全 文 ：收稿日期: 2004-03-29;　修订日期: 2004-04-21
作者简介:李忠琼 ( 1966-) ,女 (汉族 ) ,云南江川人 ,现任云南省药品检验所副主任药
师 ,硕士学位 ,主要从事中药检验及其质量标准研究工作 .
高效液相色谱法测定益肾健骨片中齐墩果酸的含量
李忠琼 , 张雯洁 , 马　昕 , 张　华
(云南省药品检验所 ,云南 昆明　 650011)
摘要:目的: 建立 HPLC测定益肾健骨片中齐墩果酸含量的方法。方法: 色谱条件为: C18柱 ,流动相为乙腈 -0. 1%磷酸 ( 67
∶ 33) , UV检测波长为 210 nm。结果:此方法线性关系良好 ,平均加样回收率为 97. 25% (n= 6)。结论: 该方法分离良好 ,
结果准确可靠。
关键词: 高效液相色谱法 ;　齐墩果酸 ;　益肾健骨片
中图分类号: R284. 2　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2004) 07-0397-01
Determination of Oleanolic Acid in Yishen Jiangu Tablets by HPLC
LI Zhong-qiong , ZHANG Wen-jie, MA X in, ZHANG Yun-hua
(Yunnan Institute for Drug Control , Kunm ing 650011, China )
Abstract: Object ive: T o establish the determination method of O leano lic acid in Yish en Jiangu Table ts. Methods: The
HPLC method fo r determina tion w as: C18 co lumn( 150 mm× 4. 6 m m, 5μm) , mobile phase: a ce tonit rile- 0. 1% phospho ric
acid ( 67∶ 33) , detection w aveleng th: 210 nm. Results: This me thod showed a good linea r relationship. The aver age
r ecover y w as 97. 25% , R SD= 0. 38% ( n= 6) .Conclusion: This method show ed a good separa ting deg ree and reliable.
Key words: HPLC;　 Oleano lic acid;　 Yishen Jiangu Tablets
　　益肾健骨片为千年健、红花、制首乌、杜仲、淫羊藿、女贞子、甘草等 16
味药制成的包衣片 ;具补益肝肾、益气养血、化瘀通络之功效 ;用于骨痹、慢
性腰腿痛、肢体疼痛、麻木等。笔者采用 HPLC法测定了其中齐墩果酸的含
量。 现报道如下:
1　仪器及试药
Agilent- 1100液相色谱仪 (配四元泵、智能柱温箱、自动进样器、 VWD
可变波长检测器 )。 岛津 UV- 2201紫外 /可见分光光度计。 齐墩果酸对照
品 ,中国药品生物制品检定所提供 ,编号 0709- 9803,供含量测定用。 益肾
健骨片样品 ,云南曲靖康利制药厂提供。乙腈为色谱纯 ,水为超纯水 ;其余溶
剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件 Ag ilent C18色谱柱 ( 150 mm× 4. 6 mm, 5μm) ;乙腈 -0. 1%
磷酸 ( 67∶ 33)为流动相 ;流速 1 ml /min;检测波长 210 nm;柱温 25℃。
2. 2　溶液配制
2. 2. 1　对照品溶液的配制 精密称取齐墩果酸对照品 41. 43 mg ,置 25 ml
量瓶中 ,加甲醇使溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,精密取 3 ml稀释至 100 m l,即
得 (每 1 ml中含齐墩果酸 0. 049 716 mg )。
2. 2. 2　供试品溶液的制备 取本品 30片 ,除去包衣 ,精密称定 ,研细 ,取粉
末约 10片量 ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25 ml,密塞 ,称定
重量 ,超声处理 30 min,放冷 ,称定重量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,滤
过 ,弃去初滤液 ,取续滤液即得。
2. 2. 3　阴性供试品溶液的制备 取缺女贞子药材的样品 ,按供试品溶液的
制备方法 ,制成阴性供试品溶液。
2. 3　系统适用性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各
10μl,注入色谱仪 ,按前述色谱条件记录色谱图 (图 1) ;齐墩果酸峰与其它
组分峰的分离度大于 1. 8,保留时间约为 22. 5 min;其它组分不干扰齐墩果
酸的测定。
2. 4　线性关系考察 精密吸取对照品溶液 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50
μl进样 ,记录色谱图 ,以峰面积积分值 Y对进样量 X (μg )进行回归处理 ,齐
墩果酸在 0. 049 716～ 2. 485 8μg范围内呈现良好线性关系 ,回归方程为 Y
= 625. 04X - 7. 45,r= 0. 999 98。
2. 5　精密度试验 取同一齐墩果酸对照品溶液 ,连续测定 5次 ,峰面积积分
值 R SD= 0. 24% ,表明精密度良好。
2. 6　稳定性试验 取同一供试品溶液 ,测定 9次 ,每
次间隔 1 h,以供试品峰面积积分值计算 , R SD =
0. 97% ,表明供试品溶液在 8 h内稳定。
2. 7　重现性试验 取同一批号的样品 ,按供试品溶液
的制备方法制备 5份供试品溶液 ,分别测定 ,以供试
品含量计算 , RSD= 0. 27% ,证明此方法重现性良好。
A　对照品
B　供试品
C　阴性供试品
图 1　 HPLC测定益肾健骨片中齐墩果酸含量色谱图
2. 8　回收率试验 分别精密取齐墩果酸对照品溶液
( 0. 132576mg / ml) 3. 4, 4. 3, 5. 1ml (各双样 )置具塞
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LISHIZHEN MEDICIN E AND M AT ERIA M EDICA RESEARCH 2004 VOL. 15 NO. 7 时珍国医国药 2004年第 15卷第 7期
锥形瓶中 ,蒸干 ,取重现性试验的同一批号片心粉末约 5片量 ( 6
份 )加入上述具塞锥形瓶中 ,按含量测定方法测定 ,计算回收率 ,
平均回收率为 97. 25% , RSD= 0. 38%。 结果见表 1。
表 1　齐墩果酸加样回收试验结果
样品含量
m /mg
对照品加入量
m /mg
测定量
m /mg
对照品测得量
m /mg
回收率
(% )
0. 583 2 0. 450 8 1. 021 3 0. 438 1 97. 18
0. 581 9 0. 450 8 1. 018 8 0. 436 9 96. 92
0. 581 9 0. 570 1 1. 137 7 0. 555 8 97. 49
0. 583 2 0. 570 1 1. 140 4 0. 557 2 97. 74
0. 581 7 0. 676 1 1. 240 2 0. 658 5 97. 40
0. 582 7 0. 676 1 1. 236 8 0. 654 1 96. 75
　　注:平均片重 0. 295 9 g ,每片平均含量 0. 115 8 mg
2. 9　样品测定 取 10个批号的样品按上述方法进行含量测定。
结果见表 2。
3　讨论
益肾健骨片为药味较多的中药成方制剂 ,方中各药味的化学
成分复杂 ,相互干扰大 ,给定量检测带来一定的困难。实验中曾进
行过方中制首乌中 2, 3, 5, 4’ -四羟基二苯乙烯 - 2- O- β - D-
葡萄糖苷的含量测定试验 ,但未取得良好结果。女贞子滋补肝肾 ,
主要含齐墩果酸 ,因此测定制剂中女贞子的齐墩果酸含量 ,对控
制该制剂质量具有一定意义。
表 2　样品中齐墩果酸含量测定结果
批号 每片含量 m /mg 批号 每片含量 m /mg
011120 0. 115 6 020206 0. 103 8
010920 0. 123 1 020315 0. 100 9
011020 0. 128 6 020328 0. 106 2
010801 0. 077 4 020409 0. 102 6
020109 0. 102 3 020412 0. 095 4
以流动相为溶剂配制的齐墩果酸对照品溶液 ,测定其紫外吸
收光谱 ,在 200～ 400 nm范围内无最大吸收波长 ,参照中国药品
生物制品检定所标定齐墩果酸对照品含量的条件 ,确定 210 nm
波长为检测波长。理论塔板数以齐墩果酸峰计应不低于 4 000。另
实验中对供试品溶液的制备条件进行过超声处理 20, 30, 40 min
(各 2份 )的比较 ,试验结果表明超声处理 30 min即可提取完全。
收稿日期: 2004-03-14;　修订日期: 2004-05-31
护理与食疗
中西医结合护理冠心病的体会
丁东　
(湖北省黄石市一医院　 435001)
关键词: 冠心病 ;　护理
中图分类号: R248. 1　　文献标识码: C　　文章编号: 1008-0805( 2004) 07-0398-01
　　冠心病是威胁人们健康的常见病、多发病 ,属于中医学 “胸
痹”“真心痛”等范围 ,男性发病率高于女性 , 50岁以后发病率增
高 ,多数患者有吸烟史。随着年龄增长 ,其发病率成倍增长。主要
表现为胸部闷痛 ,甚至胸痛彻背 ,喘气不能平卧。胸痹的临床表现
最早见于《内经》 ,《灵枢· 厥论》说: “真心痛 ,手足青至节 ,心痛
甚 ,旦发夕死 ,夕发旦死” ,这种真心痛就是一种胸痹的重证。 因
此 ,对于冠心病的早期防治 ,合理的护理在临床上具有重要的意
义。
祖国医学在冠心病的防治上 ,具有独特的理论和丰富的实践
经验。 我院对 2000～ 2003年收治的 60例冠心病患者 ,运用中西
医结合的方法辨证施治 ,并结合临床表现进行辨证施护 ,配合一
般的常规护理 ,取得显著成效。 现将护理体会总结如下:
1　冠心病与机体脏腑功能的关系
本病多见于中、老年人 ,年过半百 ,肾气渐衰 ,如: 肾阳虚衰 ,
则不能鼓舞五脏之阳 ,可致心气不足或心阳不振 ,肾阴亏虚则心
阴内耗 ,心阳不振 ,气血运行不畅 ,在此本虚的基础上形成标实 ,
导致气滞血瘀 ,从而胸阳失运 ,心脉痹阻 ,发生胸痹。 冠心病易发
于老人 ,与中医学中肾气虚衰的年龄一致。因此 ,滋阴补肾或温肾
助阳以抗衰老 ,是防治冠心病的有效途径之一。
2　冠心病的饮食护理
中医学对饮食非常重视 ,认为人体是一个有机的整体 ,必须
保持阴阳的动态平衡 ,其生化除靠先天、肾气的温煦充养之外 ,主
要依靠饮食中的水谷精微来维持。 因此 ,应根据患者的病情来调
节饮食。
2. 1　心血不足 应低盐高蛋白饮食 ,以益气扶脾为主 ,可吃山药
等健脾益气瓜类食物 ,以健脾利水。
2. 2　心阳虚 宜食甘温益气之品 ,可给枸杞子、肉桂、附子煮肉
汤。
2. 3　心阴虚 宜心肾两补。 可用百合、枸杞子、人参炖鸡。
2. 4　心血瘀阻 宜活血化瘀养血。 可用丹参、桃仁、红花、银杏叶
炖汤。
2. 5　阴寒凝滞 给予附子、少量白酒、当归炖汤 ,薤白温阳开痹散
寒。
3　一般护理
本病发生多为本虚标实 ,寒邪内侵 ,饮食不当 ,情志失调有
关 ,因此护理方面也需结合其病因综合调护。
3. 1　生活护理 宜进低盐、低脂、低热量、高维生素、高纤维的饮
食 ,多食水果、蔬菜 ,保持大便通畅。过食肥甘易脾胃损伤 ,聚湿成
痰 ,气滞血瘀 ,因此 ,肥胖者要控制体重 ,饮食限量 ,每餐不宜过
饱。
3. 2　戒烟、酒 吸烟者可出现周围血管收缩和应激性增加 ,因而 ,
戒烟、酒可降低血浆胆固醇和游离脂肪酸浓度。
3. 3　松弛训练和音乐治疗相结合 坚持适当锻炼 ,注意劳逸结
合 ,切忌过重的体力活动 ,保证充足的睡眠。 中医认为:静则生阴
而多病 ,动则生阳而气血流畅 ,小劳可增进肠胃消化 ,使气血流
畅 ,适量的运动可降低血脂、血压、体重、改善糖耐量 ,增加氧气摄
入量和组织对氧的利用能力 ,有利于冠心病的防治。
3. 4　调畅情志 忧思伤脾 ,脾虚气结聚成痰 ,郁怒伤肝 ,肝失疏
泄 ,灼津成痰 ,气滞痰阻易发病 ,因此在生活中应调畅情志 ,避免
出现大喜、大悲、大怒而现突发急症。
3. 5　根据医嘱指导病人 按时按量服药 ,控制输入液体量 ,每
min滴速在 30～ 40滴 ,如出现心肌梗塞则要记录 24 h尿量。
根据多年的临床观察 ,用中西医结合的方法辨证施治 ,从整
体着眼 ,从局部着手 ,权衡疾病的轻重缓急 ,配合恰当的护理 ,能
及时缓解冠心病患者的症状 ,有效防止冠心病的发作 ,在临床上
收到较好的效果。
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时珍国医国药 2004年第 15卷第 7期 L ISHIZHEN MEDICIN E AND M AT ERIA M EDICA RESEARCH 2004 VOL. 15 NO. 7