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新疆香鳞毛蕨药材质量研究



全 文 :基金项目:国家药品(维药)标准提高研究课题项目(538);第四次全国中药资源普查(试点)新疆中药民族药资源普查专项资助项目(2011-2013)
作者简介:田 莉(1974-),女,博士,副教授,硕士生导师,研究方向:中药民族药新制剂研究与开发。
通信作者:田树革,男,博士,教授,博士生导师,研究方向:中药化学与质量标准,E-mail:tianshuge@hotmail.com。
新疆香鳞毛蕨药材质量研究
田 莉1,2,施 洋1,畅 静1,王东东1,2,田树革1,2
(1新疆医科大学中医学院,2新疆名医名方与特色方剂学重点实验室,乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 建立新疆产香鳞毛蕨的质量控制方法,并评价其质量,为该植物资源的开发利用提供科学依据。
方法 采用性状鉴别、显微鉴别、水分、灰分、浸出物、薄层鉴别和总间苯三酚含量测定等研究方法。结果 新疆
香鳞毛蕨的根茎横切面有分体中柱3~7个,周韧型。粉末黄棕色,孢子囊环带,薄壁细胞呈多角形或类圆形,含淀
粉粒;管胞孔纹、梯纹。3批香鳞毛蕨水分、灰分、酸不溶灰分和浸出物含量分别为9.46%~10.22%、8.46%~
9.52%、2.89%~3.56%、24.53%~32.33%,总间苯三酚含量为5.16%~8.10%,RSD=7.14%。结论 建立的
方法适用于香鳞毛蕨药材的质量控制。
关键词:香鳞毛蕨;生药学;鉴别;总间苯三酚;含量测定
中图分类号:R914  文献标识码:A  文章编号:1009-5551(2014)09-1111-04
doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2014.09.003
Study on quality standard of Dryopteris filix-mas(L.)Schott
TIAN Li 1,2,SHI Yang1,CHANG Jing1,WANG Dongdong1,2,TIAN Shuge1,2
(1 College of TCM,Xinjiang Medical University,2 Xinjiang Key Laboratory of
Famous Prescription and Science of Formula,Urumqi 830011,China)
Abstract:Objective To establish quality standard and evaluable the quality of Dryopteris fragrans(L.)
Schott of Xinjiang,thus to provide a scientific basis for the use of herbs and the development of plant re-
source.Methods Pharmacognosy research,moisture,total ash,acid-insoluble ash,extract,thin layer
chromatography and the content determination of total phloroglucinol were carried out.Results The rhi-
zome cross-section of Dryopteris fragrans(L.)Schott of Xinjiang included 3-7cental vascular,which is
amphicribral type,around the pith.The powder is yelowish-brown.Sporangium is annulus.Parenchyma
cels are polygonal or roughly spherical and containing starch grains.Tracheids are pitted or ladder pat-
tern.Moisture,ash,acid insoluble ash and extract content are 9.46%-10.22%,8.46%-9.52%,2.
89%-3.56%and 24.53%-32.33%,respectively.The contain of total phloroglucinol is 5.16%-8.10
% with RSD 7.14%(n=3).Conclusion The quality standard established in this paper is suitable for the
quality control of Dryopteris fragrans(L.)Schott.
Key words:Dryopteris fragrans(L.)Schott;pharmaeognosy;identification;total phloroglucinol;con-
tent determination
  香鳞毛蕨 [Dryopteris fragrans(L.)Schott]
为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,系多年生草本植物,生长
于海拔700~2 500m的山地林缘和山坡石缝中,分
布于我国东北、河北、内蒙古等地,新疆境内主要产
于北疆的青河、富蕴、阿勒泰、布尔津、哈巴河等县,
国外西伯利亚、远东、蒙古、朝鲜、日本以及北美各地
亦有分布[1-2]。
香鳞毛蕨具有驱虫、杀菌、抗炎和抗肿瘤等药理
活性,民间流传用其水煎液涂擦患处可治疗牛皮癣、
皮疹、皮炎、痤疮等各种皮肤病且无毒副作用,水提
液洗头可去头屑、止痒,被黑龙江省北部居民视为
“皮肤病的克星”,尤其治疗牛皮癣疗效显著[3]。香
 第37卷 第9期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.37 No.9
 2014年9月 Journal of Xinjiang Medical University Sep.2014
鳞毛蕨具有显著的抗炎镇痛作用,张彦龙[4]研究发
现其乙醇提取物治疗类风湿性关节炎的疗效优于雷
公藤多苷片;张莹莹[5]分离获得了具有抗肿瘤活性
和免疫调节活性的提取物。目前对东北产香鳞毛蕨
的研究主要为临床疗效和化学成分,尤其对牛皮癣
和关节炎疗效的研究较多。该植物资源在新疆分布
广泛,但未作为药用植物使用,也未见相关研究报
道。本研究在参考相关文献[6]的基础上对新疆产
香鳞毛蕨的质量控制方法进行研究,并评价其质量,
为该植物资源的进一步研究和开发利用提供依据。
1 材料与仪器
1.1 材料 3批香鳞毛蕨样品分别采自新疆布尔
津、哈巴河、青河县,均系野生,经新疆维吾尔自治区
中医医院李永和主任中药师鉴定为香鳞毛蕨
[Dryopteris fragrans(L.)Schott.]。将药材阴
干,去除根茎及叶柄残基以外的其他部分,粉碎,备
用;绵马贯众素 ABBA对照品(成都瑞芬思生物科
技有限公司,纯度98%,批号:M-040-111008),坚牢
蓝 BB 盐 (上 海 阿 拉 丁 试 剂 有 限 公 司,批 号:
F106955),水为重蒸水,其余试剂均为分析纯。
1.2 仪器 Mikroskope Primo Star X2005型数码
显微镜(德国麦克奥迪实业有限公司),XS105型电
子天平(德国梅特勒-托利多仪器有限公司),AK-
1000A摇摆式中药粉碎机(温岭市奥为中药机械有
限公司),KQ3200DE型超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司),CS101型鼓风干燥箱(中华人民共
和国重庆试验设备厂),GBCCinira-40型紫外可见
分光光度计(澳大利亚GBC科学仪器公司)。
2 方法与结果
2.1 原植物形态[1-2] 植株高15~30 cm,根状茎
粗短,直立或斜升,密被三角状披针形棕褐色鳞片。
叶簇生,革质,两面被金黄色腺体;叶柄长 5~
10cm,禾秆色,连同叶轴和羽轴密被卵形或披针
形、边缘具细齿、先端尾状尖、密被金黄色腺体的鳞
片;叶片倒披针形,长10~20cm,宽2.5~3.5cm,
二回羽状全裂;羽片20~25对,互生,相距4~
8mm,披针形,中部者最大,长12~15mm,宽约
5mm,先端钝,基部楔形,一回羽状;小羽片5~7
对,长约3mm,宽约1.5mm,长圆形,先端钝圆,基
部下延成狭翅,边缘具钝圆锯齿,向下各对羽片逐渐
缩小,基部1~2对呈耳状;叶脉羽状分枝。孢子囊
群圆形,生侧脉中下部;囊群盖圆肾形,灰白色,膜
质,边缘缺刻状。孢子椭圆形,周壁具瘤状突起,见
图1。植物略具香味,故有香鳞毛蕨之称。
2.2 药材性状 根据实际药材样品观察:药用根
茎,呈圆柱形略弯曲,长10~25cm,粗1~3cm,所
被叶柄基部呈扁圆形,稍弯曲,长2~5cm,粗0.5~
0.8cm,表面呈棕褐色或灰棕色,有纵脊纹和粗槽
纹,内呈棕色。根茎周围密生叶柄和丛生红棕色鳞
片(图1)。气特异,味甘而苦辛,有不愉快感。
2.3 显微特征
2.3.1 叶柄基部横切面 表皮细胞1列,外壁稍
厚;厚壁细胞数列,多角形,棕色;基本组织中有分体
中柱3~7个,每一分体中柱具周韧维管束,外围以
内皮层,见图2。
 
图1 香鳞毛蕨[Dryopteris fragrans(L.)Schott]   图2 香鳞毛蕨叶柄基部横切面    
2.3.2 粉末特征 内皮层碎片甚多,黄棕色;孢子
囊环带,由14~20个增厚细胞组成;气孔环式;梯纹
管胞,见单个纤维或纤维束;非腺毛由单细胞组成,
弯曲或笔直;鳞片细胞排列紧密;两面型孢子,孢子
表面观与赤道面观不易看清楚。薄壁细胞呈多角形
或类圆形,含淀粉粒;周壁具有褶皱,褶皱形成瘤状
突起,有时孢子沿褶皱处裂开,外壁厚度约为
2.5μm,外层厚于内层。管胞孔纹、梯纹,偶有网
纹,有的薄壁细胞和木栓细胞具孔纹。偶见草酸钙
簇晶,见图3。
2.4 水分、灰分、浸出物测定 分别采用《中国药
典》(2010年版)一部附录Ⅸ H烘干法测定水分;附
录Ⅸ K方法测定灰分和酸不溶性灰分;附录Ⅹ A
方法测定水浸出物;附录Ⅸ A方法测定醇浸出物,
分别采用了热浸法和冷浸法;附录ⅨE方法测定重
金属。结果显示3批香鳞毛蕨水分为9.46%~
10.22%,灰分为8.46%~9.52%,酸不溶性灰分为
2.89% ~3.56%,水溶性浸出物为 15.77% ~
20.34%,采用热浸法的醇溶性浸出物远高于冷浸
法,浸出物含量为24.53%~32.33%,重金属与砷
2111 新 疆 医 科 大 学 学 报 第37卷 
盐检查结果均符合《中国药典》规定的限量检查要
求,见表1。
2.5 薄层鉴别[7] 取本品粉末0.5g,加环己烷
20mL,超声处理30min,滤过,取续滤液10mL,浓缩
至5mL,作为供试品溶液。另取香鳞毛蕨对照药材
0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国
药典2010年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述2种溶
液各4μL,分别点于同一硅胶G薄层板上[取硅胶G
10g、枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH 7.0)10mL、维
生素C 60mg、羧甲基纤维素钠溶液20mL,调匀,铺
板,室温避光晾干,50℃活化2h后备用],以正己
烷-三氯甲烷-甲醇(30∶15∶1)为展开剂,薄层板置
展开缸中预饱和2h,展开,展距15cm以上取出,立
即喷以0.1%坚牢蓝BB盐的稀乙醇溶液,在40℃
放置1h。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应
的位置上,显相同颜色的斑点,见图4。
图3 香鳞毛蕨粉末
1~3:供试品;S:对照药材
图4 香鳞毛蕨薄层鉴别
2.6 总间苯三酚含量测定
2.6.1 对照品溶液的制备 精密称取绵马贯众素
ABBA 对 照 品 适 量,用 95% 乙 醇 制 成 浓 度 为
0.08g/L的溶液,备用。
2.6.2 供试品溶液的制备 精密称定香鳞毛蕨药
材粉末(60目)约1g,加入95%乙醇100mL,称重,
回流提取1h,冷却至室温,称重,补足减失重量,混
匀,过滤,弃去初滤液,精密量取续滤液2mL置于
10mL量瓶中,用95%乙醇稀释并定容至刻度,摇
匀,即得。
2.6.3 测定方法[8] 精密量取对照品溶液或供试
品溶液2mL,置于10mL磨口具塞刻度试管中,精
密加入0.5%坚牢蓝BB盐溶液5mL,混匀,室温放
置20min,采用比色法在476nm波长处测定吸光
度,计算总间苯三酚含量,结果总间苯三酚含量为
5.16%~8.10%,RSD=7.14%,见表1。
表1 香鳞毛蕨药材水分、灰分、浸出物、含量测定结果
样品 水分/% 灰分/%
酸不溶性
灰分/%
水浸出物/%
醇浸出物-冷
浸法/%
醇浸出物-热
浸法/%
Pb2+/(μg/g) 砷盐/(μg/g)
总间苯三酚
含量/%
哈巴河县 9.46  8.46  2.89  15.77  18.36  24.53 <5 <1  5.16
布尔津县 9.92  8.76  3.23  20.34  22.04  32.33 <5 <1  5.97
青河县 10.22  9.52  3.56  19.44  20.94  31.53 <5 <1  8.10
-x±s  9.86±0.38 8.92±0.55  3.23±0.33  18.52±2.42  20.45±1.89  29.46±4.29  6.41±1.52
RSD/% 3.90  6.12  10.36  13.07  9.24  14.56  7.14
3 讨论
新疆产香鳞毛蕨主要分布于新疆北部天山和阿
尔泰山,资源丰富。现有研究主要集中于东北产香
鳞毛蕨的化学成分、药理作用和临床应用,而对质量
控制的研究很少。香鳞毛蕨的同属植物绵马贯众
(Dryopteris crassirhizoma Nakai.,即粗茎鳞毛蕨)
是《中国药典》收载品种,其质量标准包括性状、
TLC鉴别、检查(水分、灰分、酸不溶性灰分、醇浸出
物),参照其项下内容建立香鳞毛蕨的质量控制
方法。
香鳞毛蕨主要含间苯三酚类、萜类和黄酮类等
成分[9],而间苯三酚类是其特征性化学成分,也是主
要的药理活性成分。香鳞毛蕨根茎含多种间苯三酚
化合物,已分离得到的单体成分有 Aspidin AB(绵
马素AB)、Aspidin BB(绵马素BB)、Aspidinol(绵马
酚)、AspidinPB(绵马素PB),Dryofragin(香鳞毛蕨
素)[10]。因此,测定香鳞毛蕨中总间苯三酚的含量
对控制其质量具有代表性和合理性。本研究增加了
香鳞毛蕨中总间苯三酚的含量测定。
根据不同地区3批药材质量研究结果,并考虑
3111 第9期 田 莉,等:新疆香鳞毛蕨药材质量研究
药材来源差异的实际情况,可以初步确定水分不超
过12.0%,总灰分不超过10.0%,酸不溶性灰分不
超过5.0%,醇溶性浸出物不少于20.0%,总间苯三
酚含量限度为不低于6.0%。新疆不同产地的香鳞
毛蕨中总间苯三酚含量有较大差异,此种差异可能
与药材的生长环境、生长年限有关,有待进一步的研
究。香鳞毛蕨尚无人工栽培品,本实验所用均为野
生采集,有害重金属砷(As)和铅(Pb)含量均不超
标,铅(Pb)≤5μg/g,砷(As)<1μg/g,说明没有其
他无机物污染和掺杂。
本研究对薄层鉴别方法中各个环节进行了确
定,考察了不同的薄层板,如国产的预制板、进口预
制板,效果均不理想,因此采用自制板;确定了展开
溶剂种类和比例,间苯三酚类化合物与坚牢蓝BB
盐呈特征性颜色反应,故确定0.1%坚牢蓝BB盐为
显色剂。
本研究较全面地考查了新疆产香鳞毛蕨药材的
各项指标,在实验结果和数据分析的基础上制定了
相关限度。所建立的方法简便、快速、可靠,适用于
该药材的质量控制,而与其他产地香鳞毛蕨的质量
对比还有待进一步研究。
参考文献:
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[收稿日期:2013-12-30]
(本文编辑 施洋
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(上接1110页)
性很强,80%的细菌性感染与之有关[9]。从天然产
物中筛选抑制细菌生物膜形成的活性成分已成为研
发热点。
本研究结果表明,欧绵马氯仿、乙酸乙酯和乙醇
提取物对变异链球菌生长有一定抑制作用,氯仿和
乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的生长有一定抑制作
用;5种不同极性提取物对变异链球菌和大肠杆菌
生物膜形成均有不同程度的抑制作用,其中乙酸乙
酯和乙醇提取物中含有能有效抑制变异链球菌生物
膜形成的活性成分,乙酸乙酯、氯仿、乙醇和正丁醇
提取物中含有能有效抑制大肠杆菌生物膜形成的活
性成分。
本研究经化学鉴别预试验检出欧绵马中含生物
碱、黄酮类、糖和苷类、有机酸,酚类鞣质和油脂类等
成分。进行抑菌筛选时发现,欧绵马水提取部位对
变异链球菌以及正丁醇和水提取部位对大肠杆菌没
有抑菌作用,反而有促进细菌生长的的趋势,可能其
所含糖类和苷类、有机酸、鞣质等成分为细菌生长提
供了营养成分。欧绵马不同极性提取物所含化学成
分的类别和含量不同,使其抑菌活性不同,而同一提
取物对不同菌种的抑制敏感性也存在差异。本方法
可为欧绵马的药用开发提供实验依据,对欧绵马抑
菌成分的分离、抑菌机理及对其他细菌的影响还有
待进一步研究。
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(本文编辑 施洋)
4111 新 疆 医 科 大 学 学 报 第37卷