全 文 ：短小芽孢杆菌 ＡＲ０３对烟草赤星病菌和
白粉病菌的防治∗
王　 静１∗∗　 田　 华１，２　 孔凡玉１　 王贻鸿１，２　 张成省１　 冯　 超１
（ １中国烟草总公司青州烟草研究所烟草行业烟草病虫害监测及综合治理重点实验室， 山东青岛 ２６６１０１； ２中国农业科学院研
究生院， 北京 １０００８１）
摘　 要　 采用对峙培养法、凹玻片法、ＬＢ琼脂培养基萌发法测定短小芽孢杆菌 ＡＲ０３ 对烟草
赤星病菌和白粉病菌的抑制作用．结果表明： ＡＲ０３菌液对 ２种病菌的菌丝生长和分生孢子萌
发均有明显的拮抗作用；对赤星病菌的抑制作用表现为：经 ＡＲ０３ 菌液原液 （ ３ × １０８
ｃｆｕ·ｍＬ－１）处理的菌丝隔间变短、肿胀且集结成团，内含物聚集，菌丝顶端生长膨大畸形；经
该菌液处理的赤星病菌分生孢子不萌发或萌发产生畸形芽管，分生孢子变形、肿大，纵横分隔
部分的组织膨胀呈泡状．ＡＲ０３菌液原液、３０倍液和 ２００倍液对白粉病菌分生孢子萌发的平板
抑制率分别为 １００％、９１．４％和 ６９．３％，菌液对分生孢子萌发的破坏作用表现为分生孢子不萌
发，细胞肿胀变形、细胞原生质解体或收缩，孢子内、外壁分离，由于原生质外泄，一些分生孢
子内部呈中空状．温室防治试验结果表明： 不同浓度 ＡＲ０３ 菌悬液处理对烟草白粉病的防治
效果存在显著差异，第二次药后 ７ 和 １５ ｄ，ＡＲ０３ 菌液原液的防治效果分别达到 ８３．８％和
９０．３％，与对照药剂差异不显著；而 １００ 倍稀释液的防效分别为 ７０．０％和 ７３．３％，与对照药剂
差异显著．ＡＲ０３菌株防治白粉病的持效期为 ３０ ｄ以上．
关键词　 链格孢菌； 二孢白粉菌； 短小芽孢杆菌； 拮抗活性
∗中国烟草总公司重点科技项目（１１０２００９０２０６５）和四川省烟草公司科技项目（２０１００３０１３）资助．
∗∗通讯作者． Ｅ⁃ｍａｉｌ： ｗｊｉｎｇ３２３＠ １６３．ｃｏｍ
２０１４⁃１１⁃２４收稿，２０１５⁃０７⁃０１接受．
文章编号　 １００１－９３３２（２０１５）１０－３１６７－０７　 中图分类号　 Ｓ４３５．１２１，Ｓ４７６　 文献标识码　 Ａ
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＡＲ０３ ｏｎ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ ａｎｄ Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ ｏｎ ｔｏ⁃
ｂａｃｃｏ． ＷＡＮＧ Ｊｉｎｇ１， ＴＩＡＮ Ｈｕａ１，２， ＫＯＮＧ Ｆａｎ⁃ｙｕ１， ＷＡＮＧ Ｙｉ⁃ｈｏｎｇ１，２， ＺＨＡＮＧ Ｃｈｅｎｇ⁃ｓｈｅｎｇ１，
ＦＥＮＧ Ｃｈａｏ１ （１Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｐｅｓｔ Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ， Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ＆ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｍａｎａ⁃ｇｅｍｅｎｔ，
Ｑｉｎｇｚｈｏｕ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｃｏｒｐ， Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６１０１， Ｓｈａｎｄｏｎｇ，
Ｃｈｉｎａ； ２Ｇｒａｄｕａｔｅ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８１， Ｃｈｉｎａ） ． ⁃
Ｃｈｉｎ． Ｊ． Ａｐｐｌ． Ｅｃｏｌ．， ２０１５， ２６（１０）： ３１６７－３１７３．
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＡＲ０３ ａｇａｉｎｓｔ Ａｌｔｅｎａｒｉａ ａｌ⁃
ｔｅｒｎａｔａ ａｎｄ Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ． Ｔｈｅ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｗａｙ ｏｆ ｃｏ⁃ｃｕｌｔｕｒｅ
ｏｎ ｐｌａｔｅ， ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｎ ｃｏｎｃａｖｅ ｓｌｉｄｅｓ ａｎｄ ＬＢ ａｇａｒ ｍｅｄｉｕｍ． Ｉｎ ｔｈｅ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３， ａｔ ３×１０８ ｃｆｕ·ｍＬ－１ ｈａｄ ａ ｒｅ⁃
ｍａｒｋａｂｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｈｙｐｈａｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ａ． ａｌｔｅｒｎａｔａ ａｎｄ ｃａｕｓｅｄ
ｈｙｐｈａｅ ｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ， ｓｈｏｒｔｅｒ ａｎｄ ｓｗｏｌｌｅｎ ｎｏｄｅｓ， ｗｉｎｄｉｎｇ ｈｙｐｈａｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ， ａｂｎｏｒｍａｌ ｔｕｂｅｓ ｗｉｔｈ
ｔｉｐｓ ｅｘｐａｎｄｅｄ ｏｒ ｄｅｆｏｒｍｅｄ． Ｃｏｎｉｄｉａ ｄｉｄ ｎｏｔ ｇｅｒｍｉｎａｔｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ ｂｅｃａｍｅ ｓｗｏｌ⁃
ｌｅｎ ｏｒ ｆｏｒｍｅｄ ａ ｒｏｕｎｄ ｓｐｈｅｒｉｃａｌ ｂｕｂｂｌｅ． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅ．
ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ ｗａｓ ９１． ３％ ａｎｄ ６９． ３％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｗｈｅｎ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３ ａｔ １ × １０７
ｃｆｕ·ｍＬ－１ ａｎｄ １．５×１０６ ｃｆｕ·ｍＬ－１ ． Ｃｏｎｉｄｉａ ｔｒｅａｔｅｄ ｂｙ ｌｉｖｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ＡＲ０３ ｂｅｃａｍｅ ｓｗｏｌｌｅｎ， ｄｅ⁃
ｆｏｒｍｅｄ， ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍ ｏｆ ｃｏｎｉｄｉａ ｓｈｒｉｎｋｅｄ， ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ａｎｄ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃｏｎｉｄｉａ
ｗａｌｌ． Ａｎｄ ｓｏｍｅ ｃｏｎｉｄｉａ ｗｅｒｅ ｈｏｌｌｏｗ ｂｅｃａｕｓｅ ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍ ｌｅａｋｅｄ ｏｕｔ ｆｒｏｍ ｉｎｓｉｄｅ． Ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ ｒｅ⁃
ｓｕｌｔｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｉｖｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ＡＲ０３ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ． Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ＡＲ０３ ａｔ ３×１０８ ｃｆｕ·ｍＬ－１ ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｌｙ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｔｏ Ｅ． ｃｉｃｈｏｒａ⁃
应 用 生 态 学 报　 ２０１５年 １０月　 第 ２６卷　 第 １０期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｅｃｏｌｏｇｙ， Ｏｃｔ． ２０１５， ２６（１０）： ３１６７－３１７３
ｃｅａｒｕｍ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ７ ｄａｙｓ ａｎｄ １５ ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｗｏ ｓｐａｙｓ ｂｅｉｎｇ ８３．８％
ａｎｄ ９０．３％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ｏｆ ＡＲ０３ ａｔ ３×１０６ ｃｆｕ·ｍＬ－１ ｗｅｒｅ ７０．０％
ａｎｄ ７３．３％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３ ｈａｄ ａ ｌｏｎｇ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ３０
ｄａｙｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ； Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ； Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ； ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ．
　 　 烟草赤星病（ｂｒｏｗｎ ｓｐｏｔ）和白粉病（ｗｈｉｔｅ ｐｏｗ⁃
ｄｅｒ）是烟草生产过程中主要的两种叶部真菌病害．
赤星病是烟叶成熟期的病害，在烟株打顶后，叶片进
入成熟阶段开始发病，条件适宜病情会逐渐加重，造
成整个叶片破碎而无使用价值，已多次在世界主要
烟区发生并造成严重经济损失［１－２］ ．白粉病是由二孢
白粉菌（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ）引起的一种真菌性
气传病害，病原寄主范围广，病害易识别且分布范围
普遍，在烟草整个生育期均能造成危害，在我国主要
烟区均有发生，由于温棚内相对的高温高湿环境条
件适宜病害发展，与田间条件相比，烟草白粉病在大
棚内扩展迅速且造成产量损失，对烟草生产构成一
定威胁［３］ ．
赤星病、白粉病发病严重时，化学防治可以有效
地控制这两种病害［４］ ．但是过多地依赖化学药剂会
导致病原菌的抗药性和农药残留问题．不断筛选新
的生防因子来控制植物病害可以减轻病害发生程
度，且对生态系统的生物体及其他微生物群落不产
生负面影响［５］ ．利用微生物防治烟草赤星病和白粉
病的研究国内外均有报道，应用于赤星病和白粉病
的生物因子包括生防真菌、生防细菌、生防放线菌及
植物源提取物等；已有科学工作者研究了芽孢杆菌
属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、木霉属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）及放线菌（Ａｃｔｉ⁃
ｎｏｍｙｃｅｔｅ）的次级代谢物对烟草赤星病的拮抗作
用［６－８］；来自真菌拮抗物质已有 ＡＱ１０®和 Ｓｐｏｒｏｄｅｘ®
抗白粉病的生防杀菌剂登记注册并在一些国家商品
化应用［９］；白粉寄生孢（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ ｓｐｐ．）是白粉菌
上一种常见的重寄生菌，在一定程度上能抑制白粉
病的发生．白粉寄生孢的菌丝能够穿透白粉菌的菌
丝并在菌丝内生长，产生分生孢子器、分生孢子和未
成熟的闭囊壳，这些细胞内的真菌寄生物能够抑制
白粉菌孢子形成及细胞质的降解［１０－１１］；粘质沙雷氏
菌（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）Ｂ１５ 被应用于葫芦白粉病的
田间防治试验，并初步取得了较好的防效［１２］；据 Ｓｅｏ
等［１３］报道，大蒜油能够抑制白粉菌孢子的形成，在
温室条件下，大蒜油能显著减轻番茄白粉病发生，防
治效果为 ７１．２％．烟草白粉病的生物防治研究报道
较少，宋双［１４］从秦岭原始森林菌库中筛选到一株产
葡聚糖的云芝菌种，该菌种分泌的云芝葡聚糖对烟
草白粉病菌具有显著的体外钝化和预防作用；目前
尚未有拮抗细菌同时应用于烟草赤星病和白粉病生
物防治的报道．
我们筛选了一株对烟草多种重要病害具有较强
拮抗活性的短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ） ＡＲ０３
菌株，该菌株能够有效防治烟草黑胫病、炭疽病及青
枯病，且能在烟株根际及土壤中定殖兼具促生作
用［１５－１８］ ．为了充分利用该生防菌株防治烟草叶部病
害，本研究测定了该菌株对引起烟草赤星病的链格
孢菌（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ）和白粉病菌的拮抗活性，
并初步研究了温室条件下该菌株对白粉病的防治效
果，以期为该菌株在生物防治领域的进一步研究及
生物防控赤星病和白粉病提供支持．
１　 材料与方法
１􀆰 １　 材料
１􀆰 １􀆰 １ 供试菌株及生长条件 　 供试烟草品种为
Ｋ３２６，苗龄为 ５０ ｄ， 盆栽于中国农业科学院烟草研
究所温室内，用于白粉病菌采集及盆栽拮抗试验．
供试链格孢菌从烟草病叶上分离获得；保存、活
化采用 ＰＤＡ培养基．由于二孢白粉菌不能纯培养，
病原菌保存于自然发病的叶片上．短小芽孢杆菌
ＡＲ０３为中国烟草总公司烟草行业烟草病虫害监测
及综合治理重点实验室自主专利菌株 （ ＺＬ．
２０１１１０１４６６８３．８），细菌活化采用 ＬＢ 琼脂培养基平
板划线法，２８ ℃恒温培养 ２ ｄ．ＬＢ 液体培养基用于
ＡＲ０３ 菌株发酵培养，试验所用培养基参照文献
［１９］．
供试药剂为 １５％三唑酮可湿性粉剂（ＷＰ）由四
川贝尔化工集团生产，稀释 １５００ 倍，用于白粉病室
外防治试验的对照药剂．
１􀆰 １􀆰 ２ 短小芽孢杆菌 ＡＲ０３ 菌液制备 　 将活化的
ＡＲ０３菌株以 １％接种量接种于 ＬＢ液体培养基中 ２８
℃、１２０ ｒ·ｍｉｎ－１培养 ７２ ｈ；将所得细菌培养液于 ４
℃、８０００ ｒ·ｍｉｎ－１离心 ８ ｍｉｎ，上清液经滤膜孔径为
０．２２ μｍ细菌滤器除菌，获得无细胞培养滤液；沉淀
的菌体重悬于无菌的双蒸水（ｄｄＨ２Ｏ）中，用 ｄｄＨ２Ｏ
８６１３ 应　 用　 生　 态　 学　 报　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 ２６卷
将 ＡＲ０３菌悬液以 １０ 倍梯度稀释成一定倍数的稀
释液各 １００ μＬ，用紫外分光光度计检测各稀释液的
ＯＤ６００值，其中 ＯＤ６００ ＝ １ 时，细菌含量为 ３ × １０７
ｃｆｕ·ｍＬ－１，然后根据试验需要选取浓度为 ３ × １０８
ｃｆｕ·ｍＬ－１的 ＡＲ０３菌悬液作为原液备用．
１􀆰 ２　 研究方法
１􀆰 ２􀆰 １ ＡＲ０３对赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发
的抑制试验　 对菌丝生长的影响采用平板对峙法测
定，即分别取 ＡＲ０３ 菌液原液和去菌体后的上清液
按照滤纸条法测定其对赤星病菌的拮抗活性，具体
如下：分别在无菌滤纸条（７ ｍｍ×３ ｍｍ）均匀滴入 ５０
μＬ，按照十字交叉方向小心将滤纸条置于培养皿
中，然后将赤星病菌菌饼等距离接种在滤纸条的空
当中，２８ ℃培养 ４ ｄ，观察生防菌 ＡＲ０３ 对赤星病菌
的拮抗活性；挑取赤星病菌菌落边缘菌丝于光学显
微镜（ＯＬＹＭＰＵＳ Ｅ１００，下同）下镜检．
对赤星病菌分生孢子萌发的抑制试验采用凹玻
片法，吸取 ６０ μＬ 浓度为每毫升含 １×１０６个孢子的
孢子悬浮液与等量的 ＡＲ０３ 菌原液及其 １０ 倍稀释
液混合，滴加在凹玻片中央，对照为等量无菌水与孢
子悬浮液混合，将各处理的凹玻片置于底部铺层湿
滤纸的培养皿内，２８ ℃恒温箱中黑暗培养，８ ｈ 后显
微镜检查分生孢子萌发情况．
１􀆰 ２􀆰 ２ ＡＲ０３对白粉病菌分生孢子萌发的抑制试验
１） ＬＢ 琼脂培养基萌发法．试验设 ３ 个处理浓
度：原液（菌含量为 ３×１０８ ｃｆｕ·ｍＬ－１）、３０ 倍稀释
液、２００倍稀释液．吸取 ２ ｍＬ ＡＲ０３ 菌悬液和无细胞
培养滤液，分别与 １８ ｍＬ、５５ ～ ６０ ℃的 ＬＢ 琼脂培养
基混匀制成含菌平板和无细胞培养滤液平板；加入
等量无菌水的 ＬＢ琼脂平板为对照．轻轻抖动自然发
病的白粉病病叶，使白粉孢子均匀散布于各处理的
平板表面上，２８ ℃黑暗恒温培养 １６ ｈ，用灭菌的刀
片分别切取各处理的菌块（１ ｃｍ×１ ｃｍ）置于洁净的
载玻片上，在显微镜下分别镜检分生孢子萌发情况，
以芽管长度超过孢子直径（短径）一半作为萌发标
准，每个处理镜检 １５０个孢子，并按照以下公式计算
抑制率：
抑制率（％）＝ ［（对照孢子萌发数－处理孢子萌
发数） ／对照孢子萌发数］×１００
２） 喷雾法．将 ＡＲ０３ 拮抗菌菌悬液均匀的喷施
于感染白粉病的烟株叶片上，以雾滴不滴落为准；将
处理的烟苗置于 ２５ ℃、相对湿度 ＲＨ＞８０％的温室
中，对照为清水；１６ ｈ 后用洁净毛笔刷取适量各处
理叶片上的白粉菌孢子至载玻片上，显微镜下观察
孢子萌发情况．
１􀆰 ２􀆰 ３ ＡＲ０３菌液对烟草白粉病的温室防效及持效
期试验　 试验于 ２０１３ 年 ５ 月在青岛市即墨市龙泉
镇石门村中国农业科学院烟草研究所试验基地温棚
内进行，烟草处于 ４ ～ ５ 片真叶苗期．该温棚为病圃，
常年白粉病发生严重，施药时正处于白粉零星发病
期．设 ＡＲ０３ 菌悬液原液、１００ 倍液、１５％三唑酮 ＷＰ
和清水 ４个处理，每处理 ３ 盘烟苗（共 ３０ 株），将药
液均匀喷雾于烟草叶片上，以雾滴不滴落为准．于 ５
月 ８日进行第一次喷施，间隔 ７ ｄ 后调查发病情况
并进行第二次施药，８ ｄ 后第二次调查发病情况．将
处理后的烟苗于温棚内常规条件下（１６ ～ ２７ ℃，ＲＨ
＞８０％，自然光照）培养及管理．每个育苗盘五点法取
样随机调查 ２５株烟苗，参照国家标准烟草白粉病药
效试验准则［２０］的分级标准分级调查并计算病情指
数及防治效果．另外，分别于第二次施药后 ７、１５、２２
和 ３０ ｄ，按照上述取样调查方法取样并计算病情指
数（ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｄｅｘ， ＤＩ）和防治效果 （ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔ，
ＣＥ），同时观察新生叶片的发病情况，分析各处理对
白粉病的持效期．
１􀆰 ３　 数据处理
利用 Ｅｘｃｅｌ ２００３ 软件和 ＤＰＳ 统计软件进行数
据分析，采用邓肯氏新复极差法检验处理间差异显
著性．
２　 结果与分析
２􀆰 １　 ＡＲ０３含菌发酵液对赤星病菌的拮抗作用
平板对峙试验结果显示，ＡＲ０３ 含菌发酵液对
赤星病菌具有很强的拮抗作用（图 １），烟草赤星病
菌菌丝受拮抗菌 ＡＲ０３ 抑制后菌丝形态出现异常，
抑制作用表现为分隔菌丝变粗、肿胀成泡囊状，且颜
色变深，内含物聚集成团，菌丝顶端生长膨大畸形
（图 ２）．挑取畸形的边缘菌丝于 ＰＤＡ 培养基上培
养，不能正常生长．ＡＲ０３菌原液及其 １０ 倍稀释液均
有抑制分生孢子萌发及芽管伸长的作用，对照孢子
均正常萌发且生长芽管（图 ３ａ），而经 ＡＲ０３ 菌液处
理的孢子不萌发或萌发产生畸形芽管，经 ＡＲ０３ 菌
原液处理的分生孢子几乎未萌发且变形，孢子外形
肿大，纵横分隔部分膨胀畸形呈现泡状（图 ３ｂ）；１０
倍稀释液处理的孢子同样出现变形肿大，分隔部分
亦形成圆球状泡，有少部分孢子萌发，但分生孢子萌
发时芽管伸长受到抑制，生长异常（图 ３ｃ）；而 ＡＲ０３
发酵上清液无抑制作用．
９６１３１０期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 王　 静等： 短小芽孢杆菌 ＡＲ０３对烟草赤星病菌和白粉病菌的防治　 　 　 　 　
图 １　 ＡＲ０３菌株对烟草赤星病菌的拮抗活性
Ｆｉｇ．１　 Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３ ａｇａｉｎｓｔ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌ⁃
ｔｅｒｎａｔａ．
ａ） ＡＲ０３发酵液 Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｒｏｔｈ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３； ｂ） ＡＲ０３ 无菌滤
液 Ｔｈｅ ｃｅｌｌ⁃ｆｒｅｅ ｆｉｌｔｒａｔｅ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３． ＣＫ： 对照 Ｃｏｎｔｒｏｌ； ＡＲ０３： 处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．
图 ２　 ＡＲ０３菌株对赤星病菌菌丝形态的影响
Ｆｉｇ．２　 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３ ｏｎ ｔｈｅ ｈｙｐｈａｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ Ａｌｔｅｒ⁃
ｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ．
ａ） 对照 Ｃｏｎｔｒｏｌ （ ＣＫ）； ｂ） 畸形菌丝（标尺 ＝ １０ μｍ） Ｄｅｆｏｒｍｉｔｙ ｏｆ
ｈｙｐｈａｅ （Ｂａｒ＝ １０ μｍ）．
图 ３　 不同浓度 ＡＲ０３菌液对赤星病菌分生孢子萌发的抑制作用
Ｆｉｇ．３　 Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＡＲ０３ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｉｌｕｔｉｏｎｓ ｔｏ ｔｈｅ ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ．
ａ） 对照 Ｃｏｎｔｒｏｌ （ＣＫ）； ｂ，ｃ） ＡＲ０３菌原液与 １０倍稀释液（标尺＝ １０ μｍ） Ｏｒｉｇｉｎａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｌｕｔｅｄ ｂｙ １００ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ＡＲ０３ （Ｂａｒ＝ １０ μｍ）．
２􀆰 ２　 菌株 ＡＲ０３ 菌悬液及发酵上清液对烟草白粉
病菌分生孢子的抑菌活性
琼脂培养基萌发法的试验结果表明（表 １），不
同菌含量的 ＡＲ０３菌悬液对烟草白粉病分生孢子萌
发具有不同程度的抑制作用，ＡＲ０３ 菌原液的抑制
作用最强，对分生孢子的萌发抑制率达到 １００％；随
着稀释倍数的增加抑制能力逐渐减弱，３０ 倍液与
２００倍液的抑制率分别为 ９１．４％与 ６９．３％．培养基法
及喷雾法的菌液对孢子萌发的破坏作用表现为分生
孢子不萌发，细胞肿胀变粗且两端变齐平状，细胞原
生质溶解、解体或收缩，孢子内壁与外壁分离，其中
一些分生孢子由于原生质外泄后，内部呈中空状
（图 ４ｂ、ｃ）；而对照处理的分生孢子正常萌发并产生
芽管 （图 ４ａ）；但 ＡＲ０３的发酵上清液对孢子萌发无
表 １　 短小芽孢杆菌 ＡＲ０３对白粉病菌分生孢子萌发的抑制
作用
Ｔａｂｌｅ １　 Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＡＲ０３ ｏｎ ｔｈｅ
ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅ． ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
处理
菌液 Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ
分生孢子萌发率
Ｃｏｎｉｄｉａ
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ （％）
抑制率
Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ｒａｔｅ
（％）
ＡＲ０３菌悬液
ＡＲ０３ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ
０．０±０．０ｄ １００．０±０．０ａ
３０倍稀释液
３０ ｆｏｌｄ ｄｉｌｕｔｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
５．８±０．８ｃ ９１．３±１．１ｂ
２００倍稀释液
２００ ｆｏｌｄ ｄｉｌｕｔｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
２０．４±１．５ｂ ６９．３±２．６ｃ
ＡＲ０３无菌上清液
ＡＲ０３ ｃｅｌｌ⁃ｆｒｅｅ ｆｉｌｔｒａｔｅ
６６．２±５．４ａ １．５±６．３ｄ
ＬＢ培养基（ＣＫ）
ＬＢ ｍｅｄｉｕｍ （ＣＫ）
６８．０±３．６ａ －
同列不同字母表示不同处理间差异显著（Ｐ＜０．０５） Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎ
ｔｈｅ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ａｍｏｎｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ａｔ
０􀆰 ０５ ｌｅｖｅｌ． 下同 Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
０７１３ 应　 用　 生　 态　 学　 报　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 ２６卷
图 ４　 拮抗细菌 ＡＲ０３对烟草白粉病菌孢子萌发的抑制作用
Ｆｉｇ．４　 Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＡＲ０３ ａｇａｉｎｓｔ ｃｏｎｉｄｉａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．
ａ） 正常萌发的孢子 Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｉｄｉａ； ｂ， ｃ） 畸形孢子 （标尺＝ １０ μｍ） Ｄｅｆｏｒｍｅｄ ｃｏｎｉｄｉａ （Ｂａｒ＝ １０ μｍ）．
表 ２　 ＡＲ０３对大棚烟草白粉病的防治效果
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｏｂａｃｃｏ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ ＡＲ０３ ｉｎ ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
７ ｄ
ＤＩ ＣＥ （％）
１５ ｄ
ＤＩ ＣＥ （％）
２２ ｄ
ＤＩ ＣＥ （％）
３０ ｄ
ＤＩ ＣＥ （％）
ＡＲ０３菌液 Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ＡＲ０３ ２．５０ ８３．８±０．４ａ ２．９５ ９０．３±１．４ａ ３．９８ ８９．５±１．３ａ １１．９７ ７４．０±３．６ａ
１００倍稀释液 １００ ｄｉｌｕｔｅｄ ｔｉｍｅｓ ４．６３ ７０．０±４．１ｂ ８．９２ ７３．３±６．４ｂ １３．２６ ６４．８±９．０ｂ ２１．２８ ５４．５±６．５ｂ
１５％三唑酮 ＷＰ １５％ ｔｒｉａｄｉｍｅｆｏｎ ＷＰ ２．８９ ８１．３±０．５ａ ４．９０ ８５．２±４．８ａ １４．５２ ６１．８±２．２ｂ ２５．５４ ４５．４±８．１ｃ
ＣＫ １５．４５ － ３４．０６ － ３７．９５ － ４７．１２ －
ＤＩ： 病情指数 Ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｄｅｘ； ＣＥ： 防效 Ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔ．
抑制作用．
２􀆰 ３　 ＡＲ０３菌悬液对温棚烟草白粉病的防治效果及
持效期
从表 ２可以看出，第 ２ 次药后 ７ ｄ，各试验组与
对照组的病情指数之间存在差异，菌株 ＡＲ０３ 原液
对白粉病的防治效果为 ８３．８％，而化学药剂 １５％三
唑酮 ＷＰ 的防效为 ８１．３％，两者差异不显著；而其
１００倍液的防效仅为 ６９．９％，与对照化学药剂差异
显著．持效期的测定结果显示，在大棚自然发病条件
下，白粉病的病情随着时间的延长而逐渐加重，第 ２
次药后 １５ ～ ２２ ｄ，菌株 ＡＲ０３ 菌原液的控病效果较
好，白粉病病情基本未增长，防效分别为 ９０．３％与
８９．５％；而其他两个处理的病情增长较快，防效明显
下降，至 ２２ ｄ时，ＡＲ０３原液 １００倍稀释液及对照药
剂 １５％三唑酮 ＷＰ 的防效分别为 ６４．８％与 ６１．８％，
与 ＡＲ０３原液的防效差异显著；第 ２次药后 ３０ ｄ时，
ＡＲ０３菌原液的防效为 ７４．０％，但所处理植株的新生
叶片均未发病，具有一定的保护作用，防效仍好于对
照药剂，且差异显著，而另外 ２ 个处理的防效较差，
仅为 ５４．５％与 ４５．４％，表明 ＡＲ０３菌原液在防治白粉
病时有 ３０ ｄ以上的持效期．
３　 讨　 　 论
在实验室条件下，生防细菌对植物病原真菌的
抑菌作用测定的方法大多采用平板对峙培养
法［２１－２２］和凹玻片悬滴法［２３］，由于烟草白粉病菌具
有活体寄生特性，不能在离体条件下培养，所以不能
采用上述传统方法进行测定，且白粉孢子在水中几
乎不萌发，因此采用琼脂培养基法［２４］和叶片喷雾法
进行室内外生物活性测定．
生防细菌对植物病原真菌病害的防病机制主要
包括抗生、竞争、诱导抗性及寄生等多种方式［２５］，其
中通过分泌胞外代谢物抑制病原的生长和代谢是抗
生作用的主要方式．因此，验证菌株拮抗活性的重要
指标是该菌株的发酵上清液具有抑菌作用，即抗菌
活性物质的提取是通过生防菌株的发酵滤液来完成
的［２６－２８］ ．然而，在本研究中，不同浓度 ＡＲ０３ 菌悬液
对赤星菌菌丝形态、分生孢子萌发及白粉孢子萌发
表现出较强的抑制作用，但其除菌上清液无抑菌活
性；显然本试验结果与上述研究报道不一致，笔者初
步判断原因主要有以下两种：第一，发酵上清液内抑
菌物质的浓度很低，在平板对峙培养中未体现出抗
生作用，针对这一问题，将对发酵除菌上清液进行浓
缩，再进一步验证上清液是否具有抑菌作用；其次，
发酵上清液的抑菌作用可能不是通过胞外抗菌代谢
物来体现的，而是细菌细胞的存在及其直接作用的
结果，目前尚未有相关文献报道这一抑菌机制，因此
ＡＲ０３菌株对病原菌的拮抗机理及其拮抗物质有待
于进一步深入研究．
能否在植株引入点较好定殖是衡量生防菌是否
１７１３１０期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 王　 静等： 短小芽孢杆菌 ＡＲ０３对烟草赤星病菌和白粉病菌的防治　 　 　 　 　
具有开发潜力的重要前提之一．黄有航等［２９］自橡胶
树根际土壤中分离到一株对橡胶树白粉病（Ｏｉｄｉｕｍ
ｈｅａｅｖｅ）有较强拮抗作用的枯草芽孢杆菌 Ｓ４３，该菌
株能在橡胶树叶片上较好的定殖，且随着时间推移，
Ｓ４３菌株在叶片上定殖的数量呈下降趋势；而本研
究中 涉 及 的 ＡＲ０３ 菌 悬 液 （ 浓 度 为 ３ × １０８
ｃｆｕ·ｍＬ－１）防治白粉病的持效期比化学药剂的持效
期长，达到 ３０ ｄ 以上，暗示着自烟株根围土壤中分
离到的 ＡＲ０３菌株亦能够在其自然寄主植株叶片定
殖，抢先占据了有利的生态位点，改变叶围的微生物
群落结构，或与病原菌形成营养竞争，从而有效避免
病原菌侵染，这些可能是生防菌 ＡＲ０３ 对烟草白粉
病具有较好防效的关键因素，在病害流行期应用该
菌株进行防治的效果会优于化学药剂，且无污染、无
残留，能有效保护生态环境．但 ＡＲ０３ 菌原液 １００ 倍
稀释液防治白粉病的持效期较短，究其原因可能是
随着菌含量的降低，已在叶表定殖的微生物与之拮
抗和竞争作用增强，导致 ＡＲ０３ 菌株定殖量减少，因
而后期的防效下降较快．因此，ＡＲ０３ 菌株在烟株叶
片表面的定殖规律及如何阻碍病原菌的侵染还有待
进一步验证．
国内外研究人员已经分离获得了一些短小芽孢
杆菌应用于植物病害生防、造纸业及农药的降
解［３０－３２］ ．前人研究报道的生防菌短小芽孢杆菌菌株
在抗菌谱上均不同于本研究分离获得的 ＡＲ０３ 菌
株，该菌株在室内条件下能够有效抑制赤星病菌和
白粉病菌菌丝生长及孢子萌发；在温棚内能有效减
轻白粉病的发病程度且持效期长，对防治烟草赤星
病和白粉病具有一定生防潜力；同时因其具有较宽
的抗菌谱、繁殖能力强，较强的定殖力，大量发酵后
对烟草主要的根部病害和叶部病害具有较好的应用
价值．植物病害的防治受植物、病原物、生防菌及环
境条件等多因素影响，因此在温室防病研究的基础
上，应进一步测定短小芽孢杆菌 ＡＲ０３ 拮抗菌株与
多种病原菌的靶标位点、作用方式及其田间防效，为
将该菌株更好的应用于烟草生产奠定理论基础．
参考文献
［１］　 Ｚｈｕ Ｘ⁃Ｃ （朱贤朝）， Ｗａｎｇ Ｙ⁃Ｔ （王彦亭）， Ｗａｎｇ Ｚ⁃Ｆ
（王智发）． Ｔｏｂａｃｃｏ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ． Ｂｅｉｊｉｎｇ： Ｃｈｉｎａ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｒｅｓｓ， ２００２ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２］　 ＬａＭｏｎｄｉａ ＪＡ． Ｏｕｔｂｒｅａｋ ｏｆ ｂｒｏｗｎ ｓｐｏｔ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ ｃａｕｓｅｄ
ｂｙ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ ｉｎ Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ ａｎｄ Ｍａｓｓａｃｈｕ⁃
ｓｅｔｔｓ． Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ， ２００１， ８５： ２３０－２３１
［３］　 Ｄａｒｖｉｓｈｚａｄｅｈ Ｒ， Ａｌａｖｉ Ｒ， Ｓａｒｒａｆｉ Ａ． Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｐｏｗ⁃
ｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ （Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ ＤＣ．） ｉｎ ｏｒｉｅｎｔａｌ
ａｎｄ ｓｅｍｉ⁃ｏｒｉｅｎｔａｌ ｔｏｂａｃｃｏ ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｕｎｄｅｒ ｆｉｅｌｄ ｃｏｎｄｉ⁃
ｔｉｏｎｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｏｐ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ， ２０１０， ２４： １２２－１３０
［４］　 Ｗａｎｇ Ｈ⁃Ｃ （汪汉成）， Ｌｉ Ｗ⁃Ｈ （李文红）， Ｘｉａ Ｈ⁃Ｑ
（夏海乾）， ｅｔ ａｌ． Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ａｚｏｘｙｓ⁃
ｔｒｏｂｉｎ ａｎｄ ｐｙｒａｃｌｏｓｔｒｏｂｉｎ ａｇａｉｎｓｔ Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ
ｏｎ ｔｏｂａｃｃｏ ｄｕｒｉｎｇ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｐｅｒｉｏｄ． Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ （农药学学报）， ２０１２， １４
（４）： ４１２－４１６ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［５］ 　 Ｌｅｅ ＫＪ， Ｋａｍａｌａ⁃Ｋａｎｎａｎ Ｓ， Ｓｕｂ ＨＳ， ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｂｌｉｇｈｔ ｉｎ ｒｅｄ ｐｅｐｐｅｒ （ Ｃａｐｓｉｃｕ
ｍａｎｎｕｕｍ Ｌ．） ｕｓｉｎｇ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ． Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ＆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ２００８， ２４： １１３９－１１４５
［６］　 Ｆａｎｇ Ｄ⁃Ｈ （方敦煌）， Ｗｕ Ｚ⁃Ｊ （吴祖建）， Ｄｅｎｇ Ｙ⁃Ｌ
（邓云龙）， ｅｔ ａｌ． Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｉｃ
ｓｐｏｒｅ⁃ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｇａｉｎｓｔ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｒｏｗｎ ｓｐｏｔ．
Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ （植物病理学报）， ２００６，
３６ （６）： ５５５－５６１ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［７］　 Ｔａｏ Ｇ （陶　 刚）， Ｌｉｕ Ｘ⁃Ｚ （刘杏忠）， Ｗａｎｇ Ｇ （王　
革）， ｅｔ ａｌ． Ｒｏｌｅ ｏｆ ｃｈｉｔｉｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ
ｓｐ． ｉｎ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｒｏｗｎ ｓｐｏｔ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ａｌｔｅｒ⁃
ｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ
（中国生物防治）， ２００４， ２０（４）： ２５２－２５５ （ ｉｎ Ｃｈｉ⁃
ｎｅｓｅ）
［８］　 Ｇａｏ Ｆ （高　 芬）， Ｗｕ Ｙ⁃Ｈ （吴元华）， Ｗａｎｇ Ｍ⁃Ｌ （王
梦亮）． Ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ⁃
ｃｅｓ ｃａｃａｏｉ ｓｔｒａｉｎ １８２⁃２ ｏｎ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ． Ｓｃｉｅｎｔｉａ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ Ｓｉｎｉｃａ（中国农业科学）， ２０１３， ４６（２３）：
４９３３－４９４０ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［９］　 Ｌｅｖｅｎｔｅ Ｋ． Ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ｆｕｎｇａｌ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ
ｍｉｌｄｅｗｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｓ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ａｇｅｎｔｓ． Ｐｅｓｔ
Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２００３， ５９： ４７５－４８３
［１０］　 Ｌｉａｎｇ Ｃ （梁 　 晨）． Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ， ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ａｎｄ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ａｍｐｅｌｏ⁃
ｍｙｃｅｓ． Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ （植物病理学报），
２００５， ３５（６）： ２０５－２０６ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１１］ 　 Ｋｉｓｓ Ｌ． Ｎａｔｕｒａｌ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ
ｍｙｃｏｐａｒａｓｉｔｅｓ ｉｎ ｍｙｃｅｌｉａ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｆｕｎｇｉ． Ｎｅｗ
Ｐｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ， １９９８， １４０： ７０９－７１４
［１２］　 Ｈａｂｔｏｍ ＢＴ， Ｍａｒｋ ＤＬ， Ｈａｒｏｌｄ ＪＡ． Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｃｏｎ⁃
ｔｒｏｌ ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｓｉｌｉｃａｔｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ
ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ ｚｕｃｃｈｉｎｉ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ， ２０１４，
７３： ８－１５
［１３］　 Ｓｅｏ ＳＴ， Ｌｅｅ ＪＳ， Ｐａｒｋ ＪＨ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌ⁃
ｄｅｗ ｂｙ ｇａｒｌｉｃ ｏｉｌ ｉｎ ｃｕｃｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｔｏｍａｔｏ． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ
Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ， ２００６， １２： ５１－５４
［１４］ 　 Ｓｏｎｇ Ｓ （宋 　 双）． Ｒａｃｅ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ
Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ ＤＣ ｏｎ Ｔｏｂａｃｃｏ ｉｎ Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖ⁃
ｉｎｃｅ． Ｍａｓｔｅｒ Ｔｈｅｓｉｓ． Ｙａｎｇｌｉｎｇ： Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ａ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉ⁃
ｔｙ， ２０１３ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１５］　 Ｗａｎｇ Ｊ （王　 静）， Ｃｈａｎｇ Ｐ（常　 平）， Ｋｏｎｇ Ｆ⁃Ｙ （孔
凡玉），ｅｔ ａｌ． Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ ａｎｔｉ⁃
ｂａｃｔｅｒｉａ ＡＲ０３ ｉｎ ｒｏｏｔ ａｎｄ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ ｓｏｉｌｓ． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｏ⁃
ｂａｃｃｏ Ｓｃｉｅｎｃｅ（中国烟草科学）， ２０１０， ３１（３）： ４５－４８
（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１６］　 Ｗａｎｇ Ｊ （王 　 静）， Ｚｈａｏ Ｔ⁃Ｃ （赵廷昌）， Ｋｏｎｇ Ｆ⁃Ｙ
（孔凡玉）， ｅｔ ａｌ． Ｄｉｓｅａｓｅ⁃ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ⁃ｐｒｏｍｏ⁃
ｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｇａｉｎｓｔ ｔｏｂａｃｃｏ ｗｉｌｔ．
２７１３ 应　 用　 生　 态　 学　 报　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 ２６卷
Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ （植物保护）， ２００７， ３３（５）： １０３－１０６
（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１７］　 Ｗａｎｇ Ｊ （王 　 静）， Ｋｏｎｇ Ｆ⁃Ｙ （孔凡玉）， Ｑｉｎ Ｘ⁃Ｙ
（秦西云）， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏ⁃ｃｏｎｔｒｏｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＡＲ０３ ａｇａｉｎｓｔ ｔｏｂａｃｃｏ ｂｌａｃｋ ｓｈａｎｋ． Ａｃｔａ
Ｔａｂａｃａｒｉａ Ｓｉｎｉｃａ （中国烟草学报）， ２０１０， １６ （ ５）：
７８－８１ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１８］　 Ｗａｎｇ Ｊ （王 　 静）， Ｋｏｎｇ Ｆ⁃Ｙ （孔凡玉）， Ｃｈｅｎ Ｘ⁃Ｈ
（陈小红）， ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉ⁃
ｌｉｓ ＡＲ０３ ａｇａｉｎｓｔ ｔｏｂａｃｃｏ ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ． Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
（植物保护）， ２０１５， ４１（１）： １０４－１０７ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１９］　 Ｆａｎｇ Ｚ⁃Ｄ （方中达）． Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｆｏｒ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．
Ｂｅｉｊｉｎｇ： Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｒｅｓｓ， １９９８ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２０］　 Ｓｔａｔｅ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｍｏｎｏｐｏｌｙ Ｂｕｒｅａｕ （国家烟草专卖局）．
Ｇｒａｄｅ ａｎｄ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｉｎｓｅｃｔ Ｐｅｓｔｓ
（ＧＢ ／ Ｔ ２３２２２－２００８）． Ｂｅｉｊｉｎｇ： Ｃｈｉｎａ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｐｒｅｓｓ，
２００８ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２１］　 Ｑｉａｏ Ｈ⁃Ｐ （乔宏萍）， Ｈｕａｎｇ Ｌ⁃Ｌ （黄丽丽）， Ｋａｎｇ Ｚ⁃Ｓ
（康振生）． Ｅｎｔｏｐｈｙｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｗｈｅａｔ ａｎｄ
ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｔｏ ｓｏｉｌ⁃ｂｏｒｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ．
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｅｃｏｌｏｇｙ （应用生态学报），
２００６， １７（４）： ６９０－６９４ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２２］　 Ｙａｎ Ｗ⁃Ｒ （严婉荣）， Ｚｈａｏ Ｔ⁃Ｃ （赵廷昌）， Ｘｉａｏ Ｔ⁃Ｂ
（肖彤斌）， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎ
ｐｌａｎｔ ｄｉｓｅａｓｅ ｃｏｎｔｒｏｌ． Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ （基
因组学与生物学）， ２０１３， ３２（４）： ５３３－５３９ （ ｉｎ Ｃｈｉ⁃
ｎｅｓｅ）
［２３］　 Ｗａｎｇ Ｌ⁃Ｈ （王莉衡）， Ｋｅ Ｙ （柯　 扬）， Ｑｉａｎｇ Ｙ （强
毅）， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎ⁃
ｔｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｕｓ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ ＬＨ⁃７ ｆｒｏｍ Ａｌｏｅ
ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ． Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｅｃｏｌｏｇｙ （应用
生态学报）， ２０１４， ２５（４）： １１３０－１１３６ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２４］ 　 Ｊｕｎｅｌｌ Ｌ． Ｅｒｙｓｉｐｈａｃｅａｅ ｏｆ Ｓｗｅｄｅｎ． Ｓｙｍｂｏｌａｅ Ｂｏｔａｎｉｃａｅ
Ｕｐｓａｌｉｅｎｓｅｓ， １９６７， １９： １－１１７
［２５］　 Ｍｅｒｃａｄｏ⁃Ｆｌｏｒｅｓ Ｙ， Ｃ􀅡ｒｄｅｎｓ⁃Áｌｖａｒｅｚ ＩＯ， Ｒｏｊａｓ⁃Ｏｌｖｅｒａ
ＡＶ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉ⁃
ｃａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐｈｏｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｕｓ Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ
ｒｅｉｌｉａｎｕｍ． Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ， ２０１４， ７６： ３６－４０
［２６］　 Ｙａｎ Ｘ⁃Ｑ （颜学勤）． Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ａｎ⁃
ｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ａ Ｓｔｒａｉｎ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｐｕｍｉｌｕｓ． Ｍａｓｔｅｒ Ｔｈｅｓｉｓ． Ｎａｎｊｉｎｇ： Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉ⁃
ｖｅｒｓｉｔｙ， ２０１１ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２７］　 Ｙｕ Ｔ （于　 婷）， Ｓｈａｎｇ Ｙ⁃Ｋ （尚玉珂）， Ｌｉ Ｙ⁃Ｆ （李艳
芳）， ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ
ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ｓｔｒａｉｎ ＢＳＨ⁃４．
Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐｈｙｌａｃｉｃａ （植物保护学报）， ２００９， ３６（１）：
６５－６９ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２８］　 Ｃｈｅｎｇ Ｄ⁃Ｄ （程丹丹）． Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｐｕｍｉｌｕｓ ２２３ ａｓ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ Ｂａｃｔｅｒｉａ ｔｏ Ｒｉｃｅ
Ｓｈｅａｔｈ Ｂｌｉｇｈｔ． Ｍａｓｔｅｒ Ｔｈｅｓｉｓ． Ｈａｎｇｚｈｏｕ： Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉ⁃
ｖｅｒｓｉｔｙ， ２００８ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２９］　 Ｈｕａｎｇ Ｙ⁃Ｈ （黄有航）， Ｔａｎ Ｚ⁃Ｑ （谭志琼）， Ｗａｎｇ Ｙ⁃
Ｈ （王寅寒）， ｅｔ ａｌ． Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｓｏｌａｔｅ
ｆｏｒ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｔｈｅ ｒｕｂｂｅｒ ｔｒｅｅ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ａｎｄ ｉｔｓ
ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｕｂｂｅｒ ｔｒｅｅ ｌｅａｖｅｓ． Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ（植物
保护）， ２０１３， ３９（２）： ７７－８１ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［３０］ 　 Ｓｗａｄｌｉｎｇ ＩＲ， Ｊｅｆｆｒｉｅｓ Ｐ． Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｗｏ
ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ ａｇｅｎｔｓ ｏｆ ｇｒｅｙ ｍｏｕｌｄ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｂｉｏ⁃
ｃｏｎｔｒｏｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １９９８， ８： ４３９－４４８
［３１］ 　 Ｘｕ Ｚ⁃Ｈ （许正宏）． Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
Ａｌｋａｌｉ⁃ｔｏｌｅｒａｎｔ Ｘｙｌａｎａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｍｏｄｅ ｏｆ Ｓｕｂ⁃
ｓｔｒａｔｅ Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ． Ｍａｓｔｅｒ Ｔｈｅｓｉｓ． Ｗｕｘｉ： Ｊｉａｎｇｎａｎ Ｕｎｉ⁃
ｖｅｒｓｉｔｙ， ２００５ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［３２］　 Ｚｈａｎｇ Ｌ⁃Ｚ （张丽珍）． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ａ Ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｍ
Ｄｅｇｒａｄｉｎｇ Ｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｓｔｒａｉｎ ａｎｄ ＧＦＰ Ｍａｒｋｉｎｇ． Ｍａｓｔｅｒ
Ｔｈｅｓｉｓ． Ｔａｉｙｕａｎ： Ｓｈａｎｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， ２００７ （ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
作者简介　 王　 静， 女，１９７５年生，硕士． 主要从事烟草病害
综合治理研究． Ｅ⁃ｍａｉｌ： ｗｊｉｎｇ３２３＠ １６３．ｃｏｍ
责任编辑　 肖　 红
３７１３１０期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 王　 静等： 短小芽孢杆菌 ＡＲ０３对烟草赤星病菌和白粉病菌的防治