全 文 ：天然药物化学
从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷
的研究
李坤平1，曾玉冰1，高崇凯1，李卫民2
(1．广东药学院 药科学院，广东 广州 510006;2． 广州中医药大学 中药学院，广东 广州
510006)
摘要:目的 从布渣叶中分离制备高纯度异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷。方法 采用大孔吸附树脂富集布
渣叶总黄酮，用 Sephadex LH-20凝胶柱从布渣叶总黄酮中分离化合物单体，并采用 IR、MS 和1H-NMR、
13C-NMR 对其进行结构鉴定，利用 TLC 和 HPLC 对其纯度进行测定。结果 从布渣叶中分离出异鼠李
素-3-O-β-D-芸香糖苷，其质量分数大于 98． 0%。结论 该方法简便有效，可以从布渣叶中制备异鼠李素-
3-O-β-D-芸香糖苷对照品。
关键词:布渣叶;异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷;对照品
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2011． 01． 008
文章编号:1006-8783(2011)01-0031-03
Preparation of isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside from Microcos paniculata L．
LI Kun-Ping1，ZENG Yu-bing1，GAO Chong-kai1，LI Wei-ming2
(1． School of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical College，Guangzhou，Guangdong 510006，China;2． School
of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou，Guangdong 510006，
China)
Abstract:Objective To obtain high purity of isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside from M． paniculata L． ．Methods
Firstly，the total flavonoids of M． paniculata L． was enriched and purified with macroporous resin，and then
separated by Sephadex LH-20 column chromatography． The purity of isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside was
determined by TLC and HPLC． Its structure was demonstrated by IR，MS，1H-NMR and 13C-NMR spectral
analysis． Results Isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside was successfully separated from M． paniculata L．，and the
purity was above 98． 0% ． Conclusion This method is simple，convenient and effective，which can be used as a
reference substance for the quality control of M． paniculata L． and its preparations．
Key words:Microcos paniculata L．;iorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside;reference substance
收稿日期:2010-09-02
基金项目:广东高校优秀青年创新人才培养计划项目(LYM10092) ，广东省中医药局科研课题(2010418)
作者简介:李坤平(1978 －) ，男，博士，从事中药制药工程方面的教学与研究，Email:lkpchina@ hotmail． com。
网络出版时间:2011-01-21 17:20 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /44． 1413． R． 20110121． 1720． 021． html
布渣叶为椴树科 植 物 破 布 树 (Microcos
paniculata L．)的叶，其味甘淡，性微寒，具清热消
滞、利湿退黄之功效，广泛用于“王老吉”、“广东凉
茶”等中成药和凉茶饮料中，收载于 2010 年版《中
国药典》［1-2］。异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷具有抗
氧化、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性［3］，是布渣
叶中主要的黄酮类成分［4］，但尚未见异鼠李素-3-
O-β-D-芸香糖苷对照品分离制备的报道。本试验
建立了一种从布渣叶中利用大孔树脂富集、凝胶
柱色谱分离制备高纯度异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖
苷的方法。
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical College Feb． 2011，27(1)
1 仪器与试药
RE52A型旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限公
司) ;Vector 33 型傅立叶变换红外光谱仪(德国
Bruker公司) ;Q-Tof micro 四极杆飞行时间质谱［电
喷雾离子源(ESI)及 MassLynx 4． 1 数据处理系统，
Waters公司］;Avance Ⅲ型核磁共振谱仪(500 MHz，
瑞士 Bruker公司) ;LC-10AT 高效液相色谱仪(SPD-
10A Vp Plus 检测器，LC solution LITE 色谱工作站，
岛津公司)。
Sephadex LH-20(瑞典 Pharmacia 公司) ;D101
大孔树脂(天津海光化工有限公司) ;聚酰胺薄膜
(台州路桥四甲生化塑料厂) ;甲醇为色谱纯，磷酸
为分析纯，水为自制超纯水。
布渣叶购自广州致信中药饮片有限公司，由广
州中医药大学中药学院李卫民教授鉴定为椴树科植
物破布树(Microcos paniculata L．)的叶。
2 方法与结果
2． 1 布渣叶总黄酮的富集纯化
取布渣叶药材 2 kg，70%(体积分数，下同)乙
醇回流提取，提取液减压浓缩至无醇味，加入 5 倍量
水，离心，上清液倒入 500 g 处理好的 D101 大孔树
脂中，室温静态吸附过夜。依次用水、20%(体积分
数，下同)乙醇、70%乙醇洗脱，收集 70%乙醇洗脱
部位，减压蒸干即为布渣叶总黄酮。
2． 2 化合物的分离
将布渣叶总黄酮用少量甲醇溶解，上 Sephadex
LH-20 凝胶柱(3 cm × 40 cm) ，甲醇洗脱，聚酰胺薄
层色谱分析后合并相同流份，再用 Sephadex LH-20
凝胶柱(1． 5 cm × 200 cm)进行纯化，甲醇-水(体积
比 500∶ 50)洗脱，将异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷流
份减压蒸干后甲醇重结晶，真空干燥，得黄色粉末
32 mg。
2． 3 对照品的结构确证
黄色粉末，盐酸-镁粉反应阳性，Molish 反应为
阳性。IR(KBr)γ / cm －1:3 382，1 654，1 602，
1 503，1 453。ESI-MS m/z:623 ［M － H］－;ESI-
TOF-/MS /MS:m/z 477 ［M － rha － H］－，315［M －
rha － glc － H］－。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ:
6. 20 (1H，d，J = 2. 0 Hz，H-6) ，6． 42(1H，d，J =
2. 0 Hz，H-8) ，7. 85 (1H，d，J = 2． 0 Hz，H-2) ，7. 50
(1H，dd，J = 8. 5，2. 0 Hz，H-6) ，6． 90(1H，d，J = 8． 5
Hz，H-5) ，3． 83 (3H，s，—OCH3)和 0． 96 (3H，d，J
= 6． 0 Hz，rha—CH3)。其
13 C-NMR 数据如表 1 所
示。上述数据与文献 ［5，6］报道一致，因此鉴定
该化合物为异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷。
2． 4 对照品纯度的测定
2． 4． 1 对照品杂质的检查 参考 2010 年版《中国
药典》附录ⅥB薄层色谱法，点样量 1 μL，分别以甲
醇-HAC-水(体积比 10∶ 1∶ 0． 5)聚酰胺薄膜展开和三
氯甲烷-甲醇(体积比 7∶ 3)硅胶板展开，以 3%(质量
浓度)AlCl3 为显色剂，105 ℃加热 5 min后均为一个
亮黄色斑点，无其他杂质斑点。
表 1 化合物的13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)数据
Table 1 13C-NMR(125MHz，DMSO-d6)data of the compound
位置 化学位移 位置 化学位移
2 156． 5 OCH3 55． 7
3 133． 0 glc 3-O-glc
4 177． 4 1 101． 2
5 161． 2 2 74． 3
6 98． 8 3 76． 4
7 164． 1 4 70． 1
8 93． 9 5 75． 9
9 156． 5 6 66． 9
10 104． 0 rha (1→6)rha
1 121． 0 1 100． 9
2 113． 2 2 70． 3
3 146． 9 3 70． 6
4 149． 4 4 71． 8
5 115． 3 5 68． 3
6 122． 3 6 17． 7
2． 4． 2 对照品纯度的检测［4］ 采用 HPLC 法，峰面
积归一化法确定对照品的质量分数。色谱条件为
Kromasil C18柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;柱温为 35
℃;流动相为甲醇(A)-水(含 0． 2% H3PO4，B) ，依
下列程序梯度洗脱:0 ～ 8 min，80% B ～ 70%B;8 ～ 35
min，70% B ～ 50%B;35 ～ 60 min，50% B ～ 20 %B;流
速为 1 mL·min －1;检测波长为 276 nm。测得样品
质量分数为 98． 2%，见图 1。
23 广东药学院学报 第 27 卷
图 1 异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的 HPLC图
Figure 1 HPLC chromatography of Isorhamnetin-3-O-β-D-
rutinoside
3 讨论
异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷具有很强的抑制肿
瘤和抑制 EB 病毒早期抗原活性［3］，且在不同产地
布渣叶药材中含量均较大［4］。采用大孔树脂富集
结合凝胶柱色谱法制备布渣叶中异鼠李素-3-O-β-D-
芸香糖苷，样品损失少，方法简单，可快捷有效地制
备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷对照品。
广东药学院中心实验室芮雯老师和姜苗苗老师
在测试过程中给予大力帮助，谨致谢意。
参考文献:
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典:2010 年版一部
［M］．北京:中国医药科技出版社，2010:88．
［2］潘天玲，李坤平，林赞菲，等．不同产地布渣叶总黄酮含
量及其清除自由基活性研究［J］． 广东药学院学报，
2009，25(5) :452 － 454．
［3］HIDEYUKI I，MASATERU M，EISEI N，et al． Anti-tumor
promoting activity of polyphenols from Cowania mexicana
and Coleogyne ramosissima［J］． Cancer Lett，1999，143
(1) :5 － 13．
［4］李坤平，潘天玲，高崇凯，等． HPLC 法测定布渣叶中牡
荆苷和异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的含量［J］． 药物分
析杂志，2010，30(9) :950 － 952．
［5］MARKHAM K R，TERNAI B，STANLEY R，et al． Carbon-
13 NMR studies of Flavonoids-Ⅲ:Naturally occurring
flavonoid glycosides and their acylated derivatives［J］．
Tetrahedron，1978，34(9) :1389 － 1397．
［6］冯世秀，刘梅芳，魏孝义，等．布渣叶中三萜和黄酮类成分
的研究［J］．热带亚热带植物学报，2008，16(1) :51 －56．
(责任编辑:刘晓涵
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美国 FDA批准一种预防早产药物 Makena
美国 FDA 于 2011 年 2 月 4 日通过快速审批程序批准 Makena(己酸羟孕酮，hydroxyprogesterone
caproate)用于有早产病史的孕妇预防早产，但不适用于怀有双胞胎或多胞胎的孕妇。
FDA相关主管官员指出，早产是美国的一个重大的公共卫生问题，Makena 是 FDA批准的首个旨在降低
孕妇早产风险的药物。Makena为注射剂，具体用法为在孕期第 16 ～ 21 周每周为孕妇通过臀部注射一次。
FDA对 Makena的安全性与有效性数据进行了评估。这些数据是通过一项多中心随机双盲临床试验获
得的，该试验由 463 名 16 ～ 43 岁的有早产病史的单胞胎孕妇参加。在服用 Makena的孕妇中，37%发生早产
(怀孕 37 周前) ，而对照组有 55%的孕妇发生早产。
另外一项研究对参加试验的孕妇所生小孩的生长发育情况进行了评估。在该项研究中，不论孕妇当初
在临床试验中的治疗情况如何，其小孩在 2． 5 ～ 5 岁时均达到了相似的生长发育指标。该项研究目前仍在进
行中，预计在 2018 年全部完成，届时将总共有 580 ～ 750 名婴幼儿被跟踪研究。
Makena最常见的副作用有疼痛、注射部位肿胀或者瘙痒、出现疹子、恶心和腹泻，其他严重副作用很
罕见。Makena由位于加州 Sunnyvale的 Hologic公司研究研发生产。FDA曾在 1956 年批准己酸羟孕酮用
于预防流产，当时商品名为 Delalutin。但原生产厂家在 2000 年申请该药退市，退市的原因与其安全性并
无关联。
(来源:美国 FDA政府公告 2011-02-04 夏训明编译)
33第 1 期 李坤平，等．从布渣叶中制备异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷的研究