全 文 ：布渣叶中总黄酮与牡荆苷质量分数的季节动
态变化
冯燕燕，梁秋娴，李小青，李坤平
(广东药学院 药科学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 分析布渣叶中总黄酮和牡荆苷质量分数随季节的动态变化规律，探讨采收期对其质量的影
响。方法 以广东省阳东县大八镇太安村某布渣叶居群为研究对象，采集 2010 年 12 月至 2011 年 11 月
间共 12 个月的样品，采用 Al(NO3)3 -NaNO2-NaOH 体系比色法测定总黄酮质量分数，HPLC法测定牡荆
苷质量分数，采用 DPPH模型测定其提取物清除自由基活性。结果 12 份样品的牡荆苷质量分数最高为
0． 068 4%(4 月) ，最低为 0． 008 7%(10 月) ，平均值为(0． 034 9 ± 0. 013 4)%;总黄酮质量分数最高为
16. 9%(8 月) ，最低为 3. 21%(3 月) ，平均值为(9． 975 ± 3． 425)%;9 月份样品提取物清除 DPPH 自由
基活性最强，其 EC50为 1. 461 9 × 10
－3 mg·mL －1，4 月份样品提取物清除自由基活性最弱，其 EC50为
22. 820 1 × 10 －3mg·mL －1。结论 布渣叶中总黄酮及牡荆苷的质量分数随季节的变化较大，整体上以 4
至 8 月较高。
关键词:布渣叶;牡荆苷;总黄酮;高效液相色谱法;1，1-二苯基-2-苦基肼;动态变化
中图分类号:R917 文献标志码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2013． 01． 008
文章编号:1006-8783(2013)01-0035-04
Seasonal variation of total flavonoids and vitexin in Microcos paniculata L．
FENG Yanyan，LIANG Qiuxian，LI Xiaoqing，LI Kunping
(School of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China)
Abstract:Objective To analyze the contents of total flavonoids and vitexin from Microcos paniculata L． in
different seasons，and evaluate the effect of harvest time on its quality． Methods 12 samples collected from
December 2010 to November 2011 from one population of Microcos paniculata L． in TaiAn village，Daba town，
Yangdong County in Guangdong province． The contents of vitexin and total flavonoids were quantitatively
analyzed by HPLC and spectrophotometry method based on Al (NO3)3 -NaNO2-NaOH reaction system
respectively． The radical-scavenging activity of the extracts were evaluated on DPPH model． Results The
highest content of vitexin was 0. 068 4% in April，while the lowest was 0. 008 7% in October，and the average
was (0. 034 9 ± 0. 013 4)% ． The highest content of total flavonoids was 16． 9% in August，while the lowest
one was 3． 21% in March，and the average was (9． 975 ± 3． 425)% ． The minimum EC50 of the extract was
1． 461 9 × 10 －3 mg·mL －1 in September，while the maximum was 22． 820 1 × 10 －3 mg·mL －1 in April．
Conclusion The contents of vitexin and total flavonoids in Microcos paniculata L． varied greatly with months，
and the higher contents of vitexin and total flavonoids were observed in those harvested from April to August for
this population．
Key words:Microcos paniculata L．;vitexin;total flavonoids;HPLC;DPPH;dynamic change
收稿日期:2012-11-12
基金项目:广东高校优秀青年创新人才培养计划项目(LYM10092)
作者简介:冯燕燕(1990 －) ，2010 级制药工程专业本科生;通信作者:李坤平(1978 －) ，男，博士，副教授，从事中药制药方面的
教学与研究，电话:020 － 39352118。
网络出版时间:2013-01-18 10:19 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /44． 1413． R． 20130118． 1019． 002． html
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Feb． 2013，29(1)
布渣叶(Microcos paniculata L．)为椴树科
(tiliaceae)破布叶属(Microcos)植物破布叶的干燥
叶，亦称破布叶、烂布渣等，具有消食化滞、清热利湿
的功效［1］，收载于 2010 年版《中国药典》和卫生部
新资源食品目录，为岭南常用的“药食两用”特色植
物。潘天玲等［2］研究了不同产地布渣叶总黄酮质
量分数及其清除自由基活性;李坤平等［3］测定了不
同产地布渣叶中牡荆苷和异鼠李素-3-O-D-芸香糖
苷的质量分数;罗文汇等［4］对广东、广西产 15 份布
渣叶样品中牡荆苷质量分数进行了分析。但迄今未
见有关布渣叶有效成分随季节变化的报道。为探讨
采收时间对布渣叶药材质量的影响，本试验选择
了牡荆苷、总黄酮质量分数，以及提取物清除自由
基活性为指标，对同一居群布渣叶进行了不同季
节的比较。
1 仪器、材料与试剂
高效液相色谱仪(日本岛津公司，LC-10ATVP
泵、SCL-10AVP 控制器、SPD-10AVP 检测器、CTO-
10ASVP柱温箱、SIL-20A 自动进样器、LC solution色
谱工作站) ;RE-52AA型旋转蒸发仪(河南巩义仪器
有限公司) ，KH-400KDB 型超声波清洗器(昆山禾
创超声仪器有限公司，功率 320 W，频率 40 kHz) ;
AY120 型电子天平(日本岛津公司) ;UV-2550 型紫
外-可见光分光光度计(日本岛津公司)。
牡荆苷对照品(中国药品生物制品检定所，批
号:111687-200501) ;1，1-二苯基-2-苦基肼(DPPH，
Sigma-Aldrich 公司) ;甲醇(色谱纯，Merck 公司) ;
Al(NO3)3、NaNO2、乙醇、H3PO4 为市售分析纯。
布渣叶为 2010 年 12 月至 2011 年 11 月采集自
广东省阳东县大八镇太安村，经本校药用植物教研
室李钟副教授鉴定为破布叶属植物破布叶(Microcos
paniculata L．) ，详见表 1。取叶，粉碎，过 3 号筛，
备用。
表 1 各布渣叶样品采集日期
Table 1 Different harvest time of the samples of Microcos
paniculata L．
序号 采样日期 序号 采样日期
1 2010-12-20 7 2011-06-22
2 2011-01-19 8 2011-07-20
3 2011-02-18 9 2011-08-20
4 2011-03-18 10 2011-09-22
5 2011-04-20 11 2011-10-21
6 2011-05-20 12 2011-11-20
2 方法与结果
2． 1 布渣叶中牡荆苷的含量测定
2． 1． 1 牡荆苷对照品溶液的制备 精密称取牡荆
苷对照品 2． 01 mg，加甲醇溶解并定容至 10 mL，即
得质量浓度为 0． 201 0 mg·mL －1的对照品溶液。
2． 1． 2 供试品溶液的制备 分别取各月份样品约
2． 5 g，精密称定，置 100 mL 奈氏比色管中，加入
70%(体积分数，下同)甲醇 50 mL，密塞称定，超声
处理 1 h。放冷，再称定质量，用 70%甲醇补足减失
的质量，摇匀，过 0． 45 μm微孔滤膜，即得。
2． 1． 3 色谱条件［1］ 色谱柱:Kromasil C18柱 (250
mm ×4． 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇-0． 4%(质量浓
度)磷酸溶液(体积比 30∶ 70) ;检测波长:339 nm;柱
温:35 ℃;流速:1 mL·min －1，进样量:10 μL。分别
精密吸取对照品及供试品溶液，按上述条件进行测
定，结果见图 1。
1．牡荆苷。
图 1 对照品(A)、供试品(B)溶液的 HPLC色谱图
Figure 1 HPLC chromatograms of reference substance of
vitexin(A)and tested sample(B)
2． 1． 4 线性关系的考察 精密吸取“2． 1． 1”项下
对照品溶液适量，用甲醇稀释成质量浓度为 0． 04
mg·mL －1的牡荆苷溶液，分别进样 5、10、15、20
μL;再将质量浓度 0． 04 mg·mL －1的牡荆苷溶液稀
释 10 倍，分别进样 10、15、20 μL，测定峰面积。以
峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归，得回归方
程为:Y = 5 206 379X － 19 533，r = 0． 999 9，线性范围
为 0． 04 ～ 0． 8 μg。
2． 1． 5 精密度试验 取质量浓度为 0． 04 mg·
mL －1的牡荆苷对照品溶液，连续进样 6 次，每次进
样 10 μL，按“2． 1． 3”项下方法测定。结果牡荆苷峰
63 广东药学院学报 第 29 卷
面积的 RSD为 1． 10 %，表明仪器精密度良好。
2． 1． 6 稳定性试验 取 6 月份采集样品，制成供试
品试液，按“2． 1． 3”项下方法，每隔 2 h测定 1 次，共
测定 7 次。结果牡荆苷峰面积的 RSD为 2． 14%，表
明供试品溶液在 12 h内基本稳定。
2． 1． 7 重复性试验 取 6 月份采集样品 6 份，每份
约 2． 5 g，精密称定。按“2． 1． 2”项下方法制备供试
液，按“2． 1． 3”项下方法测定，结果样品中牡荆苷质
量分数平均值为 0． 490 mg·g －1，RSD为 1． 43%。
2． 1． 8 加样回收率试验 取 6 月份样品 9 份，每份
约 1． 2 g，精密称定后分成 3 组，每组 3 份。分别加
入质量浓度为 0． 201 0 mg·mL －1的牡荆苷对照品
溶液 2、2． 5、3 mL，按“2． 1． 2”项下方法制备供试品
溶液，按“2． 1． 3”项下方法测定其质量分数，结果其
平均加样回收率为 98． 54%。见表 2。
表 2 加样回收率试验结果
Table 2 Results of recovery tests (n = 9)
No． 样品中的量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /%
1 0． 513 6 0． 402 0 0． 913 1 99． 38
2 0． 514 0 0． 402 0 0． 916 5 100． 12
3 0． 513 9 0． 402 0 0． 914 7 99． 70
4 0． 513 9 0． 502 5 1． 005 4 97． 81
5 0． 514 1 0． 502 5 1． 007 7 98． 23
6 0． 513 6 0． 502 5 1． 006 4 98． 07
7 0． 513 6 0． 603 0 1． 100 1 97． 26
8 0． 513 7 0． 603 0 1． 107 9 98． 54
9 0． 514 0 0． 603 0 1． 103 5 97． 76
平均回收率 = 98． 54%，RSD = 0． 99%
2． 2 布渣叶中总黄酮的含量测定［2］ 精密称取芦
丁对照品 5． 02 mg，置于 25 mL 容量瓶中，用 70%
(体积分数，下同)乙醇定容，备用。分别精密吸取
上述芦丁对照品溶液 0． 5、1． 0、1． 5、2． 0、2． 5、3． 0、
4． 0 mL于 10 mL容量瓶中，分别补加 70%乙醇至 5
mL。依次加入 5%(质量分数)NaNO2 溶液 0． 3 mL
(放置 6 min) ，10%(质量分数)Al(NO3)3 溶液 0． 3
mL(放置 6 min) ，4%(质量分数)NaOH 溶液 4 mL，
再以 70%乙醇定容，摇匀，静置 15 min 后在 510 nm
处测吸光度。以吸光度(Y)为纵坐标，芦丁质量
(X)为横坐标，进行线性回归，得回归方程为:Y =
9. 725 4X + 0. 002 9，r = 0. 999 4，线性范围为 0. 1 ～
0. 8 mg。准确移取“2． 1． 2”项下各供试品溶液 0. 1
mL，按照上述方法显色后测定 510 nm处的吸光度，
计算各供试品溶液中总黄酮的质量分数(以芦丁
计)。
2． 3 布渣叶提取物清除 DPPH 自由基活性的测
定［2，5］ 精密称取 DPPH 2． 51 mg置于 100 mL容量
瓶中，甲醇溶解，定容。准确移取上述溶液 5 份，每
份 2 mL，加入 0． 1 mL 经适当稀释的不同质量浓度
的供试品溶液，混匀，避光放置 30 min 后于 517 nm
测定吸光度，按式(1)计算清除率。将 5 份供试品
溶液的清除率 E(%)对供试品溶液中的总黄酮质
量浓度(mg·mL －1)进行线性回归，计算清除率为
50%时供试品溶液的质量浓度(EC50)。
E =
A0 － At
A0
× 100% (1)
式中:A0 为 DPPH 溶液的初始吸光度，At 为加
入供试品溶液 30 min后的吸光度。
2． 4 不同季节布渣叶中牡荆苷、总黄酮质量分数及
其提取物清除 DPPH自由基活性测定结果
按照上述方法，对采自阳东县大八镇太安村某
居群 12 个月的布渣叶样品分别进行了牡荆苷、总黄
酮质量分数测定，并以提取物清除 DPPH 自由基的
清除率 E对供试品溶液中的总黄酮质量浓度(mg·
mL －1)进行了线性回归，结果如图 2、表 3 所示。由
结果可知，该居群布渣叶样品的总黄酮质量分数普
遍较高，8 月份达到了最大值(16． 9%) ，4 ～ 8 月份
样品的总黄酮质量分数均高于 11． 0%;而牡荆苷质
量分数以 4 月份最高，且 4 ～ 8 月份均较高，也相对
稳定。从总体上看，牡荆苷与总黄酮质量分数随季
节动态变化趋势基本一致，这也说明以牡荆苷作为
指标成分来评价布渣叶的药材质量是比较合理
的［1］，但在研究中发现，与 9 月份样品相比，10 月份
样品中牡荆苷质量分数急剧下降了 241． 38%，而总
黄酮质量分数竟上升了 39． 55%，推测这与黄酮类
化合物的代谢有关，其具体原因还有待分析。另外
还可以看出，12 个月份样品提取物清除 DPPH 自由
基活性与牡荆苷、总黄酮质量分数动态变化趋势不
尽一致。其中，9 月份布渣叶提取物清除 DPPH 自
由基活性最强，其 EC50达到了 1． 461 9 × 10
－3 mg·
mL －1，而同期牡荆苷和总黄酮质量分数均较低;4 月
份布渣叶提取物清除自由基活性最弱，而同期牡荆
苷质量分数却最高，总黄酮质量分数也达到了
13. 8%。推测这可能与此季节布渣叶中黄酮类化合
物苷元较多，而苷元清除自由基活性较强，含量测定
未能真实反映具体组成成分的变化有关。
73第 1 期 冯燕燕，等．布渣叶中总黄酮与牡荆苷质量分数的季节动态变化
图 2 布渣叶中牡荆苷、总黄酮质量分数及其提取物清除自
由基活性随季节动态变化图
Figure 2 The contents of vitexin and total flavonoids in
Microcos paniculata L． and its radical scavenging activity
in different seasons
表 3 不同季节布渣叶提取物清除 DPPH自由基回归方程
Table 3 The regression equations of the extracts radical
scavenging activity in different seasons
序号 采样日期 线性回归方程 r
1 2010-12-20 Y = 137． 14X + 0． 146 1 0． 949 2
2 2011-01-19 Y = 36． 294X + 0． 401 0 0． 999 9
3 2011-02-18 Y = 126． 4X + 0． 126 1 0． 993 7
4 2011-03-18 Y = 53． 912X + 0． 051 1 0． 999 3
5 2011-04-20 Y = 11． 411X + 0． 239 6 0． 997 8
6 2011-05-20 Y = 51． 021X + 0． 286 4 0． 968 1
7 2011-06-22 Y = 39． 616X + 0． 238 7 0． 992 1
8 2011-07-20 Y = 87． 958X + 0． 362 7 0． 996 5
9 2011-08-20 Y = 41． 727X + 0． 148 0 0． 993 1
10 2011-09-22 Y = 277． 45X + 0． 094 4 0． 993 2
11 2011-10-21 Y = 28． 766X + 0． 182 5 0． 978 6
12 2011-11-20 Y = 12． 602X + 0． 321 6 0． 933 1
3 讨论
从本试验结果可知，该居群布渣叶样品牡荆苷
质量分数随季节变化较大，4 月份(最高，0． 068 4%)
为 10 月份(最低，0． 008 7%)的 7． 86 倍，且只有 4 ～
8 月份样品符合药典规定(含牡荆苷不得少于
0． 04%)。这说明按照当前的评价体系，控制采收
季节对于布渣叶药材的质量保证非常重要，由此布
渣叶居群的研究结果可知，布渣叶药材的采收以 4
～ 8 月份为宜。
另外，从初步评测的组分(牡荆苷和总黄酮)质
量分数与生物活性(清除 DPPH 自由基活性)关系
发现，单单测定布渣叶中某几个指标成分并不能反
映其提取物组成成分的具体变化，而化学物质组的
变化与其活性有密切关联，故探讨布渣叶组分变化
与生物活性的关系是一个值得深入研究的问题。
参考文献:
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1205．
(责任编辑:刘晓涵
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本刊 2012 年的各项引证指标
据中国知网《中国学术期刊影响因子年报》2012 版的数据显示，本刊的复合影响因子和综合影响因子分别为
0． 636 和 0． 452，比 2011 年的 0． 566 和 0． 352 均有所提高，在 65 种药学期刊中的排名分别为第 23 和 29 名。
影响因子和其他部分计量指标如下:
载文量
可被引
文献量
总被引
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影响引子
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他引影响因子
(复合 /综合)
基金
论文比
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半衰期
引用
期刊数
他引
总引比
WEB 下 载
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(本刊编辑部)
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