全 文 ：幸 Vo l、 9 No .1 2989
上 海 第 二 医 科 大 学 · 学 报
A e t a U ni e v rs i t a t i s M e di e ia ni ls S e e o n d“ S h a ng恤 i
关附甲素对北草乌头碱引起豚 一鼠心肌自发节律的影响
基础部药理教研室 陈红专
中国科学院上海药物研究所 .
顾培丝 章 替 金正均
陈维洲
摘要 用细胞内微电极和微机实时分析技术发现 :关附甲素( G u a n一u f ba s e A , G F A ) 能使豚鼠心室乳
头肌动作电位的 V m a x 和 A P A 降低 . R P 无明显影响 动作电位时程缩短 . 以上作用具有浓度依赖性 ; E R P
相对延长 ; 对北草乌头碱引起的自发节律有明显抑制作用 。
关键词 关附甲素 · 抗心律失常药 动作电位 北草乌头碱
丫
关附 甲 素 (G u a n 一 f u b a s e A , G F A )系关
白附子 ( A c o n t i n u m K o r e a n u m R a y m u n d ) 中
的一种新生物碱① 。 近年来 , 文献②③ 报道
G F A 能 增 加 哇 巴因诱发豚鼠室早 、 室颤和
心脏停搏的用量 ; 明显对抗乌头碱诱发大鼠
心律失常 ; 减低 C a CI : 引起大鼠室颤发生率
和死亡率 , 提高猫 、 兔电刺激 的 致 颤 值 。
G F A 能降低犬浦氏纤维 V m a x 和 A P A 值 ,
延长 E R P 和 动 作 电位时程④ 。 本实验采用
细胞 内微 电极和微机实时 分 析 技 术 , 观察
G F A 对豚 鼠 心室乳头肌动作电位各参数变
化及对北草乌头碱引起的 自发节律的抑制作
用 , 探讨其抗心律失常的机理 。
同一细胞内观察用药前后变化 。
。 有效不应期 (E R )P 测定 : 由微机系统自
动测量 。 每隔 7 次基础刺激发出一次期外刺
激 , 强度为阑强度 2 倍 , 用逐次逼近法搜索
最适点 , 以期外刺激能引起动作电位产生的
最短间隔为 E R P 。 1 分钟内完成测量 , 理论
误差 士 l m s 。
药物 : 关附甲素为白色菱状 结 晶 生 物
碱 , 用生理盐水溶解稀释 。 中科院上海药物
所提供 。
北草乌头碱 (B e i w u t i ne A e o n i t u nt , B A )
是较乌头碱诱发心律失常为强的一类新生物
碱 。 中科院上海药物所提供 。
刁犷 材料和方法
豚 鼠 , 体重 30 。~ 5 0 09 , 性别 不 拘 , 击
昏后迅速摘出心脏 , 选取直 径 < l m m 的 右 `
心室乳头肌 , 置标本槽中 , 用台氏液 ( K cl
5
.
4m M )灌流 , 以 9 5肠 O : + 5 % C O : 饱 和 s
PH 7
·
2一 7 · ` 得度 36 一 37 ℃ 。 待标本稳定
1
.
5小时后 开 女龟寒验 。
记录电极为充以 3 M K C I皱璃微电极 ,
电阻 8 ~ 15 M 。 , 从心肌纤维引出的动作电位经微电极放夫落各后 , 分别输入示波器瑞口微
机实时分析系统⑥ 。 前者作显示和摄片动作
电位用 ; 后.者每分钟打印各动作 电位参数 ,
并定时触发刺激器 (s E N一 7 10 3) , 经隔离器
(S s一 3 02 ) 输出刺薇脉冲 , `频率 1 H z , 波宽
1 m s
, 强度为闭强度的 .1 5倍 。 所 有实验在
结 果
一 、 G F A 对 动作 电位 作用
(一 )量效关系 采用累积给药法 , 观察
不同药物浓度 (1 ~ 10 0 协g /m l) 灌流 30 分钟后
动作电位参数变化 。 浓度为 1昭 /m l 时 , 动作
电位各参数无 明显变化 ;浓度为 1 0林g /m l时 ,
v m a x 已显著降低 ; 随着浓度递增 ( 3 0 , 1 0 0林g
·
/叫 ), vm ax 降低更著 , E D印 (Vm a x 抑制一半浓度〕为 80 , g加 1左右了A队 显著降低 ,
而 R P无明显影响协主要反映超射 (0 5) 下降 ,
动作电位时程 A p D : 。 , A p D 。。 , A p D 。 。 均 显
著缩短 。 结果见附表 , 图 1 .
( 二 )时效关系 当 G F A 5 0协g /m l 加 入
台氏液后 , 药物立即起效 ` 首先出 现 V m ax
降低 。 . 随药物作用时间延长 , v m ax 降 低显
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著 , V m ax 抑制最大效应一半时间为 7 分钟 , 态抑制水平 。 用不含药物的台氏液冲洗后 ,
A P A 及 A P D 。 , A P D 6 。 , A P D . 。 均呈渐进性 各参数又逐渐恢复 (图 2 ) 。
减小。 上述参数在灌流 30 分钟后基本达到稳
附裹 不同浓度 G F A 对耳叹心盆乳头舰动作电位今傲的影呐 (又士S D )
R P
(m v )
A P A
(m v )
V m扭盆
(v/
s )
A P入。
( m s )
A P D 6o
(血 s )
A P D o o
( m s )
E R P
( m s )
对照组
10“ g / m l
30 件g / m l
100“ g / m l
一 88士3
一 88士3
一 87 士3
一 87士3
t P < 0
.
05
125士3
1 24士3.
12 士3* .
116土2. *
244士83
216士78* .
165 士3*8 .
113士29二
125 士25
12 1士26
1 13士 2*4
102士25*
147 士27
143土2 7
13 6士27 .
1 27士2 9 .
153 士25
15 1士26
1 48士2 5.
1 3 6士2护
n = 5 *. P < :0
.
01
R P = 一 09 l ln v A P D Zo 二 068功 5 R P = 一 090m v A P D Zo 二 049m s
A P A = 129m v A P D 6o 二 103 m s A P A = 146m v A P D 6 o = 081m s
V m a x 二 224 v / 5 A P D o o 二 122m s V m a x 二 15v6 / 5 A P D o o = 1 02 m s
图 l 关附甲素对球鼠心室乳头肌动作电位的作用 (上 )及微机打印结果 (下 )
A 对照 B 关附甲素 ( 3 0卜g /m l) 作用30 分钟后
马P
血A201630 0 V/ S
vma
、
1泰 . 0 二
80
.
.
A p与
二 .
260184
10 0
4 0
0 二AP飞。
面面面山面面 . . . . . . . 尝二二
4对照 关附甲紊 冲洗
. . . . . . . . . . . . . . . .一 ~ 士」卜昭 娶附甲素 冲洗 。 m ln图 2 关附甲素 (5卯吕/功 1) 刘乍口 a x和动作电位时程作用的时间过程
V o l
.
9N o
.
2 198 9陈红专等 关附甲素对豚鼠心肌自发节律影响
(三 )R Ep与 Ap D 。 。 关系 ER p和 Ap D , 。
在 G E A 作 用不 同时间过程和不同浓度下均
呈平行缩短 。 用 药 前 后 E R P 一A P D 。 。 回归
线呈显著相关 , 但用药后回归线斜率较小 ,
若 A P D 。 。 缩短相同单位时 , E R P 缩短 用药
后较用药前为小 , 表明 E R P 相对延长 。 图 3
为用药前与O F A (5 O协g /m l) 作用 30 分 钟后的
直线回归 。
二 、 G F A 对 自发节律的影响
当含有 B A (2 5一 5 0“ g / 1 0 0m l ) 台 氏 液灌
流标本后 , 一般 5 分钟左右出现 自发节律 。
自发活动前 , 往往首先在动作电位复极 3相
出现一个小凸起 , 以后逐渐增高而成一去极
化波 , 由此形成自发节律 , 40 ~ 3 0 次 /分不
等 , 持续 20 分钟后加入药物观察 。 多数情况
下 , O F A 浓度 10 “ g /m l时 , 自发节律未见减
少 ; 30 协g加 1时 , 自发节律变慢 , 但时有加
速 ; 50 陀 或 1 0 0 林g /血 时 , 自发节律明显变
慢 , 甚至消失 , 对节律消失的标本再加入一定
量的 B A 又会出现 自发节律 (图 4 ) 。
一 对照
E R卜 .12 2 A P场。 一 24
r 二 0 . 9 8 火 0 . 0 1
,挤之
10() 150 2 0 0卜: R皿, m s
关附甲素 ( 50林g /m l) 用药前后
E R P一 A P D o o 直线回归
姗|耐料竹礁阴
田 4 天阿 甲东坷北早与大燃 5 {斑互日反 “ ,平阴落咧
A
,
B 北草乌头碱 ( 3 7 . 5哆 / 100m l )加入后 7 分钟 , 20分钟 C . D 关附甲素 (50卜g / m l) 用药后 5分钟 . 20分钟
讨 论
快反应心肌动作 电位的 O相上升幅度及
速率主要由快钠通道所携带钠内流所致⑥ ,
若该离子流受阻 , 则 V m a x 和 A P A均降低 。
G F A这种抑制快钠内流作用类似经典 I 类抗
心律失常药① 。
G F A 在一定剂量时能缩短 E R P 和动作
电位时程 。 不应期主要反映快钠通道失活门
h 开放这一复活过程⑧ , 由于失活门 h 的开
关主要是电位依赖性 , 而动作电位时程反映
膜电位的恢复时间。 因此 , E R P 往 往 随动
作电位时程作相应的缩短和延长 , 两者呈显
著相关 , 但 由于两者所形成机理各不相同 ,
其缩短或延长程度不同 , G F A 可 能 同 时相
对减慢钠通道的复活过程而使 E R P 相 对 延
长 。 G F A 使犬浦氏纤维动作电位时 程 延 长
④ , 可能与动物种类 、 细胞类型不同而组成
动作电位的离子流性质不同致使药物作用差
异有关 。
B A 是 较乌头碱诱发心律失常为一强新
生物碱⑨ 。 目前认为乌头碱引起心肌 自发节
律是由于使心肌细胞维持数值较大的稳态钠
电导 , 即促进钠离子内流 , 而导致 自发活动 ,
对其他离子流无影响L 。 G F A 能 明 显抑制
B A 引起的自发节律 , 表明 G F A 也 能 抑制
B A 诱发的钠离子内流 。 此外 , G E A 对 B A
的抑制存在一定剂量依赖关系 , 且两者 化学
结构类似 , 即 G F A 属 C 20 二菇生物 碱 , 而
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.
9 No
.
1 29 89 冬
乌头碱类属 C19 二菇生物碱 , 有理由推测两
者可能作用于同一受体并涉及受 体 占领 过
程 , 值得进一步探讨 。
综上所述 , G F A 抗 心 律失常机理可能
主要通过阻断快钠通道 , 抑制钠离子内流 ,
使 v m a x 下降 , 传导速度降低 , 加之相对延
长 E R P , 使单向传导阻滞转变为双相 阻滞 ,
从而发挥制止折返型心律失常的作用 。
参 考 文 献
① 刘静涵 , 等 . 中国乌头之研究 . 巾草药 1981 ;
12 : 1
② 后德辉 , 等 。 关附甲素对实验性心律失常的作用 。
南京药学院学报 198 1; (2 ) : 68
① 陈维洲 , 等 . 关附甲素的抗心律失常作用 . 中国
药理学很 1 983 ; 4 : 247
④ 章鲁 , 等 . 关附甲素对犬心浦肯野氏纤维动作电
位的作用 . 中国药理学报 1986 ; 7 : 2时
⑥ 章鲁 , 等 . 心肌细胞动作电位的自动测量及实时
分析 . 生物医学工程学杂志 19 86 ; 3 : 252
⑥ F o z z ar d H A , B e e le r G W . T h e v o l ta g e
c la m P an d e a r d i a e e l e c t r o Ph y s i o l o g y
.
C ir e
R e s 1976 ; 37 : 403
① H a u s w i r t h O , S in g h B N . OI o i e m e e h a -
n i s m s 纽 h e盯 t m u s e l e i n 此 l a t i o n t o t h e
g e n e s i s an d th e P h ar m a e o l o g i e a l e o n t r o l
o f e a r d i a
e a r r h y t h m a s
.
P h a rm a e o l R e v
1979 ; 30 : 5
⑧ C a r m e l i e t E . C ar d i a e t r叭 s m e m b r a n e e
P o te n t i a l s a n d m e t a b o l i s m
.
C i r c R e s
1978 ; 42 : 577
⑥ 鱼月丽 , 等 。 乌头碱及其 5种同系物诱发心律失
常作用的比较。 中国药理学报 1981 ; 2 : 173
L P e P e r K , T r au t w e i n W . T h e e f f e e t o f
a e o n i t i n e o n t h e m e位b t a n e e e u r t e n t i n
e a r d i a e m u s e l e
.
P f 1O g仃 , 5 A r e h G e s P h y -
5 10 1 1967 : 296 : 3 28
( 19 88年5月 17日收稿 )
丫
E f f e e t s o f G F A o n A e it o n P o t en it a is o f V e n tr ic u la r
P a P i l la r y M u s e le s o f G u i n e a P ig s a n d
A r r hy t hom g en ic A
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C h e n H o n g z h u a n
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Sha 咋g介a 玄命 e o作 d M己d ica l U n i v er s i t y , S h a n g九a 云 一斗心
T h e ef f e e t s o f G u a n才u b a s e A ( G F A ) o n v e n t r i e u l a r P a P i l l a r y mu s e l e s o f g u ien a
P i g s w e r e s t u d i e d u s i n g g l a s s一m i e r o e l e e t r o d e et e h n i q u e a n d m i e r o e o m P u t e r o -n l i n
e
a n吐 y s i s . G F A e o u l d er d u ce t he a e t i o n P o t e n t ial
d e P o l a r i z a t i o n a n d a e t i o n P o t e n t i a l d u r a t i o n
b u t h a d l es s e f f e e t o n t h e r e s t i n g P o t e n t i a l
.
I n a
T h e
r e l a t i v e l y P r o l o n g e d
.
G F A e o u ld a l s o i n h i b l r
B e iW U t i讹 .
K e y w o r d s G F A a n t i a r r h y t il m i e a郎 n t s
a m P l i t i t u d e
,
m a x iln u m ar t e o f
e o n c e n t r a t i o n 一d e P e n d e n t m a n n e r ,
e f f e c t i v e r e f r a e t o r y Po r i o d w a s
the a r r h y thm o ge n i e
a e t i o n o f
a e t i o n P o t e n t i a l s B e iw u t i加 沐
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