全 文 :·论著·
生半夏、法半夏水提物对小鼠镇静催眠作用的比较研究
Study on the Sedative - hypnotic Effect of the Raw Pinellia Ternate and Prepared Pinellia Tuber Aqueous Extract
游秋云 1,2,王平2*
(1.湖北中医药大学药学院,湖北 武汉 430065;2.湖北中医药大学国家中医药管理局醒脑益智重点研究室,湖北 武汉 430065)
* 通讯作者:王平,1962 -,男,教授,博士生导师。Tel: 027 - 68890008; Email: youqiuyun@ 126. com。
摘 要:目的 比较观察生半夏、法半夏水提物对小鼠的镇静催眠作用。方法 通过直接睡眠实验、协同戊巴比妥钠作用实验,以及
抗惊厥实验,观察生半夏、法半夏水提物对小鼠的镇静催眠作用。结果 生半夏、法半夏水提物对小鼠的直接睡眠作用较弱; 生半夏、
法半夏水提物可明显增加戊巴比妥钠阈下剂量的动物入睡率,除生半夏水提物小剂量组外其余组均能明显延长阈上戊巴比妥钠小鼠
睡眠时间; 生半夏、法半夏水提物有一定的抗惊厥作用。结论 生半夏、法半夏水提物具有一定的镇静催眠作用,且法半夏强于生半
夏。
关键词:生半夏; 法半夏; 镇静催眠; 小鼠; 实验研究
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1000 - 0704(2013)03 - 0003 - 03
半夏为天南星科植物半夏 PinelLia ternata(Thunb)Breit.的
干燥块茎。生半夏性辛、温,归脾、胃、肺经。具有燥湿化痰,降逆
止呕,消痞散结的功效,临床用于湿痰寒痰,咳喘痰多,痰饮眩
悸,风痰眩晕,痰厥头痛,呕吐反胃,胸脘痞闷,梅核气,外治痈肿
痰核。生半夏有毒,生用对口腔、喉头和消化道粘膜有强烈刺激
性,临床偏重于祛风、散瘀。法半夏是生半夏用甘草 15%、生石
灰 10%为辅料,经过炮制而得,长于祛痰止咳,除湿浊。古代医
家很早就认识到半夏对失眠的治疗作用,《本草纲目》里记载了
夜不眠的治法“饮以半夏汤一剂,阴阳既通,其卧立至。”,还记载
有附方辰砂半夏丸用于化痰镇心,祛风利膈。现代临床实践证
实,凡阴阳不交、脾胃失和、痰结湿滞、气郁血瘀等所致之失眠,
无论虚实寒热,均可据证以重剂半夏治之,只要配伍得当,疗效
良佳[1]。临床常用方剂有半夏秫米汤、半夏泻心汤、半夏枯草汤
等[2]。笔者的临床实践中发现,半夏乃为治疗失眠方药中之常
用者,为了比较观察生半夏和法半夏的安神作用,拟对生半夏、
法半夏水提物的镇静催眠作用进行比较研究,以便为临床正确
使用提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 药品
半夏、法半夏均购自武汉银杏中药饮片厂,批号 20110201,
经本校中药鉴定教研室专家鉴定为半夏 Pinellia ternate(Thunb)
Breit的块茎。分别将上述药材 6g经干燥、粉粹后加 10 倍量水热
回流提取 3 次,1h /次,滤过,合并滤液,定容 100mL,相当于生药
浓度 0. 06g /mL 的小剂量组的生半夏、法半夏水提物。同法制得
含生药浓度为 0. 18g /mL大剂量组的生半夏、法半夏水提物。
1. 2 试剂
戊巴比妥钠(上海试剂二厂产品,批号 20100206) ;安定(湖
北制药联合有限公司产品,批号 20100912) ;尼可刹米注射液(天
健药业焦作有限公司,批号 20110509)。
1. 3 动物
昆明种小鼠,(20 ± 2)g,雌雄各半,由湖北省实验动物研究
中心提供。实验前将小鼠适应性饲养 1 周。
1. 4 方法
1. 4. 1 直接睡眠作用[3]
—3—
湖北中医杂志 2013 年 3 月第 35 卷第 3 期
Hubei Journal of TCM MAR. 2012. Vol. 34,No. 3
将 72 只小鼠随机分为 6 组,每组 12 只。分别为空白对照组
(等容生理盐水) ,安定对照组(1mg /kg) ,生半夏小剂量组(1. 2g /
kg) ,生半夏大剂量组(3. 6g /kg) ,法半夏小剂量组(1. 2g /kg) ,法
半夏大剂量组(3. 6g /kg)。每天灌胃 1 次,连续 7 天。给药容积
均为 0. 2mL /10g 。记录末次给药后 2h 内各组小鼠的入睡数。
观察翻正反射现象,超过 1min不能翻正者即为进入睡眠。
1. 4. 2 协同戊巴比妥钠作用[4]
1. 4. 2. 1 对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量作用的影响
将 72 只小鼠随机分为 6 组,每组 12 只。分别为空白对照组
(等容生理盐水) ,安定对照组(0. 26 mg /kg) ,生半夏小剂量组
(1. 2g /kg) ,生半夏大剂量组(3. 6g /kg) ,法半夏小剂量组(1. 2g /
kg) ,法半夏大剂量组(3. 6g /kg)。每天灌胃 1 次,连续 7 天。给
药容积均为 0. 2ml /10g 。最后 1 次给药 30min之后,分别腹腔注
射阈下剂量戊巴比妥钠 28. 5mg /kg(为预先测定的 90% - 100%
小鼠翻正反射不消失的最大剂量,) ,以 30min 内小鼠翻正反射
消失达 1min以上者为入睡指标,观察入睡动物数,并计算入睡
率。
1. 4. 2. 2 对小鼠戊巴比妥钠阈上催眠剂量作用的影响
实验分组及给药同 1. 4. 2. 1。给药 30min 后,分别腹腔注射
阈上剂量戊巴比妥钠 33. 0mg /kg(为预先测定的动物 100%入睡
的最小剂量) ,小鼠翻正反射消失达 1min 以上者即为入睡,观测
睡眠持续时间。
1. 4. 3 抗惊厥作用[5]
实验分组及给药同 1. 4. 2. 1。给药 30min 之后,按剂量 0.
375g /kg腹腔注射 3. 75%的尼可刹米 0. 1mL /10g,记录发生惊厥
动物数。
1. 5 统计学方法
采用 SPSS12. 0 统计软件包对数据进行 t 检验和卡方检验。
数据采用(珋x ± s)表示。
2 结果
2. 1 直接睡眠作用
实验结果显示,与空白对照组比较,安定对照组小鼠的入睡
率明显增加(P < 0. 01) ,其余组小鼠的入睡率不变均为零。空白
对照组和生半夏小剂量组小鼠的活动正常,生半夏高剂量组和
法半夏高、低剂量组小鼠出现懒动现象,但没有进入睡眠状态。
说明生半夏、法半夏水提物的大小剂量组无直接睡眠作用。结
果(见表 1)。
表 1 对小鼠直接睡眠作用的入睡率(n = 12)
组别 剂量(g·kg -1) 入睡率(%)
空白对照组 等容 0
安定对照组 0. 26 × 10 -3 83. 3**
生半夏小剂量组 1. 2 0
生半夏大剂量组 3. 6 0
法半夏小剂量组 1. 2 0
法半夏大剂量组 3. 6 0
与空白对照组比较,* *P < 0. 01。
2. 2 协同戊巴比妥钠作用
2. 2. 1 对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量作用的影响
实验结果表明,与空白对照组比较,其它各组均可显著增加
阈下剂量戊巴比妥钠所致小鼠的入睡率(P < 0. 01)。结果(见表
2)。
表 2 对阈下剂量戊巴比妥钠所致小鼠入睡率的影响(n = 12)
组别 剂量(g·kg -1) 入睡率(%)
空白对照组 等容 16. 67
安定对照组 0. 26 × 10 -3 83. 3**
生半夏小剂量组 1. 2 58. 3**
生半夏大剂量组 3. 6 83. 3**
法半夏小剂量组 1. 2 66. 67**
法半夏大剂量组 3. 6 91. 7**
与空白对照组比较,* *P < 0. 01。
2. 2. 2 对小鼠戊巴比妥钠阈上催眠剂量作用的影响
实验结果表明,与空白对照组比较,安定对照组、生半夏大
剂量组、法半夏大、小剂量组能明显延长阈上剂量戊巴比妥钠致
小鼠睡眠时间(P < 0. 01) ,而生半夏小剂量组作用不明显。结果
(见表 3)。
表 3 对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响(珋x ± s,n = 12)
组别 剂量(g·kg -1) 睡眠时间(min)
空白对照组 等容 48. 5 ± 6. 7
安定对照组 0. 26 × 10 -3 95. 7 ± 8. 7**
生半夏小剂量组 1. 2 51. 0 ± 8. 7**
生半夏大剂量组 3. 6 90. 7 ± 10. 6**
法半夏小剂量组 1. 2 75. 4 ± 6. 3**
法半夏大剂量组 3. 6 92. 1 ± 9. 9**
与空白对照组比较,**P < 0. 01。
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2. 3 抗惊厥作用
实验结果表明,与空白对照组比较,安定对照组、生半夏大
剂量组、法半夏大、小剂量组有差异(**P < 0. 01,* P < 0. 05) ,
而生半夏小剂量组无明显差异。表明法半夏有一定的抗惊厥作
用,且较生半夏作用强。结果(见表 4)。
表 4 对尼可刹米所致小鼠惊厥作用的影响(n = 12)
组别 剂量(g·kg -1)发生惊厥数(只)抗惊厥率(%)
空白对照组 等容 12 0
安定对照组 0. 26 × -3 2 83. 3**
生半夏小剂量组 1. 2 9 25. 0
生半夏大剂量组 3. 6 8 33. 3*
法半夏小剂量组 1. 2 7 41. 7*
法半夏大剂量组 3. 6 5 58. 3**
与空白对照组比较,* *P < 0. 01,* P < 0. 05。
3 讨论
半夏为中国传统中药材,资源丰富,具有多种药理活性,临
床应用范围广,是极其重要并极具开发利用价值的中药材。据
2010版《中国药典》记载,半夏有毒,内服一般炮制后使用。该药
典记载了法半夏炮制方法:取半夏,大小分开,用水浸泡至内无
干心,取出;另取甘草适量,加水煎煮二次,合并煎液,倒入用适
量水制成的石灰液中,搅匀,加入上述已浸透的半夏,浸泡,每日
搅拌 1 - 2 次,并保持浸液 pH值 12 以上,至剖面黄色均匀,口尝
微有麻舌感时,取出,洗净,阴干或烘干,即得。每 100kg净半夏,
用甘草 15kg、生石灰 10kg。
本实验结果表明,生半夏、法半夏无直接睡眠作用,生半夏
水提物大剂量组以及法半夏水提物大、小剂量组具有协同戊巴
比妥钠的中枢抑制作用,且法半夏作用更为明显,从而进一步验
证了法半夏在临床上的安神疗效。
另有研究表明,半夏生物总碱、半夏乙醇提物具有抗惊厥的
作用[6 - 7]。在我们进行的抗惊厥实验中,生半夏水提物大剂量
组,法半夏大、小剂量组有一定的抗惊厥作用,生半夏水提物小
剂量组无抗惊厥作用,笔者分析为给药剂量浓度过低所致,还有
待今后做进一步考证。
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(收稿日期:2011 - 12 - 20 编辑:邵企红)
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湖北中医杂志 2013 年 3 月第 35 卷第 3 期
Hubei Journal of TCM MAR. 2012. Vol. 34,No. 3