全 文 ：对照组 50 例中痊愈 30 例 ,显效 5 例 , 有效 3 例 , 无
效 12 例 , 总有效率 76.00%。两组结果经统计学处
理 , P<0.01 ,有非常显著性差异 。
6　讨论
　　方中大部分药物的有效成分皆具挥发性 , 经一
般的煎煮提取容易损失和破坏 , 故先用水蒸气蒸馏
法提取 ,再佐以适当的矫味品 , 制成露剂 , 药性清凉
透达 ,疗效好 , 见效快 ,口感好 , 易为患者接受。
(收稿日期:1998年 10月)
薄层-紫外法测定咽炎合剂中齐墩果酸 、靛蓝 、靛玉红的含量
广东五邑中医院(529051)　张玉娥　江门市人民医院　李献州
摘要　用薄层-紫外分光光度法测定咽炎合剂中主药土牛膝之齐墩果酸含量 , 其回收率为
99.57%, RSD为 0.59%;同法测定主药板蓝根之靛蓝 、靛玉红含量 , 其回收率分别为:99.40%,
98.73%, RSD分别为 0.93%, 1.44%,方法可靠 , 精密度好。
关键词　咽炎合剂　齐墩果酸　靛蓝　靛玉红　薄层-紫外法
　　咽炎合剂是由土牛膝 、板蓝根等中药组成的中
药复方制剂 ,具有清热解毒 、利咽等 , 作用是我院治
疗咽炎的验方。为了控制其质量 , 我们对主药土牛
膝之齐墩果酸 ,板蓝根之靛蓝 、靛玉红进行了含量测
定。
1　仪器与药品
1.1　仪器　UV-2201 分光光度仪(日本岛津)53WB
-紫外分光光度计(上海)。
1.2 　药品　咽炎合剂由本院提供;齐墩果酸对照
品 、靛蓝 ,靛玉红对照品均为中国药品生物制品检定
所提供;其他试剂均为分析纯。
2　薄层条件
0.3%羧甲基纤维素钠硅胶 G 板;齐墩果酸展
开剂为氯仿-甲醇(40∶1), 碘蒸气显色定位;靛蓝 、
靛玉红的展开条件为苯-氯仿-丙酮(5∶4∶1)自然
光或紫外灯显色。
3　齐墩果酸的含量测定
3.1　对照品溶液制备　精称齐墩果酸对照品适量 ,
加无水乙醇制成 1.02mg/ml的对照品液。
3.2　测定波长的选择[ 1] 　按文献方法在 UV-2201
分光光度仪上 ,以 200-700nm 范围扫描 , 确定测定
波长为 559nm。
3.3　标准曲线的绘制　精密吸取对照品液 10 , 20 ,
30 , 40 , 50μl依次点于同一硅胶 G 板上 , 按薄层条件
显色定位后 ,刮取斑点 , 按[ 1] 法处理后 , 离心取上清
液 ,并随行空白。以 53WB 分光光度计在 559nm 波
长处测定 A 值 , 绘制 A-C 曲线 , 回归方程为:Y=
0.04172X-0.0671(r=0.9999)。线性范围:2.04-
10.20μg。
3.4　供试品溶液的制备　按文献[ 2]酸保护水解法。
精取样品 20ml , 加无水乙醇 100ml , 加盐酸 10ml , 加
热回流 4h。 滤过 , 滤液浓缩至 20ml加水 10ml , 滤
过。滤液用氯仿萃取 4 次 , 每次 30ml。合并萃取
液 ,水浴挥干溶剂 , 残渣加无水乙醇定容至 5ml量瓶
中 ,为供试液。
3.5　精密度试验　取同一供试液及 3 块薄层板 , 每
板点 3个同量斑点60μl , 如法处理后测定 A值 , 结果
RSD 为 0.992%, 精密度良好。
3.6　回收率试验　取同批已知含量的药液混匀后 ,
精取 20ml ,共 6 份 , 分别加对照品后 , 如法处理后 ,
测定 ,结果见表 1。
表 1 回收率试验
组号样品含量(mg/ml)
加入量
(mg/ml)
测得量
(mg/ml)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 0.173 0.249 0.420 99.53
2 0.173 0.249 0.423 100.23
3 0.173 0.249 0.417 98.82
4 0.173 0.521 0.696 100.29 99.57 0.59
5 0.173 0.521 0.690 99.42
6 0.173 0.521 0.688 99.14
3.7　供试品中齐墩果酸含量的测定　精密吸取供
试品液 60μl ,对照品液 50μl ,分别点于同一硅胶 G 板
上。如法展开显色定位 , 刮取与对照品同位置同颜
色处斑点 , 如法处理 , 测定 A值 , 并根据方程计算浓
度 ,结果见表 2 ,薄层图见图 1。
205中成药　Chinese Traditional Patent Medicine 1999 , 21(4)
表 2　2 批咽炎合剂中齐墩果酸含量
批号 浓度(mg/ml)
平均浓度
(mg/ml)
RSD
(%)
0.188
980428 0.175 0.185 0.93
0.193
0.166
980921 0.183 0.173 0.87
0.171
图 1
1 齐墩果酸对照品
2 样品
4　靛蓝 、靛玉红的含量测定
4.1　对照品溶液的制备　精密称取对照品适量 , 加
氯仿溶解 , 70°C 水浴加热 , 分别配成 23.5μg/ ml ,
49.0μg/ ml的靛蓝 , 靛玉红对照品液。
4.2 　测定波长的选择　分别取对照品液 , 在波长
200-700nm 内扫描 , 选定为靛蓝的测定波长为
604nm , 靛玉红为 540nm。
4.3 　标准曲线的绘制　精密吸取靛蓝对照品液
60 , 80 , 100 , 120 , 140ml依次点于同一硅胶 G 板上;
靛玉红对照品液 30 , 50 , 70 , 90 , 110μl依次点于另一
硅胶 G 板上。按文献[ 3]方法展开定位 ,刮取斑点处
硅胶 , 分别加氯仿溶解定容于 5ml量瓶中 ,离心 , 随
行空白 ,分别在测定波长处测定 A 值 , 绘制 A-C 曲
线。靛蓝的回归方程为 y=0.03989x+0.0155(r=
0.9999),线性范围:0.282-0.658μg;靛玉红的回归
方程为:y=0.03165x+0.01268(r=0.9998), 线性
范围 0.294-1.078μg。
4.4　供试品溶液制备　按文献[ 3]法 ,精密吸取样品
50ml ,氯仿萃取 3 次 , 水浴浓缩并定容于 5ml量瓶
中 ,为供试品液。
4.5　精密度试验　取同一供试液及各 3 块硅胶 G
板 ,每板点 3 个同量斑点 , 测定后计算浓度 , 结果靛
蓝 ,蓝玉红 RSD均小于 2%(n=9)。
4.6　回收率试验　取同批已知含量的样品 ,分别加
对照品 ,如法提取处理后 ,测定 A 值 , 根据方程计算
浓度 ,结果分别见表 3 、表 4。
表 3 靛蓝回收率试验
序
号
原药液含量
(μg/ml)
加入量
(μg/ml)
测得量
(μg/ml)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 0.548 42.0 42.760 100.50
2 0.548 42.0 42.550 100.00
3 0.548 42.0 41.760 98.15 99.40 0.93
4 0.548 64.0 64.160 99.40
5 0.548 64.0 63.534 98.43
6 0.548 64.0 64.474 99.89
表 4 靛玉红回收率试验
序
号
原药液含量
(μg/ml)
加入量
(μg/ml)
测得量
(μg/ml)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 4.010 50.0 52.196 96.64
2 4.010 50.0 52.986 98.10
3 4.010 50.0 53.578 99.20 98.73 1.44
4 4.010 56.0 60.490 100.80
5 4.010 56.0 59.910 98.17
6 4.010 56.0 59.700 99.48
4.7　供试品中靛蓝 、靛玉红的含量　精密吸取供试
液 80μl ,对照品液各 50μl , 点于同一硅胶 G 板上 , 如
法展开。分别刮取与对照品相同位置处斑点硅胶 ,
如法处理后 , 分别在测定波长处测定 A 值 , 根据方
程计算浓度 ,见表 5 ,薄层图见图 2。
图 2
1 靛玉红对照品
2 样品
3 靛蓝对照品
表 5 3 批咽炎合剂中靛蓝 、靛玉红含量
批号 浓度(μg/ml) 平均浓度(μg/ml) 　RSD(%)靛蓝 靛玉红 靛蓝 靛玉红 靛蓝 靛玉红
970521
未检出
未检出
未检出
4.11
4.09
4.13
- 4.11 - 2.00
970810
未检出
未检出
未检出
4.14
4.12
4.15
- 4.14 - 1.53
971203
0.568
0.560
0.555
4.09
4.03
4.05
0.561 4.06 0.66 3.08
5　讨论
齐墩果酸在加入显色剂后 , 要尽可能在半小时
206 中成药　Chinese Traditional Patent Medicine 1999 , 21(4)
内测定 ,以免误差大。
测定咽炎合剂中靛蓝 、靛玉红含量时 , 共测定 3
批样品 ,但只有一批有靛蓝斑点 , 其余 2 批未检出 ,
但用氯仿提取同批同量药材时 ,靛蓝斑点清晰 ,且靛
玉红含量远远高于咽炎合剂中的含量 , 这就进一步
证明了靛蓝 、靛玉红在水中的溶解度很小。目前 , 大
多数含板蓝根的制剂(包括咽炎合剂)都是以水煎煮
方法提取有效成分 ,笔者认为应改进工艺 , 以使有效
成分靛蓝 、靛玉红能被充分地提取出来 。
参 考 文 献
1　徐礼遷编.中草药有效成分分析法(下册).人民卫生出
版社 , 202:55
2　刘红亚 ,等.中草药 , 1993;24(4):219
3　寿国香.中草药 , 1993;24(1):15
(收稿日期:1998年 4月)
金莲花袋泡剂中总黄酮的含量测定
内蒙古医学院(010059)　鞠爱华　杨来秀　渠　弼　栗志文　吴佳升
摘要　用分光光度法 ,以芦丁为对照品 , 加入硝酸铝—亚硝酸钠为显色剂 , 在 500nm 波长处 ,分析
测定金莲花袋泡剂中总黄酮含量 ,回收率为 100.75%, RSD为 1.98%。
关键词　金银花袋泡剂　总黄酮　分光光度法
　　金莲花袋泡剂是在金莲花片剂的基础上研制成
的新剂型 ,为金莲花的单方制剂 , 具有抗菌消炎的功
能。临床用于治疗上呼吸道感染 , 咽炎 、扁桃体炎 、
中耳炎及急性结膜炎等[ 1] 。袋泡剂与片剂相比 , 具
有工艺简便 、成本低廉 , 作用迅速 ,疗效显著等特点。
金莲花主含黄酮类及生物碱类成分 , 黄酮类为其主
要的抗菌有效成分[ 2] 。本实验采用分光光度法 , 以
芦丁为对照品 ,以硝酸铝—亚硝酸钠为显色剂[ 3] , 在
500nm 波长处 , 对袋泡剂中总黄酮的含量进行了测
定。金莲花袋泡剂本身仅在小于 400nm 波长区有
吸收 , 与芦丁无相同吸收。加入硝酸铝—亚硝酸钠
显色剂后 ,最大吸收峰在 500nm 波长处 , 与标准品
芦丁最大吸收接近 , 且两者峰形相同。方法灵敏度
高 、操作简便 、结果可靠。
1　仪器 、药品与试剂　721 型分光光度计(上海第
三分析仪器厂生产);标准品:芦丁(中国药品生物制
品检定所);样品:金莲花袋泡剂(本院中草药室提
供);所用试剂均为分析纯。
2　标准曲线绘制
2.1　标准液配制:精密称取 120°C 干燥至恒重的芦
丁标准品 11.2mg , 置 100ml量瓶中 , 加 30%乙醇适
量 ,微热使芦丁溶解。放冷后 , 用 30%乙醇定容至
刻度 ,摇匀。
2.2　标准曲线的绘制:精密吸取芦丁标准液 1.0 ,
2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.0ml ,分别置于 10ml量瓶中 ,各加入
适量 30%乙醇使成 5ml , 加入 5% NaNO 2 溶液0.3
ml ,摇匀 , 放置 6min。再加入 10% Al(NO3)3 溶液
0.3ml , 摇匀后放置 6min , 加 4% NaOH 溶液 4ml , 加
30%乙醇至刻度。摇匀 ,放置 15min , 于 500nm 波长
处测定吸收度 ,并随行空白。标准曲线回归方程:A
=6.964×10-2C-7.896×10-4 , r=0.9999。
3　样品中总黄酮的测定　取袋泡剂1袋 , 精密称定
后置烧杯内 , 置 90°C 恒温水浴中。第 1 次加 50ml
水浸提 10min , 第 2 次加 50ml水浸提 5min。合并 2
次浸提液过滤 , 吸取滤液 10ml于 100ml量瓶中 , 加
30%乙醇定容至刻度 ,摇匀后吸取 1.5ml于 10ml量
瓶中 ,加 30%乙醇 3.5ml , 接“标准曲线绘制”项下方
法显色 、测定 , 根据回归方程计算样品中总黄酮含
量 ,结果见表 1。
表 1 样品测定结果
样品批号称重(g) 总黄酮含量(%) 均值(%) RSD(%)
11.12 11.00
960415 2.0031 11.16 11.14 11.11 0.61
11.06 11.18
11.18 11.23
960818 2.0132 11.19 11.22 11.19 0.27
11.16 11.16
4　回收率测定　精密吸取已测得含量样品溶液
5ml , 加入定量的芦丁 ,依法测定 , 结果见表 2。
表 2 回收率测定结果
芦丁加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)均值(%)RSD(%)
6.48 6.66 102.83
6.81 6.85 100.59 100.75 1.98
7.28 7.19 98.86
207中成药　Chinese Traditional Patent Medicine 1999 , 21(4)