全 文 ：表 1　不同浓度小枣处理的根尖细胞具微核的细胞率
编号 处理 3个根尖的具微核的细胞率 均值±标准差 微核率(%)
1 2 3 (X±SE)
1 CP+小枣 50 58 48 52.0±5.3 52
2 CP+小枣Ⅱ 39 33 32 34.6±3.8 30
3 CP+小枣Ⅲ 27 31 20 28.0±5.6 26
4 CP+小枣Ⅳ 19 13 16 18.0±3.0 16
5 CP+小枣Ⅴ 12 9 10 10.0±1.6 10
6 CP+小枣Ⅵ 10 12 7 9.7±2.5 9.7
阳性对照 CP 69 67 75 70.3±4.2 70.3
阴性对照 蒸馏水 7 9 5 7.0±2.0 7
表 2　数据的方差分析
变异来源 方差和 自由度 均方 F 值
处理间 19 168.3 7 2632.4 3.8＊
误差 11 148.75 16 696.8
总和 30 317.05 23
＊差异显著
2.3　数据间的多重比较
在邓肯(Duncan)检验结果来看 , 全部数据可分为 3 组 , 其
中 CP+小枣Ⅴ浓度 、CP+小枣Ⅵ 浓度和蒸馏水引起的微核变
化近似于一个水平 , CP和 CP+小枣Ⅰ浓度引起的微核变化最
高 ,其他居中。上述检测和统计的结果表明 , 在小枣Ⅰ浓度～
CP+小枣Ⅵ 浓度的范围内可以观察小枣汁的明显的抗突变作
用。结果见表 3。
表 3　数据间的多重比较
编号 处理 X±S 5% 1%
显著水平 显著水平
阳性对照 CP 70.3±4.2 a A
1 CP+小枣Ⅰ 52.0±5.3 a A
2 CP+小枣Ⅱ 34.6±3.8 a A
3 CP+小枣Ⅲ 28.0±5.6 a A
4 CP+小枣Ⅳ 18.0±3.0 a A
5 CP+小枣Ⅴ 10.0±1.6 a A
6 CP+小枣 Ⅵ 9.7±2.5 a B
阴性对照 蒸馏水 7.0±2.0 b B
注:a 和A 表示差异显著 ,而 b和 B差异不显著。
3　讨论
蚕豆细胞 DNA 含量多 , 染色体数目多且大 , 环境 、诱变物
对它的遗传物质损伤较为敏感 , 微核效应又易于观察。 本研
究结果表明 ,小枣汁能显著抑制环磷酰胺引起的蚕豆根尖微
核细胞的升高 ,使其微核率从 52.0±5.3‰降至 9.7±2.5‰(P
<0.001), 阳性组和阴性对照组的微核率之间的差异性极为显
著(P<0.001),说明小枣汁具有抗突变作用。
目前 , 有报道初步分析了红枣的成分 , 红枣含有丰富的
VA、VC 、VB2 等多种维生素 , 称得上百果之冠。鲜红枣中维生
素C 的含量较柑橘高 7～ 10 倍 , 为苹果的 75 倍。红枣中还含
有益于健康的化学成分如谷氨本酸 、赖氨酸 、精氨酸等 14 种
氨基酸 、苹果酸 、酒后酸等 6 种有机酸 , 黄酮类化合物及磷 、
钾 、镁 、钙 、铁等 36 种微量元素[ 11-14] 。维吾尔医认为 , 枣可用
于清血液降血脂 、调血压 、贫血 、肺虚咳嗽 、神经衰弱 、失眠 , 解
药毒 ,调和百药。因其加工方法不同有红枣 、黑枣之分 , 入药
一般以红枣为主。红枣最能滋养血脉 , 素被民间视为补气佳
品 ,可医治面容枯槁 、肌肉失润 、气血不正等症。枣亦能防治
贫血 、紫癜 、妇女更年期情绪烦躁 , 抗疲劳 、增加人的耐力[15] 。
此外 , 枣还具有减轻毒性物质对肝脏损害的功能。近现代医
学表明 , 枣果中所含有丰富的微量元素和由它形成的多糖 、三
萜及其苷类 、环腺苷酸(cAMP)以及黄酮 、酚酸 、维生素 、膳食纤
维等成分及其营养素 , 能够增强人体免疫功能 , 对于防癌抗癌
都有一定效果[16-19] 。枣果所富含的 VC、VB 、黄酮类和酚类都
是很强的抗氧化剂和 DNA 保护剂 ,因而具有抗氧化和清除自
由基 、防止衰老的作用。这些资料都显示出小枣汁可能主要
是通过其所含生物活性物质 , 作用于染色体畸变的起始阶段
来发挥其抗突变 , 其详细作用机理有待于进一步研究。
目前运用分子生物学方法来研究中药抗突变的分子机制
才刚刚起步 , 加上实验材料大多来自体外或动物实验 , 距临床
实际应用还有一段距离。但无论如何 , 和田小枣抗突变无疑
是中医药研究领域的一个充满希望的研究方向 ,一旦有所突
破 , 将为提高整个人类健康水平 、丰富和发展中医理论作出重
大贡献[15] 。
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短柄南蛇藤叶普通粉挥发性成分的研究
丁丽娜1 , 2 ,杨 嘉1 ,刘建华1 ,安立群2 ,刘文炜1＊(1.贵州省生物技术研究开发基地 ,贵州 贵阳 550002;2.贵州大学生命科学院 , 贵州 贵阳 550025;
3.贵阳医学院药理学教研室 , 贵州 贵阳 550004)
摘要:目的:研究短柄南蛇藤叶普通粉中的挥发性成分。方法:利用有机溶剂-水蒸汽蒸馏提取短柄南蛇藤挥发油 ,用 GC-
MS进行测定 , 结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定 ,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:
54　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　生　物　技　术　　　　　　　　　　　　　　　　　2008年 18(6)
DOI :10.16519/j.cnki.1004-311x.2008.06.032
分离鉴定出 50种化学成分 , 占挥发油总量的 92.24%,其中含量大于 2%的分别为油酸 31.59%、13-十八碳烯 29.74%、棕榈酸
4.41%、反-2-己烯醛 3.36%、异丁基邻苯二甲酸酯 3.26%、香叶基丙酮 2.30%。结论:该文首次采用气相色谱-质谱联用法对
短柄南蛇藤叶普通粉中的挥发性成分进行研究。
关键词:短柄南蛇藤叶;有机溶剂-水蒸汽蒸馏;挥发性成分;气相色谱-质谱联用
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1004-311X(2008)06-0054-03
Determination of Chemical Constituents of Volatile Oil from the
Ordinary Pulverization of the Leaves of Celastrus rosthornianus Les
DING Li-na1 , 2 ,YANG Nai-jia1 ,LIU Jian-hua1 ,AN Li-qun2 , LIU Wen-wei1＊
(1.Guizhou Institute of Biotechnology Research and Development , Guizhou 550002;2.College of Life Science , Guzhou University , Guizhou 550025;
3.School of Medicine , Guiyang College of Pharmacology ,Guiyang 550004 , China)
Abstract:Objective:To study the chemical constituents of the volatile oil from the ordinary pulverization of the leaves of Celastrus rosthornianus
Loes Method:The chemical compositions of the volatile oil of the plants which were obtained by Organic-team distillation with hexane were ana-
lyzed by GC-MS.The constituents were identified by their mass spectra.The relative percentage of the oil constituents was calculated from the
GC peak areas.Result:fivty kind of chemical components are identified from ordinary pulverization of the leaves of Celastrus rosthornianus Loes.
The amount of the identified components were accounted for 92.24% of all the volatile oil.The most relative contents were more than 2% were
determined as Oleic acid 31.59%, 13-Octadecenal 29.74%, Palmiticacid 4.41%,(E)-2-Hexenal 3.36%, Isobutyl phthalate 3.26%,Ger-
anyl acetone 2.30%.Conclusion:This paper reported , for the first time , the composition of volatile oils of the leaves of Celastrus rosthornianus
Loes by GC-MS.
Key words:the leaves of Celastrus rosthornianus Loes;organic-steam distillation;volatile oil;GC-MS
收稿日期:2008-07-09;修回日期:2008-09-16
基金项目:贵州专项资金项目资助(“贵州植物药材抗菌 、抗虫活性研
究” ,黔省专合字[ 2006] 81号)
作者简介:丁丽娜(1981-),女 , 在读硕士;＊通讯作者:刘文炜 ,女 ,
Email:khliuwenwei@163.com。
　　短柄南蛇藤(Celastrus rosthornianus Loes)为卫矛科南蛇藤属
植物 ,生于山坡 , 路旁草丛和灌丛中 , 分布于陕西 、浙江 、福建 、
湖北 、广东 、广西 、四川 、贵州 、云南。其根 、茎 、叶 、果实等均可
入药。短柄南蛇藤叶味辛 、苦 , 性平 、小毒。功效为祛风除湿 ,
活血止血 , 解毒消肿。 主治风湿痹痛 , 跌打损伤 , 脘腹痛 , 牙
痛 ,疝气痛 , 月经不调 , 经闭 , 血崩 , 肌衄 , 疮肿 , 带状疱疹 , 湿
疹[ 1] 。文献资料[ 2-6] 表明:对短柄南蛇藤的研究主要集中在根
皮及藤茎的化学成分和抗肿瘤 、杀虫活性方面 ,对短柄南蛇藤
叶及其挥发性成分的研究较少 , 本文首次利用简便的有机溶
剂-水蒸汽蒸馏法提取短柄南蛇藤叶的挥发油 , 并对其挥发
油化学组成进行了定性定量的研究。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　材料与试剂:药材为短柄南蛇藤叶 (80 目)[ 药材采自
贵州镇远 ,由贵阳中医学院孙庆文老师鉴定为卫矛科南蛇藤
属植物短柄南蛇藤 Celastrus rosthornianus Loes] 。所用试剂均为
国产分析纯。
1.1.2　仪器:美国惠普公司(Hcwlctt Packard)HP-6890 HP5973
GC-MS 气质联用仪;挥发油提取器。
1.2　方法
1.2.1　短柄南蛇藤叶挥发油的提取:取过 80 目筛短柄南蛇藤
叶20g ,加入2 000ml水及 4ml正己烷 , 采用《中国药典》挥发油
提取装置[ 7]提取 , 收集上层油状物 , 用无水硫酸钠干燥作为供
试品。
1.2.2　短柄南蛇藤叶挥发性成分定性定量分析:取短柄南蛇
藤叶提取物 1μl ,进样 , 用 GC-MS 仪器进行分离测定。
气相色谱条件:HP-5MS5% Phenyl Methyl Siloxane(30m×
250μm×0.25μm)弹性石英毛细管柱 , 柱温 50℃(保留 2min), 以
4℃·min-1升温至 280℃(保持 2min);汽化室温度 250℃;载气
为高纯度 He(99.99%);柱前压 7.62Psi;流速 1.0ml·min-1;进
样量 1μl;分流比 40∶1。
质谱条件:离子源 EI 源;离子源温度 230℃;四级杆温度
150℃;电子能量 70eV;发射电流 34.6μA;倍增器电压2013V;接
口温度 280℃;溶剂延迟 4min;质量范围 10～ 500amu。
定性分析:通过 HP MSD化学工作站检索 Nist98标准质谱
图库和WILEY275质谱图库 , 同时结合有关质谱图文献解析 ,
确认短柄南蛇藤叶挥发性物质的化学成分 。
定量分析:通过HP MSD化学工作站数据处理系统 , 按峰
面积归一化法进行计算求出短柄南蛇藤叶各化学成分的峰面
积相对百分含量。
2　结果
短柄南蛇藤叶普通粉化学组分图谱见图 1 ,各化学成分的
峰面积相对百分含量见表 1。
图 1　短柄南蛇藤叶普通粉挥发性成分总离子流图
Fig.1　Total ion chromatogram of the volatile constituents from the ordinary
pulverization of the leaves of Celastrus rosthornianus Loes
3　讨论
在短柄南蛇藤叶普通粉挥发性成分中共提取分离 74 个
成分 ,检测出 50 个化学成分 , 占挥发油总量的 92.24%, 多为
萜类化合物(单萜 、倍半萜)和链状芳香族化合物(烷烃 、醇 、酯
及羧酸)等 ,其中相对含量较高的为油酸 31.59%、13-十八碳
烯 29.74%、棕榈酸 4.41%、反-2-己烯醛 3.36%、异丁基邻
苯二甲酸酯 3.26%、香叶基丙酮 2.30%。其中 ,反-2-己烯
醛(青叶醛)是植物叶片呈现强烈青草气味的主要物质。以上
检测分析结果可以看出 , 短柄南蛇藤叶的挥发性成分是很丰
富的 , 需从不同角度和不同方法对其进行研究 , 本文是首次对
短柄南蛇藤叶的挥发性化学成分进行研究 , 为综合利用短柄
南蛇藤提供了科学依据。
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表 1　短柄南蛇藤叶普通粉检出化学成分及峰面积相对百分含量
Table 1　Percentage composition of the volatile constituents from the ordinary pulverization of the leaves of Celastrus rosthornianus Loes
序号
No.
保留时间(min)
RT
化合物
Compound
分子式
Molecular formula
分子量
Molecular weight
含量
RC(%)
1 4.14 Hexanal 正己醛 C6H12O 100 1.40
2 5.28 (E)-2-Hexenal 反-2-己烯醛 C6H10O 98 3.36
3 6.46 Heptenal 庚烯醛 C7H16O 114 0.39
4 8.12 Benzaldehyde 苯甲醛 C7H6O 106 0.40
5 8.69 1-Octen-3-ol 1-辛烯-3-醇 C8H16O 128 0.26
6 8.98 2-Pentyl Furan 2-戊基呋喃 C9H14O 138 0.18
7 9.06 Camphene 樟脑萜 C10H16 136 0.25
8 9.16 (E , E)-2 , 4-Heptadienal(E , E)-2 , 4-庚二烯醛 C8H14O 110 0.28
9 9.31 Octanal 辛醛 C8H16O 128 0.10
10 9.56 1-ethyl-Cyclohexene 1-乙基-环己烯 C7H10O 110 0.47
11 10.09 Limonene 艹宁稀 C10H16 136 0.423
12 10.14 1 , 8-Cinede 1 , 8-按树酚 C10H18O 154 0.18
13 10.26 2 , 2, 6-trimethyl Cyclohexanone 2 ,2 , 6-三甲基环己酮 C9H16O 136 0.12
14 10.45 β -Phorone β -佛尔酮 C9H14O 138 0.30
15 10.56 Hyacinthin 苯乙醛 C8H8O 120 0.31
16 11.66 Allyl hexanoate 己酸烯丙酯 C9H16O 2 156 0.22
17 12.26 Linalool 芳樟醇 C10H8O 154 0.50
18 12.34 Nonanal 壬醛 C9H18O 142 1.00
19 12.85 Isophorone 异佛尔酮 C9H14O 138 0.14
20 13.38 5-Undecen-4-one 5-十一烯-4-酮 C11H20O 168 0.15
21 13.56 Camphor 樟脑 C10H16O 152 0.13
22 14.14 1 , 6-Dimethyl decalin 1, 6-二甲基十氢化萘 C12H22 166 0.14
23 14.56 Terpinen-4-ol萜品烯-4-醇 C10H18O 154 1.12
24 14.71 Naphthalene 萘 C10H8 128 0.20
25 14.83 2 , 6-Dimethyl decalin 2, 6-二甲基十氢化萘 C12H22 166 0.20
26 15.13 2 , 3-Dimethyl decalin 2, 3-二甲基十氢化萘 C12H22 166 0.44
27 15.77 β -Cyclocitralβ -环柠檬醛 C10H16O 152 0.42
28 16.81 β -Cyclohomocitralβ -环高柠檬醛 C10H18O 166 0.10
29 20.04 α-Copaeneα-古巴烯 C15H24 204 0.12
30 20.56 Tetradecane 十四烷 C14H30 198 0.15
31 20.86 Junipene 刺伯烯 C15H24 204 0.25
32 21.21 β -Caryophyllene β -石竹烯 C15H24 204 0.31
33 21.36 α-Ionone α-紫罗兰酮 C13H20O 192 0.27
34 21.95 Geranyl acetone 香叶基丙酮 C13H22O 194 2.30
35 22.66 2 ,6-di(t-butyl)-4-methyl-2, 5-4-methyl-2 , 5-Cyclohexadien-1-
one 2 ,6-二叔丁基-4-甲基-2 , 5-环己二烯-1-酮 C15H22O 218 0.27
36 22.83 β -Ionone β -紫罗兰酮 C13H20O 192 0.64
37 23.07 Pentadecane 十五烷 C15H32 212 0.28
38 23.49 4-Methyl-2 , 6-di-tert-Butylphenol 4-甲基-2 ,6-二叔丁基苯酚 C15H24O 220 0.26
39 24.49 Lauryl bromide 十二烷基溴 C12H25Br 248 0.51
40 24.69 Nerolidol 橙花叔醇 C15H26O 222 0.40
41 25.45 Hexadecane 十六烷 C16H34 226 0.48
42 25.74 α-Cedrolα-洋杉醇 C15H26O 222 0.44
43 27.71 Heptadecane 十七烷 C17H36 240 0.27
44 30.83 6 , 10 , 14-Trimethy-2-Pentadecanone 6 ,10 ,14-三甲基-2-十五烷酮 C18H36O 268 1.57
45 31.36 Isobutyl phthalate 异丁基邻苯二甲酸酯 C16H22O4 278 3.26
46 32.34 Farnesol法呢醇 C15H26O 222 0.53
47 33.23 Butyl phthalate 邻苯二甲酸丁酯 C16H22O4 278 1.01
48 34.81 Palmiticacid 棕榈酸 C16H32O2 256 4.41
49 36.88 Oleic acid油酸 C18H34O2 282 31.59
50 42.30 13-Octadecenal 13-十八碳烯 C18H34O 266 29.74
合计 92.24
56　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　生　物　技　术　　　　　　　　　　　　　　　　　2008年 18(6)