全 文 ：Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 March，Vol．23 No．2
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26.
（编辑：邓响潮）
收稿日期：2011- 09- 18
作者简介：王庆庆，女，硕士研究生，研究方向：主要从事中药活性成分分析及药理活性研究。Email：wangqqmyself@sina.com。通讯作者：欧阳
臻，教授，博士生导师，Email：zhenouyang@ujs.edu.cn。
基金项目：江苏省中医药局科技项目（LZ09086）；江苏大学学生科研立项项目（09A050）。
茅苍术提取物对胃癌 BGC- 823和 SGC- 7901细胞增殖抑制作用研究
王庆庆 1，欧阳臻 1，赵 明 1，韩邦兴 1，王文兵 2，吴 燕 1，杨 兵 1（1. 江苏大学 药学院，江苏 镇江
212013；2. 江苏大学 生命科学研究院，江苏 镇江 212013）
摘要：目的 探讨茅苍术提取物对胃癌细胞株 BGC-823和 SGC-7901的增殖抑制效应。方法 采用不同浓度
（0.625，1.25，2.55，10 mg·mL-1）茅苍术水提物处理胃癌 BGC-823和 SGC-7901细胞，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）
法检测药物对细胞的抑制作用；倒置显微镜下观察细胞的形态学改变；Hoechst 33342染色，荧光显微镜观察
细胞凋亡形态；应用流式细胞仪观察凋亡过程中的细胞周期变化。结果 茅苍术提取物对胃癌 BGC-823 和
SGC-7901细胞增殖均有明显的抑制作用，且呈浓度和时间依赖性；光镜下可见凋亡细胞的形态学特征性改变；
流式细胞仪检测表明经茅苍术提取物处理，BGC-823 细胞周期阻滞于 S期，SGC-7901细胞周期阻滞于 G0/G1
期。结论 体外实验显示茅苍术提取物能抑制胃癌 BGC-823和 SGC-7901细胞增殖，可以诱导胃癌细胞凋亡。
关键词：茅苍术提取物；胃癌细胞 BGC-823；SGC-7901 ；增殖；细胞凋亡
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1003-9783（2012）-02-0152-05
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2012.02.009
Proliferation Inhibition Effect of Atractylodes lancea（Thunb.） DC. Extracts in Human Gastric Carcinoma
BGC-823 and SGC-7901 Cells
WANG Qingqing1，OUYANG Zhen1，ZHAO Ming1，HAN Bangxing1，WANG Wenbing2，WU Yan1，YANG Bing1
（1. School of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang 212013 Jiangsu，China；2. Institute of Life Science，Jiang－
su University，Zhenjiang 212013 Jiangsu，China）
Abstract：Objective To observe the effect of extracts of Atractylodes lancea（Thunb.） DC. on the growth of gastric
cancer cell lines of BGC-823 and SGC-7901. Methods Gastric cancer cell lines BGC-823 and SGC-7901 were treat
ed with Atractylodes lancea（Thunb.）DC. extracts at the concentrations of 0.625，1.25，2.55，10 mg·mL-1. Cell via－
bility was measured by MTT assay. Morphological changes of the cells were observed under invert microscope after
staining with Hoechst 33342. Cell cycle was examined by PI fluorescence flow cytometry（FCM）. Results The water
extract of Atractylodes lancea（Thunb.）DC. could inhibit the growth of BGC-823 and SGC-7901 cell lines in dosage and
time dependant manner. Cells exhibited apoptosis in morphology. The cell cycle of BGC -823 was blocked in S
phase，and that of SGC-7901 was blocked in G0 / G1 phase. Conclusion The extract of Atractylodes lancea（Thunb.）
DC. could inhibit the proliferation and induce the apoptosis of gastric cancer cell lines of BGC-823 and SGC-7901.
Keywords：Atractylodes lancea（Thunb.）DC extracts；BGC-823；SGC-7901；Proliferation；Apoptosis
152· ·
中药新药与临床药理 2012年 3月第 23卷第 2期
茅苍术为菊科植物茅苍术 Atractylodes lancea
（Thunb.）DC.干燥根茎，具有燥湿健脾，祛风散寒，
明目的功效[1]。历代医家临床多采用苍术治疗脾胃疾
病，现代药理研究表明茅苍术具有抗炎、抗菌、抗
肿瘤、抗溃疡的作用[2]。有研究证明茅苍术提取物在
体外能抑制人肝癌细胞株 HepG2 生长，并诱导细胞
凋亡[3]，对小鼠淋巴肉瘤 L-5187Y细胞有抑制作用[4]。
但是关于茅苍术对胃癌的治疗作用尚未见有相关报
道。本研究基于中药的传统使用方法，选取两株人
胃癌细胞株——BGC-823 和 SGC-7901 细胞株，研
究茅苍术水提物对人胃癌细胞株增殖的抑制作用及
其对细胞凋亡的诱导作用。
1 材料与方法
1.1 试剂及仪器 胰蛋白酶、DMEM培养基、胎牛血
清（FBS），Gibco 公司；四甲基偶氮唑蓝（MTT）、
DMSO，Sigma公司；MK3型酶标仪，Thermo Labsys－
tems 公司；FACS Calibur 流式细胞仪，美国 BD 公
司；Nikon TS100 型倒置显微镜、Ti-2000 荧光倒置
显微镜，Nikon 公司；超净工作台，苏州净化设备
厂；INCO2/108型CO2培养箱，德国MEMMERT公司。
1.2 药材及细胞 茅苍术药材购于江苏句容，经江
苏大学药学院欧阳臻教授鉴定为菊科植物茅苍术
Atractylodes lancea（Thunb.）DC.的干燥根茎；人胃癌
细胞株 BGC-823 及 SGC-7901 由江苏大学生命科学
院医学分子生物学实验室提供。
1.3 茅苍术水提物的制备 取茅苍术干燥粗粉，过
40目筛，用 10倍量的水加热回流提取 2次，每次 2
h，提取液抽滤后混合，减压浓缩至含生药量 1.0
g·mL-1，4 ℃储存，备用，实验时用细胞培养液稀释
至所需浓度。
1.4 细胞培养 人胃癌 BGC-823和 SGC-7901细胞，
以含 100 IU·mL-1青霉素、100 μg·mL-1链霉素、10
%FBS的 DMEM培养液，在 37 ℃、5 % CO2饱和湿
度培养箱中培养，取对数生长期的细胞进行实验。
1.5 实验方法
1.5.1 MTT法检测茅苍术提取物对 BGC-823和 SGC-
7901细胞增殖的抑制作用 药物组为 0.625，1.25，
2.5，5，10 mg·mL-1，共 5组，用培养液稀释。取对
数生长期胃癌 BGC-823和 SGC-7901细胞移入 96孔
培养板，细胞密度为 1×105/mL，每孔加入 200 μL。
将培养板移入细胞培养箱继续培养 24 h，吸弃孔内
原培养液，实验组加入含各浓度茅苍术水提物的培
养液 200 μL，阴性对照不加药，移入细胞培养箱继
续培养 24 h和 48 h，每组药物设 5个平行复孔。分
别培养 24 h和 48 h后，每孔加入 5 mg·mL-1 MTT溶
液 20 μL，继续培养 4 h后终止培养，小心吸弃孔内
上清液，每孔加入 DMSO 150 μL，使结晶充分溶解，
用酶标仪测定吸光度（OD）值，检测波长为 490 nm，
计算细胞增殖抑制率：抑制率（%）=（1－OD药物/OD
空白对照）×100 %。
1.5.2 台盼蓝拒染观察细胞存活情况 取对数生长期
的胃癌 BGC-823和 SGC-7901细胞移入 24孔板，细
胞密度为 1×105/mL，每孔加入 500 μL。将培养板移
入细胞培养箱继续培养 24 h，吸弃孔内原培养液，
加入含茅苍术水提物的培养液 500 μL，设阴性对照
组。将培养板放入培养箱中培养 24 h后，将孔内培
养液吸弃，每孔加入 50 μL 0.4 %的台盼蓝溶液，再
加入 450 μL PBS进行染色。待染色完成后，于倒置
显微镜下观察细胞死亡情况，死细胞被染成蓝色，
活细胞则不被染色，观察细胞存活情况。
1.5.3 倒置显微镜观察茅苍术提取物对细胞形态的影
响阴性对照组和经各组药物处理 24 h 后的的 BGC-
823和 SGC-7901细胞直接置于倒置显微镜下观察细
胞形态变化。
1.5.4 Hoechst 33342染色观察胃癌细胞细胞核形态变
化 分别取对数生长期的胃癌 BGC-823和 SGC-7901
细胞，用 0.25 %胰蛋白酶消化，以 4×104 /mL的密度
接种于 24 孔培养板中。培养 24 h后，以一定浓度
药物（5 mg·mL-1）分别处理胃癌 BGC-823和 SGC-7901
细胞 24 h，吸去孔内培养液，用 PBS清洗 2 次，每
孔加入 10 μg·mL-1 Hoechst 33342 荧光染液 300 μL，
37 ℃、5 %CO2避光孵育 10 min，吸去染液，用 PBS
清洗 2次，荧光显微镜下观察细胞核形态。
1.5.5 流式细胞仪检测茅苍术对胃癌细胞周期的影响
实验分药物组和阴性对照组，5 mg·mL-1茅苍术水提
物分别处理胃癌 BGC-823和 SGC-7901 24 h后，分
别收集 1×106个对照组和实验组细胞，PBS 洗涤后用
预冷的 70 %乙醇固定，20 mg·L-1 RNase A 酶消化
后，经 50 mg·L-1的碘化丙啶（PI）染色，4 ℃避光孵
育 30 min。上机检测，并用 Modfitlt 3.0 软件分析。
1.6 统计学处理方法 应用 SPSS 16.0 统计软件进行
方差分析和 t检验，P ＜ 0.05为有统计学意义。
153· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 March，Vol．23 No．2
表 3 茅苍术水提物对胃癌 BGC-823 和 SGC-7901 细胞周
期分布的影响（x± s，%，n=5）
Table 3 Effect of the water extract of Atractylodes lancea
（Thunb.）DC. on BGC-823 and SGC-7901cells in cell cycle
细胞株
BGC-823
SGC-7901
组 别
阴性对照组
茅苍术水提物
阴性对照组
茅苍术水提物
剂量/mg·mL-1
-
10
-
10
G0/G1
72.47±2.56
61.09±1.52*
50.78±2.04
62.61±1.35*
S
22.23±0.78
34.91±0.61*
40.67±2.78
32.20±2.08*
G2/M
8.00±1.01
5.3±0.95*
6.54±1.23
6.19±1.86
注：与阴性对照组比较， *P ＜ 0.05。
2 结果
2.1 茅苍术水提物对 BGC-823和 SGC-7901细胞增
殖的影响 各浓度组药物对 BGC-823 和 SGC-7901
胃癌细胞株均有抑制增殖作用，与阴性对照组比较
有统计学意义（P ＜ 0.05），随着药物浓度的增加，其
抑制率增加（表 1，表 2），且随着作用时间的延长，
抑制率也随之增加。同一浓度下，茅苍术水提物对
胃癌细胞株 BGC-823 的抑制率略高于 SGC-7901；
在作用 24 h ，药物浓度为 1000 μg·mL-1时，对胃癌
BGC-823 和 SGC-7901 的抑制率分别达到 73.5%和
71.5 %；作用时间为 48 h 时对胃癌 BGC-823 和
SGC-7901的抑制率分别达到 81.0 %和 81.6 %。茅苍
术水提液处理 24 h 后的 IC50 分别为 2.93 mg·mL-1
（BGC-823）和 3.36 mg·mL-1（SGC-7901），处理 48 h 后
IC50分别为 2.18 mg·mL-1（BGC-823）和 3.13 mg·mL-1
（SGC-7901）。实验结果显示茅苍术水提物对这两种
胃癌癌细胞株具有较好的抑制其增殖的作用，对
BGC-823细胞的抑制作用略优于 SGC-7901细胞。
2.2茅苍术提取物对胃癌细胞活力的影响 台盼蓝染
色结果显示，茅苍术水提物对胃癌细胞增殖具有抑
制作用。阴性对照组细胞活细胞占大多数，基本未
被染成蓝色，细胞形态未发生变化，仍呈透明状；
而药物处理组细胞经台盼蓝染色后，可以观察到明
显的许多蓝色细胞碎片，且细胞形状成不规则状，
透明度降低，死亡细胞较多。
2.3 茅苍术提取物对胃癌细胞形态变化的影响 采用
倒置显微镜观察 BGC-823和 SGC-7901胃癌细胞株
生长情况。结果表明，阴性对照组的细胞贴壁生长
良好，饱满。边界清晰、细胞呈多角形、细胞透亮、
折光性好、无细胞碎片；经茅苍术水提物处理 24 h
后的胃癌 SGC-7901和 BGC-823细胞生长受到抑制，
并出现贴壁生长细胞典型的凋亡形态变化现象，镜
下观察到细胞体积变小、细胞数量减少、细胞边缘
变钝、悬浮、有许多细胞碎片。
2.4 Hoechst 33342荧光染色观察胃癌细胞凋亡形态
正常的 BGC-823和 SGC-7901细胞核染色后，出现
蓝色荧光均匀弥散的分布状态，染色质分布均匀。
用药物处理 24 h后细胞数目减少，细胞核有了明显
的变化，在一个细胞内出现多个蓝色荧光小亮点，
说明染色质出现聚集、固缩、断裂的现象，形成
“凋亡小体”。
2.5 茅苍术提取物对胃癌细胞周期分布的影响 茅苍
术水提物作用 24 h，可以使 BGC-823 细胞的周期明
显改变，使 G0/G1期细胞比例降低，S期细胞比例增
高，G2/M期比例降低，与阴性对照组相比有显著性
差异（P ＜ 0.05），结果见表 3，表明茅苍术水提物将
胃癌 BGC-823细胞周期阻滞于 S期。茅苍术水提物
作用 24 h，SGC-7901细胞的周期也发生明显改变，
S期细胞比例降低，G0 /G1期细胞比例增高，表明茅
苍术水提物阻滞 SGC-7901细胞于 G0/G1期。
药物浓度/mg·mL-1
阴性对照组
0.625
1.25
2.5
5
10
OD值（490nm）
0.784±0.00837
0.709±0.0328*
0.556±0.0167*
0.343±0.0182*
0.271±0.0199*
0.208±0.00669*
抑制率/%
—
9.57
29.1
56.4
65.4
73.5
OD值（490nm）
0.667± 0.0225
0.546±0.0279*
0.422± 0.0136*
0.274±0.0154*
0.197±0.0126*
0.126±0.007*
抑制率/%
—
18.1
36.7
58.9
70.4
81.0
24 h 48 h
表 1 不同浓度茅苍术水提物对 BGC-823的抑制作用（x± s，
n=5）
Table 1 The growth inhibitory of water extract of Atratylodes
lancea（Thunb.）DC. on BGC-823 cell
注：与阴性对照组比较， *P ＜ 0.01。
表2 不同浓度茅苍术水提物对 SGC-7901 抑制作用（x ± s，
n=5）
Table 2 The growth inhibitory of water extract of Atratylodes
lancea（Thunb.）DC. on SGC-7901 cell
药物浓度/mg·mL-1
阴性对照组
0.625
1.25
2.5
5
10
OD值（490nm）
0.643±0.0205
0.609±0.0157*
0.464±0.0241**
0.397±0.0254**
0.257±0.0211**
0.183±0.00926**
抑制率/%
—
5.29
27.8
38.3
60.0
71.5
OD值（490nm）
0.686±0.0284
0.629±0.0196**
0.569±0.0260**
0.399±0.0185**
0.180±0.0149**
0.126±0.0131**
抑制率/%
—
8.19
17.3
41.6
73.8
81.6
24 h 48 h
注：与阴性对照组比较， *P ＜ 0.05， **P ＜ 0.01。
154· ·
中药新药与临床药理 2012年 3月第 23卷第 2期
3 讨论
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，据
WHO 统计，胃癌的发病率在消化道肿瘤中居于第一
位，严重威胁着人类的健康。中医药对胃癌的治疗，
在缓解临床症状，配合手术治疗，减轻放化疗的毒
副反应，提高治疗有效率，延长生存时间等方面具
有很大的优势。因此，抗癌中药的研究与开发，一
直是中医药领域研究的热点[5-10]。
茅苍术为江苏省道地药材，临床应用广泛，常
被用于脾胃郁证诸病，现代药理学研究表明苍术具
有抗溃疡、抗肿瘤、抗菌、抗炎、肠免疫活性调
节、促进胃排空、降血糖、利尿等作用。但是关于
茅苍术对胃癌的治疗作用尚未有相关报道。本实验
选取两种胃癌细胞株 BGC-823 和 SGC-7901，采用
MTT 法研究茅苍术水提物对两种胃癌细胞株增殖
的影响。
MTT实验结果显示，茅苍术水提物体外具有一
定的细胞毒作用，对胃癌细胞株 BGC-823 和 SGC-
图 1 台盼蓝染色后观察 BGC-823细胞形态学变化（×200）
Figure 1 Morphological changes of BGC-823 cells after stained
with Trypan Blue（×200）
图 2 台盼蓝染色后观察 SGC-7901细胞形态学变化（×200）
Figure 2 Morphological changes of SGC-7901 cells after stained
with Trypan Blue（×200）
A B A B
A． 阴性对照组 B． 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1） A． 阴性对照组 B． 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1）
图 3 茅苍术水提物作用胃癌 BGC-823细胞 24 h 后置倒置
显微镜下观察细胞形态学变化（×200）
Figure 3 Morphological changes of BGC-823 cells treated with
water extract of Atractylodes lancea（Thunb.）DC various drugs for
24 h under inverted microscope（×200）
图 4 茅苍术水提物作用胃癌 SGC-7901细胞 24 h 后置倒置
显微镜下观察细胞形态学变化（×200）
Figure 4 Morphological changes of SGC-7901cells treated with
water extract of Atractylodes lancea（Thunb.）DC various drugs for
24 h under inverted microscope（×200）
A. 阴性对照组 B. 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1） A. 阴性对照组 B. 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1）
A B A B
图 5 BGC-823细胞凋亡的形态变化（Hoechst 33342荧光染
色，×200）
Figure 5 Morphological changes of BGC-823 cells apoptosis flu－
orescence microscope（Hoechst 33342 staininy，×200）
图 6 SGC-7901细胞凋亡的形态变化（Hoechst 33342荧光染
色，×200）
Figure 6 Morphological changes of SGC -7901 cells apoptosis
under fluorescence microscope（Hoechst 33342 staininy，×200）
A. 阴性对照组 B. 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1） A. 阴性对照组 B. 茅苍术水提物处理组（10 mg·mL-1）
A B A B
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Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 March，Vol．23 No．2
7901均有较好的抑制增殖的作用，并呈现一定的量
效和时效关系。倒置显微镜下呈现出早期的凋亡形态
学特征； Hoechst 33342实验结果显示，经茅苍术水
提物处理后出现了细胞凋亡形态学变化特征。说明茅
苍术水提物可以诱导胃癌细胞 BGC-823和 SGC-7901
细胞凋亡。
流式细胞仪检测细胞周期结果表明，经茅苍术水
提物处理后，BGC-823细胞细胞周期变化明显，S期
细胞比例增高，G0/G1期细胞比例降低，茅苍术水提
物可将 BGC-823细胞阻滞于 S期；SGC-7901细胞的
周期也发生明显改变，S期细胞比例降低，G0 / G1期
细胞比例增加，茅苍术水提物阻滞 SGC-7901细胞于
G0/G1期，因此推测茅苍术对细胞周期的阻滞是其抑
制细胞增殖的部分机制。结果还显示茅苍术水提物可
将不同分化程度的胃癌细胞阻滞于不同时期，提示其
对不同细胞抑制作机制不同，具体机制尚需进一步研
究。
本研究结果显示茅苍术水提物可以抑制胃癌细胞
的增殖，可能与其诱导细胞周期阻滞和使细胞形态发
生变化引起细胞凋亡的活性有关。茅苍术抗肿瘤的具
体作用机制以及茅苍术抗肿瘤的药效物质基础有待进
一步深入研究。
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（编辑：邓响潮）
收稿日期：2011- 12- 07
作者简介：赵妍，女，硕士研究生，研究方向：中药药理学。Email：zhaoyan9932@163.com。通讯作者：王春丽，副教授，中药学硕士生导师，
研究方向：主要从事中药方剂抗氧化作用研究。Email：wangchunli@ecust.edu.cn。
基金项目：上海市卫生局中医药科研基金项目（2010223）。
活络效灵丹对乳鼠缺氧 /复氧损伤心肌细胞的保护作用研究
赵 妍 1，韩向东 2，王春丽 1（1. 华东理工大学药学院，上海 200237；2. 上海中医药大学中药学院，上海
201203）
摘要：目的 探讨活络效灵丹含药血清对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）损伤的保护作用
及其机制。方法 取体外培养的乳鼠心肌细胞，建立 H/R心肌细胞损伤模型，实验分为 4组：正常血清对照
组、模型组（H/R组）、活络效灵丹（HXP）血清组和单硝酸异山梨酯（ISMN）血清组，采用 MTT比色法检测活络
效灵丹对 H/R损伤心肌细胞存活率的影响，测定细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）的漏出量以及胞浆丙二醛（MDA）
含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，并采用流式细胞仪检测活络效灵丹对 H/R损伤心肌细胞凋亡的影响。结果
与正常组比较，模型组细胞存活率明显降低，上清液中 LDH漏出量和胞浆 MDA含量升高，SOD活性降低，细
胞凋亡率显著增加（P < 0.01）；与模型组比较，活络效灵丹含药血清可明显提高细胞存活率，增加胞浆 SOD活
性，减少上清液中 LDH漏出量和胞浆 MDA含量，并降低细胞的凋亡率（P < 0.01）。结论 活络效灵丹对 H/R
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