全 文 :吉林农业大学学报 2000 ,22(2):34 ~ 37
Journal of J ilin Agricultural Universi ty
砂地柏提取物对棉铃虫生长
发育的影响初探
刘建宏1 段立超2 张 兴3 段立颖4
(1.成都军区联勤部军事医学研究所 昆明 650032;2.东北师范大学 长春 130024;
3.西北农业大学无公害农药研究中心 陕西杨陵 712100;4.吉林农业大学 长春 130118)
摘 要:利用甲醇和石油醚两种溶剂对砂地柏种子进行连续抽提 ,并跟踪测定了各组分对棉铃虫生长发育的
影响 。结果表明:各处理的幼虫体重增加量均较对照低。从第 3 天至第 13 天 ,各处理组之间及和对照组之间
差异显著。各处理的总校正死亡率均低于 35%。经甲醇残组分处理的幼虫 , 其幼虫期与对照相比延长了
7 ~ 9 d , 其化蛹率仅为 64.71%和 55.56%,蛹重与对照相比差异显著。
关键词:砂地柏 棉铃虫 生长发育
中图分类号:S482.39 文献标识码:A 文章编号:1000-5684(2000)02-0034-04
The Effects of Sabina vulgris Extractives on
Development of Cotton Bollworm
LIU Jian-hong1 , DUAN Li-chao2 , ZHANG Xing3 ,DUAN Li-ying4
(1.The Insti tute of Mili tary Medicine of Chengdu Mili tary Region , K unm ing 650032;2.
Northeast Normal University , Changchun 130024;3.Center of Nonpublic Hazard , Northwest
Agricul tural University , Yangling 712100;4.J il in Agricultural University , Changchun
130118)
Abstract:Some act ive components from Sabina vulgris were ext racted successively w ith both
methanol and mineral ether.Their ef fect on cot ton bollw orm , Heliothis armigera was tested in
laborato ry.The results showed that the treatment group significant difference in 3rd day and 13th
day.Each general corrected mortality is less than 35%.The treatment of methanol remains is no-
ticeable.It s larva period is about 7 ~ 9 day s later than the contrast.The pupating rate is 64.71%
and 55.56%.The pupa weight is much lighter than the contrast.
Key Words:Sabina vulgris;Heliothis armigera;development
近十多年来 ,从植物中寻找和发现可干扰昆
虫生长发育和行为的新型特异性杀虫活性物质并
用于 IPM 的研究越来越受到人们的重视[ 1] 。砂
地柏(Sabina vulgris)是新发现的一种高效杀虫
植物[ 2] 。其种子提取物对害虫药效高 ,作用机制
特殊[ 3~ 5] 。此项工作对于从砂地柏中进一步分
离鉴定杀虫活性物质提供了依据。
基金项目:国家自然科学基金资助项目
作者简介:刘建宏 ,男 , 1970年出生 ,硕士 ,助研 ,主要从事害虫防治剂方面的研究
收稿日期:1999-12-16
DOI :10.13327/j.j jlau.2000.02.007
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试虫 由棉田采回棉铃虫(Heliothis
armigera(Hubner))虫种 ,在养虫室中用人工饲
料饲养 1代以上 ,挑取发育良好的 3 龄中期幼虫
供试 。
1.1.2 供试植物样品 为采自甘肃张掖的砂地
柏种子 ,在 60℃的鼓风烘箱中风干后粉碎 ,通过
孔径为 0.35 mm 筛 ,冷贮备用 。
1.2 试验方法
1.2.1 各组分的制备 利用水蒸气蒸馏法除去
精油 ,再用甲醇和石油醚两种溶剂进行连续抽提 ,
抽提流程见图 1[ 6] 。
图 1 砂地柏中杀虫活性物质的抽提流程
Fig.1.The process of extracting active components from Sabina vulgris
1.2.2 对棉铃虫的生物活性测定 采用饲喂称
重法[ 7] 测定各组分对棉铃虫生长发育的影响。
分别取各组分 2.5 mL 、5 mL ,加入 100 g 人工饲
料中 ,混和均匀 ,配制成干样与饲料的质量分数相
当于 0.025%和 0.050%的处理饲料 。加入酌量
处理饲料于培养皿中 ,每皿接试虫 1 头于养虫室
内饲养。每处理用虫 40头 , 2 d后换 1次处理饲
料 ,5 d后换正常饲料饲养 。对照组饲料中加入等
量丙酮 。试验一直延续到试虫化蛹 ,详细观察试
虫的取食 、生长发育及生死反应 ,并定期称量试虫
体重 ,统计化蛹率。
2 结果与分析
2.1 各组分对棉铃虫幼虫生长发育的影响
试验结果列于表 1(数列后标相同字母者 ,表
示在方差分析中于 5%水平上无明显差异)。由
表 1可知:在同一时间内 ,各处理的幼虫体重增加
量均较对照低 。从第 3天至第 13天 ,各处理组之
间 、处理组与对照组之间差异明显 ,对棉铃虫体重
影响大小的基本顺序是:甲醇残组分 >甲醇组
分>石油醚组分>精油 。但从第 15天的体重增
加量来看 ,有的处理在换正常饲料饲养后 ,试虫的
取食得到一定程度的恢复 ,体重增加量的差异变
小。
由于各处理对试虫取食均有一定程度的影
响 ,故幼虫的平均历期均比对照组有所延长 ,且受
浓度的影响 。在质量分数为 0.050%的浓度下 ,
甲醇残组分 、甲醇组分 、石油醚组分 、精油分别比
对照延长了 8.3 d 、7.4 d 、5.6 d 、2.6 d。在质量分
数为 0.025%的浓度下 ,甲醇残组分 、甲醇组分 、
石油醚组分 、精油分别比对照延长了 7 d 、5.6 d 、
4.4 d 、1.5 d。对幼虫期的延长 ,除了药剂抑制幼
虫取食外 ,甲醇残组分使幼虫历期延长了7 ~ 9 d ,
则可能还有药理效应 。
35第 22卷 第 2期 刘建宏等:砂地柏提取物对棉铃虫生长发育的影响初探
表 1 各组分对棉铃虫幼虫生长发育的影响
Table 1.The effect of treatment on development of cotton bollworm
供试物及浓度/ %
Experimental substances
and thei r concent rations
幼虫体重增加量/mg
T he increasing amount of larva w eight
第 3天
The 3rd day
第 5天
The 5th day
第 9天
The 9th day
第 13天
The 13th day
第 15天
The 15th day
幼虫历期/ d
The larva
period
甲醇组分
Methanol group
0.025 3.14 cd 7.66 c 45.46 cd 148.32 cd 235.57 b 25.2
0.050 3.16 cd 6.31 c 40.94 cd 108.25 d 182.59bc 27.0
石油醚组分
Mineral ether
group
0.025 5.83b 18.01 d 87.40 b 193.89 c 307.88 ab 24.0
0.050 4.06 c 9.52 c 55.19 c 141.52 cd 205.71bc 25.2
甲醇残组分
Methanol remains
group
0.025 2.33d 5.83 c 23.81 d 89.31 d 196.17bc 26.6
0.050 1.22d 4.24 c 18.48 d 56.47 d 133.74 c 27.9
精油
Oil of
peppermint
0.025 6.01b 25.88b 117.24 b 258.37b 321.11 a 21.1
0.050 5.63b 22.59 b 113.48 b 247.41b 318.65 a 22.2
对照
Cont rast
— 14.05 a 41.48 a 211.72 a 350.16 a 324.21 a 19.6
2.2 各组分对棉铃虫蛹及存活率的影响
试验结果见表 2。表中总校正死亡率是各处
理组从试验开始到羽化的总体死亡率和对照组相
比而求出的。
由表 2可知:棉铃虫取食处理饲料后 ,大部分
存活老熟幼虫的化蛹率均受到一定程度的影响。
从测量结果看 ,甲醇残组分的效果较为明显 ,其化
蛹率仅为 64.71%和 55.56%。从蛹重测量结果
看 ,饲喂质量分数为 0.050%饲料处理的甲醇残
组分与对照差异显著 。该处理的平均蛹重仅为
257.71mg ,比对照轻 13.74 mg 。其余处理与对
照无明显差异。各处理对棉铃虫的存活影响不
大 ,其总校正死亡率均未超过 35%。
表 2 各组分对棉铃虫蛹及存活的影响
Table 2.The effect of treatment on pupa and survival of cotton bollworm
供试物及浓度/ %
Experimental substances and
thei r concent rations
蛹重/mg
Pupa w eight
化蛹率/%
Pupa t ing rate
总校正死亡率/ %
General corrected
mortality
甲醇组分
Methanol group
0.025 275.72 a 72.73 14.05
0.050 267.08 a 71.43 19.81
石油醚组分
Mineral ether group
0.025 270.74 a 75.00 0.28
0.050 273.44 a 78.57 2.92
甲醇残组分
Methanol remains group
0.025 272.95 a 64.71 9.63
0.050 257.71 b 55.56 34.34
精油
Oil of peppermint
0.025 269.91 a 78.31 17.36
0.050 266.56 a 77.77 22.22
对照
Cont rast
— 271.45 a 88.46 —
36 吉 林 农 业 大 学 学 报 2000年
3 讨 论
1)在化学抽提流程中 ,选用何种溶剂能够最
大限度地提取和分离出杀虫活性物质至关重要。
本研究选用甲醇和石油醚 2 种溶剂 ,采用冷浸振
荡法和两相溶剂萃取法对砂地柏的活性成分进行
了提取和初步分离 。甲醇为极性有机溶剂 ,能溶
于水 ,又能诱导非极性物质产生一定的偶极矩(即
产生一定的极性),而使后者的溶解度增加 ,提取
成分较为全面 。但因含有较多杂质 ,活性成分所
占的比例小 ,活性不是很高 ,生物测定结果也证明
了这一点 。石油醚可分离出甲醇提取物中的亲酯
性成分;石油醚萃取后残留的甲醇部分较为集中
地剩余了极性成分 。生物测定结果表明 ,采用该
抽提流程 ,基本达到了提取及初步分离的目的。
但各组分中究竟含有哪些化学成分 ,其活性成分
是什么 ,属于哪一类化合物以及结构与活性的关
系如何 ,尚需进一步分离和生物活性跟踪测定 。
2)从整个试验情况看 ,棉铃虫取食处理饲料
后 ,其生长发育受到不同程度的影响 。形成这种
情况的主要原因 ,可能与处理饲料中所含的有毒
物质及棉铃虫在不同发育时期的代谢能力有
关[ 8] 。有毒物质的存在对棉铃虫的生长有一定
的抑制作用。食物中有害物质的存在可能会延长
害虫的生命周期[ 9] 。因此 ,砂地柏对棉铃虫的致
毒机理需要进一步探讨。
3)在该试验方法条件下 ,甲醇残组分在各项
测试指标中均表现出较强的生物活性 ,它对棉铃
虫的作用方式和作用机理 ,需要进行重点研究。
参 考 文 献
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2 张 兴等.西北地区杀虫植物资源初步调查[ J] .甘肃农
业大学学报 , 1993 , 28(1):93~ 98
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学学报 , 1995 , 23(4):53~ 57
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食贮藏 , 1993 , 22(4):3~ 8
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业大学学报 , 1997 , 20(3):50~ 53
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(上接第 33页)
菌悬液量较大 ,如测定雨水 、露水中的细菌数量时
难以施行。血球计数板法的不足之处:细菌在菌
悬液中不是处于同一焦平面上 ,且未经染色 ,故难
以准确计数 ,累眼睛;同时需要制备的菌悬液量较
大 ,如测定雨水 、露水中的细菌数量时难以收集。
与上述 3种方法相反 ,直接制片测计方法简便易
行 ,不需要特殊的仪器设备 ,工作量仅为稀释平板
法的 1/8 ,是较为理想的测计方法 ,尤其对初学者
更易掌握。但是 ,直接制片测计方法也有它不足
之处:在测定细菌数量时分不开死细菌和活细菌 ,
因此在查活细菌绝对数量时不够准确 ,所测得的
细菌数一般都要高于实际数。本论文采用直接制
片测计方法 ,主要是测计细菌相对数量 ,故所得结
论较准确 、可靠 。
由于采用了直接制片测计方法 ,保证了我们
对烟草野火病流行系统分析研究的顺利进行 。这
种测计方法对其它植物细菌病害流行的系统分析
研究也可提供借鉴。
参 考 文 献
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37第 22卷 第 2期 刘建宏等:砂地柏提取物对棉铃虫生长发育的影响初探