全 文 ：果胶酸 、细菌多糖及某些糖苷中;葡萄糖是己醛糖 , 分子式
CH2OH(CHOH)3COCH2OH, 是自然界分布最广泛的单糖。
4　结论
研究结果表明该多糖是一杂多糖 ,由 D-阿拉伯糖和 D-葡
萄糖组成 , 它们的摩尔比为 1∶2,该多糖为杂多糖。
参考文献:
[ 1] 　王友绍 ,何磊.药用红树植物的化学成分及其药理研究进展 [ J].中
国海洋药物 , 2004, 2:26.
[ 2 ] 　张晓静 ,刘会东.植物多糖提取分离及药理作用的研究 [ J] .时珍国
医国药 , 2003, 14(8):495.
[ 3 ] 　季宇彬.中药多糖的化学与药理 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
2005:5.
收稿日期:2010-03-05;　修订日期:2010-06-25
基金项目:四川省科技厅应用基础项目(No.08JC187)
作者简介:廖敬礼(1984-),男(汉族),河南南阳人 ,现为西南民族大学在
读硕士研究生 ,主要从事中药及民族药物的药效及毒理学研究工作.
＊通讯作者简介:顾　健(1967-),男(汉族),浙江武义人 ,现任西南民族
大学少数民族药物研究所副教授 ,硕士研究生导师 ,博士学位 ,主要从事
中药及民族药物的药效及毒理学研究工作.
唐古特青兰提取物齐墩果酸的药代动力学研究
廖敬礼 ,顾　健＊ ,李　婧 ,张亮亮 ,钟　锋 ,姚　峰
(西南民族大学少数民族药物研究所 ,四川 成都　610041)
摘要:目的 建立测定齐墩果酸血浆浓度的 HPLC方法 , 研究唐古特青兰醇提取物中齐墩果酸的药代动力学规律。方法
采取甲醇 -水(85∶15, V/V)为流动相 , DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)为固定相 , 紫外检测波长为 215 nm测
定 , 大鼠灌胃给药 3.0, 1.5 g/kg,用 HPLC法测定给药大鼠血浆中齐墩果酸的含量 ,采用药代动力学软件 DAS(ver2.0)处
理 , 得到齐墩果酸的药代动力学参数。结果 大鼠灌胃高剂量和低剂量给药的齐墩果酸主要参数分为 AUC0 -t为
49 450.915 mg/(L· min)和 37 336.884mg/(L· min), tl/2为 85.154 min和 55.215 min。结论 齐墩果酸在大鼠体内的
代谢符合一室模型 , 吸收 、消除较快。
关键词:唐古特青兰;　齐墩果酸;　药代动力学;　高效液相色谱
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.11.083
中图分类号:R969　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)11-2893-02
　　唐古特青兰又名甘青青兰(DracocephalumtanguticumMax-
im, 简称 DtM),藏文译音 “知羊格” ,是藏医常用药材 , 属多年生
唇形科草本植物 ,生长在海拔 1 900 ～ 4 600 m的青藏高原。其性
寒 、味甘苦 ,可清肝胃之热 , 用于治疗胃炎 、肝炎 、头晕 、关节炎 、胃
溃疡 、神疲等 [ 1] , 主含黄酮苷 、挥发油 、氨基酸 、甾类 、齐墩果酸 、
熊果酸 、胡萝卜苷等 [ 2] 。研究发现 , DtM的醇提液可以有效降低
大鼠的血糖浓度 , 具有降血糖的药理作用 , DtM水提液可升高缺
氧动物红细胞 SOD含量 、清除氧自由基 , 降低整体耗氧量 , 具有
抗心脑组织缺氧的作用 ,可改善缺氧造成的血液流变学异常 、血
小板减少 、右心室肥厚及组织病理学损伤。其药用价值显著 ,但
目前对唐古特青兰用于治疗这方面疾病的研究不少 ,大多数对其
在体内的代谢还不清楚 ,或仅限于理论上的论述 , 不便于对其进
行研究和利用 , 且未见文献报道。为此我们对 DtM的醇提液中
齐墩果酸在大鼠体内的代谢进行药代动力学研究。
1　材料与仪器
1.1 　动物 健康 Wistar雄性大鼠 12只 , 体质量(250±50)g,由
四川省实验动物中心提供 ,合格证号:SCXK[川 ] 2008-14。
1.2　仪器 岛津 LC-10AT高效液相色谱仪;DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);SPD-M10AvpUV-VIS检测器;CTO
-1OA柱温箱;C-R7Ae色谱数据处理仪;SIL-1OADvp自动进
样器;旋转蒸发仪(上海夏丰实业有限公司);精密天平(沈阳龙
腾电子有限公司);台式高速离心机;HY调速多用振荡仪(江苏
正基仪器有限公司);YGL系列氮吹仪(成都雅源科技有限公
司);微孔滤膜(0.45 μm)。
1.3 　试剂及药品 甲醇;醋酸乙酯;无水乙醇;高纯水(自制);
肝素;唐古特青兰(采自青海 , 经成都中医药大学中药室鉴定为
唇形科植物唐古特青兰的带根全草。)
1.4 　药物的制备 取 115 g原药材 , 加入 700 ml95%的乙醇溶
液中 , 加热煮沸 2h, 过滤 ,通过旋转蒸发仪回收乙醇 ,浓缩成相当
于生药量 0.45, 0.90g/ml的溶液 , 保存备用。
2　方法与结果
2.1 　色谱条件 DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm, 5μm);流动
相为甲醇 -水(85∶15, V/V);柱温 30℃ ;流速 1.0ml/min;检测
波长 215nm。
2.2　血样处理 在 100 μl血浆加入 0.1 ml乙酸乙酯 , 振荡 5
min, 6 000r/min离心 ,取上清液 , 加 0.3 ml甲醇沉淀蛋白 ,振荡 5
min, 6 000 r/min离心 ,取上清液 , 50℃氮气吹干。用 1.0 ml流动
相溶解 ,取 10 μl进样分析 ,测定峰面积。
2.3 　对照品溶液的制备 取对照品恒温干燥至恒质量 , 精密称
取 5.0 mg齐墩果酸对照品 , 置 5.0ml容量瓶中 , 用流动相溶解 ,
超声 5 min, 定容至 5.0ml, 得到 1.0mg/ml对照品溶液。
2.4 　标准曲线的制备 精密量取大鼠空白血浆 0.1 ml,分别加
入齐墩果酸标准品 ,配制成血浆浓度分别为:10, 20, 30, 40, 50μg/
ml血浆溶液 ,按上述血样处理过程处理 ,分别取 10 μl进样 , 记录
峰面积 ,以峰面积值(Y)对齐墩果酸的浓度(X)进行线性回归。
2.5 　精密度实验 取大鼠空白血浆 0.1 ml, 用标准品配制成浓
度分别为 10, 20, 40 μg/ml的血浆溶液 , 按 “ 2.2”项操作 , 测定样
品峰面积。代入标准曲线方程 ,计算测得浓度 , 考察日内和连续
5d的日间变异情况。
2.6 　回收率实验 分别用空白血浆配制齐墩果酸质量浓度为
10, 20, 40 μg/ml,的样品 , 按 “ 2.2”项操作 ,测定样品峰面积 。代
入标准曲线方程 ,计算测定浓度。
2.7 　动物实验 大鼠给药前禁食 , 自由摄水 , 实验随机分为两
组 , 每组 6只 ,分别为高 、低剂量组。按 3.0 g/kg, 1.5 g/kg灌胃
给药。给药后 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 360 min后分
别于尾静脉取血 , 每次取血 0.5 ml于肝素处理的离心管中 , 离
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心 , 取 100 μl上清液 ,按 “ 2.2”项操作。
2.8　药动学参数计算 所得血药浓度 -时间(C-T)数据用药
代动力学分析软件 DAS(ver2.0)程序处理。
3　结果
3.1 　线性关系 以峰面积值(Y)对齐墩果酸的浓度(X)进行线
性回归 , 得回归线方程:Y=3 089.5X-6 481.2, r=0.999 09。结
果表明齐墩果酸在 10 ～ 50 μg/ml关系良好 , 保留时间为
23.3 min, 齐墩果酸色谱图见图 1。
3.2　精密度实验 从表 l可知该方法精密度好 , 日内及日间误差
(RSD)都比较小。
3.3 　回收率实验 由表 2可知 , 高 、中 、低 3个质量浓度的回收
率均大于 90%。
3.4 　动物实验结果 将实验所得齐墩果酸的血药浓度 -时间
数据 , 经药代动力学分析软件 DAS(ver2.0)处理 , 经由计算机进
行曲线拟合 , 得唐古特青兰醇提取物中齐墩果酸在健康大鼠体内
的药代动力学参数(见表 3 ～ 4)及药 -时曲线图(见图 2)。
结果显示 , 大鼠灌胃给药后 ,齐墩果酸在血液里 60 min时达
到最高血药浓度。高低剂量对比 , 药 -时曲线线性关系良好 ,所
得最佳房室数为一室 ,权重系数为 1,清除率基本一致。
图 1　齐墩果酸色谱图
表 1　齐墩果酸在大鼠血浆中的精密度实验结果
质量浓度
/μg· ml-1
日内
实测值 RSD(%)
日间
实测值 RSD(%)
10 9.62±0.34 3.53 9.12±0.53 5.81
20 19.53±0.18 0.92 18.83±0.27 1.43
40 38.86±0.96 2.47 38.59±1.15 2.98
　　n=5
表 2　齐墩果酸在大鼠血浆中的回收率实验结果
质量浓度 /μg· ml-1 回收率(%) RSD(%)
10 90.12±4.31 4.78
20 93.01±3.56 3.82
40 92.18±1.21 1.31
　　n=5
表 3　齐墩果酸在大鼠血液里的药代动力学参数(低剂量组)
房室参数 单位 参数值 一级参数 参数值
t1/2 min 55.215 A 1 142.135
Ke 1/min 0.013 α 0.013
V1/F L/kg 0.307 K 1130.92
CL/F L/min-1· kg-1 0.004 Ka 0.021
AUC(0-t) mg/L· min 37 336.884
AUC(0-∞) mg/L· min 38 971.708
Ka 1/min 0.021
t1/2Ka min 32.7
4　讨论
4.1　分析方法学 齐墩果酸易溶于甲醇 、醋酸乙酯 、氯仿中 , 经
反复试验 ,并参考文献 , 当采用醋酸乙酯萃取血浆样本时 ,萃取效
率较高 ,且内源性物质对齐墩果酸测定干扰小。本文建立 HPLC
法测量齐墩果酸在血浆中含量 , 方法稳定 、灵敏度高 、专属性强 ,
杂质干扰小 ,操作简便 , 回收率和精密度实验的 RSD均比较低 ,
是一种比较理想的方法。
表 4　齐墩果酸在大鼠血液里的药代动力学参数(高剂量组)
房室参数 单位 参数值 一级参数 参数值t
1/2 min 85.154 A 541.768Ke 1/min 0.008 α 0.008
V1/F L/kg 0.686 K 490.427CL/F L/min-1· kg-1 0.006 Ka 0.034AUC(0-t) mg/L· min 49450.915
AUC(0-∞) mg/L· min 53708.273
Ka 1/min 0.034t1/2Ka min 20.116
图 2　药-时曲线图
4.2 　药代动力学 对大鼠灌胃唐古特青兰的醇提物齐墩果酸 ,
血药浓度 -时间数据经 DAS(ver2.O)药代动力学分析软件处
理 , 所得最佳房室数为一室 , 权重系数 w为 1, 采用高剂量组和低
剂量组灌胃给药 ,这两种剂量的半衰期 , 清除率基本一致 ,同时无
观察到毒性反应现象 , 说明给药剂量合理 , 线性关系良好。综上
所述 , 唐古特青兰在大鼠体内药代动力学规律明显 , 吸收 、消除较
快 , 代谢迅速 ,所得结果可为临床合理用药提供科学依据。
参考文献:
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质谱分析 [ J] .中医药导报 , 2008, 14(8):12.
[ 2 ] 　李霁昕 ,贾忠建.甘青青兰化学成分的研究 [ J].西北植物学报 ,
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