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白背叶根提取物的抗炎机制初探



全 文 :2014年 第 17卷 第 1期 广西中医药大学学报
白背叶根为广西民间常用草药,系壮药材之一,为大戟科
野桐属植物白背木 Mallotus apelta(Lour.)Muell. Arg.的干燥
根。壮医药理论认为,其性平,微涩、微苦,通谷道,除湿毒,清
热毒,用于肝炎、脾肿大、降白呆(带下)、肉扭(淋证)、白冻(泄
收稿日期:2013-12-25
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 11107009-2-2);广西中医药管理局中医药专项课题(GZKZ09-14);广西
高等学校特色专业及课程一体化建设项目(GXTSZY014)
通讯作者:王志萍
白背叶根提取物的抗炎机制初探
黄卓坚 1,王志萍 1,夏 星 1,冯 桥 2,雷晓翠1
(1.广西中医药大学,广西 南宁 530001;2.广西壮医医院,广西 南宁 530001)
摘 要:[目的]研究白背叶根提取物的抗炎作用及机制。[方法]采用角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型,观察白背叶根提取
物对小鼠足趾肿胀炎症足中 NO,MDA,SOD的影响。[结果]白背叶根提取物高、中剂量能显著减轻角叉菜胶引起小鼠足趾肿
胀的肿胀率(P <0.01);白背叶根提取物高、中剂量能显著降低角叉菜胶致小鼠肿胀足的 NO含量(P <0.01或 P <0.05);白背叶
根提取物高剂量能显著降低角叉菜胶致小鼠肿胀足的 MDA含量(P <0.05);白背叶根提取物高、中、低剂量能显著提高角叉菜
胶小鼠肿胀足的 SOD活力(P <0.01)。[结论]白背叶根提取物对急性炎症具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制细胞内 NO
的释放,抑制脂质过氧化物生成和提高抗氧化能力有关。
关键词:白背叶;根;提取物;抗炎机制
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:2095-4441(2014)01-0081-03
图 2 样品紫外光谱图
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(编辑 陈明伟)
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2014,Vol.17 No.1Journal of Guangxi University of Chinese Medicine
表 1 白背叶根提取物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀率的影响 (x ± s)
剂量(g/kg) 肿胀率(%) 肿胀抑制率(%)
- 38.40±4.04 -
0.006 12.44±6.06① 67.60
0.717 30.63±4.42① 20.23
0.358 30.95±6.96① 19.40
0.179 36.84±9.91 4.06
注:与模型组比较,①P <0.01
组 别 n
模型组 10
地塞米松组 10
白背叶根高剂量组 10
白背叶根中剂量组 10
白背叶根低剂量组 10
泻)、兵嘿细勒(疝气)、火眼、中耳炎、子宫下垂、脱肛[1]。中医
药理论认为,其性平,味微苦涩,归肝、脾经,具有清热解毒、收
涩消瘀、抗肝纤维化、降低转氨酶等作用,用于慢性肝炎、肝脾
肿大、子宫脱垂、脱肛、白带、妊娠水肿[2-4]。本实验对白背叶
根提取物的抗炎作用及机制进行初步探讨, 为进一步开发白
背叶根提供理论及实验依据。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 白背叶根采于广西南宁市郊老虎岭,经广
西中医药大学壮医药学院韦松基教授鉴定为大戟科野桐属植
物白背木 Mallotus apelta(Lour.)Muell. Arg.的干燥根。称取
白背叶根粗粉适量,置于圆底烧瓶中,按料液比 1∶8加入 50%
乙醇,用电热套加热,回流提取 2次,每次 1 h,过滤,合并滤
液,减压浓缩至无醇味,继续浓缩至浓度为 2 g/ml的药液,喷
雾干燥,得提取物干燥粉,再加入蒸馏水分别配成相应浓度的
白背叶根提取物溶液。白背叶根提取物的灌胃剂量为干粉重
量。醋酸地塞米松片(浙江仙琚制药股份有限公司,批号:
1103120);角叉菜胶(上海源叶生物科技有限公司,批号:
YY13755);生理盐水(广西源裕药业有限公司,批号:
13012101);超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(批号:20130709)、
丙二醛(MDA)测试盒(批号:20130711)、一氧化氮(NO)测试
盒(批号:20130712)均由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 动物 昆明种小鼠,18~22 g,雄性,由广西医科大学实
验动物中心提供,动物许可证号: SCXK桂 2003-0003。
1.3 仪器 TU-1901紫外分光光度计(北京普析通用仪器有
限责任公司 LMXO27D);L-600台式低速自动平衡离心机(长
沙湘仪离心机仪器有限公司);EL-204电子天平[梅特勒-托
利多仪器(上海)有限公司];恒温水浴锅(北京医疗仪器厂)。
2 方 法
2.1 白背叶根提取物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀率的影
响[ 5] 实验采用完全随机设计的方法,将昆明种小鼠 60只分
为 6组:空白对照组,模型组,地塞米松组,白背叶根提取物
低、中、高剂量组,每组 10只。空白对照组、模型组给予等量
生理盐水, 地塞米松组予地塞米松 0.006 g/kg,白背叶根低、
中、高剂量组分别予白背叶根提取物 0.179,0.358,0.717 g/kg。
每日灌胃给药 1次,连续 7 d,末次给药 30 min后,除空白对
照组外,其余每组每只小鼠右后肢足跖注射 1%角叉菜胶
30 μl,4 h后颈椎脱臼处死,于踝关节处剪下左右后肢,称重,
计算肿胀抑制率。肿胀率(%)=(右足重量–左足重量)/左足
重量×100%;肿胀抑制率=(模型组平均肿胀率-给药组平均
肿胀率)/模型组平均肿胀率×100% 。
2.2 各组小鼠足爪中 NO,MDA,SOD含量的测定[6] 剪下各
组小鼠足趾,剪碎,按重量∶体积为 1∶9的比例加入 9倍体积的
生理盐水,浸泡 1 h,离心,取上清液。足爪中 NO采用硝酸还
原酶法,MDA采用硫代巴比妥酸法,SOD采用黄嘌呤氧化酶
法分别进行含量的测定,按试剂盒说明书进行操作。
2.3 统计学处理 实验数据以x ± s表示,两组间均数差异采
用 t检验,P <0.05为有统计学意义。
3 实验结果
3.1 白背叶根提取物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀率的影
响 见表 1。
表 1结果显示,与模型组比较,地塞米松组及白背叶根提
取物高、中剂量组均能显著减轻角叉菜胶引起小鼠足趾肿胀
的肿胀率(P <0.01)。
3.2 各组小鼠足爪中 NO,MDA,SOD 含量的测定结果 见
表 2。
表 2结果显示,与空白对照组比较,模型组 NO,MDA明
显升高(P <0.01),而 SOD明显下降(P <0.01)。与模型组比
较,白背叶根提取物高、中剂量均能显著降低角叉菜胶致小鼠
肿胀足的 NO含量(P <0.01或 P <0.05);高剂量能显著减低
角叉菜胶致小鼠肿胀足的MDA含量(P <0.05);高、中、低剂量
均能显著提高角叉菜胶致小鼠肿胀足的 SOD活力(P <0.01)。
4 讨 论
炎症是指具有血管系统的活体组织对各种损伤因子刺激
所发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。其中局部的
血管反应是炎症过程的主要特征和防御反应的中心环节。急
性炎症反应的特征是血管变化和渗出性改变。本试验采用的
角叉菜胶致小鼠足趾肿胀试验为常规的急性炎症模型。试验
结果表明,白背叶根提取物能显著减轻角叉菜胶致小鼠足肿
胀的程度。
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2014年 第 17卷 第 1期 广西中医药大学学报
HPLC-ELSD法测定银杏洋参颗粒中萜类内酯的含量
朱雪妍,罗 轶,谷立勍
(广西壮族自治区食品药品检验所,广西 南宁 530021)
摘 要:[目的]建立 HPLC-ELSD法测定银杏洋参颗粒中白果内酯、银杏内酯 A、银杏内酯 B和银杏内酯 C的含量。[方
法]采用 SunfireTM C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水(30∶70)为流动相进行洗脱,流速 1.0 ml/min,柱温 35 ℃,漂
移管温度 110 ℃,气体流速 2.9 L/min。[结果]白果内酯在 0.9333~7.778 μg范围内线性关系良好(r=0.9994),平均加样回收率
为 98.89%(RSD=1.20%);银杏内酯 A在 0.9846~8.205 μg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均加样回收率为 104.63%(RSD=
1.10%);银杏内酯 B在 0.9144~7.620 μg范围内线性关系良好(r=0.9992),平均加样回收率为 100.21%(RSD=2.78%);银杏内酯
C在 0.3027~2.5225 μg范围内线性关系良好(r=0.9991),平均加样回收率为 103.80%(RSD=2.11%)。[结论]该方法操作简便,
方法可靠,结果准确,灵敏度高,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。
关键词:HPLC-ELSD;银杏洋参颗粒;白果内酯;银杏内酯A;银杏内酯B;银杏内酯C;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:2095-4441(2014)01-0083-03
收稿日期:2014-02-25
表 2 各组小鼠足爪中 NO,MDA,SOD的测定结果 (x ± s)
剂量(g/kg) NO(μmol/L) MDA(nmol/ml) SOD(U/ml)
- 7.61±6.41 3.75±1.4 17.92±1.12
- 84.78±22.51① 7.70±1.95① 14.75±0.85①
0.006 30.71±12.70③ 4.94±1.81③ 17.20±1.26③
0.717 48.72±16.13③ 5.79±2.07② 16.44±0.75③
0.358 59.92±24.52② 5.94±2.32 15.99±1.01③
0.179 83.64±23.70 7.24±4.74 16.13±0.66③
注:与空白对照组比较,①P <0.01;与模型组比较,②P <0.05,③P <0.01
组 别 n
空白对照组 10
模型组 10
地塞米松 10
白背叶根高剂量组 10
白背叶根中剂量组 10
白背叶根低剂量组 10
NO具有细胞毒性作用,诱导促炎症细胞因子产生,如肿
瘤坏死因子-α、白细胞介素-1等[7]。SOD作为生物体内超氧
离子自由基的清除剂,具有良好的抗氧化、抗炎症的功效[8]。
MDA为多不饱和脂肪酸过氧化物的降解产物,与脂蛋白交联
有毒性作用。测定 MDA的量可反映机体内脂质过氧化的程
度,间接反映细胞损伤的程度。本试验表明白背叶根提取物
能降低角叉菜胶致小鼠足趾肿胀炎症足中 NO,MDA的含量,
提高 SOD的活力,提示其抗炎作用可能与抑制细胞内 NO的
释放,抑制脂质过氧化物生成和提高抗氧化能力有关。
近年来,中药抗炎作用已经受到广泛关注,白背叶根为广
西民间常用草药,属于地道的广西壮药材,其抗炎作用在医书
上已有记载,但是其抗炎机制未有文献报道,本文通过实验初
探白背叶根的抗炎机制,为今后开发白背叶根提供了科学
依据。
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(编辑 陈明伟)
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