全 文 ：HPLC测定祛斑养颜颗粒剂中齐墩果酸的含量
魏舒畅 , 　高慧琴 , 　金　辉 , 　李荣科 , 　李转花
(甘肃中医学院 甘肃 兰州 730000)
关键词:祛斑养颜颗粒剂;齐墩果酸;高效液相色谱
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2003)07-0598-02
收稿日期:2002-09-30
基金项目:甘肃省教育科技研究计划项目 9909-05
作者简介:魏舒畅(1969～ ),男 ,甘肃人 ,讲师 ,执业药师 ,主要从事中药新药的开发研制工作。电话:0931-8619986-615.
　　祛斑养颜颗粒剂的药物处方由女贞子 、丹参 、益母草 、川
芎 、当归等药组成 , 具滋补肝肾 ,活血调经 , 养颜祛斑之功效 ,
主要用于治疗面部黄褐斑 ,疗效颇佳。方中女贞子为君药 ,
而齐墩果酸是女贞子中主要活性成分之一 ,因此女贞子中齐
墩果酸含量可作为该制剂质量控制的客观指标之一。 虽然
测定单味中药中齐墩果酸的报道较多 , 但以高效液相色谱
(HPLC)法测定中药复方中齐墩果酸含量尚不多见 , 作者对
祛斑养颜颗粒剂中齐墩果酸进行了含量测定 , 方法简便 , 重
现性好。
1　仪器 、试剂和药品
仪器:P1000型高效液相色谱 , SP440 积分仪 、UV-100
型全自动可变波长紫外检测器(美国产);TG328A 型分析天
平(上海天平仪器厂);2K-82P3 型真空干燥箱(上海市实验
仪器总厂)。
试剂:甲醇(分析纯), 重蒸水。
对照品:齐墩果酸对照品购自中国药品生物制品检定
所 ,批号 0909-9803。祛斑养颜颗粒剂系由甘肃中医学院
中药系制剂室制备。
2　色谱条件[ 1] :
色谱柱:ODS 色谱柱( 4.6mm×250mm 中科院大连化
学物理所产品);流动相:甲醇-水(9∶1);流速:0.8mL·
min-1;检测波长:220nm;灵敏度:0.05AUFs;进样量:20μL。
3　供试液制备[ 2]
精密称取祛斑养颜颗粒剂 5g , 置索氏提取器中加氯仿
100mL加热回流提取 60min , 提取液回收氯仿至干 , 然后用
甲醇溶解定容于 20mL 量瓶中作为供试液 , 以 2 项下方法进
样分析 , 色谱见图 1 , 测定 5 批样品。 含量分别为 963.5 ,
950.8 , 932.8 , 976.6 , 968.9μg·g-1。
4　提取时间考察
以祛斑养颜颗粒剂为研究对象 ,选择不同提取时间测定
齐墩果酸含量。从结果看 ,连续回流提取 60min后齐墩果酸
已提取完全。
5　齐墩果酸溶液稳定性考察
将浓度为 416μg·mL -1的齐墩果酸对照品溶液在 2 ～
8℃保存 ,于第 1 , 2 , 3 , 5 , 7d 进样 ,测得齐墩果酸峰面积 RSD
为 0.4%,表明齐墩果酸溶液避光冷藏在 7d 内稳定。
图 1　样品色谱图
6　进样精密度试验
取浓度为 104.0μg·mL-1齐墩果酸对照品溶液 , 进样 5
次测得峰面积 RSD 为 0.78%。
7　线性关系考察
精密称取齐墩果酸对照品 8.32mg 置 10mL 量瓶中加适
量甲醇溶解后定容 , 作为齐墩果酸贮备液。分别精密量取齐
墩果酸贮备液 0.5 , 1.0 , 2.0 , 5.0mL 于 10mL 量瓶中用甲醇
稀释至刻度 , 摇匀。在前面所述的色谱条件下将 5 种浓度的
对照品溶液进样分析 , 见色谱图 2。以对照品溶液浓度为横
坐标 ,峰面积积分值为纵坐标进行回归计算得回归方程为
Y =37377+328266X(r=0.9918 n =5), 齐墩果酸在41.6
～ 416μg·mL-1浓度范围内线性良好。
图 2　齐墩果酸标准品色谱图
8　方法重复性试验
取同批制作的祛斑养颜颗粒剂 5份 , 制备供试液进样分
析 , 平均含量 X =963.5μg·g-1 , RSD=0.85%。
9　回收率试验
精密称取 3 项下已测含量的祛斑养颜颗粒剂(950.8μg·
g
-1)5 份.每份 0.4g ,准确称定 2.5mg 的齐墩果酸对照品 , 用
甲醇定溶于5m L量瓶分别移取0.7 , 0 .3 , 0.9m L依次加入
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2003 年 7 月
第 25 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2003
Vol.25　No.7
以上样品中 ,挥去甲醇 , 置微型索氏提取器中加氯仿 8mL ,回
流提取 60min ,提取液回收至干 , 加甲醇定容于 2 mL 量瓶中
制成供试液 ,以 2 项下条件进样分析 , 结果见表 1。
表 1　 祛斑养颜颗粒剂回收率试验(n=6)
取样相当齐墩
果酸含量(μg)
加入齐墩果
酸的量(μg)
测出齐墩果
酸的量(μg)
回收率
(%) 平均 RSD
380.20 350 724.36 99.20
379.30 350 716.90 98.30 99.52 1.0%(n)
381.25 150 539.75 101.60
380.69 150 528.35 99.56
381.74 450 821.34 98.75
379.56 450 826.99 99.69
10　干扰情况考察
制作缺女贞子的祛斑养颜颗粒剂 , 然后按照 3 项下操
作 ,制备阴性供试液 , 进样分析。色谱图见图 3。 结果表明
复方中其它成分对女贞子中齐墩果酸的测定无干扰。
11　讨论
齐墩果酸系五环三萜类化合物 ,在女贞子中以游离状态
图 3　阴性对照色谱图
存在 ,故在氯仿中有很好的溶解度 , 因此以氯仿作为提取溶
剂制备供试液既可溶出齐墩果酸 , 又可减少其它成分的干
扰。为检测方法的准确性提供了保障 , 经实验研究证明该方
法可作为祛斑养颜颗粒剂的质量控制方法之一 , 并为生产工
艺条件的改进提供参考指标。
参考文献:
[ 1] 　陈桂云 ,王泽英 ,丁以华 ,等.高效液相色谱法测定三两半药酒
中齐墩果酸含量[ J] .中国现代应用药学杂志 , 2001 , 18(1):61-
62.
[ 2] 　李显奇 ,何新荣 ,李晓蒙.HPLC法测定女贞子中齐墩果酸的含
量[ J] .广东药学院学报 ,1998 , 14(4):256-258.
HPLC测定润肺止咳胶囊中黄芩苷含量
吕　东 , 　杨凤梅
(青海省药品检验所 ,青海 西宁 810000)
关键词:高效液相色谱法;润肺止咳胶囊;黄芩苷
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2003)07-0599-02
收稿日期:2002-07-24
作者简介:吕　东(1963～ ),女 ,山西人 ,副主任药师,主要从事中药检验。电话:0971-8232182.
　　润肺止咳胶囊为中药三类新药 ,由百部(蜜炙)、生地 、麦
冬 、芦根 、黄芩 、杏仁 、枇杷叶(蜜炙)、桔梗 、浙贝母 、甘草 10
味中药经提取制备而成。 具有养阴清热 , 润肺止咳 , 化痰平
喘的功能。在对本品进行质量标准研究中 ,采用反相高效液
相色谱法测定方中黄芩的有效成分黄芩苷含量 ,方法简捷准
确 ,结果可靠 , 为质量标准的制订提供了依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　HP1100 型高效液相色谱仪;Agilent1100 紫外
检测器及数据处理器;HP 化学工作站:SB2200 型超声波清
洗器。
1.2　试剂与药品　黄芩苷对照品(批号 715-200010 , 含量测
定用)由中国药品生物制品检定所提供;润肺止咳胶囊及缺
黄芩阴性对照品由青海大地药业有限公司提供;甲醇为色谱
纯 ,水为超纯水 , 其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:依利特 C18(4.6mm ×250mm ,
5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(44∶56);检测波长:274nm;
流速:1.0mL·min-1;柱温:室温。理论板数按黄芩苷峰计算
不低于 5000。在该色谱条件下 , 供试品 、对照品分离较好见
图 1A-B , 黄芩苷的保留时间为 13.3min。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取黄芩苷对照品20.28
mg , 置 100mL 量瓶中加 50%甲醇制成每毫升含 0.2028mg
的溶液 , 即得。
2.3　供试品溶液的制备　取装量差异项下的内容物 , 研匀 ,
取约 0.5g ,精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入 50%甲醇
50mL , 称定重量 ,超声处理 20min , 放冷 , 用 50%甲醇补足减
失的重量 , 摇匀 ,滤过 , 取续滤液 ,制成供试品溶液。
2.4　阴性对照试验　按质量标准中处方比例和制法配成缺
黄芩的润肺止咳胶囊 , 然后按供试品溶液的制备方法 , 制备
阴性对照品溶液 , 按上述色谱法测定 ,结果表明 , 润肺止咳胶
囊中其他成分对黄芩中的黄芩苷测定无干扰 ,见图 1C。
2.5　线性范围测定　分别精密吸取黄芩苷对照品溶液2 ,
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第 25 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2003
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