全 文 ：2011年 1月第 28卷第 1期
January2011, Vol.28, No.1
收稿日期: 2010-10-18
作者简介:黄月纯 (1968-), 女 , 主任中药师 , 硕士研究生导师
基金项目:广东省科技计划项目 (编号: 2009B060700012);广东省中医药管理局课题 (编号:2009256)
石淋通片与广金钱草指纹图谱相关性的初步研究
黄月纯 1 , 　张素中 2 , 　曾彩芳 3 , 　刘翠玲4 , 　魏　刚 4
(1.广州中医药大学第一附属医院 , 广东广州　510405;2.中山大学新华学院 , 广东广州　510520;
3.广州医学院港湾医院 , 广东广州　510700;4.广州中医药大学 , 广东广州　510405)
摘要:【目的】　建立石淋通片高效液相色谱 (HPLC)法指纹图谱研究方法 , 并采用广金钱草指纹图谱评价石淋通片的质
量。 【方法】采用 HPLC法分析 , 色谱柱为 ZorbaxSB-Aq, 流动相为乙腈—体积分数 0.05%磷酸溶液 (梯度洗脱), 检测波
长为 270 nm, 流速为 1 mL/min, 柱温为 40℃。 【结果】不同厂家石淋通片均具有广金钱草的 11个黄酮类共有峰 , 但不同
厂家产品质量有很大差异。【结论】采用指纹图谱与含量测定相结合可作为石淋通片质量控制方法之一。
关键词:石淋通片 /化学;　广金钱草 /化学;　黄酮类 /分析;　指纹图谱;　色谱法 , 高压液相
中图分类号:R284.1　　文献标志码:A　　文章编号:1007-3213 (2011)01-0063-03
　　石淋通片为广金钱草浸膏片 , 具有清热利尿 、
通淋排石的功效 , 用于湿热下注所致的热淋 、 石
淋 , 症见尿频 、 尿急 、尿痛 , 或尿有砂石 、 尿路结
石 、肾盂肾炎见上述症候者[ 1] 。广金钱草主要含黄
酮类 、 生物碱类 、酸性类 、挥发性等成分[ 2-3] , 其
中黄酮类成分是防治结石的有效成分 [ 4] 。石淋通片
的标准 [ 1]只有鉴别项目 , 不能有效地控制其质量。
本研究对石淋通片与前期报道的广金钱草指纹图
谱 [ 5]的相关性进行初步研究 , 并评价不同厂家石淋
通片的质量 , 现报道如下 。
1　仪器与试药
HP-1100高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司),
二极管阵列检测器 (美国安捷伦公司);广金钱草
购自广州致信药业中药饮片厂 、 广州市药材公司经
营部等 , 经广州中医药大学第一附属医院黄月纯主
任中药师鉴定为 Desmodiumstyracifolium (Osb.)
Mer.的干燥地上部分;石淋通片分别为广东万年
青药 厂 产品 (批 号 分 别 为 090824、 090516、
090311、 090207、 081034、 090101、 090925)以及
广西禅方药厂产品 (批号分别为 080701、 090201、
090601);夏佛塔苷标准品 (批号:090719)购自
上海融禾医药科技有限公司;乙腈为色谱纯 , 其他
试剂为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱为 ZorbaxSB-Aq(250 mm
×4.6 mm, 5 μm);流动相为乙腈 —体积分数
0.05%磷酸溶液 , 梯度洗脱:0 ～ 30min, 乙腈为
10%※12%, 30 ～ 40min, 乙腈为 12%※15%, 40
～ 55 min, 乙腈为 15%※ 25%;检测波长为 270
nm;柱温为 40℃;流速为 1mL/min。
2.2　供试品溶液的制备　取石淋通片研细 (糖衣
片先除去糖衣), 精密称取相当于 4片的量 , 加体
积分数 80%甲醇 50mL, 超声 40 min, 滤过 , 滤液
蒸干 , 残渣加体积分数 50%甲醇溶解并定容至
10 mL。
2.3　方法学考察
2.3.1　精密度试验　取供试品溶液 10 μL, 连续
进样 6次 。结果 11个共有峰的相对保留时间与相
对峰面积的 sR值均小于 3.0%, 提示精密度良好 。
2.3.2　稳定性试验　取供试品溶液 10 μL, 分别
在 0、 2.5、 5、 7.5、 10、 24 h进样。结果 11个共
有峰的相对保留时间与相对峰面积的 sR值均小于
3.0%, 提示 24 h内供试品溶液稳定性较好。
2.3.3　重复性试验　取同一批样品 6份 , 分别制
备供试品溶液 , 进样分析。结果 11个共有峰的相
对保留时间与相对峰面积的 sR值均小于 3.0%, 提
示重复性良好。
2.4　样品检测　精密取各供试品溶液各 10 μL,
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广州中医药大学学报
JournalofGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine
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依法进样分析。
2.5　石淋通片指纹图谱的建立与分析
2.5.1　共有峰的确定　根据以上 10批石淋通片分
析结果 , 石淋通片具有与广金钱草相同的 11个共
有峰 , 各样品共有峰的平均保留时间与峰面积见
表 1。
表 1　 10批石淋通片共有峰的平均保留时间与峰面积结果
Table1　Comparisonofcommonpeakareaandthemeanretentiontimeofthepeakfor10batchesofTDS
峰号 t平均保留 /min
A广东
090824 090516 090311 090207 081034 090101 090925
　
A广西
080701 090201 090601
1 20.874 3028.02 3742.16 2900.72 2887.91 3302.85 2657.07 2584.56 199.22 159.61 182.39
2 21.995 959.41 1059.87 821.21 1001.94 1091.58 941.27 873.21 84.16 56.30 58.18
3 26.525 742.46 1219.99 1055.95 755.35 1144.41 1080.15 647.60 63.49 68.34 86.11
4 27.797 1690.74 2235.63 1763.61 1582.91 2031.30 1644.46 1809.71 132.67 95.80 119.63
5 29.428 5106.81 6576.99 5000.93 4736.83 5775.08 4424.28 4786.60 409.57 306.09 350.23
6 30.778 532.29 503.03 410.24 660.33 638.93 401.95 494.65 39.72 41.90 42.74
7 33.739 731.67 931.62 705.99 517.12 802.61 606.70 682.43 25.63 36.81 37.65
8 34.905 1628.51 2186.54 1622.23 1490.43 1812.14 1422.78 1517.29 122.18 74.85 95.72
9 36.884 3071.76 4050.43 2854.45 2845.75 3399.87 2617.22 2917.80 239.95 150.20 178.46
10 38.669 734.24 1017.49 697.79 671.22 888.13 661.04 634.36 51.41 39.02 48.23
11 40.369 1166.61 1616.17 1466.23 1102.08 1385.12 1143.52 1343.36 93.89 68.09 80.72
2.5.2　相似度分析　采用国家药典委员会中药色
谱指纹图谱相似度评价系统软件 (2004A版)计算
相似度 。由于广东万年青药厂与广西禅方药厂石淋
通片的峰面积有很大差异 , 因此 , 分别以两厂家的
样品均值生成指纹图谱模式 , 计算各样品相似度 ,
同时与广金钱草共有模式[ 6]进行相关性初步分析 ,
结果见表 2。广金钱草及不同厂家石淋通片 HPLC
指纹图谱共有模式见图 1 (见彩图页第 105页)。
2.5.3　参照峰的确定 　经夏佛塔苷标准品溶液
(0.45 mg/mL)对照 , 峰 5为夏佛塔苷 , 而且是第
一大峰 , 因此 , 以峰 5为参照峰 (S)计算其他峰
的保留时间 、峰面积与参照峰的保留时间 、 峰面积
的比值 , 得相对保留时间与相对峰面积 , 结果见表
3。夏佛塔苷的 HPLC图谱见图 2。
图 2　夏佛塔苷的 HPLC图谱
Figure2　HPLCofschaftoside
表 2　石淋通片与广金钱草指纹图谱的相似度分析结果
Table2　Similarityanalysisoffingerprintof
TDSandHerbaDesmodiStyracifoli
厂家 批号
相似度
万年青药厂
模式为对照
禅方药厂
模式为对照
广金钱草药材
模式为对照
广东万年 090824 0.999 0.990 0.976
青药厂　 090516 0.999 0.990 0.975
090311 0.997 0.992 0.972
090207 0.997 0.991 0.977
081034 1.000 0.996 0.979
090101 0.997 0.994 0.970
090925 0.996 0.989 0.986
万年青模式 1.000 0.994 0.978
广西禅方 080701 0.993 0.995 0.989
药厂　　 090201 0.987 0.997 0.974
090601 0.989 0.998 0.973
禅方模式 0.994 1.000 0.983
3　讨论
本实验中石淋通片供试品溶液的制备采用不同
体积分数的甲醇溶液进行试验 , 结果体积分数
80%甲醇为溶媒较好。经超声处理 15、 25、 40 min
进行比较 , 结果基本一致 , 确定采用超声处理 25
min的方法 。
按本研究拟定的方法分析了 10批石淋通片 ,
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第 1期
结果均检出广金钱草的 11个黄酮类共有峰 , 不同
样品共有峰的相对峰面积与广金钱草模式的相对峰
面积比较接近 , 相似度亦较高 (大于 0.97), 表明
广金钱草的指纹成分群能在石淋通片体现 , 有一定
的相关性。
表 3　石淋通片与广金钱草指纹图谱模式的
相对保留时间与相对峰面积结果
Table3　Comparisonofrelativeretentiontimeand
relativepeakareaoffingerprintofTDSand
HerbaDesmodiStyracifoli
峰号 t相对保留
A相对峰
万年青药厂
石淋通片模式
禅方药厂石
淋通片模式
广金钱草
模式
1 0.709 0.581 0.510 0.449
2 0.747 0.187 0.185 0.198
3 0.901 0.183 0.208 0.149
4 0.945 0.351 0.326 0.346
5 (S) 1.000 1.000 1.000 1.000
6 1.046 0.101 0.119 0.177
7 1.147 0.136 0.097 0.104
8 1.186 0.320 0.272 0.248
9 1.254 0.597 0.529 0.641
10 1.315 0.145 0.130 0.101
11 1.373 0.254 0.227 0.278
　　通过对不同厂家不同批次石淋通片的指纹图谱
进行分析 , 结果显示同一厂家不同批次产品的质量
较接近 , 但不同厂家石淋通片的共有峰面积测定结
果差异相当大 , 广东万年青药厂的共有峰面积是广
西禅方药厂共有峰面积的 12 ～ 21倍 , 表明 2个厂
家石淋通片的质量有明显差异 , 原因可能与所采用
的药材来源的质量差异或工艺过程的损失等因素有
关 , 有待于进一步探讨 。
本研究结果表明 , 目前市场上不同厂家石淋通
片的质量差异很大 , 现行质量标准 [ 1]不能有效地控
制其质量 , 有必要提高其质量标准。采用指纹图谱
与含量测定相结合的质量控制方法符合石淋通片质
量标准提高的要求 。
参考文献:
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QualityEvaluationofTabelaeDesmodiStyracifoliwithFingerprints
ofHerbaDesmodiStyracifoli
HUANGYuechun1 , 　ZHANGSuzhong2 , 　ZENGCaifang3 , 　LIUCuiling4 , 　WEIGang4
(1.TheFirstAfiliatedHospitalofGuangzhouUniversityofTCM, Guangzhou510405 Guangdong, China;
2.XinhuaColegeofSunYat-senUniversity, Guangzhou510520 Guangdong, China;
3.GangwanHospitalofGuangzhouMedicalCollege, Guangzhou510700 Guangdong, China;
4.GuangzhouUniversityofTCM, Guangzhou510405 Guangdong, China)
Abstract:Objective　ToestablishthemethodofHPLCfingerprintanalysisofTabelaeDesmodiStyracifoli
(TDS), andtoestimatethequalityofTDSwithfingerprintsofHerbaDesmodiStyracifoli.Methods　HPLCwas
performedonZorbaxSB-Aqcolumn.Thechromatographicconditionwasasfolows:acetonitrile-0.05%
phosphoricacid(gradientelution)asamobilephase, detectionwavelengthat270nm, flowratebeing1 mL·
min-1 , andcolumntemperaturesetat40℃.Results　ElevencommonpeaksofflavonoidsfromHerbaDesmodi
StyracifoliwereseparatedinTDS.GreatdiferencewaspresentedinthequalityofTDSfrom diferent
pharmaceuticalfactories.Conclusion　Thecombinedmethodoffingerprintingandcontentdeterminationcanbe
usedtocontrolthequalityofTDS.
Keywords:TABELLAEDESMODISTYRACIFOLI/chemistry;　HERBADESMODISTYRACIFOLI/chemistry;
FLAVONOIDS/analysis;　FINGERPRINTS;　CHROMATOGRAPHY, HIGHPRESSURELIQUID
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