全 文 ：StudyonHeavyMetalsinGrowingAreaSoilsandYoungFruitofCitrusgrandis` Tomentosa
ZhongJihong1 , LinLanwen1 , TanJun1 , LinLi2 , HuangLanzhen2 , LiaoGuanrong1
(1.GuangdongKeyLaboratoryofIntegratedControlofAgro-environment, GuangdongInstituteofSoilandEnvironmentalSciences,
Guagzhou510650;2.GuangzhouUniversityofTCM, Guangzhou510405)
Abstract　Objective:TodeterminethestatusofheavymetalscontaminationingrowingareasoilsandyoungfruitsofCitrusgran-
dis.Method:ApplicationofNemerow sindexforheavymetalsassessmentofsoilandyoungfruitofCitrusgrandis, aswelasaccord-
ingtonationalenvironmentalqualitystandardforsoilsandgreentradestandardsofimporting＆exportingmedicinalplants＆prepara-
tions.Result:TheheavymetalscontentofmostofthegrowingareasoilsofCitrusgrandisratesasfirst, andoftherestonesratesas
second.TheheavymetalscontentinyoungfruitsofCitrusgrandisiswithinthelimitationofquantityofcriteria.Conclusion:Theenvi-
ronmentalqualityofgrowingareasoilsofCitrusgrandisinHuazhouCityistotallyingood.
Keywords　Citrusgrandis` Tomentosa ;Heavymetals;Assessment;HuazhouCity
甘木通的离体快繁
邵　玲　余淦新
(肇庆学院生物学系 ,广东肇庆 526061)
　　摘要　本研究初步建立快速培养甘木通组培苗的体系。以幼茎段为外植体 , 最适的诱导愈伤组织的培养基为
MS+NAA0.1mg/L+6-BA0.5 mg/L(单位下同);不定芽诱导和增殖的培养基为 MS+NAA0.05+6-BA0.5,壮苗
生根培养基为 MS+NAA0.1。经炼苗后 ,组培苗移栽成活率达 78%左右。
关键词　甘木通;离体培养;快速繁殖
　　甘木通 ClematisfilamentosaDumn又称丝铁线
莲 ,对治疗高血压及冠心病有较好的疗效 〔1〕。甘木
通作为鼎湖山自然保护区内特有的野生药用植物 ,
在引种驯化上已取得一系列的成功 ,但受地理环境 、
季节气候的影响较大 ,生长速度慢 ,满足不了生产上
对种苗的需求 〔2 ～ 4〕。本研究用组织培养方法 ,为加
快甘木通的繁殖提供有效途径 。
1 　材料和方法
1 ～ 2年株龄的甘木通植株 ,由鼎湖山树木园提
供 。以幼嫩茎段和叶片为外植体 ,以 MS为基本培
养基 ,附加各种生长物质 , pH5.8 ～ 6.0。
从 25cm高植株顶端取完全伸展的叶片 ,自来
水冲洗干净 ,用消毒棉球吸干表面的水分 , 70%乙醇
消毒 20 s,再用 0.1%升汞消毒 5 min,无菌水冲洗 5
次 ,在无菌滤纸上吸干 。
嫩茎先用少许吐温-80浸泡 3 min,流水冲洗干
净 ,用 70%乙醇消毒 20 s,再用 0.1%的升汞消毒 5
min,无菌水冲洗 5次 ,无菌滤纸上吸干。
1.1 　愈伤组织诱导培养基筛选　将叶片或茎段切
成约 0.5 ～ 1 cm2的小块接入各诱导培养基 。每处
理接种 24瓶 ,每瓶接种外植体 1块 ,在光照强度 25
μmol/(m2· s),光照 12h/d,温度 28±1℃条件下培
养(下同)。 30d后观察统计 。
1.2　不定芽分化培养基的筛选　将诱导得到的愈
伤组织块切成约 1.0 cm2见方的小块转接入各种分
化培养基 ,第 30天统计芽的分化情况。
1.3　生根培养基筛选　待丛生芽长到 2 ～ 3 cm
时 ,切下粗壮芽条 ,转接到生根培养基上 。 7 ～ 10 d
后开始发生不定根 ,第 28 d统计根的生长情况 。
2　结果与分析
2.1　甘木通叶片和幼茎段诱导愈伤组织的效果　
愈伤组织诱导见表 1。当 NAA浓度为 0.1时 ,不论
是叶片还是幼茎段外植体 ,均以 6-BA0.5 mg/L的
诱导效果最好 。在两类不同激素组合的培养基中 ,
叶片外植体 ,在 MS+2.4-D0.5的培养基中诱导的
愈伤组织质量较好 ,平均直径达到 0.5 cm,且组织
块致密 ,色泽浅黄 ,但出愈率略低。 9种培养基中 ,
以幼茎段为外植体 、MS+NAA0.1 +6-BA0.5为培
养基 ,愈伤组织的诱导率及生长速度均较理想 ,诱导
率达 100%,适宜于甘木通愈伤组织诱导。
2.2　芽的诱导与分化　幼茎段诱导的愈伤组织 ,
在分化培养基上不定芽分化的结果如表 2。 NAA
0.05+6-BA0.5和 NAA0.1 +6-BA0.5的两种组
合中 ,分化率均在 68%以上。当 NAA0.05 mg/L
时 ,出芽数较多而强壮 。因此 MS+NAA0.05+6-
BA0.5是较为合适的培养基。
·364· 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.05.002
　　表 1 　不同培养基与甘木通愈伤组织诱导
培养基(mg/L)
叶片
愈伤组织数(个) 愈伤组织平均直径(cm) 出愈率
＊
(%)
幼茎段
愈伤组织数(个) 愈伤组织平均直径(cm) 出愈率
＊
(%)
MS+NAA0.1+6-BA0.3 9 0.2 37.5　 12 0.3 50
MS+NAA0.1+6-BA0.5 15 0.3 62.5 24 0.4 100
MS+NAA0.1+6-BA0.7 6 0.1 25.0 12 0.2 50
MS+NAA0.1+6-BA0.9 0 0 0 9 0.2 37.5
MS+2, 4-D0.1 3 0.1 12.5 0 0 0
MS+2, 4-D0.3 6 0.2 25.0 3 0.1 12.5
MS+2, 4-D0.5 11 0.5 45.8 9 0.3 37.5
MS+2, 4-D0.7 11 0.3 45.8 9 0.2 37.5
MS+2, 4-D0.9 9 0.2 37.5 6 0.2 25.0
　　＊注:出愈率 =愈伤组织数 /接种的外植体数 ×100%
　表 2　　不同生长剂组合与甘木通愈伤组织的芽诱导
培养基(mg/L) 愈伤组织数(块)
分化芽块数(块)
分化率(%)
出芽平均数(个 /块)
芽生长情况
MS+NAA0.05+6-BA0.25 16 6 37.5 2.1 +
MS+NAA0.05+6-BA0.5 16 11 68.7 2.7 +++
MS+NAA0.05+6-BA0.75 16 8 50.0 3.1 +++
MS+NAA0.05+6-BA1.0 16 0 0 0 0
MS+NAA0.1+6-BA0.3 16 9 56.3 1.5 ++
MS+NAA0.1+6-BA0.5 16 12 75.0 2.0 +
MS+NAA0.1+6-BA0.7 16 5 31.3 1.7 +
MS+NAA0.1+6-BA0.9 16 5 31.3 1.9 -
　　注:“ +++”强壮 , “ ++”良好 , “ +”一般 , “ -”差
2.3 　生根培养　从丛生芽切下单个芽 ,转接到生
根培养基上 ,以 MS附加 NAA0.1mg/L的培养基诱
导效果最好 ,生根率达 68.8%,且不定根粗壮 ,根数
多 ,详见表 3。
　表 3 　不同浓度的 NAA对甘木通生根的影响
培养基(mg/L) 诱导芽(个) 生根率(%) 平均根数(条)平均根长(cm)平均根粗(cm)
MS+NAA0.05 16 31.3 5 2.1 0.2
MS+NAA0.1 16 68.8 11 2.7 0.3
MS+NAA0.15 16 43.8 7 1.9 0.2
MS+NAA0.2 16 18.8 3 1.6 0.1
2.4 　练苗与移栽　试管苗生根 40 d后 ,即可练苗
移栽。先将试管苗放在自然光下练苗 1周后 ,拧松
瓶盖 ,在室外放置 4 ～ 5天 ,再取出试管苗 ,洗净根部
的培养基 , 在 0.5%, 多菌灵水溶液中浸泡 2 ～ 3
min,移植到经 0.03%高锰酸钾水溶液处理的珍珠
岩和河沙等量混合的基质 。移栽后前几周需每 7 d
浇灌 1 /10 MS营养液 1次 ,并随时注意保温 、保湿。
3周后移栽苗长出新根 ,成活率 78%左右 , 5 ～ 6周
后便可移栽到大田 。
3　讨论
甘木通组培苗的建立 ,可加快种的繁殖速度 ,解
决药材的供求矛盾 ,实现甘木通野生资源的保护和
可持续利用。
本试验表明 ,甘木通叶片和幼茎段外植体的愈
伤组织诱导率存在较明显的差异。以幼茎段在 MS
+NAA0.1+6-BA0.5的培养基上适宜愈伤组织的
诱导 。不定芽的分化能力除与愈伤组织块的质量有
关外 ,也与诱导分化培养基的激素种类和浓度有关 ,
选用 MS+NAA0.05+6-BA0.5,不仅分化率高 ,且
芽条粗壮。而适合于芽条发根的 MS培养基附加
NAA0.1,生根情况较理想。
甘木通组培瓶苗的练苗与移栽需结合实际情况
操作 ,为提高移苗率 ,整个养护过程必须细心管理 ,
尽量减少试管苗的霉变或病害发生。
参 考 文 献
1　梁颂名 , 等 .高血压病与中药治疗 .中药材 , 1999, 22
(2)∶96
2　陈定如 .南亚热带的绿宝石———鼎湖山自然保护区 .
植物杂志 , 1995, (3)∶6
3　魏平 , 等 .鼎湖山树木园四十年 .植物杂志 , 1997,
(1)∶5
4　苏战仪 , 等 .甘木通人工栽培 .中药材 , 2004, 27(9)∶
631
(2004-11-22收稿)
·365·中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
InVitroPropagationofClematisfilamentosa
ShaoLing, YuGanxin
(DepartmentofBiology, ZhaoqingColege, Zhaoqing, Guangdong526061)
Abstract　TherapidpropagationofClematisfilamentosaDumnbytissueclutureshowedthatthebestexplantwasyoungstem.It
alsoshowedthatthecalluscanbeeasilyinducedinMS+NAA0.1mg/L+6-BA0.5 mg/L, themediumforthebudsdifferentiation
andproliferationwasMS+NAA0.05 mg/L+6-BA0.5 mg/L, andthemediumfortherootgrowthwasMS+NAA0.1 mg/L.The
survivaltubeseedlingcanbesuccessfulytransplant.
Keywords　ClematisfilamentosaDumn;Vitroculutre;Rapidpropagation
泽泻白斑病的病原及田间药效试验初报
葛有茂　赵士熙　林光美
(福建农林大学 ,福州 350002)
　　摘要　泽泻白斑病经镜检是由柱隔孢真菌侵染引起的。田间药效试验结果:在发病初期间隔 6天连续用 40%
福星 、30%特富灵 、10%宝丽安和 2%加收米连续用药两次 ,均可收到很好防治效果。
关键词　泽泻;白斑病;病原;药效试验
　　泽泻 Alismaorientale(Sam.)Juzep以块茎入药 ,
主产于福建 、四川 ,素有 “建泽泻 ”和 “川泽泻 ”之称 ,
为地道药材 。危害泽泻生长的主要病害为白斑病 ,
俗称 “炭枯病 ”,每年造成的产量损失可达 15% ～
35%。本课题组在福建建瓯市吉阳镇泽泻 GAP基
地 ,对该病的发病症状 、病原菌 、发生规律以及防治
药剂的筛选作了初步研究 。
1 　症状及病原菌
1.1 　症状　白斑病先在基部的外层叶片 、叶柄上
发生 ,然后逐渐向内层叶片 、叶柄蔓延 ,但 4 ～ 5片心
叶始终不受侵袭 。发病初期在叶片上出现许多红褐
色的小圆形病斑 ,后扩大成直径 1 ～ 2.5 mm,边缘红
褐色 ,中央灰白色 、略凹陷 。病 、健交界处变黄 ,病斑
多时密集 ,互相愈合 ,叶片变黄焦枯。被害叶柄 ,病
斑呈梭形 、黑褐色 、边缘红褐色 、中央略下陷 ,严重时
枯死。高温潮湿条件下 ,病斑中央产生白霉状物 ,即
为病原菌的分生孢子和分生孢子梗。
1.2 　病原及侵染循环　经镜检 ,泽泻白斑病的病
原菌为半知菌亚门 、从梗孢目 、淡色孢科 、柱隔孢属 、
泽泻柱隔孢 Ramulariasp.。病菌分生孢子梗从寄
主气孔伸出 ,有时有小子座 ,菌丝体在 PDA平板上
呈灰白色 ,培养基底色呈淡褐色。分生孢子长椭圆
形至圆柱形 ,两端钝圆 ,无色 , 1个隔膜 ,但未成熟时
不形成隔膜 ,大小为 19 ～ 22 μm×3.2 ～ 3.6μm。
该病的初侵染源为带菌的种子和在病残体上越
冬的孢子。孢子萌发侵染叶片后 ,引起发病 ,在病部
产生分生孢子 ,分生孢子侵染其他叶片引起再侵染。
传播途径主要靠种子 、气流 、雨水 。侵染途径为伤口
和气孔。
1.3　发病特点　病原菌对温度要求不太严格 , 5 ～
30℃均可发病 ,适温为 11 ～ 23℃。由于建瓯市属亚
热带季风气候 ,年平均气温 14 ～ 19.9℃, 10月份平
均气温≤15℃, 11月份 ≤10℃, 12月份 ≤6℃。因
此 ,泽泻在苗期和大田期间均会发病 , 9月中旬到 10
月下旬发病最为严重。在植株下部靠近田面的叶先
侵染发病 ,再向内层叶片扩展蔓延 ,没有发病中心 ,
而是多点随机发生 。
2　药剂防治试验
2.1　药剂　供试药剂共 7种:40%福星(有效成分
氟硅唑 ,美国杜邦公司)、30%特富灵(有效成分氟
菌唑 ,日本曹达株式会社)、12.5%敌力康(有效成
分烯唑醇 ,江苏建湖农药厂)、70%甲基托布津(有
效成分甲基硫菌灵 ,日本曹达株式会社)、10%宝丽
安(有效成分多氧霉素 ,日本科研制药株式会社)、
2%加收米(有效成分春雷霉素 ,日本北兴化学工业
株式会社)及 20%绿帝(有效成分为人工合成的仿
生银杏提取液 ,山东京蓬药业有限公司)。前 4种
为化学农药 ,后 3种为生物农药 ,都属于高效 、低毒 、
低残留农药。
2.2　作物　泽泻于 2003年 9月 3日种植 ,种植密
度为 40cm×40 cm。
2.3　处理 　化学农药设 7个处理 ,小区面积 15
·366· 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月