全 文 ：266　 广州中医药大学学报JournalofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine 2009年 5月第 26卷第 3期May2009, Vol.26, No.3
收稿日期: 2008-06-04
作者简介:刘丹丹 (1984-), 女 , 硕士研究生
文章编号:1007-3213 (2009)03-0266-04
牛大力祛痰 、 镇咳和平喘作用的实验研究
刘丹丹1 , 　唐立海 1 , 　王　艳 2 , 　肖细姬 1 , 　刘亮锋 1 , 　叶木荣1
(1.广州中医药大学中药学院 , 广东广州　510405;2.山西中医学院 , 山西太原　030006)
摘要:【目的】观察牛大力的祛痰 、 镇咳及平喘作用。 【方法】通过小鼠气管酚红法 、 家鸽纤毛运动实验 、 小鼠浓氨水引咳
法 、 豚鼠枸橼酸引咳法及豚鼠组胺—乙酰胆碱超声雾化法观察牛大力的祛痰镇咳平喘作用。 【结果】牛大力能显著增加小
鼠气管酚红排泌量 , 促进家鸽气管内墨汁运动 , 减少氨水引发小鼠和枸橼酸引发豚鼠咳嗽反应的次数 , 延长咳嗽潜伏期 ,
对抗组胺—乙酰胆碱引起的豚鼠支气管哮喘 (均 P<0.05或 P<0.01)。 【结论】牛大力具有一定的祛痰 、 镇咳及平喘作
用。
关键词:牛大力 /药理学;　慢性支气管炎 /中药疗法;　疾病模型 , 动物;　小鼠;　豚鼠;　家鸽
中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A
牛大力 (RadixMiletiaeSpeciosae, RMS), 为
蝶形花科植物美丽崖豆藤 MiletiaspeciosaChamp的
干燥根 。功能补虚润肺 、强筋活络 , 临床证明对腰
肌劳损 、风湿性关节炎 、肺结核 、 慢性支气管炎
等有一定疗效 [ 1] 。本文通过观察牛大力的祛痰 、
镇咳及平喘等作用 , 为该药临床用药提供依据 。现
报道如下。
1　材料与方法
1.1　动物 　SPF级 KM小鼠 , 体质量 18 ～ 22g;
SPF级豚鼠 , 体质量 250 ～ 300g, 均由广州中医药
大学实验动物中心提供 , 合格证号:SCXK粤
2003-0001。
1.2　受试药物　牛大力水提物由广州中医药大学
药理教研室提供 , 浓缩液浓度为 1g/mL, 使用时
用蒸馏水稀释成不同的浓度。
1.3　药品 、 试剂与仪器　美沙芬由广州白云山光
华制药股份有限公司生产 , 批号:727008;氨茶碱
由天津力生制药股份有限公司生产 , 批号:
784136;氨水由广东光华化学厂有限公司生产 , 批
号:20070806;酚红由上海三爱思试剂有限公司生
产 , 批号:0040309;枸橼酸由广州化学试剂厂生
产 , 批号:0060503-2;醋酸由广州化学试剂厂生
产 , 批号:06040204;氢氧化钠由天津市百世化工
有限公司生产 , 批号:006730;UNICO7200型光
栅分光光度计由尤尼柯 (上海)仪器有限公司提
供;YLS-6B智能热板仪由山东省医学科学院设备
站生产;超声雾化器由江苏鱼跃医疗设备有限公司
生产 。
1.4　牛大力对小鼠酚红祛痰的影响 [ 2] 　取 KM小
鼠 60只 , 雌雄各半 , 随机分为 5组 , 即空白组 ,
阳性对照组 , 牛大力水提物高 (20 g·kg-1·d-1)、
中 (10g·kg-1·d-1)、低 (5g·kg-1·d-1)剂量给
药组 。阳性对照组以沐舒坦 30mg·kg-1·d-1灌胃 ,
空白组给予等容积蒸馏水 , 连续 5d。于末次给药
后 30min, 腹腔注射 50g/L酚红生理盐水溶液
0.5mL/只 , 30min后小鼠脱颈椎处死 , 剥离气管
周围组织 , 剪下自甲状软骨下至气管分支处一段气
管放入盛有 2mL生理盐水的试管中 , 剪开浸泡
10min后 , 加 1mol/LNaOH溶液 0.1mL, 离心取
上清液采用紫外分光光度计于波长 546nm处测定
吸光度 D值。
1.5　牛大力对家鸽气管纤毛运动的影响 [ 3] 　取家
鸽 50只 , 随机分为 5组 , 分别为空白组 , 阳性对
照组 , 牛大力水提物高 (16 g·kg-1· d-1 )、 中
(8g·kg-1·d-1)、 低 (4g·kg-1·d-1)剂量给药组。
阳性对照组以 20 mg·kg-1·d-1剂量的沐舒坦灌胃 ,
空白组给予等容积蒸馏水 , 连续 3d。末次给药后
手持家鸽颈部拉直与水平面平行 , 拔除颈部毛 , 不
麻醉 , 背位固定 , 沿颈中线切开 , 剥离气管 , 将周
围软组织分离清楚 , 使气管自甲状软骨至胸骨段
充分暴露 , 并小心将气管表面外膜剥离干净 , 于
第 3期 刘丹丹 , 等.牛大力祛痰 、 镇咳和平喘作用的实验研究 267　
末次给药后 0.5、 1、 2h以 5号针头从靠心脏端
插入气管 , 使针头靠近气管内壁推入 0.05mL中
华墨汁 , 观察 1min内墨汁沿气管向前运动的距
离 。
1.6　牛大力对小鼠氨水引咳的镇咳作用 [ 4-5] 　分
组和给药方法同 1.4项下 。阳性对照组按美沙芬
10mg·kg-1·d-1灌胃 , 空白组给予等容积蒸馏水 ,
连续 5d。末次给药 1h后将小鼠放入玻璃钟罩内 ,
用超声雾化器将浓氨水均匀地喷入玻璃钟罩内 , 喷
雾 10s, 立即取出小鼠 , 观察和记录小鼠的咳嗽潜
伏期和 4min内的咳嗽次数。
1.7　牛大力对豚鼠枸橼酸引咳的镇咳作用 [ 6] 　采
用豚鼠枸橼酸引咳法 (序贯法), 以 175mg/L枸
橼酸在玻璃钟罩内连续喷雾 90s, 观察 5min内咳
嗽次数进行筛选 , 咳嗽次数小于 10次者弃除 。将
筛选合格的豚鼠分为 5个组 , 分别为空白组 , 阳性
对照组 , 牛大力水提物高 (16 g·kg-1·d-1)、 中
(8g·kg-1·d-1)、低 (4g·kg-1·d-1)剂量给药组 。
阳性对照组以 8mg·kg-1·d-1美沙芬灌胃 , 空白组
给予等容积蒸馏水 , 连续 5d。于末次给药后 1h
(美沙芬 0.5h), 按预选方法 , 用枸橼酸引咳 , 观
察豚鼠自喷雾开始至出现咳嗽的潜伏期及喷雾停止
后 5min内的咳嗽次数。
1.8　牛大力对豚鼠的平喘作用[ 7-8] 　取 250 ～
300g豚鼠 , 按整体喷雾致喘法 , 用 4g/L磷酸组
胺与 20g/L氯化乙酰胆碱以体积比 1:2混合液超
声雾化器喷雾 25s致喘 , 挑选潜伏期在 150s内出
现哮喘的豚鼠为合格的敏感动物。将合格豚鼠分为
5个组 , 分别为空白组 , 阳性对照组 , 牛大力水提
物高 (16 g·kg-1·d-1 )、 中 (8g·kg-1·d-1)、 低
(4g·kg-1·d-1)剂量给药组。阳性对照组以氨茶
碱 1.2g·kg-1·d-1剂量灌胃 , 空白组给予等容积蒸
馏水 , 连续 7d。于末次给药后 1h(氨茶碱
0.5h), 按预选方法记录各组动物出现哮喘的潜伏
期 。
1.9　统计学方法　采用 SPSS11.5统计软件进行 T
检验分析。
2　结果
2.1　牛大力对小鼠酚红祛痰的影响　表 1结果表
明 , 牛大力水提物能显著增加小鼠气管酚红排泌
量 , 与空白组比较差异有显著性意义 (P<0.05),
随着剂量的增加 , 祛痰作用增强 , 呈现良好的量效
关系 。提示牛大力水提物具有较好的祛痰作用。
2.2　牛大力对家鸽气管纤毛运动的影响　表 2结
果表明 , 牛大力水提物高剂量组药后 1h炭末推进
距离与空白组比较差异有显著性意义 (P<0.05),
表明其对家鸽气管纤毛运动有明显的影响。
2.3　牛大力对小鼠氨水引咳的镇咳作用　表 3结
果表明 , 牛大力水提物能显著延长咳嗽潜伏期 , 减
少咳嗽次数 , 与空白组比较差异有显著性意义 (P
<0.05或 P<0.01)。提示牛大力水提物对氨水诱
导的小鼠咳嗽有较好的镇咳作用 。
2.4　牛大力对豚鼠枸橼酸引咳的镇咳作用　表 4
结果表明 , 不同剂量的牛大力水提物均能延长枸橼
酸引咳豚鼠的咳嗽潜伏期 , 减少豚鼠 5min内的咳
表 1　各组对小鼠酚红祛痰的影响
Table1　ExpectorantefectofRMSinmice
phenolredexcretiontest　( x±s)
组别 N ρ酚红 /(μg· mL-1)
空白组 12 0.14±0.05
沐舒坦组 12 0.48±0.12②
牛大力高剂量组 12 0.36±0.18①
牛大力中剂量组 12 0.25±0.12①
牛大力低剂量组 12 0.20±0.06①
　①P<0.05, ②P<0.01 , 与空白组比较
表 2　各组对家鸽气管纤毛运动的影响
Table2　EffectofRMSonciliarymovement
inpigeontrachea　( x±s)
组别 N l炭末推进 /cmt=0.5h t=1h t=2h
空白组 10 1.35±0.21 1.38±0.26 1.18±0.23
沐舒坦组 10 1.77±0.38① 1.85±0.27① 1.39±0.26
牛大力高剂量组 10 1.71±0.36 1.73±0.22① 1.38±0.32
牛大力中剂量组 10 1.68±0.32 1.68±0.32 1.40±0.28
牛大力低剂量组 10 1.43±0.21 1.63±0.25 1.43±0.24
　①P<0.05, 与空白组比较
表 3　各组对小鼠氨水引咳的镇咳作用比较
Table3　AntitussiveefectofRMSinmice
ammoniawatersteamingtest　( x±s)
组别 N t咳嗽潜伏 /s n咳嗽 /次
空白组 12 6.36±3.08 28.61±9.83
美沙芬组 12 24.14±10.95② 8.85±3.80②
牛大力高剂量组 12 15.50±2.29② 11.20±4.38②
牛大力中剂量组 12 14.86±3.48② 13.90±6.00②
牛大力低剂量组 12 14.00±5.21① 15.17±3.38②
　①P<0.05, ②P<0.01, 与空白组比较
268　 广州中医药大学学报 2009年第 26卷
嗽次数 , 以高剂量组效果显著 , 与空白组比较差异
有显著性意义 (P<0.05)。提示牛大力水提物对
枸橼酸引咳的豚鼠有一定的镇咳作用 。
2.5　牛大力对豚鼠的平喘作用　表 5结果表明 ,
不同剂量的牛大力水提物对组胺—乙酰胆碱诱发的
哮喘有明显的保护作用 , 能使引喘潜伏期显著延
长 , 与空白组比较差异有显著性意义 (P<0.01)。
提示牛大力水提物有较好的平喘作用 。
表 4　各组对豚鼠枸橼酸引咳的镇咳作用
Table4　AntitussiveefectofRMSinguineapig
citric-acid-inducedcoughtest　( x±s)
组别 N t咳嗽潜伏 /s n咳嗽 /次
空白组 10 37.80±17.60 32.20±10.83
美沙芬组 12 76.40±32.55① 5.80±1.45②
牛大力高剂量组 11 70.00±28.60① 17.00±8.90①
牛大力中剂量组 11 63.80±22.25 17.60±5.28
牛大力低剂量组 12 53.40±17.74 19.42±9.57
　①P<0.05, ②P<0.01, 与空白组比较
表 5　各组对豚鼠的平喘作用比较
Table5　AntiasthmaticefectofRMS
onguineapigs　( x±s)
组别 N t哮喘潜伏 /s
空白组 12 83.1±14.51
氨茶碱组 11 185.3±15.97①
牛大力高剂量组 12 121.6±16.23①
牛大力中剂量组 10 109.2±11.41①
牛大力低剂量组 12 106.1±10.09①
　①P<0.01, 与空白组比较
3　讨论
到目前为止 , 有关牛大力对呼吸系统疾病的药
理研究尚未见报道 , 临床证明其对慢性支气管炎有
一定疗效 , 本实验从镇咳 、袪痰和平喘三个方面对
其进行了初步研究 , 目的为其进一步开发利用提供
可靠的药理学依据。
慢性支气管炎是由于感染或非感染因素引起的
气管 、 支气管黏膜及其周围组织的一种慢性非特异
性炎症 , 临床主要表现为咳 、 喘 、痰症状 , 因而镇
咳 、祛痰和平喘在慢性支气管炎的症状控制中起重
要的作用。文献报道 [ 9]化学物质氨水 、 枸橼酸可
通过刺激呼吸道感受器 , 引起支气管平滑肌收缩 ,
兴奋引发神经冲动 , 激活脑内咳嗽中枢从而引起咳
嗽反射 。本实验结果表明牛大力水提取物能显著抑
制氨水引发小鼠咳嗽反应次数及枸橼酸引起豚鼠咳
嗽反应次数 , 延长咳嗽潜伏期 , 说明该药可作用于
有关的化学感受器 , 保护支气管黏膜免受刺激 , 达
到镇咳效果。痰是由气管 、 支气管的腺体和杯状细
胞所分泌 , 它的存在是引起咳嗽以致喘息的重要原
因。痰液的清除有赖于黏液胶的物理特性和黏液 、
气道及纤毛之间的相互作用 。本实验结果表明牛大
力水提取物能增加小鼠气管酚红排出量 , 加速家鸽
气管黏膜的黏液纤毛运动 , 表明其可促进腺体分
泌 , 使分泌量增加 , 稀释痰液从而达到化痰祛痰作
用。中医认为哮喘是宿痰内伏于肺 , 遇诱因而引
发 , 使痰阻气道 , 肺失肃降 , 气道挛急。文献报
道[ 10]组胺可通过兴奋体内 H1和 H2组胺受体产生
广泛而复杂的生理和病理作用。本实验采用磷酸组
胺和氯化乙酰胆碱混合液复制豚鼠哮喘模型 , 主要
是由于在哮喘急性发作时 , 这两种物质是导致气管
痉挛收缩的主要介质 , 结果表明 , 牛大力水提取物
对组胺—乙酰胆碱诱发的哮喘有保护作用 , 能对抗
组胺 、乙酰胆碱等过敏介质引起的气管 、支气管收
缩 , 明显延长哮喘潜伏期。综上所述 , 牛大力水提
取物具有止咳 、祛痰及平喘作用 。
参考文献:
[ 1] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编 (上册) [ M].第
3版.北京:人民卫生出版社, 1986:200.
[ 2] 唐汝愚.桔梗远志半夏的祛痰作用研究 [ J] .中华医学杂志 ,
1952, 38: 4.
[ 3] 刘威.臭冷杉精油的镇咳祛痰平喘作用 [ J].中草药 , 1990,
21 (6): 28.
[ 4] 温文川 , 冯泳虹 , 谭毓治.泰镇咳浸膏的镇咳 、 祛痰 、 抗炎
和平喘作用 [ J] .广东药学院学报 , 2000, 16 (2):114.
[ 5] 王国杰 , 李群 , 肖洪斌 , 等.射干麻黄冲剂镇咳 、 祛痰 、 平
喘作用的实验报告 [ J].中医药学报 , 1990, 3: 1990.
[ 6] 黄庆彰.中药的镇咳作用:半夏与贝母 [ J] .中华医学杂志 ,
1954, 40 (5):325.
[ 7] 方泰惠 , 许崽琴 , 金胜娥 , 等.麝香定喘膏平喘作用实验研
究 [ J] .南京中医药大学学报 , 1995, 11 (2):2.
[ 8] 许惠琴 , 方泰惠 , 张培祥, 等.寒喘平 、 热喘平口服液平喘
作用研究 [ J] .南京中医药大学学报 , 1999, 15 (5):297.
[ 9] RicciardoloFL, RadoV, FabbriLM, eta1.Bronchoconstriction
inducedbycitricacidinhalationinguineapigs:roleoftachykinins,
bradykinins, andnitricoxide[ J].AmJRespirCritCareMed,
1999, 159 (2):557.
[ 10] 李卫平 , 张艳 , 方明 , 等.国产西替利嗪的抗组胺作用研究
[ J] .安徽医科大学学报 , 1998, 33 (1):13.
第 3期 刘丹丹 , 等.牛大力祛痰 、 镇咳和平喘作用的实验研究 269　
ExperimentalStudyontheExpectorant, AntitussiveandAntiasthmatic
EfectsofRadixMiletiaeSpeciosae
LIUDandan1 , 　TANGLihai1 , 　WANGYan2 , 　XIAOXiji1 ,
LIULiangfeng1 , 　YEMurong1
(1.SchoolofChineseHerbalMedicine, GuangzhouUniversityofTCM, Guangzhou　510405　Guangdong, China;
2.ShanxiCollegeofTCM, Taiyuan　030006 Shanxi, China)
Abstract:Objective　Toobservetheexpectorant, antitussiveandantiasthmaticefectsofRadixMiletiae
Speciosae(RMS).Methods　Expectorantefectswereevaluatedbymeasuringtheexcretionofphenolredinmice
tracheaandbyobservingthepigeontrachealciliarymovement.Antitussiveefectswereobservedthroughmice
coughtestinducedbyammoniawatersteamingandthroughguineapigscoughtestinducedbycitricacid.
Antiasthmaticactionsinguineapigswereobservedbyhistamineandacetylcholineultrasonicatomizationtest.
Results　RMSincreasedtheexcretionofphenolredfrommicetrachea, promotedthemovementofprepared
Chineseinkinthepigeontrachea, decreasedthefrequencyofmicecoughinducedbyammoniaandguineapigs
coughinducedbycitricacid, prolongedthecoughlatentperiod, andinhibitedtheguineapigsasthmainducedby
histamineandacetylcholinesolution(P<0.05 orP<0.01).Conclusion　RMSshowscertainexpectorant,
antitusiveandantiasthmaticefects.
Keywords:RADIXMILLETTIAESPECIOSAE/pharmacology;　CHRONICBRONCHITIS/TCDtherapy;　
DISEASEMODELS, ANIMAL;　MICE;　GUINEAPIGS;　PIGEONS
(Continuedfrompage265)
ExperimentalStudyofInterventionofYiqiHuaxianDecoction
onRatsPulmonaryFibrosis
CAIWangxi, 　YINShanshan, 　CHANGJianfang
(HubeiCollegeofTCM, Wuhan　430061 Hubei, China)
Abstract:Objective　ToobservetheefectofYiqiHuaxianDecoction(YHD)ontransforminggrowthfactorβ1
(TGF-β1)mRNAexpressioninratsalveolarmacrophages(AM)andpulmonaryinterstitialmacrophages(IM).
Methods　Ninety-sixWistarratswererandomizedintosham-operationgroup, modelgroup, YHD(4g· kg-1·
d-1)group, andhydrocortisone(20mg·kg-1· d-1)group.BleomycinA5 wasinjectedintotheratstracheato
inducepulmonaryfibrosis.AMandIMwereisolatedfortheculturingaftermodelingfor7and28 days.Molecular
in-situhybridization(ISH)wasusedforthedetectionofTGF-β1 expressioninAMandIM.Results　Percentage
ofcelsinAMandIMwithTGF-β1 positiveexpressionandthescoreofopticdensitywereincreasedinthemodel
group(P<0.01comparedwiththoseinsham-operationgroup), YHDhadanefectondeceasingtheabovetwo
indexes(P<0.01), anditsefectwassimilartothatofhydrocortisone.Conclusion　Thetherapeuticmechanism
ofYHDisprobablyrelatedwiththedecreaseofTGF-β1 expressionandtheinhibitionoffibrosis.
Keywords:YIQIHUAXIAN DECOCTION/pharmacology;　 PULMONARY FIBROSIS/TCD therapy;　
TRANSFORMINGGROWTH FACTOR Β1;　 ALVEOLAR MACROPHAGES/pathology;　
INTERSTITIALMACROPHAGES/pathology;　DISEASEMODELS, ANIMAL;　RATS