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一株螺旋藻溶藻菌的分离、鉴定及
溶藻特性初步研究
季 方1，朱 毅2，郝 睿2，程辉彩1，3，董仁杰1，*
(1.中国农业大学工学院，北京 100083;
2.中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083;
3.河北省科学院生物研究所，河北石家庄 050081)
摘 要:从黄化的螺旋藻体中分离出一株溶藻菌 ES1，经形态、生理生化、16S rDNA 序列分析鉴定为盐单胞菌属
(Halomonas sp.)。该菌对螺旋藻有较好的溶解效果，能在 24h使螺旋藻絮凝成团、黄化死亡，加入 15%体积分数的菌
液 2d后螺旋藻去除率就可达到 70.71%。实验表明，经 0.22μm 的微孔滤膜过滤，高温、低温灭菌处理的滤液，仍能强
烈抑制螺旋藻生长，说明起溶藻作用的是 ES1 菌株的代谢产物，且该代谢产物在高温 121℃和低温－80℃下稳定。ES1
菌株生长速度快，对盐、碱有较强的耐受性，并能通过自身代谢产物调节 pH 至适合其生长的 9.2 左右，该菌的存在会
使螺旋藻在短时间内大量死亡，对螺旋藻的大规模工业化养殖危害极大。
关键词:螺旋藻，盐单胞菌属，溶藻菌
Isolation，identification and characterization
of algicidal bacteria against Spirulina platensis
JI Fang1，ZHU Yi2，HAO Rui2，CHENG Hui－cai1，3，DONG Ren－jie1，*
(1.College of Engineering，China Agricultural University，Beijing 100083，China;
2.College of Food Science and Nutritional Engineering，China Agricultural University，Beijing 100083，China;
3.Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences，Shijiazhuang 050081，China)
Abstract:An algicidal bacteria ES1 was isolated from death Spirulina platensis.On the basis of analysis of its
physiological characteristics and 16S rDNA gene sequence，it was identified as Halomonas sp. The strain had
excellent algicidal effect on Spirulina platensis that could cause the cells to agglomerate，become yellow and dead
in 24h. 70.71% of Spirulina platensis had been removed 2d after addition of the bacterial culture. Under the
laboratory conditions，the growth of Spirulina platensis was strongly inhibited by the filtrate of the bacterial culture，
or by the heated or the refrigerated bacterium cultures，which indicated that the bacterium lysed Spirulina platensis
indirectly and the algicidal factors produced by this strain was of extracellular and thermo－ stable.The strain ES1
grew faster，had better alkali resistance and salt resistance.Also，the pH could be adjusted to 9.2 by itself to be
suitable for the cell growth by extracellular.This sort of bacteria would make Spirulina platensis dead in a short
period，it was harmful to the large－scale industrial production of Spirulina platensis.
Key words:Spirulina platensis;Halomonas sp.;algicidal bacteria
中图分类号:TS210.1 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2012)12－0221－05
收稿日期:2011－09－13 * 通讯联系人
作者简介:季方(1984－) ，女，硕士研究生，研究方向:能源微藻。
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划(2008BADC4B00) ;北京市教
委科学研究与科研基地建设项目(201002910710415，
201002910610409)。
螺旋藻(Spirulina)是一种低等原核丝状蓝藻，因
其营养丰富、全面，极具商业价值而成为当前国内外
开发规模最大的经济微藻之一［1］。螺旋藻在一些不
适合其他生物的高盐碱度极端环境中生长［2］，且易于
养殖和收获，这使得其成为大规模人工养殖的对象。
螺旋藻的工业化生产主要采用开放式户外培养系统
培养［3］，这种培养系统的始建费用和运行费用都较
低，但在生产过程不可避免地会受到其他生物的影
响，而对高盐、高碱培养环境的耐受性使得螺旋藻成
为优势生物，大多数杂菌在此条件下无法生长。虽
然如此，在螺旋藻培养过程中，还是会出现藻体变
黄、絮凝结块，甚至整池藻水体突然变白的污染现
象，这将直接影响到螺旋藻的质量和产量，严重时可
导致藻体的大量死亡。现有的文献报道中，螺旋藻
最主要的生物污染物是小球藻和变形虫［4－5］，细菌和
真菌也对其的生长有着影响［6］。目前，国内外已分离
筛选出许多溶藻菌，其溶藻特性各不相同。其中所
能降解的绿藻种类较多，有小球藻、硅藻、栅藻
222
等［7－8］;能降解蓝藻的较少［9－10］，现研究较多的为微囊
藻属［11－12］;而降解螺旋藻的溶藻菌更无详细报道。本
研究从黄化的螺旋藻体中分离出一株螺旋藻溶藻菌
株，并对其溶藻特性进行了初步研究，以期对螺旋藻
的大规模工业化生产中产生的病害现象提供理论依
据，对蓝藻水华的治理提供相关支持。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
钝顶螺旋藻(Spirulina platensis) 首都师范大
学;溶藻细菌 采用 LB培养基，用 NaOH调节 pH至
9.2;螺旋藻培养 采用 zarrouk 培养基:NaNO3 2.5g /L，
K2HPO4 0.5g /L，MgSO4·7H2O 0.2g /L，CaCl2 0.04g /L，
NaCl 1g /L，FeSO4·7H2O 0.01g /L，EDTA－Na2 0.08g /L，
K2SO4 1g /L，NaHCO3 16.8g /L，A5 溶液 1mL /L，B6 溶
液 1mL /L。
GrodS547 型紫外可见分光光度计 上海凌光;
Sp2 激光扫描共聚焦显微镜 德国 Lexica。
1.2 实验方法
1.2.1 溶藻细菌的分离 溶藻细菌分离自实验室开
放培养的螺旋藻中黄化藻体。细菌分离采用稀释平
板及划线法，具体参考文献［13］:分离得到一株螺旋
藻溶藻菌，记为 ES1。
1.2.2 溶藻细菌鉴定 菌株的形态及生理生化鉴定
参考文献［14］。按 Pitcher法［15］提取总 DNA;以提取
的 DNA 为 模 板，采 用 通 用 引 物 (正 向 27F:
5’－AGAGTTTGATCCTGGCTCAG－3’，反 向 1492R:
5’－GGTTACCTTGTTACGACTT－3’)对 16S rRNA 基
因进行 PCR 扩增。20μL PCR 反应体系为:10 ×
buffer 2μL，dNTPs 4μL，引物各 1μL，Taq 酶 0.2U，
DNA模板 0.4μL。PCR 产物经检测后，将所测得的
序列在 GenBank数据库中进行 BLAST比较。
1.2.3 溶藻菌生长曲线测定 采用比浊法测定溶藻
菌的生长曲线［13］:LB 培养基，接种量 1%，培养温度
37℃，振荡培养(转速 200r /min)。每隔 2h 取样，用
紫外可见分光光度计测菌液在 600nm处的 OD值。
1.2.4 溶藻菌耐盐度和耐碱度生长实验 配制含不
同浓度 NaCl的 LB液体培养基，按 1%的体积比接种
菌液，37℃振荡(200r /min)培养 10h，用紫外可见分
光光度计测定各盐度梯度下的 OD值。
用 HCl 和 NaOH 调节液体 LB 培养基的 pH，接
种 1%体积比的菌液，37℃振荡(200r /min)培养 10h
后，于 700nm处测定各 pH条件下的 OD值。
1.2.5 溶藻实验 将螺旋藻培养至对数生长期，分
别按照不同的体积比投加生长至对数期的 ES1 菌
液，每隔 24h测定其叶绿素 a 的含量［16］;并用显微镜
观察接种菌株 24h后螺旋藻细胞的破碎情况。
螺旋藻只含有叶绿素 a［4］，以叶绿素 a 含量的变
化来考察溶藻菌的溶藻效果［7］，用去除率 η 表征［17］，
公式如下:
η(%)=
C初始叶绿素a含量－C溶藻后叶绿素a含量
C初始叶绿素a含量
× 100
1.2.6 溶藻方式研究 将溶藻菌培养到对数生长期
备用。
a.取一定量的供试菌液不做任何处理;
b.取一定量供试菌液于高压蒸汽灭菌锅中
121℃灭菌 20min，获得高温灭菌处理的菌液;
c.取一定量的供试菌液于－80℃冰箱中反复冻融
3 次，获得低温灭菌处理的菌液。
以上处理所得菌液都在 4000r /min 条件下离心
10min，上清液经 0.22μm的微孔滤膜抽滤 2 次，获得
无菌滤液。取适量无菌滤液进行平板涂步，48h 内无
菌落生长，再按 15%的体积比加入供试藻液中，进行
溶藻实验，每组三个平行，每隔 24h 测定其叶绿素 a
含量，并分析溶藻效果。
2 结果与分析
2.1 ES1 的鉴定结果
ES1 菌落呈乳白色，圆形，凸状隆起，边缘完整，
表面光滑湿润，正反面颜色相同，无芽孢，革兰氏染
色呈阴性;在液体 LB培养基中呈杆状，无运动特性;
兼性好氧。将 16S rDNA 序列经校对后，在 GenBank
数据库中进行 BLAST 相似性搜索，结果表明其与多
株盐单胞菌(Halomonas)有很高的同源性，相似性均
在 98%以上，可以鉴定其为盐单胞菌属(Halomonas
sp.) ，ES1 菌株的显微照片见图 1。目前盐单胞菌属
的溶藻特性还未见报道。
图 1 ES1 溶藻菌的显微照片(× 1000)
Fig.1 The algicidal bacteria under microscopy
2.2 ES1 的生长曲线
溶藻菌在 LB 液体培养基中的生长曲线如图 2
所示。ES1 的迟缓期为 2h，2～8h 处于对数生长期，
8～45h处于稳定生长期，45h 之后进入衰亡期。根据
《微生物学实验》［13］代时计算公式得到 ES1 的 G =
50min，其代时较短，生长速率快，浓度增长快。
图 2 ES1 菌株的生长曲线
Fig.2 Growth curve of ES1
2.3 ES1 的耐盐、耐碱特性
图 3 表明，ES1 能耐受 NaCl 的范围较广，在 0%
～10%的盐浓度下均能生长，最适宜其生长的 NaCl
223
浓度为 1% ～6%。根据实验结果可知 ES1 为兼性嗜
盐菌［18－19］。
图 3 ES1 在不同 NaCl浓度下的生长情况
Fig.3 The growth of ES1 under different NaCl concentration
耐碱度实验表明，ES1 能很好的适应碱性环境，
在 7～10 的 pH范围内均能生长，8～10 是其比较适宜
的培养环境，pH 高于 10 其生长受到明显抑制(图
4)。在 ES1 能生长的 pH 范围内，虽然培养基初始
pH不同，但经过 10h的培养，其最终 pH均稳定在9.2
左右，说明其对 pH具有一定的自我调节能力。
图 4 ES1 在不同 pH下的生长情况
Fig.4 The growth of ES1 under different pH
2.4 ES1 溶藻过程
通过对 ES1溶藻过程的观察发现，加入菌液 3～4d
后，螺旋藻细胞有凝聚现象，藻液浊度降低，明显变黄，
随着时间的推移，凝聚的螺旋藻团明显变小，直至最后
消失。在显微镜下可以明显观察到，加入 ES1菌液后，
螺旋藻细胞壁开始破裂，胞内物质溢出，藻丝断裂，然
后逐步黄化、溶解，最后只剩下细胞碎片(图 5)。
图 5 ES1 作用 24h后螺旋藻的形态变化(× 400)
Fig.5 Morphological changes of Spirulina platensis
at 24h after ES1 infection
2.5 ES1 溶藻效果
不同浓度的 ES1 对螺旋藻的降解效果如图 6 所
示。ES1 菌株对螺旋藻的降解从一开始就产生作用，
加入 ES1 菌株的螺旋藻叶绿素 a 含量一直呈下降趋
势。螺旋藻初始叶绿素 a 含量为 5.59g /L。按 10%的
体积分数投加 ES1菌液时(菌液浓度 7 × 107 个 /mL) ，
对螺旋藻已有明显的降解作用，1d 后叶绿素 a 含量
降为 4.61g /L，去除率达到 30.02%。随着时间的增
加，其叶绿素 a 的含量持续下降，到了第 5d，其叶绿
素 a含量降为 2.00g /L，去除率达到 67.19%。当将菌
液的投加量增加到 15%和 20%时，螺旋藻叶绿素 a
含量在最初 1d 内下降明显，其去除率分别达到
62.01%和 70.81%，从第 3d开始去除率下降变缓，到
第 5d，叶绿素 a的含量分别为 1.547g /L和 1.382g /L，
去除率分别为 74.60%和 77.31%，相比第 2d 的去除
率 70.71%和 70.81%，其去除率只增加了 3.89%和
6.50%。可以看出，ES1 的溶菌效果与其投加量有关，
当投加量达到一定值时，其螺旋藻去除率变化不大。
图 6 ES1 投加量对溶藻效果的影响
Fig.6 Influence of ES1 amounts on algicidal effect
2.6 ES1 的溶藻物质
图 7 是 ES1 菌液及其无菌滤液、经高温灭菌和
低温灭菌的溶藻实验结果。可以看出，菌液处理组
对螺旋藻的降解效果在短时间内最为明显，处理 1d
后，菌液处理组、活菌代谢产物组、高温灭菌处理组
和低温灭菌处理组及叶绿素 a 分别含量降为 2.50、
3.26、4.32 和 3.36g /L，菌液处理组比其他三组的去除
率高出 11.61%、27.71%和 13.10%。随着处理时间
的增加，各实验组降解效果趋于一致，4d 后各实验组
的去 除 率 分 别 为 73.70%、77.70%、73.40% 和
76.40%。实验结果表明，ES1 对藻体溶解起直接作
用的不是菌体，而是其代谢产物，且该物质在高温
121℃和低温－80℃下稳定。
图 7 ES1 菌液经不同方法处理后的溶藻效果
Fig.7 Algicidal effect of ES1 culture medium
after being treated with different methods
3 结论与讨论
分离出一株螺旋藻溶藻菌，经鉴定为盐单胞菌
属。在 LB培养基中 8h 后进入稳定生长期，其代时
为 50min。许多研究证明，细菌溶藻效果与其投加的
初始浓度［20］和生长速率［7］密切相关，而 ES1 的代时
224
较短，可以迅速增加浓度，大量破坏螺旋藻细胞。此
次分离出的 ES1 菌株的代谢产物可以使藻丝在短时
间内大量断裂，藻体长度变短，即使在染菌初期就用
传统方法(250～300 目的筛绢或布过滤［5］)对螺旋藻
进行收获，大部分断裂藻体会被滤出，大大降低了螺
旋藻收获的生物量。
ES1 的耐盐、耐碱范围较广，在盐浓度为
0～10%、pH为 7～10 的环境下均能较好生长。而螺
旋藻生长最适的 pH范围为 8～10.5 之间［4］，最佳盐度
范围为 0.7% ～1.1%［21］，此范围与 ES1 的最佳生长范
围基本相同，且 ES1 在生长过程中，能分泌某些物
质，使溶液 pH稳定在最适合其生长的 9.2 左右。一
旦大规模养殖的螺旋藻染菌之后，不能用调节 pH 和
盐度等方法来杀灭或抑制该细菌。要抑制此类细菌
的生长就需要进行药物筛选实验，找到可以防治 ES1
菌对螺旋藻损伤的抗生素，这还需要进行进一步的
实验验证。
溶藻菌的溶藻方式主要分为直接溶藻和间接溶
藻［22］，现有的报道中，约 30%的溶藻菌的溶菌方式是
直接溶藻，其余 70%是间接溶藻［23］。其中，间接溶藻
又包括以下四种:释放溶藻物质、细菌与藻竞争营养
物质、形成菌胶膜以及进入藻细胞内杀灭藻细
胞［23－26］。本研究中，ES1 培养液的过滤液对螺旋藻仍
有较强的溶藻作用，无需菌体与藻细胞直接接触，故
认为该菌株的溶藻方式可能为分泌某种胞外物质，
且该物质在高温 121℃和低温－80℃下都能保持稳定
的活性。鉴于此物质的稳定性和强效溶藻能力，后
续可以对其代谢产物的成分、是否有毒有害，对其他
藻类有无降解作用等方面进行研究。可以考虑用做
处理蓝藻水华等水体富营养化污染。
因螺旋藻自身生长条件的特殊性，在养殖过程
中不容易受到污染，故国内外对螺旋藻的研究以藻
种选育、培养条件优化等为主，在微生物污染方面的
研究较少，螺旋藻溶藻菌更是鲜有报道。在实际生
产中，螺旋藻养殖多为开放式培养，与养殖环境中的
大气、土壤和水分等直接接触，并无其他防护措施，
发生细菌污染后只能整池弃掉。且许多厂家是通过
总管道连接各个养殖池，有害细菌会在很短时间内
扩展到整个养殖基地，污染所有养殖、加工用具，直
接经济损失将数以万计，这对于一个中型养殖户来
说，几乎是毁灭性的损失。
ES1 菌会迅速使螺旋藻的藻丝断裂，短时间内出
现黄化絮凝现象，在养殖过程中，如出现藻液浓度正
常但收获量明显降低的情况，就可能感染该菌，故控
制螺旋藻的培养条件、注意周围环境的卫生条件，预
防该细菌对藻池的污染，在螺旋藻养殖过程中有着
重要的意义。
参考文献
［1］崔叶洁，胡滨 .螺旋藻多糖的生理功能及其修饰改性研究
［J］.食品工业科技，2010，31(4) :405－407.
［2］Ajayan K V，Selvaraju M. Reflector based chloropHy Ⅱ
production by Spirulina platensis through energy save mode［J］.
Bioresource Technology，2011，102:7591－7594.
［3］Jorge Alberto Vieira Costa，Michele Greque de Morais. The
role of biochemical engineering in the production of biofuels from
microalgae［J］.Bioresource Technology，2011，102:2－9.
［4］胡鸿钧 .螺旋藻生物学及生物技术原理［M］.北京:科学出
版社，2003.
［5］陈峰，姜悦 .微藻生物技术［M］.北京:中国轻工业出版
社，1999.
［6］张加春，张灼，阮东义，等 .云南程海螺旋藻养殖池中污染
菌的研究［J］.水生生物学报，2001，25(3) :257－260.
［7］裴海燕，胡文容，曲音波，等 .一株溶藻细菌的溶藻特性及
其鉴定［J］.中国环境科学，2005，25(3) :283－287.
［8］汪辉，刘兆普，魏微，等 .一株溶藻菌的分离、鉴定及其溶
藻物质的研究［J］.中国环境科学，2008，28(5) :461－465.
［9］Shi S Y，Liu Y D，Shen Y W，et al.Lysis of a pH anizomenon
fos－aquae(Cyanobacteria)by a bacteria bacillus cereus［J］.Biol
Control，2006，39:345－351.
［10］卢兰兰，李根保，沈银武 .溶藻细菌 DC－L14 的分离、鉴定
与溶藻特性［J］.应用与环境生物学报，2009，15(1) :106－109.
［11］王海玉，赵芳，彭谦，等 .溶藻细菌W－04 的筛选及溶藻效
果初探［J］.中国农学通报，2009，25(20) :267－271.
［12］关英红，马军，雷国元，等 .一株溶藻菌株的分离鉴定及
溶藻特性［J］.环境科学学报，2008，28(7) :1288－1293.
［13］沈萍，陈向东 .微生物学实验［M］.第 4 版 .北京:高等教
育出版社，2007.
［14］东秀珠，蔡妙英 .常见细菌系统鉴定手册［M］.北京:科学
出版社，2001.
［15］Preheim L，Pitcher D，Owen R，et al. Typing of methicillin
resistant and susceptible StapHylooccus aureus strains by
ribosomal RNA gene restriction patterns using a biotinylated probe
［J］.Eur J Clin Microbiol Infect Dis，1991，10(5) :428－436.
［16］国家环境保护总局 .水和废水监测分析方法［M］.第四
版 .北京:中国环境科学出版社，2002.
［17］马超，潘伟斌，林敏，等 .3 株溶藻细菌溶藻特性的初步研
究［J］.环境科学与技术，2008，31(10) :47－51.
［18］Kushner D J. Life in high salt and solute concentrations:
halopHilic bacteria［J］.Microbial Life in Extreme Environments.
London:Academic Press，1978，6(2) :317－368.
［19］任培根，周培谨 .中度嗜盐菌的研究进展［J］.微生物学
报，2003，43(3) :427－431.
［20］Zhang H，Yu Z L，Huang Q，et al.Isolation，identification and
characterization of pHytoplankton－lytic bacterium CH－22 against
Microcystis aeruginosa［J］.Limnologica，2011，41:70－77.
［21］曾文炉，丛威，蔡昭铃，等 .螺旋藻的营养方式及光合作
用影响因素［J］.植物学通报，2002，19(1) :70－77.
［22］Mayali X，Azam F. Algicidal bacteria in the sea and their
impact on algal blooms［J］.J Euk Microbiol，2004，51:139－144.
［23］Roth P B，Twiner M J，Mikulski C M，et al. Comparative
analysis of two algicidal bacteria active against the red tide
dinoflagellate Karenia brevisv［J］. Harmful Algae，2008 (7) :
682－691.
［24］Iamura N，I Motoike，N Noda，et al.Argimicin A，a novel anti
(下转第 229 页)
229
的酶中，除嗜热菌 Bacillus caldovelox精氨酸酶最适温
度达到 60℃ 外，其他来源酶的最适温度大多为
30～37℃。由于酶促反应速率受到温度的影响，表现
为一方面当温度升高时，酶促反应速率会加快，另一
方面温度继续升高，会使酶逐渐变性至失活。苏云
金芽孢杆菌的最适反应温度较高，使得它的催化速
率也较其他非嗜热精氨酸酶更高。酶的温度稳定性
表现为:在没有外源 Mn2 +存在的情况下，温度超过
50℃时，酶稳定性明显下降，但随着外源 Mn2 +的加
入，酶的温度稳定性明显提高，酶在 50℃保温 4h 仍
能保留 85%以上的活性。已知来源于原核生物或真
核生物精氨酸酶都是 Mn2 +金属酶，Mn2 +存在于精氨
酸酶的反应活性中心，在催化反应中起到重要作用。
当酶处于较高温度条件下，活性中心的构象会发生
变化，外源 Mn2 +的加入对于稳定酶的活性中心构象
有促进作用，所以可以提高酶的热稳定性。酶的最
适反应 pH为 9.8，在 pH =8 的缓冲液中酶最稳定，除
幽门螺杆菌精氨酸酶的最适 pH 为 6.0，多数精氨酸
酶最适 pH均为碱性，在 9.0～11.0 之间。天然的精氨
酸酶的每个亚基的活性中心存在 2 个或 4 个 Mn2 +，
Mn2 +对于维持酶活性中心的构象是必须的，当用
EDTA 螯合掉活性中心的 Mn2 +后可以导致酶活的
迅速下降。如果在 Mn2 +被螯合除去的酶液中加入
不同的外源二价金属离子，其中 Mn2 +对于大多数来
源的精氨酸酶来说激活作用最强，其次是 Ni2 +。目
前，在采用苏云集芽孢杆菌转化 L－精氨酸生产
L－鸟氨酸的研究中，揭示苏云金芽孢杆菌精氨酸酶
的酶学特性，对于设计改良转化工艺有重要的指导
意义。
参考文献
［1］Ash D E． Structure and function of arginases［J］． American
Society for Nutritional Sciences，2004，134:2760－2764．
［2］Soru E． Purification of bacterial arginase［J］． Journal of
Chromatography，1965(20) :325－333．
［3］Viator R J，Rest R F，Hildebrandt E，et al． Characterization of
Bacillus anthracis arginase:effects of pH，temperature，and cell
viability on metal preference［J］． BMC Biochemistry，2008
(9) :15．
［4］McGee D J，Zabaleta J，Viator R J，et al． Purification and
characterization of Helicobacter pylori arginase，RocF:unique
features among the arginase superfamily［J］． European Journal of
Biochemistry，2004，271(10) :1952－1962．
［5］Zhang Jinyong，Zhang Xiaoli，Wu Chao，et al． Expression，
purification and characterization of arginase from Helicobacter
pylori in apo form［J］． PloS ONE，2011，6(10) :e26205．
［6］Mottram D R． Drugs in sport［M］． New York:Taylor ＆
Francis，2011:265．
［7］Kavalukas S L，Barbul A． Nutrition and wound healing:An
update［J］． Plastic ＆ Reconstructive Surgery，2011，127:38－43．
［8］Demura S，Yamada T，Yamaji S，et al． The effect of L －
ornithine hydrochloride ingestion on human growth hormone
secretion after strength training［J］． Advances in Bioscience and
Biotechnology，2010(1) :7－11．
［9］Uzgare A，Sandra K，Zhang Qiang，et al． Ornithine alpha
ketoglutarate enhances wound healing［J］． Journal of the
American College of Surgeons，2009，209(3) :72．
［10］Adam Z，Stanislaw P，Aleksandra Z，et al． Arginine and
ornithine supplementation increases growth hormone and insulin－
like growth factor－1 serum levels after heavy－ resistance exercise
in strength － trained athletes ［J］． Journal of Strength ＆
Conditioning Research，2010，24(4) :1082－1090．
［11］Maldonado H J，Torres J，Genaro V，et al． Clinical efficacy
of L － ornithine L － aspartate in the prevention of altered oral
glutamine challenge in patients with minimal hepatic
encephalopathy:A pilot study［J］． Gastroenterology，2010，138
(5) :18．
［12］Córdoba J，Mínguez B． Hepatic encephalopathy［J］． Thieme
E－Journals，2008，28(1) :70－80．
［13］Acharya S K，Bhatia V，Sreenivas V，et al． Efficacy of L－
ornithine L － aspartate in acute liver failure:A double － blind，
randomized，placebo － controlled study［J］． Gastroenterology，
2009，136(7) :2159－2168．
［14］Bommarius A S，Drauz K． An enzymatic route to L －
ornithine from arginine － activation，selectivity and stabilization of
L－arginase［J］． Bioorganic ＆ Medicinal Chemistry，1994，2(7) :
617－626．
［15］Soru E． Chemical and immunological properties of B．
anthracis arginase and its metabolic involvement［J］． Molecular
and Cellular Biochemistry，1983，50:173－183．
［16］Zhang Peng，Xu Tao，Zhang Xiao et al． Screening of
bacterium for the conversion of arginine into ornithine by arginase
［J］． Journal of Beijing University of Chemical Technology
(Natural Science Edition) ，2009，36(6) :86－90．
［17］Chinard F P． Photometric estimation of proline and ornithine
［J］． Journal of Biological Chemistry，1952，199:91－95．
［18］黄爱清，苏国成，王璋． L－鸟氨酸快速定量检测方法
［J］． 食品与发酵工业，2005，31(12) :98－102．
［19］Bradford M M． A rapid and sensitive method for the
quantitation of microgram quantities of protein utilizing the
principle of protein－ dye binding［J］． Analytical Biochemistry，
1976，72(2) :248－254．
［20］Patchett M L，Daniel R M，Morgan H W． Characterisation of
arginase from the extreme thermophile ＇Bacillus caldovelox ＇［J］．
Biochimica et Biophysica Acta，1991，1077(3) :291－298．
［21］Jenkinson C P，Grody W W，Cederbaum S D． Comparative
properties of arginases［J］． Comparative Biochemistry and
Physiology，1996，114(1) :
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
107－132．
(上接第 224 页)
－ cyanobacterial compound produced by an algae － lysing
bacterium［J］.J Antibiotics，2000，53(11) :1317－1319.
［25］Mu R M，Fan Z Q，Pei H Y，et al.Isolation and algae－ lysing
characteristics of the algicidal bacterium B5［J］. Journal of
Environmental Sciences，2007(19) :1336－1340.
［26］吴为中，安成才，刘新尧，等 .溶藻细菌(B5)的溶藻效果
与溶藻特征的初步研究［J］.北京大学学报，2003，39(4) :
489－493.