全 文 ：乌梅中齐墩果酸的含量测定方法的研究
侯 峰1 , 戚宝婵1 , 李杰胜2
(1.辽宁省药品检验所 ,辽宁 沈阳 110023;2.东北制药总厂 ,辽宁 沈阳 110026)
收稿日期期:2002-08-06
基金项目:科技部国家重点科技项目 专题合同编号 99-929-01-32
作者简介:侯 峰(1976～ ),女 ,药师。主要从事药品检验及中成药质量标准研究 电话:024-25854645.
关键词:乌梅;齐墩果酸;高效液相色谱
摘要:目的:测定乌梅中齐墩果酸的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为 Shim—pack CLS-ODS , 流动相为甲醇
—水—冰乙酸—三乙胺(85∶15∶0.04∶0.02), 流速0.8m L·min-1 , 检测波长为204nm。结果:齐墩果酸在 0.8864 ～
4.432μg范围内线性关系良好 , 平均回收率为97.03%, RSD=0.25%(n=5)。结论:含量测定方法快速 、准确。适用于乌
梅的含量测定。
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2003)07-0574-02
Study on determination of oleanolic acid in Fructus Mume
HOU Feng1 , Q I Bao-chan1 , LI Jie-sheng2
(1 .Liaon ing Provincia l Insti tu te for Drug Control , Shenyang 110023 , China;2.Northeast Genera l Pharmaceutical Factory , Shenyang
110026 , Ch ina)
Key words:Fructus Mume;oleanolic acid;HPLC
Abstract:Objective:To determine oleanolic acid in Fructus M ume.Methods:HPLC with Shim-pack CLC-
ODS column w as used.The mobile phase w as composed of MeOH-H2O-HOAc-TEA(85∶15∶0.04∶0.02).The
flow rate w as 0.8mL·min-1 and the detection w aveleng th was at 204nm .Results:It show ed that a good linear
relationship existed in the range of 0.8864 ～ 4.432μg of oleanolic acid.Its average recovery w as 97.03%.RSD
was 0.25%(n=5), respectively.Conclusion:This method is quick , accurate and can be used for the determi-
nat ion of oleanolic acid of Fructus M ume.
乌梅(Fructus M ume)为蔷薇科植物 Prunus
mume (Sieb.)Sieb.et Zucc.的干燥近成熟果实 。
具敛肺 ,涩肠 ,生津 ,安蛔之功效 ,临床用于肺虚久
咳 ,久痢滑肠 ,虚热消渴 ,蛔厥呕吐腹痛;胆道蛔虫症
等。中国药典采用滴定法测定其有机酸的含量。本
实验采用 RP—HPLC 对乌梅中的齐墩果酸含量测
定方法进行了研究 ,结果表明该方法简便 、快速 、重
现性好 ,可用于乌梅的质量控制。
1 仪器与试剂
1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪 。Waters 515
泵 ,Waters 2487 双波长检测器 , 7725I 进样阀 ,
Echrom 98色谱工作站 。
1.2 试剂 齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检
定所 0709 —9803),乌梅饮片(由全国 10 家药材公
司提供),冰乙酸 、三乙胺为分析纯 ,甲醇为色谱纯 ,
水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为 Shim —pack CLC-ODS
(150mm×6.0mm),流动相为甲醇—水—冰乙酸—
三乙胺(85∶15∶0.04∶0.02),流速 0.8mL·min-1 ,检
测波长为204nm 。
2.2 标准曲线 精密称取齐墩果酸对照品
11.08mg置于 50mL 量瓶中 ,加甲醇溶液并稀释至
刻度 ,摇匀 ,即得。分别精密吸取 4 ,8 , 12 , 16 、20μL ,
注入液相色谱仪 ,按上述色谱条件测定峰面积。以
浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线 。结
果表明 ,齐墩果酸进样量在 0.8864 ～ 4.432μg 范围
内线性关系良好。其回归方程 A =1011.98 +
2361.596C , r=0.9996。
2.3 精密度试验 取上述对照品溶液 20μL ,进样
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第 25 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2003
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5次 ,测定各自的峰面积 ,计算得峰面积的 RSD 为
0.28%。
2.4 重复性试验 取样品 5份 ,按样品测定项下的
方法连续测定 ,其 RSD 为 1.01%。
2.5 回收率试验 取已知准确含量的样品各2.5g ,
精密加入浓度为0.3948mg·mL-1的齐墩果酸溶液
3mL ,按样品测定项下方法测定 ,平均回收率为
97.03%(n=5 , RSD %=0.25%)。
2.6 供试品溶液的制备与测定
2.6.1 供试品溶液的制备 取本品粉末(过二号
筛)约 5g ,精密称定 ,置索氏提取器中 ,加乙醚适量 ,
加热回流提取4h ,提取液回收乙醚至干 ,残渣加甲醇
适量使溶解 ,定量转移至 25mL 量瓶中 ,加甲醇稀释
至刻度 ,摇匀 ,即得。
2.6.2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对
照品适量 ,加甲醇制成每 1mL 含0.2mg的溶液作为
对照品溶液。
2.6.3 样品的测定 测定 10批不同来源的乌梅含
量 ,结果见表:
编号 来源地 含量(mg/ g) 编号 来源地 含量(mg/ g)
1 湖南 0.5022 6 海南 1.0092
2 北京同仁堂 0.4965 7 福州永泰 0.3536
3 四川邛峡 1.0340 8 四川雅安 0.6195
4 沈阳天益堂 1.1327 9 四川大邑 0.5527
5 浙江 0.6507 10 浙江湖州市 0.2363
3 讨论
3.1 齐墩果酸与熊果酸是具有生理活性的三萜酸 ,
在化学结构上是差向异构体。对二者的含量测定多
采用薄层扫描法及比色法 ,在薄层上二者显一个斑
点很难分离 ,没有专属性。本实验采用 RP—HPLC
法可使二者有很好的分离 。因为熊果酸对照品纯度
不够 ,故无法对其进行含量测定。
3.2 在样品处理上曾使用甲醇为溶剂提取样品 ,结
果极性较大的杂质色谱峰严重干扰了齐墩果酸的测
定 ,改用极性小的乙醚为溶剂后可得到理想的测定
色谱 。
3.3 测定的 10批不同产地的乌梅可知齐墩果酸的
含量差异较大 ,对其进行质量控制具有一定的针对
性。
3.4 本实验对柱效要求较高 ,经过 Ship vp —ODS
150mm ×4.6mm 、SUPELCO Discovery 150mm ×
4.6mm及 Dikma Diamonsil C18 200mm ×4.6mm 色
谱柱试验均不能得到很好分离 。
齐墩果酸对照品
编号 保留时间(min)
峰面积
(mv.min) 面积百分比 塔板数 分离度
1 37.63 55919.98 97.0610 107773.95 80.36
2 39.43 1693.24 2.9390 130177.60 2.64
合计 0.00 100
熊果酸对照品
编号 组分名 保留时间(min)
峰面积
(mv.min)面积百分比 塔板数 分离度
1 Unknow n 37.69 12000.12 24.2699 111005.52 88.15
2 Unknow n 39.46 37444.27 75.7301 109144.99 2.50
合计 0.00 100
样品图谱
编号 保留时间(min)
峰面积
(mv.min) 面积百分比 塔板数 分离度
1 37.43 28385.32 24.0709 113837.39 0.00
2 39.57 89538.38 75.9291 119166.84 3.13
合计 117923.70 100
参考文献:
[ 1 ] 谢莹 、杭太俊.高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸和熊果酸
含量[ J] .中国中药杂志 , 2001 , 26(9):615.
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