全 文 ：China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 15 中国药房 2011年第22卷第15期
复方黄根颗粒是由广西中医学院附属瑞康医院生产的院
内制剂，主要由黄根、叶下珠、绞股蓝、黄芪、三七等几味中草
药制成，具有解毒、利湿、化瘀、益气、健脾、护肝之功效，主治
慢性乙型肝炎、脂肪肝、酒精性肝病。方中黄根败毒抗癌、凉
血消炎，是近年来治疗肝炎病价值较高的新药[1]；叶下珠具有
明显抗乙型肝炎病毒和对肝损伤的保护作用；绞股蓝具有护
肝和增强机体免疫功能的功效；黄芪能增强T淋巴细胞免疫功
能，对细菌和病毒均有明显的抑制作用；三七具有保肝、增强
肝脏解毒的功能。对于黄芪甲苷、人参皂苷Rg1和人参皂苷
Rb1的含量测定方法，主要有薄层扫描法和高效液相色谱-紫外
检测（HPLC-UV）法[2，3]。本试验对方中主要药味叶下珠进行了
薄层色谱（TLC）鉴别，用高效液相色谱 -蒸发光散射检测
（HPLC-ELSD）法对制剂中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄
芪甲苷同时进行定量分析，建立了可靠、准确、专属性强的质
量控制标准。
1 仪器与试药
Agilent 1100 Series HPLC仪，包含G-1322A在线真空脱气
机、G-1311A高压四元梯度泵、G-1313A标准自动进样器、
G-1316A智能化柱温箱、PL-ELS 2100型ELSD器、色谱工作站
数据处理系统（美国Agilent公司）；BP211D型电子分析天平
（德国 Sartorius公司）；超纯水系统（美国Millipore公司）；
SB25-12D超声波清洗仪（宁波新芝生物科技股份有限公司，功
率：600W，频率：50 Hz）。
没食子酸（批号：110831-200302）、人参皂苷 Rg1（批号：
110703-200424）、人参皂苷Rb1（批号：110704-200420）、黄芪甲
苷（批号：110781-200613）对照品均由中国药品生物制品检定
所提供；乙腈（色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司，批
号：080724101）；其他试剂均为分析纯，水为超纯水；复方黄根
颗粒（广西中医学院附属瑞康医院自制，批号：20060901、
20060902、20060903）。
2 方法与结果
2.1 TLC鉴别
取本品 10 g，加乙酸乙酯 40 mL，超声提取 30 min，放冷，
滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液；取
按处方量不含叶下珠的阴性样品，同法制备阴性对照溶液；另
取没食子酸对照品，加甲醇制成每 1 mL含 1 mg的溶液，作为
对照品溶液。照TLC法[4]试验，吸取上述溶液各10 μL，分别点
于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-氯仿-丙酮-甲酸（8 ∶ 5 ∶ 7 ∶ 2）
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10％氯化铁乙醇溶液，于
105℃加热至斑点显色清晰。结果，供试品色谱中，在与对照
品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；阴性对照无干扰。
叶下珠的TLC见图1。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：岛津Shim-pack
CLC-ODS（150 mm×6.0 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-水（B），
按表1进行梯度洗脱；流速：1.0 mL·min-1；柱温：25℃；漂移管
复方黄根颗粒的质量标准研究Δ
冯 旭＊，邓家刚，李 松（广西中医学院，南宁市 530001）
中图分类号 R283.627；R927.1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）15-1402-03
摘 要 目的：建立复方黄根颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对叶下珠进行定性鉴别；采用高效液相色谱-蒸发光散射检
测法对制剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲苷进行含量测定。结果：定性鉴别法分离度好、专属性强；人参皂苷Rg1、人参皂
苷Rb1和黄芪甲苷进样量分别在1.26～12.60、0.41～4.10和2.83～28.30 μg范围内，其自然对数与各自峰面积的自然对数呈良好的
线性关系（r＞0.999 0），三者平均加样回收率分别为99.34％、100.80％和100.10％，RSD分别为1.2％、2.4％和1.2％（n＝6）。结论：
所建标准可有效控制复方黄根颗粒的质量。
关键词 复方黄根颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱-蒸发光散射检测法；叶下珠；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；黄芪甲苷；质量标准
Quality Standard of Compound Huanggen Granule
FENG Xu，DENG Jia-gang，LI Song（Guangxi Traditional Chinese Medical University，Nanning 530001，Chi-
na）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the quality standard for Compound huanggen granule. METHODS：Phyllanthus urinaria
of Compound huanggen granule were identified by TLC. Ginsenoside Rg1，ginsenoside Rb1 and astragaloside Ⅳ were determined
by HPLC-ELSD. RESULTS：The qualitative identification was well-separated and specific. The linear ranges of ginsenoside Rg1，
ginsenoside Rb1 and astragaloside Ⅳ were 1.26-12.60 μg，0.41-4.10 μg and 2.83-28.30 μg（r＞0.999 0）. The average recoveries of
ginsenoside Rg1，ginsenoside Rb1 and astragaloside Ⅳ were 99.34％，100.80％ and 100.10％，respectively. RSD were 1.2％，2.4％
and 1.2％（n＝6）. CONCLUSION：Established standard can be used for quality control of Compound huanggen granule effectively.
KEY WORDS Compound huanggen granule；TLC；HPLC-ELSD；Phyllanthus urinaria；Ginsenoside Rg1；Ginsenoside Rb1；As-
tragaloside Ⅳ；Quality standard
Δ广西教育厅科研项目（201010LX256）；广西科学研究与技术开发
计划科技攻关项目（桂科攻0235023- 1）
＊副教授，硕士。研究方向：中药、天然药物及其制剂的成分分
析。电话：0771-2219877。E-mail：gxnnfx@yahoo.com.cn
··1402
中国药房 2011年第22卷第15期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 15
温度：110℃；雾化室温度：80℃；气
体流量：1.0 L·min-1。在此条件下，
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲
苷峰均与相邻成分色谱峰达到基线
分离，分离度均＞1.5，处方中其他
成分对测定无干扰。理论板数以黄
芪甲苷峰计算不少于 3 000。色谱
见图2。
2.2.2 混合对照品溶液的制备 取
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲
苷对照品各适量，精密称定，加甲醇
制成每 1 mL 分别含人参皂苷
Rg11.26 mg、人参皂苷 Rb10.41 mg、
黄芪甲苷 2.83 mg的混合对照品溶
液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备 取本品
装量差异项下的内容物，研细，取细
粉15.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁
醇 50 mL，密塞，称重，超声 30 min，放冷，再称重，用水饱和的
正丁醇补足失重，滤过，精密量取25 mL滤液，置分液漏斗中，
用氨试液洗涤4次，每次20 mL；取正丁醇层水浴蒸干，残留物
加甲醇溶解并定容至5 mL，即得供试品溶液。
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例和工艺制备不含绞
股蓝、黄芪和三七的阴性样品，照“2.2.3”项下方法制备阴性对
照溶液。
2.2.5 线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液1、2、4、6、8、
10 mL，分别置于10 mL容量瓶中，以甲醇定容，得不同浓度的
对照品溶液，按上述色谱条件进样 10 μL，测定峰面积。以峰
面积的自然对数（Y）对进样量（μg）的自然对数（X）进行线性回
归，得人参皂苷 Rg1的回归方程为 Y＝0.994 4X+2.994 6（r＝
0.999 4）；人参皂苷Rb1的回归方程为Y＝0.997 4X+2.978 2（r＝
0.999 2）；黄芪甲苷的回归方程为 Y＝0.997 5X+3.051 0（r＝
0.999 1）。结果表明，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲苷的
进样量分别在 1.26～12.60、0.41～4.10、2.83～28.30 μg范围
内，其自然对数与各自峰面积的自然对数呈良好线性关系。
2.2.6 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液，在上述色谱
条件下重复进样 6次，每次 4 μL。结果，人参皂苷Rg1、人参皂
苷Rb1和黄芪甲苷峰面积的RSD分别为 1.2％、1.8％和 1.6％
（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液20 μL，分别于0、2、
4、8、12、24 h进样，测定峰面积。结果，人参皂苷Rg1、人参皂苷
Rb1和黄芪甲苷峰面积的RSD分别为1.2％、1.8％和2.0％（n＝
6），表明供试品溶液在24 h内基本稳定。
2.2.8 重复性试验 取同一批（批号：20060901）样品适量，共
6份，分别按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条
件下精密吸取 20 μL注入色谱仪，测定峰面积。结果，人参皂
苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄芪甲苷的平均含量分别为 0.150 9、
0.051 14和 0.484 4 mg·g-1，RSD分别为 1.3％、2.6％和 1.9％
（n＝6），表明方法重复性良好。
2.2.9 加样回收率试验 取已知含量的样品 7.5 g，共 6份，精
密称定，精密加入混合对照品溶液，按“2.2.3”项下方法制备供
试品溶液，按上述色谱条件进样20 μL，测定样品含量，计算加
样回收率，结果见表2～表4。
表2 人参皂苷Rg1的加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 2 Results of recovery test of ginsenoside Rg1（n＝6）
序号
1
2
3
4
5
6
样品含量/mg
1.132 0
1.129 0
1.133 0
1.130 0
1.136 0
1.130 0
加入量/mg
1.26
1.26
1.26
1.26
1.26
1.26
测得量/mg
2.372 0
2.378 0
2.409 0
2.385 0
2.388 0
2.368 0
回收率/％
98.41
99.13
101.27
99.60
99.36
98.25
x/％
99.34
RSD/％
1.2
表3 人参皂苷Rb1的加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 3 Results of recovery test of ginsenoside Rb1（n＝6）
序号
1
2
3
4
5
6
样品含量/mg
0.383 6
0.382 6
0.384 0
0.383 0
0.385 0
0.393 0
加入量/mg
0.41
0.41
0.41
0.41
0.41
0.41
测得量/mg
0.802 9
0.799 8
0.789 8
0.805 6
0.802 2
0.790 2
回收率/％
102.27
101.76
98.98
103.07
101.76
96.88
x/％
100.79
RSD/％
2.4
表4 黄芪甲苷的加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 4 Results of recovery test of astragalosideⅣ（n＝6）
序号
1
2
3
4
5
6
样品含量/mg
3.634 0
3.624 0
3.637 0
3.627 0
3.647 0
3.627 0
加入量/mg
2.83
2.83
2.83
2.83
2.83
2.83
测得量/mg
6.451 0
6.512 0
6.471 0
6.443 0
6.487 0
6.423 0
回收率/％
99.54
102.05
100.14
99.51
100.35
98.80
x/％
100.06
RSD/％
1.2
2.3 样品含量测定
分别取3批复方黄根颗粒样品，按“2.2.3”项下方法制备供
试品溶液，按上述色谱条件进样测定，每个样品重复测定3次，
记录峰面积，计算各样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄芪
甲苷的平均含量，结果见表5。
3 讨论
本方的君药为黄根，但因制剂过程中提取工艺等原因，黄
根的TLC鉴别未检出，因此本试验选择了方中另一味主药叶
下珠进行定性鉴别。叶下珠中主要有效成分为没食子酸，经
1 2 3 4 5
图1 叶下珠的TLC
1～3.供试品；4.没食子酸对
照品；5.阴性对照
Fig 1 TLC of Phyllan-
thus urinaria
1～3.test samples； 4.gallic
acid control；5. negative con-
trol
表1 流动相梯度洗脱程序
Tab 1 The gradient elution program of mobile phase
时间/min
0
10
35
55
65
流动相A/％
75
75
67
35
25
流动相B/％
25
25
33
65
75
0 10 20 30 40 50 60 min
A
0 10 20 30 40 50 60 min
B
0 10 20 30 40 50 60 min
C
1
2
3 3
2
1
图2 高效液相色谱图
A.阴性对照；B.混合对照品；C.供试品；1.人参皂苷Rg1；2.人参皂苷
Rb1；3.黄芪甲苷
Fig 2 HPLC chromatograms
A. negative control；B. mixed control；C. Test sample；1. ginsenoside
Rg1；2.ginsenoside Rb1；3. astragalosideⅣ
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China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 15 中国药房 2011年第22卷第15期
考察多种色谱条件，结果以甲苯-氯仿-丙酮-甲酸（8 ∶ 5 ∶ 7 ∶ 2）为
展开剂的展开效果较好，故最后确定了上述叶下珠定性鉴别
的TLC条件。
人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄芪甲苷在紫外区无吸收，
现有测定方法有薄层扫描法和HPLC-UV法[1，2]，但薄层扫描法
的稳定性和重复性不佳，而 HPLC-UV法多采用末端吸收
（203～210 nm）进 行 测 定 ，干 扰 较 大 。 本 试 验 采 用
HPLC-ELSD法同时测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄芪甲
苷的含量，不受流动相溶剂和样品中其他成分的干扰，试验结
果表明分离度好、干扰少，灵敏度、稳定性与重复性均符合含
量测定要求，可作为复方黄根颗粒质量控制的方法。
在选择提取溶剂时，考察比较了甲醇、乙醇、水、正丁醇饱
和的水、水饱和的正丁醇等溶剂对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1
和黄芪甲苷提取率的影响。结果，以水饱和的正丁醇提取、氨
试液洗涤的方法对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和黄芪甲苷的
提取率最高，所以选择此方法制备供试品溶液用于测定样品
含量。
曾考察甲醇-水不同比例及乙腈-水不同比例等流动相，在
等度洗脱时分离效果均不理想。后用乙腈-水梯度洗脱（见表
1）后，可达基线分离，保留时间适中，且基线漂移小，故采用上
述色谱条件。
试验中考察了ELSD器不同漂移管温度、雾化室温度和气
体流量 3个主要参数对测定结果的影响，综合考虑最后确定
ELSD器的最佳条件为漂移管温度 110℃、雾化室温度 80℃、
气体流量1.0 L·min-1。
绞股蓝和三七中均含有人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1，而黄
芪甲苷是黄芪的主要有效成分。因此，在制作阴性样品时需
制作缺绞股蓝、三七和黄芪的三阴性样品。
参考文献
[ 1 ] 秦华珍，邓家刚，王 硕，等.黄根的文献研究[J].河南中
医学院学报，2006，21（5）：86.
[ 2 ] 兰丙欣，余孝东，尹秋霞，等.薄层扫描法测定益肾抗衰
片中黄芪甲苷的含量[J].中国药房，2003，14（3）：173.
[ 3 ] 程建峰，周 瑾，刘 梅，等.高效液相色谱法测定胃肠
舒颗粒中黄芪甲苷的含量[J].中国药房，2005，16（2）：
139.
[ 4 ] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2005
年版.北京：化学工业出版社，2005：附录31.
（收稿日期：2010-04-03 修回日期：2010-05-10）
表5 复方黄根颗粒有效成分含量测定结果（n＝3）
Tab 5 Content determination of active component in Com-
pound huanggen granule（n＝3）
批号
20060901
20060902
20060903
人参皂苷Rg1
/mg·g-1
0.150 9
0.152 3
0.161 9
RSD
/％
2.3
1.8
1.3
人参皂苷Rb1
/mg·g-1
0.051 14
0.050 36
0.051 29
RSD
/％
2.6
1.9
2.2
黄芪甲苷
/mg·g-1
0.484 4
0.475 4
0.493 8
RSD
/％
1.9
1.2
1.5
橘红痰咳煎膏的质量标准研究
宋丽军＊，赵文昌#（广东医学院药学院，东莞市 523808）
中图分类号 R283.621；R927.1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）15-1404-04
摘 要 目的：建立橘红痰咳煎膏的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对橘红痰咳煎膏中茯苓、化橘红进行定性鉴别；采
用高效液相色谱（HPLC）法测定橘红痰咳煎膏中的柚皮苷含量。结果：TLC斑点清晰，阴性对照无干扰；柚皮苷的进样量在
0.163～0.816 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r＝0.999 8），平均回收率为99.05％，RSD＝1.8％（n＝6）。结论：所建标
准可有效控制橘红痰咳煎膏的质量。
关键词 橘红痰咳煎膏；茯苓；化橘红；薄层色谱法；柚皮苷；高效液相色谱法；质量标准
Quality Standard of Juhong Tanke Soft Extracts
SONG Li-jun，ZHAO Wen-chang（College of Pharmacy，Guangdong Medical College，Dongguan 523808，Chi-
na）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the quality standard of Juhong tanke soft extracts. METHODS：Poria cocos and Citrus
grandis in the prescription of Juhong tanke soft extracts were identified by TLC. The content of naringin was determined by HPLC.
RESULTS：TLC spots were clear without interference from negative sample. The linear range of naringin was 0.163-0.816 μg（r＝
0.999 8）with an average recovery of 99.05％（RSD＝1.8％，n＝6）. CONCLUSION：Established standard can be used for the quali-
ty control of Juhong tanke soft extracts.
KEY WORDS Juhong tanke soft extracts；Poria cocos；Citrus grandis；TLC；Naringin；HPLC；Quality standard
＊副主任药师，博士。研究方向：中药新药研究与质量标准。
E-mail：songlijun6981@126.com
#通讯作者：高级工程师，博士。研究方向：缓控释制剂。E-mail：
zhaowenchang@126.com
橘红痰咳煎膏由化橘红、百部、茯苓、半夏等 8味药组成，
具有宣肺化痰、理气止咳之功能。其现行质量标准中仅有性
状、理化鉴别、检查等项目，质控指标少[1]。橘红痰咳煎膏比橘
红痰咳液、橘红痰咳糖浆、橘红痰咳颗粒等同品种其他剂型含
··1404