作 者 :姜晓杰;高金亮;祁美荣;徐萌杰;王文杰;李炜
期 刊 :中国生物制品学杂志 2015年 04期 页码:356-359+363
关键词:钝顶螺旋藻;别藻蓝蛋白亚基;基因;原核表达;
摘 要 :目的 克隆钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)α、茁亚基的基因序列,分别构建该蛋白的α和茁亚基的原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达。方法PCR扩增钝顶螺旋藻APC基因(apc)序列,克隆至pGEM-Teasy载体中,测序分析插入片段的正确性。以克隆的apc基因为模板,分别扩增APC的α和茁亚基的编码基因apcA和apcB,测序分析正确后,分别克隆入表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-4T-apcA和pGEX-4T-apcB。将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,IPTG诱导表达,表达产物经Glutathione Sep...