全 文 ：• 论 著 • 2492011 年 12 月第 9 卷 第 36 期 中 国 医 药 指 南
关白附总碱盐抗大鼠房颤作用
汤依群    尹月淼    黄  潞    汪旻晖    于雪莉    徐  静
（中国药科大学临床药学教研室，江苏 南京 210009）
【摘要】目的  观察关白附总碱盐抗房颤作用。方法  雄性 SD 大鼠，随机分组，CaCl2 10mg/mL+ACh 66μg/mL 混合液 iv 诱发大鼠房颤，
连续 7d，于大鼠造模第 4 天起，关白附治疗组 po 5、15、45mg/kg，绝奈达隆 1mg/kg ip，每天 1 次，正常组静脉注射生理盐水 7d。心电
图监测大鼠房颤持续时间及 QTc。7d后，测定大鼠心房肌有效不应期，western-blot法测定心房肌缝隙连接蛋白 Cx40的表达。结果   Ach-
CaCl2 连续静脉注射引起大鼠房颤持续时间逐渐延长，与正常组比，心房有效不应期缩短 (P ＜ 0.01)，心房肌 Cx40含量下降（P ＜ 0.05）。
关白附能有效抑制房颤持续时间，延长心房 ERP，保护心房 Cx40表达。结论 关白附能有效对抗房颤，改善房颤引起的电重构。
【关键词】房颤；电重构；缝隙连接蛋白 40
中图分类号：R541.7+5 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2011）36-0249-03
Effects of Guanfu Total Base on Experimental Atrial Fibrillation
TANG Yi-qun, YIN Yue-miao, HUANG Lu, WANG Min-hui, YU Xue-li, XU Jing
(Department of Clinical Pharmacy, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China)
[Abstract]  Objective  The present study was designed to observe the anti-atrial fibrillation (AF) effects of Guanfu total base salt (GBF). Methods  Male 
SD rats were randomized into 4 equal groups. Rats of control group were administrated physiological saline (i.v.) for 7 days. The others were injected ACh-
CaCl2 (i.v.) for 7 days.GBF treatment group (5,15,45 mg/kg, po.) and dronedarone(1 mg/kg,ip) combined with CaCl2 (10 mg/mL, iv) and ACh (66 μg/mL, iv.) 
mixture from day 4 to day 7.AF duration and ECG parameters were measured. On day 8, all rats were anesthetized and the atriums were immediately excised 
for measuring AERP, the expression of Cx40 protein were detected using western-blot. Results  In model rats, AF duration continually increased from day 1 
to day 7 with ACh-CaCl2 administration. The AERP of model rats was shorter than that of controls . Western-blot showed that in the atrium, Cx40 expression 
was down-regulated after 7 days of AF induction.GBF effectively shortened AF duration, prolonging atrial effective refractory period (AERP) in rats atrial, 
the level of Cx40 expression increased in GBF treatment group. Conclusion  GBF was effective in treating AF , inhibiting atrial electrical remodeling.
[Key words]  Atrial fibrillation; Electrical remodeling; Connexin 40
心房颤动（atrial fibrillation，AF）是临床上最为常见的快速性心
律失常，可引起血流动力学发生改变和脑栓塞等严重并发症，AF已成
为心律失常领域的研究热点。
关白附为中药毛莨科黄花乌头Aconitum coreanum （Levl,） Rapaics
的块根，主治心痛血痹，具有祛风，燥湿，化痰，止痛作用[1,2]，化学
成分主要有关附庚素 （Guanfu base G，GFG），关附甲素 （Guanfu 
base A，GFA），关附壬素 （Guanfu base I，GFI） 等，其中关附甲
素为首次发现的全新结构类型的安全、有效的广谱抗心律失常一类新
药，已获得国家新药证书和生产批文。我们以关白附总生物碱提取物
为有效部位，控制总生物碱含量达50%以上，在国家新药创制重大专
项基金支持下，进行抗房颤口服制剂的开发。
本实验选用尾静脉注射乙酰胆碱-氯化钙混合液制备大鼠心房颤动
模型[3]，结合western-blot实验，观察关白附总碱盐抗房颤作用。
1 材料与方法
受试药：关白附总碱盐，编号2010-0505，（GFI  2.7%，GFA 
82.9%），中国药科大学刘静涵教授提供，乙酰胆碱，决奈达隆，纯
品，Sigma；其余试剂市售，分析纯。
1.1 实验动物和分组
雄性SD大鼠，购自上海西普尔-必凯实验动物中心，合格证号 
SCXK（沪）2008-0016。随机分组，实验设正常，造模，治疗组。 正
常组大鼠10只，iv 生理盐水7d。其余大鼠10%水合氯醛麻醉，尾静脉注
射ACh-CaCl2混合液（0.1gCaCl2+6.6μgACh/10mLH2O，0.1mL/100g），
每天一次，第四天，随机分成①模型组、②关白附总碱盐口服低剂量
（5mg/kg）、③中剂量（15mg/kg）、④高剂量（45mg/kg）和决奈达
隆组（1mg/kg，ip）。药物治疗3d。 
1.2  AF 持续时间测定与ECG 参数的测量
大鼠麻醉，在ECGⅡ监测下静脉注射Ach-CaCl2 诱发房颤，对照
组大鼠麻醉后注射生理盐水，以出现房颤f波及P波消失为典型房颤心
电图，以恢复窦性心律及f波消失，P波出现为房颤终止。计算大鼠造
模后房颤持续时间。于实验第1天，第4天和第7天造模完成30min后记
录II导联心电图，计算QTc。
1.3 大鼠心房肌有效不应期测定 
如文献[4]描述，每组取8只大鼠在实验第8天进行ERP测定。
1.4 Western-blot 法测定大鼠心房组织缝隙连接蛋白Cx40的表达 
造模结束后，取大鼠心房，加入RIPA裂解液（Biouniquer），剪
碎匀浆离心后提取总蛋白。Bradford法定量。样品经SDS-聚丙烯酰胺
凝胶电泳分离，转膜，封闭，4 ℃孵育一抗过夜 （兔抗Cx40一抗，美
国Santa Cruz 公司；鼠抗GAPDH一抗，Bioworld公司） 。
TBST洗膜，二抗室温摇床孵育  （HRP标记山羊抗兔二抗 
Biouniquer公司；HRP标记山羊抗小鼠二抗，北京原平皓生物）。
HRP-ECL法显色（ECL化学发光试剂盒，Biouniquer 公司），X线胶
片感光，扫描，Quantity One 4.6.2 凝胶图像分析软件分析，以目的蛋
白与GAPDH灰度值的比值计算目的蛋白的表达水平，重复三次。
1.5 统计学处理  
采用SPSS 12.0统计分析软件，数据以均数±标准差（χ— ±s）表
示，t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。基金项目：国家新药创制重大专项（2009ZX09103-345）
250 • 论 著 • December 2011, Vol.9, No.36 Guide of China Medicine
2 实验结果
2.1 大鼠尾静脉注射药液（CaCl2 10 mg/mL，ACh 66μg/mL），诱导
出典型大鼠房颤心电图：P波消失，f波出现，R-R间期不等，可自行
恢复窦性心率。连续造模7d，大鼠房颤持续时间逐渐延长，心房ERP
缩短。关白治疗组，房颤持续时间缩短，ERP延长至正常水平，见图
1、图2和表1。
2.2 关白附对房颤大鼠复极参数QTc和左心房ERP的影响
实验结果见表2。大鼠造模7d，左心房ERP缩短，提示电重构形成，
关白附治疗后，心房ERP有效延长，心室复极参数回复到正常水平。
2.3 房颤大鼠心房组织Cx40蛋白表达的变化
与正常组相比，模型大鼠心房肌中Cx40含量下降（P＜0.01），
关白附治疗组，能有效保护Cx40蛋白表达，维持心房电信号同步。
Western 原始图和表达结果如图3所示。
3 讨 论
AF疾病发生发展中存在“房颤致房颤”（AF begets AF）现象[5]，
即房颤持续慢性存在，能够引起心房结构重构和电重构，形成房颤基
质。实验研究显示，心房持续性颤动，可引起心房体积增大、心房纤
维化等结构改变。电重构主要表现为心房有效不应期（atrial effective 
refractory period，AERP）缩短和不应期频率适应性降低。心房发生
电重构后，可促使AF发作频率增多、发作时间延长，甚至不能自行
转复。目前认为，异位兴奋灶只是AF发生的触发机制，而AF得以维
持，有赖于心房电和结构重构的基质即房颤基质[6]。AF电重构成为人
们研究的热点，本实验以左心房ERP值作为电重构功能性指标，观察
关白附抑制房颤引起的电重构作用。
心电图参数中，QT间期反映心室肌复极过程。QT间期受心率影
响较大，心率加快，QT间期缩短。校正QT间期，即QTc，可消除心
率引起的QT间期变化，被认为是衡量心室复极过程较可靠指标。本实
验结果显示，持续房颤刺激，模型组大鼠心室复极加快，QTc缩短。
提示房颤模型大鼠，心室电生理特性适应性改变。QT过度缩短，即
SQT综合症，可诱发室性心律失常，是危险的心律失常发生征兆。关
白附治疗后，可有效延长模型大鼠QTc，恢复心室电生理特性。
细胞间缝隙连接（gap junction，GJ）作为细胞间的一种特殊通道介
导着细胞间电和化学信号的传递，在维持电和机械偶联，以及确保心肌
协调收缩方面起着重要作用[7]。缝隙连接蛋白40（connexin40，Cx40）主
要分布在心房肌，是心房电激动传导的关键蛋白，Cx40表达和功能的改
变，有助于维持局部微折返，导致持续性AF[7]。实验结果提示，关白附
可有效提高房颤引起的Cx40表达下调，回复心房电传导功能。
决奈达隆2009年FDA批准上市，用于预防心房颤动或恢复窦性心
率，预防室性心动过速和心室颤动[8,9]。 本实验结果显示，关白附治
疗房颤作用与决奈达隆接近，本课题组药动学研究显示，关白附口
服片生物利用度大于80%（数据待发表），而决奈口服生物利用度仅
15%，提示关白附口服制剂在抗房颤作用上具有广阔的应用前景，值
得进一步深入研究。
参考文献
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正常大鼠心电图                    大鼠房颤心电图
图1 正常和房颤大鼠II导联心电图
图2 关白附总碱盐对大鼠房颤时间的影响（χ— ±s，n=6）
 western-blot 原始图 数据图
图3 关白附保护心房Cx40蛋白表达
表1 关白附2010至0505（关白1）对房颤大鼠左心房ERP（ms） 
的影响（χ— ±s，n=6）
组别 正常 模型 关白1低 关白1中 关白1高 决奈
ERP 77.4±5.3 65.3±3.6** 78.8±2.7## 80.8±2.3## 81±5.3## 76.3±2.9##
*P＜0.05，**P＜0.01，与正常组比较；# P＜0.05，##P＜0.01，与模
型组比较
表2 关白附 (关1)对大鼠QTc的影响（χ— ±s，n=6）
QTc D1前 D1后 D4前 D4后 D7前 D7后
model 0.178±0.004 0.172±0.004 0.172±0.004 0.17±0.004*## 0.161±0.006## 0.157±0.005*##
关1低 0.168±0.007 0.165±0.007 0.192±0.009## 0.187±0.009**## 0.198±0.009## 0.186±0.008**##
关1中 0.183±0.009 0.174±0.007 0.196±0.006## 0.189±0.008*## 0.204±0.007## 0.184±0.01*##
关1高 0.168±0.003 0.168±0.011 0.193±0.01# 0.178±0.006* 0.211±0.019# 0.193±0.005#
决奈 0.172±0.006 0.171±0.004 0.198±0.006## 0.193±0.006## 0.215±0.007## 0.204±0.006*##
注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs给药前后；##P＜0.01 vs 造模第一天。
• 论 著 • 2512011 年 12 月第 9 卷 第 36 期 中 国 医 药 指 南
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生、煅石膏与赛霉安散促进创伤愈合作用研究
徐  韬    徐雅君    徐先祥    吴雅清    许瑞安
（华侨大学分子药物学研究所&分子药物教育部工程研究中心，福建 泉州 362021）
【摘要】目的  比较研究生、煅石膏及赛霉安散对大鼠创伤愈合的作用。方法  制作大鼠外伤动物模型，用生石膏、煅石膏及赛霉安对创口
进行给药，肉眼观察创伤愈合情况，并对 6天、12d的创口处新生肉芽组织作组织切片，观察创口新生组织生长情况。结果  给药 12d后，
生石膏组创口愈合速度较慢，与对照组没有显著差别，而煅石膏组与赛霉安散组创口恢复速度较快，基本完全愈合。结论  石膏经高温煅
制后生肌功效明显增强。
【关键词】生石膏；煅石膏；赛霉安；创伤愈合
中图分类号：R914.1 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2011）36-0251-02
Effects of Gypsum and Saimei’an Powder on Wound Healing
XU Tao, XU Ya-jun, XU Xian-xiang, WU Ya-qing,XU Rui-an
(Institute of Molecular Medicine, Huaqiao University & Engineering Research Center of Molecular
Medicine, Ministry of Education, Quanzhou 362021, China)
[Abstract]  Objective  To  investigate  the effects of gypsum and Saimei’an powder on wound healing. Methods  Administration of original gypsum, 
burnt gypsum and Saimei’an powder to the wound of rats, the healing process was observed and the tissue slice was examined. Results  Twelve days after 
administration, burnt gypsum and Saimei’an powder had much better wound healing effects than original gypsum. Conclusions  High-temperature calcined 
system significantly enhances the effect of gypsum on wound healing. 
[Key words]  Original gypsum; Burnt gypsum; Saimei’an Powder; Promoting granulation
福建省名牌中药赛霉安散有止血、消炎、收敛、促进肉芽组织新
生及使溃疡面愈合的作用，在外伤等造成皮肤挫伤和皮肤溃疡的病例
中用于局部外敷治疗，疗效肯定[1]。石膏为赛霉安散主要药味之一，
石膏主要成分为含水硫酸钙（CaSO4•2H2O），功能清热泻火，除烦止
渴。煅石膏由生石膏高温炮制而成，功能收湿生肌、敛疮止血。中医
认为生、煅石膏之间药性功效明显不同，本文以大鼠外伤模型，观察
比较生石膏、煅石膏及赛霉安散对创伤愈合的作用，以进一步探讨赛
霉安散的组方应用。
1 材料与方法
1.1 动物
普通级SD大鼠，260±20g，雄性，购自上海斯莱克实验动物有限
责任公司。
1.2 药品
生石膏及赛霉安外用散剂（批号070801）由泉州亚泰制药有限公
司提供；煅石膏（由生石膏于马弗炉内500℃煅制1h[2]）。
1.3 仪器
TS 100倒置显微镜（Nikon公司）。
1.4 方法
1.4.1 大鼠外伤模型的制备与给药
大鼠单笼喂养，室温20～25℃，自由饮食饮水。大鼠腹腔注射3%
戊巴比妥钠0.4mL麻醉后，在整个背部用8%硫化钠溶液脱毛，在脱毛
处常规75%乙醇消毒。次日进行造创手术，每只大鼠造创口4个，沿
脊柱自上而下左右对称，每伤口用手术刀切割直径约为1.5cm 圆形创
口，间距约为2cm，深达肌层，肌层伤口厚度约为0.1 cm。
造模大鼠10只，每只大鼠的4个创口分配为对照组、生石膏组、
熟石膏组和赛霉安组。对照组不作任何处理；生石膏治疗组和煅石膏
治疗组分别均匀撒敷约0.2g样品粉末于创口，将整个创面用药粉完全
覆盖；赛霉安散剂治疗组，将散剂均匀喷于创口，覆盖整个创面。换
药后创口均无菌纱布包扎。隔日换药，连续给药12d，每天肉眼观察
基金项目：泉州市科技计划重点项目 (No. 2007Z41)；福建省生物
医药工程研究生教育创新基地资助项目(No. 06070205) 图1 给药12d创口愈合情况（a. 对照组b. 生石膏组c. 熟石膏组d. 赛霉安组）