全 文 ：　表 2 　样品测定结果
编号 产地 品种 黄芩苷(%) 汉黄芩苷(%)黄芩素(%) 汉黄芩素(%)千层纸素 A
1 北京 黄芩 15. 1 5. 06 0. 320 0.157 0. 067
2 山西 黄芩 12. 9 3. 62 2. 74 0.451 0. 298
3 山西 黄芩 11. 2 3. 74 3. 42 0.833 0. 348
4 安徽 黄芩 10. 3 3. 47 2. 12 0.578 0. 197
5 山东 黄芩 15. 8 4. 89 1. 33 0.519 0. 120
6 甘肃 黄芩 13. 7 4. 60 0. 125 0.132 0. 030
7 山东临沂 黄芩 16. 5 4. 95 0. 554 0.193 0. 069
8 内蒙 黄芩 11. 7 4. 08 0. 853 0.245 0. 174
9 甘肃 黄芩 16. 4 4. 60 1. 07 0.230 0. 123
10 内蒙 粘毛黄芩 7. 76 3. 01 1. 02 0.322 0. 266
11 内蒙 粘毛黄芩 7. 41 2. 53 0. 318 0.184 0. 111
12 内蒙 粘毛黄芩 10. 1 3. 97 0. 237 0.098 0. 075
13 云南 滇黄芩 12. 1 0. 947 0. 446 0 0. 197
14 云南 滇黄芩 16. 0 0. 436 0. 451 0 0. 114
15 甘肃 甘肃黄芩 10. 5 3. 02 0. 245 0.051 0. 064
16 甘肃武都 甘肃黄芩 9. 87 3. 16 0. 374 0.116 0. 113
明显偏低;各样品的黄芩素 、汉黄芩素含量差异很
大 。从整体上看这五个成分的含量 ,滇黄芩与正品
黄芩的差别较明显 ,而粘毛黄芩 、甘肃黄芩与正品黄
芩的差别较小 。
参 考 文 献
1　宋万志 . 药用黄芩的资源研究 . 药学学报 , 1981, 16
(2)∶139
2　郑占虎 ,等 .中药现代研究 .北京:学苑出版社 , 1998∶
3943
3　 Tsuyoshi Tom im ori, e t al. S tudies on the Constituen ts of
Scutellaria Spec ie s. Ⅵ . Yakugaku Zasshi, 1985, 105
(2)∶148
4　Yoshio Tak ino, e t a l. De term ination of Some F lavono ids in
Scute llariae Radix by H igh-Pe rfo rm ance L iquid Ch rom a tog-
raphy. Chem. Pharm Bull, 1987, 35(8)∶3494
5　Kazuh iko Sagara, e t a l. Sim ultaneous De term ination o f Ba-
ica lein, W ogonin, O roxy lin-A, and Their G lucu ronides in
Scute llariae Radix by Ion-Pair H igh-Perfo rmance L iquid
Chrom a tog raphy. Journa l of Pha rma tog raphy, 1985, 328∶
289
(2004 - 11 -29收稿)
HPLC-ELSD法测定不同产地女贞子
中齐墩果酸与熊果酸的含量
李　涛　郝武常　徐长根　马鹏飞
(陕西省药品检验所 ,陕西西安 710061)
　　摘要　采用 HPLC-ELSD法 ,色谱柱:L ichro spher C18柱(4. 6 mm ×250 mm , 5 μm);流动相:甲醇-0.5%醋酸铵溶
液(90∶10);A lltech ELSD 2000(蒸发光散射检测器 )。结果:在此色谱条件下 , 齐墩果酸与熊果酸峰完全达到基线
分离(R>1.9)。十批不同产地女贞子中齐墩果酸含量均在 0. 7%以上 , 熊果酸含量均在 0. 1%以上。齐墩果酸含
量测定的线性范围为 0.76 μg～ 11. 4 μg( r=0.9985, n=6),平均加样回收率为 97. 38%, RSD为 1.9%;熊果酸含量
测定的线性范围为 0.118 μg ～ 1. 77 μg( r=0. 9996, n=6), 平均加样回收率为 96. 10%, RSD为 1. 7%。
关键词　女贞子;齐墩果酸;熊果酸;HPLC-ELSD
　　女贞子含女贞子苷 、洋橄榄苦苷 、齐墩果酸 、乙
酰齐墩果酸 、熊果酸 、乙酰熊果酸 、4-羟基-β-苯乙基-
β-D-葡萄糖苷 、桦木醇 、甘露醇 、棕榈酸 、脂肪酸 、苹
果酸等 ,具有滋补肝肾 、明目乌发的功效;药理研究
显示女贞子具有保肝 、抑瘤 、升白 、生血 、抗衰老 、抗
变异 、增强机体免疫功能等作用 ,而其中齐墩果酸与
熊果酸的存在是其具有抗变异活性的主要原因 。
《中国药典》2000年版一部对女贞子中的齐墩果酸
采用薄层色谱法进行定量控制 ,但因女贞子中还含
有熊果酸 ,二者同属三萜酸 ,性质与化学结构较为相
似 , TLC法定量时 ,二者相互干扰 。齐墩果酸与熊果
酸在紫外区同属末端吸收 ,采用 HPLC-UV法测定
效果不太理想。本文首次采用 ELSD(蒸发光散射
检测器),用高效液相色谱法对二成分进行同时测
定 ,并进行了方法学考察 ,获得了满意的结果 。
1　仪器与试剂 、试药
W aters A llianceHT型高效液相色谱仪 , A lltech
ELSD 2000型蒸发光散射检测器 。甲醇 (色谱纯 ,
Ted ia公司 ,美国 ),水 (超纯水 ),醋酸铵(分析纯 ,西
安化学试剂厂生产 )。齐墩果酸与熊果酸对照品均
391 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牭牣牥牭牣牥牨牬
由中国药品生物制品检定所提供 , 批号分别为
110709-200304、110742-200313, 10批试验用女贞
子 ,经陕西省药品检验所中药室郝武常主任鉴定均
为木犀科植物女贞子 Ligustrum lucidum A it.的干燥
成熟果实。
2 　方法
2.1 　对照品溶液的制备　精密称取齐墩果酸与熊
果酸对照品适量 ,加甲醇制成每 1m l分别含 0.4 mg
与 0.06mg的混合溶液 ,摇匀 ,即得。
2.2 　供试品溶液的制备　取本品粉碎 ,精密称取
1.0 g,置 50具塞锥形瓶中 ,精密加甲醇 25 m l,称
重 ,超声波处理 30 m in,取出 ,放冷 ,再称定重量 ,用
甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,即得。
2.3 　色谱条件 　色谱柱:Lichrospher C18柱 (4.6
mm ×250 mm , 5 μm)(江苏汉邦公司 );流动相:甲
醇-0.5%醋酸铵溶液 (90∶10);流速:1.0 m l /m in;柱
温:30℃;ELSD漂移管温度∶85℃,雾化气体为高纯
氮气(99.999%):2.0 L /m in;放大系数 (Ga in):4;撞
击器(Impactor):o ff。在此色谱条件下 ,齐墩果酸与
熊果酸峰完全达到基线分离 (R>1.9),理论板数以
齐墩果酸峰计在 10000以上 。
3 　结果
3.1 　线性关系考察 　取齐墩果酸与熊果酸对照
品 ,加甲醇制成每 1m l分别含 0.38 mg的齐墩果酸
和 0.059 mg熊果酸的混合溶液 ,精密吸取 2 μl、5
μl、10μl、15μl、20 μl、30 μl进样 ,测定。以进样量
(μg)的自然对数值为纵坐标 、峰面积积分值的自然
对数值为横坐标 ,采用双自然对数法进行线性回归 。
结果齐墩果酸线性回归方程为 Y=0.7998X-4.6417
(r=0.9985),线性范围为 0.76 ～ 11.4μg;熊果酸线
性回归方程为 Y =0.7021X-4.3065(r=0.9992),线
性范围为 0.118 ～ 1.77μg。
3.2 　精密度试验　精密吸取同一对照品溶液 10
μl,重复进样 , 6次 ,测得齐墩果酸峰面积平均值为
2967880(RSD =2.1%), 熊果酸峰面积平均值为
605568(RSD=1.9%)。
3.3 　稳定性试验　取同一供试品溶液 ,精密吸取
10 μl,每隔 2 h测定 1次 ,计算齐墩果酸峰面积平均
值为 5013654(RSD =2.2%),熊果酸峰面积平均值
为 1020135(RSD =2.0%)。说明供试品溶液在 24
h之内基本稳定。
3.4 　重复性试验 　取同一样品 (广西南宁产 )6
份 ,分别按 2.2项下方法操作测定。结果每 1 g样
品中 , 齐墩果酸平均含量为 9.95 mg (RSD =
1.7%), 熊果酸平均含量为 1.45 mg (RSD =
1.8%)。
3.5　加样回收率试验　取 3.4项下已知含量的供
试品 6份 ,各精密加入齐墩果酸对照品与熊果酸对
照品一定量 ,照供试品溶液的制备法进行处理 ,测定
其中齐墩果酸与熊果酸的含量。结果齐墩果酸的平
均加样回收率为 97.38%(RSD=1.9%),熊果酸的
平均加样回收率为 96.10%(RSD=1.7%)。
3.6　样品含量测定　取不同产地的女贞子样品 ,
用本实验方法测定其中齐墩果酸与熊果酸的含量。
结果见表 1。
　表 1　不同产地女贞子中齐墩果酸与熊果酸的含量(%)
样品来源 产地　　齐墩果酸(%) 熊果酸(%)
陕西老百姓大药房有限公司 浙江　　 1.04 0.16
陕西老百姓大药房有限公司 四川　　 1.12 0.20
西安市好一生医药有限公司 陕西渭南 0.83 0.13
陕西省宝鸡市药材公司 陕西宝鸡 0.90 0.16
陕西怡康大药房有限公司 广西南宁 0.99 0.15
西安市同一医药连锁有限公司 江苏　　 1.32 0.23
第四军医大学西京医院 福建　　 1.89 0.38
西安市万寿路中药材批发市场 湖南　　 0.78 0.11
西安市万寿路中药材批发市场 河南　　 1.53 0.31
西安市万寿路中药材批发市场 安徽合肥 0.65 0.10
图 1　女贞子的 HPLC图
4　讨论
4.1　曾采用氯仿 、无水乙醇 、甲醇 、乙醚四种溶剂 ,
对同一女贞子样品进行索氏提取处理。结果发现氯
仿 、无水乙醇 、乙醚提取效果相当 ,而以甲醇作提取
溶剂 ,齐墩果酸与熊果酸得率均略高;氯仿提取液蒸
干用甲醇溶解后色谱图上齐墩果酸峰前有一明显干
扰测定的色谱峰 ,经石油醚 (30 ～ 60℃)脱脂处理后
该色谱峰消失 ,而甲醇提取液色谱图杂质色谱峰较
少(见图 1),对齐墩果酸与熊果酸峰测定亦无干扰。
选择好甲醇作溶剂后 ,对比索氏提取与超声波处理
两种提取方法 ,结果二法所测齐墩果酸与熊果酸的
含量未见差异 ,为便于操作 ,选择超声波处理作为供
试品处理方法 。
4.2　ELSD作为一种质量型检测器 ,在比较宽的范
围内 ,峰面积(A)与样品的质量 (m)成双对数线性
392 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
关系。定量分析时 ,为得到精确的数据 ,应用标准品
做校正曲线对实验条件进行校正或直接用标准曲线
法定量 。本试验采用如下方法:精密吸取对照品溶
液 5 μl、10 μl、20 μl及供试品溶液 10 μl,注入液相
色谱仪 ,测定 ,即得。对照品峰面积积分值与进样量
(μg)均取自然对数后列出线性方程 ,将供试品峰面
积积分值取对数后代入方程求得进样量 (μg)的自
然对数 ,再换算成供试品的含量即可 。
4.3 　方法中确定的 ELSD参数 ,是经反复试验后
得出的最佳仪器参数 。雾化气体流速及漂移管温度
是影响 ELSD检测的 2个重要可调节参数。雾化气
体流速太低 ,会形成大量液滴 ,导致尖峰信号或噪音
信号;相反 ,流速太高时微滴量会下降导致信号响应
降低。漂移管温度太低 ,溶剂挥发不够完全;太高 ,
则会由于分析样品部分挥发 ,导致颗粒量下降而使
检测器响应下降 。实验室操作时需注意调节。
4.4 　曾对甲醇-水 (90∶10)、乙腈-水 (75∶25)、甲
醇-0.5%醋酸铵溶液 (92∶8)、乙腈-甲醇-水 (64∶
20∶16)等不同流动相做过对比研究 ,结果发现以甲
醇-0.5%醋酸铵溶液(92∶8)作流动相即可得到满意
的色谱峰形 ,齐墩果酸与熊果酸峰的分离度也较高。
4.5　实验中所用女贞子来自不同产地 ,加上采集
时间 、炮制方法等各不相同 (主要为直接晒干或蒸
后晒干),故其中齐墩果酸与熊果酸含量均有差异。
但总体来说 ,齐墩果酸含量均高于药典规定限度
(0.60%),熊果酸含量均在 0.1%以上 。与以前文
献报道女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量测定结果
基本一致 〔2 ～ 4〕。
参 考 文 献
1　卫生部药典委员会 .中华人民共和国药典 .北京:化学
工业出版社 , 2000∶249
2　吕曙光 ,等 . 中药女贞子中齐墩果酸 、熊果酸的高效液
相色谱分析 .药物分析杂志 , 1993, 13(5)∶291
3　刘美兰 , 等 . 不同产地的女贞子中齐墩果酸的含量比
较 .中草药 , 1990, 21(6)∶20
4　宓鹤鸣 ,等 .女贞子中齐墩果酸含量的动态变化研究 .
中草药 , 1995, 26(5)∶258
(2004 - 10 -29收稿)
RP-HPLC法测定滇桂艾纳香中原儿
茶酸与原儿茶醛的含量
王治平　杨　柯　孟祥平　李久香　王一飞*
(暨南大学生物医药研究开发基地 ,广州 510632)
　　摘要　目的:采用高效液相色谱法测定了滇桂艾纳香中原儿茶酸 、原儿茶醛的含量。方法:L ichro ca rt C18(250
×4 mm)柱;流动相:甲醇-水(冰醋酸调 pH值 2.8)(15∶85);检测波长为 256 nm。原儿茶酸线性范围 0.057 ～ 0.57
μg, 相关系数 r=0.99999,平均加样回收率 97.60%, RSD 0.45%(n=5)。原儿茶醛线性范围 0.03 ～ 0.30 μg,相关
系数 r=0. 9997,平均加样回收率 99. 44%, RSD 1. 52%(n=5)。结论:方法简便 , 结果准确 ,可用于该中药的质量控
制。
关键词　反相高效液相色谱法;滇桂艾纳香;原儿茶酸;原儿茶醛
　　滇桂艾纳香为壮族民间草药 ,在广西有较长的
使用历史〔1、2〕 ,来源于菊科植物滇桂艾纳香 B lumea
riparia(B I.)DC.的干燥全草〔3、4〕 ,主产于云南东南
部和广西西南部。具有活血 、止血 、利水作用 ,用于
经期提前 、产后血崩 、产后浮肿 、不孕症 、阴疮。本品
含有原儿茶酸 ,笔者发现本品还含原儿茶醛 。现代
药理实验表明 ,原儿茶酸具有增加冠脉流量〔5〕、体
外具有明显抑制血小板聚集活性和抗菌活性 〔6〕等
生理活性。原儿茶醛有扩张冠状动脉 、降低心肌氧
耗量 、抑制血小板聚集 、抗肿瘤作用 、清除自由基和
抗脂质过氧化 、抗炎等作用 〔7〕。瘀血证患者单核细
胞趋化游走能力增强 ,原儿茶醛抑制单核细胞趋化
游走 〔6〕和在趋化游走过程中产生的 IL-8活性 〔8〕。
可见 ,原儿茶酸和原儿茶醛是活血化瘀类中药中的
重要活性成分之一 。滇桂艾纳香中原儿茶酸的含量
测定已有报道〔9〕。我们参考有关文献 〔10〕建立了同
时测定二者含量的测定方法 ,用于内在质量控制 。
1　仪器与试药
Ag ilentl100高效液相色谱仪 (惠普公司 ),二极
管阵列检测器 , Sa rtorius电子分析天平 (德国 )。甲
醇为色谱纯 ,其他试剂为分析纯 。对照品为中国药
品生物制品检定所提供 ,原儿茶酸 (809-200102)、原
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