全 文 ：参考文献:
[ 1] Giuseppe Giaccone.Th e Role of Gefit inib in Lung Can cer
Treatment[ J] .Clin Cancer Res , 2004 , (Suppl), 10:4233.
[ 2] Michael Wol f H elen Swaisland S teven Averbuch.Development
of the Novel Biologically Targeted Anticancer Agent Ge-
f itinib:Determining th e Opt imum Dose for Clinical Ef ficacy
[ J] .C lin Can cer Res , 2004 , 10:4607.
[ 3] Roman Prez e-Soler..HER1/ EGFR Targeting:refining st rategy
[ J] .Oncologi st , 2004 , 9:58.
[ 4] 吴一龙 ,杨学宁 ,杨衿记 ,等.中国的非小细胞肺癌 Gef it inib分
子靶向治疗[ J] .中国肺癌杂志 , 2004 , 7(4):318.
[ 5] Spicer J , H arper P.Targeted therapies for non-small cel l lung
cancer[ J] .In t J Clin Pract , 2005 , 59(9):1055.
[ 6] S andler A.C linical experience w ith the H ER1/ EGFR ty rosine
kinas e inhibi tor erlotinib[ J] .Oncology , 2003 , 17(11Suppl12):
17.
[ 7] Johnson DH , Fehrnbach er L , Novotny WF , et a l .Randomized
ph aseⅡ t rial com paring bevacizumb plus carboplatin and pacli-
t axel w ith carb oplatin and pacli taxel alone in p reviously un-
t reated locallyadvanced or metas tic non-small-cel l lung can cer
[ J] .J C lin Oncol , 2004 , 22(11):2184.
[ 8] 何小平 ,朱人敏.肿瘤血管生成与抗肿瘤血管生成基因治疗的
进展[ J] .医学研究生学报 , 2005 , 18(6):559.
[ 9] 王素去 ,刘瑞芳.塞来昔布在肺癌防治中的研究进展[ J] .世界
药物临床 , 2005 , 26(1):16.
[收稿日期] 2008-07-14
[作者简介] 周志勇 , 男 ,硕士研究生 ,电话:0717-6398469 , E-mail:in bud @126.com [ 通讯作者] 袁丁 ,男 ,副教授 ,电话:0717-6392452 , E-
m ail:yxyyd@ctgu.edu.cn
齐墩果酸药理作用研究进展
周志勇 ,袁丁 (三峡大学医学院天然产物研究与利用湖北省重点实验室 ,湖北 宜昌 443002)
[ 关键词] 齐墩果酸;药理作用;作用机制
[中图分类号] R961 [ 文献标识码] C [ 文章编号] 1001-5213(2008)23-2031-03
齐墩果酸(o leanolic acid , 简称 OA)是一种齐墩果烷型
五环三萜类化合物 , 广泛分布于自然界 , 据不完全统计 , OA
以游离形式和(或)与糖结合形式广泛分布于大约 60 个科
190 种植物中[ 1] , 如在青叶胆全草 、白花蛇舌草 、女贞果实等
植物中以游离形式存在或与糖结合成苷存在。 OA 具有消
炎 、增强免疫 、抑制血小板降集 、降糖 、抗氧化和利尿作用等
多方面的临床药理作用 ,还具有护肝 、抗高血脂 、抗动脉粥样
硬化及抗肿瘤等生物活性。 OA 是治疗急性黄胆型肝炎和慢
性病毒性肝炎比较理想的药物 ,且毒性低 , 不良反应少。由
于 OA 结构复杂 , 难以用合成法获得 , 所以目前大多从辽东
楤木 、青叶胆 、女贞子 、雪胆等植物中进行提取。 本资料综述
近年来与 OA 药理研究的相关文献报道 , 重点阐述其作用机
制 ,为 OA 的开发利用提供理论和依据。
1 主要药理作用
1.1 护肝 、解毒作用 20 世纪 70 年代人们便已开始了对
OA 保肝作用的研究 , 发现经 OA(sc)治疗后的四氯化碳中
毒大鼠血清中谷丙转氨酶明显下降。 20 世纪 80年代人们又
通过组织病理学的检查进一步证实了 OA 的肝保护作用[ 2] 。
研究报道 OA作用下残留的肝脏其核分裂数目明显增多[3] 。
齐墩果酸对肝脏的保护作用主要归因于它的抗氧化 、抗
炎作用以及对药物代谢酶的影响。韩德伟[ 4]在实验研究中
发现 ,齐墩果酸可促进肝细胞再生 , 使坏死区迅速修复 ,使变
性坏死的肝组织恢复正常来减轻丙氨酸(ALT)的活力下降 ,
使肝组织炎症反应减弱 , 血中丙种球蛋白下降 , 从而抑制发
胶原纤维增生 , 使肝硬化难以形成。其药理作用与剂量有
关 ,低剂量的齐墩果酸具有保肝作用 , 高剂量能够引起胆汁
郁积和肝毒性[ 5] 。
1.2 抗肿瘤 、抗氧化剂作用 张东方等[ 6] 通过体外实验证
实 , 35 , 45 μmo l·L-1齐墩果酸处理4 d后对 PGCL3 细胞的穿
膜侵袭能力有显著抑制作用(P<0.05和 P<0.01)。齐墩果
酸处理 PGCL3 细胞 48 h , AO/ EB 荧光双染法和 TUNEL
法测定细胞凋亡率 , 结果使 PGC L3 细胞凋亡率明显增加。
Huang等[ 7]在体外实验中发现 3 位氧化的齐墩果酸可以明
显抑制不同组织癌细胞的生长 , MT T 测定显示它对肿瘤细
胞的 IC50为 6.1 ～ 42.8 μmo l·L -1 , S RB 测定 GI50为 3.9 ～
31.8 μmo l·L-1。但是 , 在体内实验中发现它只对黑素瘤细
胞有明显的抑制作用。
齐墩果酸能作用于肿瘤发生的不同阶段 ,包括抑制肿瘤
的形成 ,阻碍肿瘤诱发和诱导肿瘤细胞分化。齐墩果酸还能
有效地抑制血管发生肿瘤细胞的侵害和转移[ 8] 。
齐墩果酸抗肿瘤活性的机制被认为是它对 DNA 复制 ,
酪氨酸激酶 、氧化亚氮诱导系统和基质金属蛋白酶-9 的活性
以及脂肪氧化酶和环氧化酶 2 表达的抑制作用 , 此外 , 它可
以导致凋亡细胞形态学和 DNA 片段特性的改变 , 这些是通
过胱门蛋白酶的活性和细胞内 Ca2+和细胞色素 C 的释放为
标准的[ 9] 。齐墩果酸一方面能诱导肿瘤细胞的编程性死亡 ,
另一方面能预防正常细胞的恶性转化 , 通过对小鼠外周血和
骨髓微核试验测定 ,齐墩果酸单味药口服剂量给药对化学治
疗药物阿霉素的染色体诱裂性有保护作用[ 10] 。
研究表明齐墩果酸可以明显抑制 H2O 2诱导的 DNA 单
链断裂。通过单细胞凝胶电泳法在 L1210 和 K562 细胞中
测定齐墩果酸抗氧化活性明显高于熊果酸[ 11] 。
1.3 抗胃溃疡作用 齐墩果酸能促进醋酸引发的慢性胃损
害的修复。 Jaime 等[ 12] 通过动物实验测得用齐墩果酸治疗
醋酸诱导的胃损伤 ,给药后受损区域明显减少。 给药剂量为
50 mg·kg -1和 100 mg·kg-1时 , 治疗比率分别为 54.5%和
76%,而雷尼替丁给药 50 mg·kg -1时治疗比率为 84%,黏膜
厚度相应从 342 μm 增加到 540 μm(100 mg·kg-1 OA)和
945 μm(50 mg·kg -1雷尼替丁), 对胃进行组织学检查 , 显示
损害区域开始再生。
·2031·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 23期 Chin H osp Pharm J , 2008 Dec , Vol 28 , No.23
有研究者指出 ,胃保护作用的机制主要是增强胃黏膜的
防御因素 ,而并非通过抑制胃酸或胃蛋白酶分泌物的侵害。
胃表皮的再次形成是黏膜损伤后胃溃疡愈合的关键过程 ,为
了修复黏膜的完整性 ,黏膜的再生和上皮细胞和结缔组织细
胞的转移是必须的。通过体外测定实验确定齐墩果酸能够
刺激 MRC-5 成纤维细胞的增殖 ,达到快速修复的目的[ 13] 。
1.4 抗高血压作用 研究表明每天以 60 mg·kg -1剂量服
用齐墩果酸经过 6 周后可以预防严重的高血压[ 14] 。 Rosalia
等[ 15]研究发现长期食用齐墩果酸含量高食物的大鼠可以通
过增强烯醇酶表达来增强内皮组织 NO 介导的主动脉环的
舒张。它的抗高血压功能主要通过它的抗血脂过多和抗氧
化活性发挥作用 , 两者结合通过抑制远曲小管近端 Na+和
K+的重吸收而产生的利尿作用 , 促尿钠排泄和促尿食盐排
泄作用和直接的强心作用(心率减慢 34%)而使血压下
降[ 16] 。
Somova等[ 17]研究发现齐墩果酸的血管减压作用和减
慢心率作用可能与阻断 β-肾上腺素作用有关 ,与普萘洛尔相
似但效能低。此外抗 CaCl2和肾上腺素诱导的心律不齐作用
也与 β-肾上腺素拮抗有关。
1.5 对免疫系统及变态反应的影响 齐墩果酸对前列腺素
合成具有明显促进作用 , 同时它能刺激环腺苷酸(cAMP)水
平的上升 , 对环鸟苷酸(cGMP)和组胺的释放有明显的抑制
作用 ,即证明了 OA 具有免疫抑制作用[18] 。
从女贞子中提取的齐墩果酸具有促进淋巴细胞增殖和
动物巨噬细胞吞噬功能 , 迟发超敏反应的效应 , 并与 IL-2
具有协同作用 , 临床观察 , 服用齐墩果酸对肝肿瘤患者的 T
淋巴细胞及巨噬细胞吞噬功能均有一定的提高作用 , 而服用
安慰剂的对照组无明显变化 , 说明其有免疫调节作用[ 19] 。
实验研究证明 ,齐墩果酸对Ⅱ , Ⅲ , Ⅳ型变态反应都具有明显
抑制作用 ,它可以对抗可的松所致小鼠胸腺 、脾脏萎缩;升高
抗体 lgG 含量 、抑制Ⅰ型变态反应[ 3] 。
动物实验表明 OA 能不同程度地除去肿瘤患者 TS 细胞
在混合淋巴细胞培养中对正常人淋巴细胞增值的抑制作用 ,
同时可明显增强正常小鼠巨噬细胞功能及 T 淋巴细胞活性 ,
但对体液免疫功能影响不显著 ,对免疫小鼠抗原结合细胞也
无明显影响 ,这些作用与肾上腺皮质激素的药理作用相似 ,
却没有皮质激素的不良反应[20] 。
1.6 降血脂 、降血糖作用 OA 对正常大鼠的血脂无明显影
响 ,而对实验性高血脂症大鼠和实验性高血脂症兔有明显的
血脂降低作用 ,可以极显著的降低血清胆固醇和三酰甘油的
含量 ,并能减少脂质在家兔主要脏器中的沉积[ 20] 。
其原因被认为 , 齐墩果酸通过降低过氧化脂质 , 保护
PGI2 合成酶 , 抑制 TXA2 的生成及活性 , 升高 PGI2/ TXA2
比值 ,抑制平滑肌细胞增生 , 减少泡沫细胞形成 , 从而明显抑
制粥样硬化斑块的形成 ,阻止粥样硬化的发生发展[ 21] 。
齐墩果酸还具有明显的降血糖和预防糖尿病的作用。
糖尿病是一种以具有过高血糖浓度为特征的常见代谢性疾
病 ,目前主要的治疗途径为阻止肠内单糖的吸收。 Or tiz-An-
drade等[ 22] 通过用 Tournefo rtia har tw egiana 的甲醇提取物
做口服葡萄糖耐量实验 ,发现血浆葡萄糖浓度的增高被明显
抑制 ,经分离鉴定 ,其中的有效成分为齐墩果酸。在降低血
糖的同时 ,肝糖原和血清胰岛素均有明显升高(P<0.01);体
外实验表明 ,齐墩果酸可以抑制α-葡萄糖苷酶的活性 , 表明
其作用机制是通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性而阻碍碳水化
合物在肠内的吸收 ,同时调节胰岛素分泌从而抑制饭后血糖
浓度的增加。
2 展望
齐墩果酸目前已经在临床上用于治疗黄疸型肝炎 、慢性
迁延性肝炎及慢性活动性肝炎。齐墩果酸片 、藏茵陈胶囊等
产品已经应用于临床 , 许多有活性的衍生物正在开发 , 但是
目前国内对齐墩果酸可能的药理作用机制少有报道。明确
其作用机制和作用靶点 ,寻找高效低毒的齐墩果酸衍生物是
一项十分有价值和前景的研究工作。
参考文献:
[ 1] 张登科.35 种植物的齐墩果酸含量比较[ J] .中药材 , 1989 , 12
(12):19.
[ 2] 孟艳秋 ,赵临襄 ,王趱 ,等.五环三萜类化合物的构效关系[ J] .
中国新药杂志 , 2004 , 13(12):1098-1102.
[ 3] 田丽婷 ,马龙 ,堵年生 ,等.齐墩果酸的药理作用研究概况[ J] .
中国中药杂志 , 2002 , 27(12):884-886.
[ 4] 韩德伟.齐墩果酸防治实验性肝硬变发生的研究[ J] .中医杂
志 , 1981 , 22(3):217.
[ 5] Liu Jie.Oleanolic acid and urs olic acid:Research perspectives
[ J] .Journal of Ethnopharmacology , 2005 ,(100):92-94.
[ 6] 张东方 ,黄炜 ,黄济群 ,等.齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖 、侵袭和
诱导细胞凋亡的研究[ J] .肿瘤防治研究 , 2003 , 30(3):180-
183.
[ 7] Huang Dan , Ding Yan , Li Yan , et al .Ant i-tumor act ivity of a 3-
ox o derivat ive of oleanolic acid[ J] .Cancer Letters , 2006(233):
289-296.
[ 8] Ovesna , Z , Vachalk ova , A , Horvath ova , K , et al .Pentacy clic
tri terpen oic acids:new chemoprotective com pounds[ J] .Mini re-
view Neop lasma , 2004 (5):327-333.
[ 9] Aggarw al B B , Takada Y , Oommen O V.From chemopreven-
t ion to chem oth erapy:common target s and common goals[ J] .
E xpert Opinion on Inves tigat ional Drugs , 2004 , 13(10):1327-
1338.
[ 10] Resende FA , Claudete Aparecida Mat tos de Andrade Barcala ,
Má rcia Cris tina da Silva Faria , et al .Ant imu tagenicity of u rsolic
acid and oleanolic acid against doxorubicin-induced clas togene-
si s in Balb/ c mice[ J] .Life Sciences , 79 (2006)1268-1273.
[ 11] Ovesna Z , Kozics K , Slamenova D.Protective ef fect s of u rsolic
acid and oleanolic acid in leukemic cells[ J] .M utat ion Research ,
2006 , 600:131-137.
[ 12] Rodriguez JA , As tudi llo L , Schm eda-Hirs chmann G.Oleanolic
acid promotes h ealing of acet ic acid-induced chronic gast ric le-
sion s in rats [ J ] .Pharm acological Research , 2003 (48):291-
294.
[ 13] Sá nch ez M .Gast roprotective and ulcer-healin g activi ty of olean-
olic acid derivatives:In v it ro-in vivo relat ionships[ J] .Life Sci-
ences , 2006(79):1349-1356.
[ 14] S omova LI , Shode FO , and Mipando M .An tih ypertensive , an ti-
atherosclerotic and an tioxidant activity of t rit erpenoids isolated
f rom Olea eu ropaea , subspecies af ricana leaves[ J] .Journal of
E th nopharmacology , 2003(84):299-305.
[ 15] Rodriguez-Rodriguez R , H errera MD.Pom ace Olive Oil Im-
p roves E ndoth elial Function in Spontaneous ly Hy pertensive
Rats by In creasing Endothelial Ni t ric Oxide Synthase Exp res-
sion[ J] .AJH , 2007 , 7(20):728-734.
[ 16] Somova1 LO , Nadar1 A , Ramman an1 P , et al .C ardiovascu lar.
·2032· 中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 23期 C hin H osp Pharm J , 2008 Dec , Vol 28 , No.23
ant ihyperlipidemic and antioxidan t ef fect s of oleanolic and ur-
s olic acid s in experimental hypertension [ J] .Phytomedicine ,
2003 , 10:115-121.
[ 17] S omova LI , Shode FO , Ramnanan P , et a l.Cardiotonic and an ti-
dys rhythmic effect s of oleanolic and u rsolic acids , m ethyl
m as linate and uvaol[ J] .Phytom edicine , 2004 , 11:121-129.
[ 18] 王德仁.齐墩果酸研究新进展[ J] .天津药学 , 2003 , 15(3):56-
58.
[ 19] 丁安伟 , 孟丽.女贞子多糖的免疫调节作用研究[ J] .中药药理
与临床 , 2001 , 17(2):11-12.
[ 20] 王立新 ,韩广轩 ,刘文庸 ,等.齐墩果酸的化学及药理研究[ J] .
药学实践杂志 , 2001 , 19(2):104-107.
[ 21] 黄婉 , 杨耀芳.女贞子及其有效成分的药理及临床研究进展
[ J] .现代中西医结合杂志 , 2003 , 12(7):772-774.
[ 22] Orti z-Andrade RR , Garcia-Jim enez S , Casti llo-Espana P , et al .
α-Glucosidase inhibitory activity of the m ethanolic ex t ract from
Tournefortia hartw egiana:An anti-hy perglycemic agen t [ J] .
J ournal of Ethnopharmacology , 2007 , 109:48-53.
[收稿日期] 2007-12-10
[作者简介] 叶鹏 ,男 ,学士 ,药师 ,电话:027-88041911-8898 , 027-62331242 , E-m ail:y p800111@163.com [ 通讯作者] 宋金春 ,男 ,主任药师 ,博
士 ,硕士生导师 ,电话:13971608052 , E-mai l:songjc1234@t om.com
量子点在药学领域的应用及前景
叶鹏1 , 2 ,宋金春1 (1.武汉大学人民医院药学部 ,湖北 武汉 430060;2.武汉大学药学院 ,湖北 武汉 430072)
[中图分类号] R943 [ 文献标识码] C [ 文章编号] 1001-5213(2008)23-2033-03
近十几年来 ,纳米科技得到了突飞猛进的发展 , 并广泛
渗透到各个学科领域 ,形成了一系列既相对独立又相互联系
的分支学科 ,尤其是纳米技术在药学领域的应用 , 极大的拓
展了药学研究的深度和广度 , 成为药学领域最有吸引力 ,最
具生命力的发展方向之一。 量子点是随着纳米技术而逐渐
发展起来的一种半导体纳米晶体材料 , 由于其独特的光谱特
征 ,良好的生物相容性 , 加上可适应特异和高通量的分子识
别的特性 ,在生命科学的多个领域取得突破性进展 , 并引起
药学领域研究者们的注意 , 在药物的靶向性研究 , 药物的高
内涵筛选 ,药物分子及细胞水平的研究 , 药物的体内分布等
方面有着广阔的前景。
1 量子点的概念
半导体荧光量子点简称量子点(quantum dots , QDs),即
半径小于或接近于激子波尔半径的半导体纳米微晶体(sem-
iconductor nanocry stal),主要由Ⅱ-Ⅳ族或 Ⅲ-Ⅴ族元素组成 ,
其中研究较多的是 CdX(X=S 、Se、Te);也可以由 2 种或 2种
以上的半导体材料组成核-壳结构(co re-shell)的纳米量子
点 ,如 CdSe/ CdS 、CdSe/ ZnS 等。 量子点由于其表面积与粒
子大小的高比例 ,存在量子尺寸效应(quantum size effect)。
量子点的体积大小严格控制着它的光吸收和发射特征。晶
体的粒子越小 ,吸收光能的能力越强 , 使其吸收带蓝移 ,荧光
发射峰位也相应蓝移 , 粒子发射蓝光;反之则红移 , 发射绿 、
黄 、橙 、红等光。
2 量子点独特的光学特性及其优越性
2.1 量子点具有连续而宽的激发光谱和可调谐的发射波长
量子点的激发光谱波长范围很宽 , 其荧光可以被波长小于
其量子限域峰的任意光源所激发 ,并且量子点的荧光发射波
长可充分利用其“量子限制”(quantum confinement)效应 ,
通过控制其合成时的直径大小和材料组分来进行连续调谐 ,
因此合成不同直径大小的量子点就能获得多种可以辨别的
不同颜色荧光。这样仅用一种波长的激发光源便可激发多
种不同颜色荧光的量子点 ,进行多元荧光检测。 而传统有机
荧光染料 ,每种颜色都需要不同波长的激发光源。此外 ,由
于量子点的这种光学特性 ,我们可以在其连续的激发谱中选
取更为合适的激发波长 ,从而使生物样本的自发荧光降到最
低点 ,提高分辨率和灵敏度。
2.2 量子点具有较大的 S toke s位移和狭窄对称的荧光谱峰
量子点的荧光谱峰狭窄对称 , 半峰宽只有 30 nm 或更小。
这样就允许同时使用不同光谱特征的量子点进行生物定性 、
定量分析。发射光谱不出现交叠 , 或只出现很少交叠 , 所标
记的生物分子的荧光光谱易于区分和识别。而且 , 量子点的
S tokes 位移(激发波长和发射波长峰值的差值)较大(300 ～
400 nm), 能够避免发射谱与激发谱的重叠 ,从而允许在低信
号强度的情况下进行光谱学检测[ 1-2] , 提高检测的灵敏度。
生物医学标本通常有很强的自发荧光背景 , 有机荧光染料的
信号由于其 Stokes 位移小 , 通常被强的组织自发荧光所淹
没 ,而量子点的信号则能克服自发荧光背景的影响 , 从背景
中清楚地辨别。
2.3 量子点抗光漂白能力强 所谓光漂白即由光激发引
起发光物分解而使荧光强度降低的现象。有机荧光染料的
光漂白速率很快 , 而量子点的光漂白作用则远远小得多。
Jaisw al 等[ 3]用 50 mW , 488 nm 激光持续 14 h 照射二羟基硫
辛酸(dihydro xy lipoic acid , DH LA)修饰的量子点 , 其荧光强
度没有丝毫减弱 ,甚至在对量子点进行光激发的开始 , 量子
点的荧光会有所增强。 这种抗光漂白的高度光稳定性对于
需要长时间成像的研究而言极为重要 , 例如细胞内转运过程
的荧光标记或单个膜结合分子的示踪[4] 。
2.4 量子点的荧光寿命长 典型的有机荧光染料的荧光寿
命仅为几纳秒 ,这与很多生物样本的自发荧光衰减的时间相
当。而量子点的荧光寿命可持续长达数十纳秒(20～ 50 ns),
这使得当光激发数纳秒以后 ,大多数的自发荧光背景已经衰
减 ,而量子点荧光仍然存在 ,此时即可获得无背景干扰的荧
光信号。如果采用脉冲激光和时间门测控技术将更有效的
减少图像信号的背景噪音 , 提高检测靶位荧光图像的衬比
度。此外 , 由于量子点的摩尔消光系数(0.5×106 ～ 2×106
M - 1 cm - 1)比通常的有机荧光染料(5×104 ～ 10×104M -1
cm -1)高出 10 ～ 50 倍 ,单一量子点表现出的荧光亮度是有机
荧光染料的 10 ～ 20 倍。
·2033·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 23期 Chin H osp Pharm J , 2008 Dec , Vol 28 , No.23