取 3 次，提取时间 120 min。含量测定结果表明：
— 46 — 现代中药研究与实践2015年第29卷第3期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.3
青蒿素的平均含量为 2.226 7 mg·g-1， 高于正交实验
表中的全部 9个实验， 从而证明了该工艺的合理性和
稳定性，为制订南蛇簕胶囊的制备工艺提供了参考依
据。
参考文献
[1] 　唐炳兰 , 缪剑华 , 马丽焱 . 我国民族药抗流感的应用与研究 [J]. 中华中
医药学刊 , 2008, 26(5): 1025-1027.
[2] 　唐炳兰 , 缪剑华 , 程　燕 , 等 . 壮瑶五验方抗病毒、抗菌、解热、镇痛、
消炎作用研究 [J]. 广西医学院学报 , 2008, 25(3): 378-380.
[3] 　陈庆淑 , 袁经权 , 黄柳娜 , 等 . 南蛇簕的研究进展 [J]. 中国实验方剂学
杂志 , 2012, 18(11): 313-315.
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与实践 , 2013, 6(27): 53-55.
[5]　梁晓媛 , 李隆云 , 白志川 . 青蒿中青蒿素提取工艺研究进展 [J]. 重庆理
工大学学报 , 2013, 27(2): 32-38.
收稿日期：2014-05-13
作者简介： 杨光义 (1975-)，男，博士，副教授，副主任药师，主要研究方向：中药资源开发和新药研究。 E-mail: ygy996@163.com
通讯作者：叶　方 (1971-)，男，本科，副教授，副主任药师，主要从事医院药学工作。E-mail: yxwen8801129@sina.com
栀子有效成分不同提取方法比较研究
杨光义 1，刘襄艳 2，叶　方 1*，杜　婷 1，杜士明 1
（1. 湖北医药学院附属太和医院，湖北 十堰 442000; 2. 湖北医药学院，湖北 十堰 442000)
摘　要：目的　优选栀子有效成分的最佳提取方法。方法　以栀子苷、总环烯醚萜、干浸膏收率为指标，
对水提法、水提-纤维素酶酶解法、水提-果胶酶酶解法、水提-纤维素-果胶酶酶解法、半仿生提取法、
半仿生-纤维素酶酶解法、半仿生-果胶酶酶解法、半仿生-纤维素-果胶酶酶解法进行比较。结果　半仿生-
纤维素酶酶解法所得综合评价指标最优。结论　半仿生-纤维素酶酶解法为提取栀子有效成分的最佳提取方法。
关键词：栀子；不同提取方法；比较
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)03-46-04
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.03.016
Comparing the Extraction Methods of Ingredients for Gardenia jasminoides Ellis
YANG Guang-yi1, LIU Xiang-yan2, YE Fang1*, DU Ting1, DU Shi-ming1
（1. Department of Pharmacy, Taihe Hospital of Hubei Medical University, Shiyan 442000, China; 2. Hubei
University of Medicine , Shiyan 442000, China）
Abstract: Objective To optimize the best extraction method of ingredients in Gardenia jasminoides Ellis.
Methods The Geniposide, total iridoid glycosides and extracts yield were set as the indexes to compare the water
extraction, the water-cellulase zymolysis, the water-pectinase zymolysis, the water-cellulase-pectinase zymolysis,
the simi-bionic extraction, the semi-bionic-cellulase zymolysis, the semi-bionic-pectinase zymolysis and the semi-
bionic-cellulase-pectinase zymolysis method used for the Gardenia jasminoides Ellis extraction. Results The
Semi-bionic-cellulase zymolysis has the optimum comprehesive value among the eight methods. Conclusion The
Semi-bionic-cellulase zymolysis is the best methods for the Ingredients in Gardenia jasminoides Ellis extraction.
Key words: Gardenia jasminoides Ellis; different extraction methods; comparing
栀子是茜草科植物栀子 (Gardenia jasminoides
Ellis.) 的干燥成熟果实，性味苦寒，是卫生部颁布的
第 1 批药食两用植物，具有泻火除烦、清热利尿、
凉血解毒之功效 [1]。中医临床主要用于治疗黄疸型肝
炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等症。栀子中主要含栀
子苷等环烯醚萜类成分，《中国药典》2010 年版以栀
子苷的含量为指标，对栀子药材进行质量控制。半仿
生提取法 (SBE 法 ) 是模仿口服给药在胃肠道的转运
过程，采用不同 pH值的酸、碱水溶液提取中药有效
物质的一种方法，进一步的研究认为药物在消化道里