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LED光质对碧玉兰×独占春组培苗生理生化影响



全 文 :北方园艺2014(16):61~66 植物·园林花卉·
第一作者简介:王丹(1987-),女,吉林人,硕士研究生,研究方向为
园林植物资源利用与创新。E-mail:398090529@qq.com.
责任作者:李枝林(1955-),男,云南宾川人,教授,硕士生导师,现
主要从事园林花卉遗传资源利用等研究工作。E-mail:lzl-yn@so-
hu.com.
基金项目:云南省科技计划资助项目(2012BB016);云南省重点新
产品开发资助项目(2012BB008);科技部科技成果转化资助项目
(2012GB2F300423);科技部资助项目(国科发农[2012]621)。
收稿日期:2014-03-13
LED光质对碧玉兰×独占春组培苗生理生化影响
王   丹1,杨 爱 宽2,李 光 宏1,李   游1,张 先 贵1,李 枝 林1
(1.云南农业大学 园林园艺学院,云南 昆明650000;2.大理兰国花业发展有限公司,云南 大理671000)
  摘 要:以碧玉兰♀×独占春♂组培苗为试材,研究了LED光源(以荧光灯作为对照)不同光
质配比组合对兰花组培苗生理生化指标的影响。结果表明:红蓝绿光质(RBG)培养下的植株,形
态指标综合系数较高。红蓝白光质(RBW)促进植株叶绿素a、b和胡萝卜素含量增加;蓝光(B)处
理下的植株可溶性糖含量显著增加;白光(W1)和红蓝光质(1RB)培养的植株可溶性蛋白质含量
较高。红光(R)处理的植株MDA含量最高;红蓝绿光质(RBG)培养的植株SOD活性最高;白色
荧光灯(W2)处理下的植株POD活性最高;红蓝白光质(RBW)处理的植株CAT活性最高。研究
表明,红蓝绿组合光质(RBG)培养的碧玉兰♀×独占春♂组培苗各项形态指标综合系数较高;
LED复合光质促进兰花叶绿素a、b和胡萝卜素的合成;蓝光(B)有利于兰花可溶性糖的积累;
1RB、W1光质能促进兰花蛋白质的合成;红光提高了兰花SOD活性、POD活性、CAT活性,有效
地清除细胞中的超氧自由基,缓解对细胞质的伤害。
关键词:LED光质;碧玉兰×独占春组培苗;生理生化
中图分类号:S 682.31 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2014)16-0061-06
  光质对植物的生长发育至关重要,不同组合的光质
对不同种类植物的生长发育状况有明显影响[1-2]。而植
物对光质也具有相应的适应性策略[3]。不同类型的光
对植物叶片的生长发育、形态建成、光合作用和抗氧化
酶系统有着显著的影响[4]。LED光源具有节能环保、发
热量少且易于控制等重要特点[5]。植物组培中采用
LED照明,不仅能够调控植物生长发育、形态建成、缩短
培养周期以及提高植株品质方面,而且能够大大减少能
耗,降低成本[6]。
随着光电技术的发展,LED在农业与生物领域的应
用正逐渐受到世界各国的广泛关注[7]。现今,LED已被
广泛应用于植物光合生理方面的研究,如光的形态发
生[8]、光合作用[9]、叶绿素合成研究[10]、植物栽培[11]等。
目前,LED在紫皮石斛[12]、洋桔梗[13-14]、菊花[15]、豌
豆[16]、叶用莴苣[17]、金线莲[18]等领域的应用也偶见报
道。但有关不同类型光质对兰花组培苗在形态学和生
理学方面的研究尚鲜见报道。因此,现采用LED光源,
将不同类型光质进行配比组合,比较不同光质处理下的
兰花组培苗生理生化方面的差异,旨在为兰花栽培提供
新的研究方法。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为碧玉兰♀×独占春♂组培苗。培养基
配方选用1/2MS+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+肌醇
1g/L+香蕉80g/L,pH 5.8。培养室条件:相对湿度
(75±5)%、温度(25±2)℃,培养365d后,测定其各项生
理指标。
1.2 试验方法
LED光质控制系统如表1所示。
表1 光源控制系统
  Table 1 Control system of light source
光处理
Light treatments
光质
Light quality
光量比例
The ratio of
luminous flux
峰值波长
Peak wavelength
/nm
波长半宽
Wavelength
banwidth/nm
RBG(BF1) 红+蓝+绿 4∶2∶1  625+475+530  20
R(BF2) 红 100%红 625  20
1RB(BF3) 红+蓝 定值 625+475  20
B(BF4) 蓝 100%蓝 475  20
RBW(BF5) 红+蓝+白 6∶1∶1  625+475+720  20
2RB(BF6) 红+蓝 2∶1  625+475  20
W1(BF7) 白 100%白 720  20
W2(BF8)(CK) 荧光灯 - 白光 -
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·园林花卉·植物 北方园艺2014(16):61~66
  光照周期设置为12h/d(8:00~20:00),光照强度保
持在800lx。荧光光源为40W的普通照明灯。不同层
间用1cm厚纸板隔离,以保证光质纯正。然后,将圆球茎
阶段组培苗预培养7d后随机分8组,每组12瓶,每瓶5
株苗,分别置于7种LED光源小区和1个荧光灯对照区。
1.3 项目测定
1.3.1 兰花外部形态指标测定 组培苗在不同光质下
生长365d后,每组随机抽取5株苗,进行株高、叶数、叶
宽、根长、根数和茎粗的测定,并记录数值。茎粗用游标
卡尺测量;其余长度指标均用直尺测量。株高为植株基
部到最长叶片的长度;叶宽为叶片中部的最宽处。
1.3.2 兰花生理生化指标测定 叶绿素a、b和胡萝卜
素含量的测定采用分光光度计比色法[19];可溶性糖含量
测定参照林加涵等[21]的蒽酮比色法;可溶性蛋白质含量
测定参照Read等[20]的考马斯亮蓝法;超氧化物歧化酶
(SOD)活性测定采用氮蓝四唑(NBT)法[22];过氧化物酶
(POD)活性测定采用愈创木酚法[23];过氧化氢酶(CAT)
活性测定参照Acbi等[24]的方法;丙二醛含量测定参照
Madhava等[25]的硫代巴比妥酸(TBA)法。
1.4 数据分析
采用统计软件SPSS 16.0(Inc.,Chicago,IL,USA)
(ANOVA)和DPS,用Excel 2003制图。
2 结果与分析
2.1 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗形态指标
的影响
从图1可以看出,不同光质对组培苗株高、叶宽、叶
片数、根数、根长、茎粗的影响效果不一。经SPSS分析,
红蓝配光(1RB)培养下的组培苗株高高于其它处理。红
蓝绿(RBG)光质培养下,叶宽指标高于其它处理;红光R
处理下,叶数指标高于其它处理;RBG、RBW和 W1光质
处理下,根数指标高于其它处理;RBG、R和 W2光质处
理下,根长指标高于其它处理;R、W2光质处理下,茎粗
指标低于其它处理,在P<0.05水平上差异显著。表2
表明,在红蓝绿(RBG)光质培养下,碧玉兰♀×独占春♂
组培苗各类形态指标显著优于其它处理。
图1 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗植株生长的影响
Fig.1 Efect of diferent light sources on the growth of the orchid hybrid(♀:Cymbidium lowianum;
♂:Cymbidium eburneumLindl)tissue culture plantlets
2.2 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗生理生化
指标的影响
2.2.1 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗叶绿素
a、叶绿素b、胡萝卜素含量的影响 由图2可知,复合光
质对叶绿素a、b和胡萝卜素合成的效果较好;而B、R单
色光质对叶绿素a、b和胡萝卜素合成的效果较差。综
合分析得出,LED复合光质对碧玉兰♀×独占春♂叶片
光合潜力的影响较单色光质敏感,促进了植物光合作用
中的光吸收和光转化。
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北方园艺2014(16):61~66 植物·园林花卉·
  表2 形态指标排名
  Table 2 Morphological parameter rankings
光处理
Light treatments
株高
Plant height
叶宽
Leaf width
叶数
Number of leaf
根长
Root length
根数
Number of root
茎粗
Diameter
总计(排名)
Total(Rank)
RBG(BF1) 2  1  3  2  1  2  11(1)
R(BF2) 3  8  1  1  8  8  29(5)
1RB(BF3) 1  2  6  4  7  5  25(3)
B(BF4) 5  3  4  6  4  4  26(4)
RBW(BF5) 7  7  7  8  3  6  38(8)
2RB(BF6) 8  4  8  7  6  1  34(7)
W1(BF7) 4  5  2  5  2  3  21(2)
W2(BF8) 6  6  5  3  5  7  32(6)
图2 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗叶绿素a、b和胡萝卜素含量的影响
Fig.2 Efect of diferent light sources on the content of chlorophyl a,b and carotene of the orchid hybrid
(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)tissue culture plantlets
2.2.2 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗可溶性
糖含量的影响 由图3-A可知,B光质处理下,组培苗可
溶性糖含量最高;而RBG光质对组培苗可溶性糖含量
影响最小,在P<0.05水平上,差异显著。结果说明蓝
光B有利于碧玉兰♀×独占春♂组培苗光合产物可溶
性糖的积累。
2.2.3 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗可溶性
蛋白质含量的影响 从图3-B可以看出,1RB、W1光质
处理下,组培苗可溶蛋白质含量显著高于其它处理,在
P<0.05水平上差异显著。结果表明1RB、W1光质更
利于促进该种兰花蛋白质的合成。
图3 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量的影响
Fig.3 Efect of diferent light sources on the contents of soluble sugar and soluble protein of the orchid hybrid
(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)tissue culture plantlets
2.3 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗 MDA含
量和抗氧化物酶活性的影响
2.3.1 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗 MDA
含量的影响 由图4-A可知,R、W1、RBG、2RB处理下
的MDA含量较高,B、RBW、1RB、W2光质照射下的
MDA含量较低。分析得出,LED光质对碧玉兰♀×独
占春♂组培苗产生的膜脂过氧化伤害处理间差异显著。
2.3.2 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗SOD活
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·园林花卉·植物 北方园艺2014(16):61~66
性的影响 由图4-B可知,RBG处理下的组培苗SOD
活性最强;W1、1RB、2RB处理下的结果次之;R、B、RBW
和W2处理下的组培苗SOD活性较弱。结果表明,RBG
光质能更有效地清除兰花细胞中的超氧自由基,缓解对
细胞质的伤害。
2.3.3 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗POD活
性的影响 由图4-C可知,W2、R、1RB光质照射下的组
培苗POD活性较强,W1处理下的结果次之;B、RBG、
RBW和2RB照射下的组培苗中的POD活性较弱,且四
者差异不显著(P≥0.05)。结果表明,W2、R、1RB光质
能提高兰花POD的活性,以抵御光质对组培苗产生的
伤害。
2.3.4 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗CAT
活性的影响 由图4-D可知,RBW、1RB、R光质照射下
的组培苗叶片CAT活性较强,2RB处理下的结果次之;
RBG、B照射的下组培苗叶片CAT活性最弱。研究发现
RBW、1RB、R光质能够使兰花CAT活性增强,有效地清
除细胞中的活性氧,缓解光质对细胞质的伤害。
图4 不同光质对碧玉兰♀×独占春♂组培苗MDA含量、SOD活性、POD活性和CAT活性影响
Fig.4 Efect of diferent light sources on the content of MDA and the activities of SOD,POD and CAT of the orchid hybrid
(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)tissue culture plantlets
3 讨论与结论
光照环境的变化会导致植物随之改变,而发生一连
串的适应性变化。该试验表明,红蓝绿LED组合光质
对碧玉兰♀×独占春♂组培苗生长的影响优于其它光
质配比组合。刘文科等[16]以豌豆为材料,发现蓝光与红
蓝光处理显著提高了豌豆苗地上部生物量。刘晓英
等[17]用莴苣作为试验对象,得出光质显著影响叶用莴苣
的品质。刘敏玲等[18]以金线莲为材料,发现红光与黄光
有利于金线莲株高增长,而蓝光有利于植株叶面积和叶
绿素含量增加。可见,光质对植物的形态影响显著。
LED红光和蓝光光谱与叶绿素a、b的吸收波长相
匹配[26]。该试验表明LED复合光质促进叶绿素a、b和
胡萝卜素的合成。而童哲[27]也发现,蓝光中混杂其它类
型光时,能够促进高粱、黄瓜以及欧白芥叶片叶绿素的
合成。
可溶性糖含量变化反映了植株的碳素营养代谢情
况。而可溶性蛋白在抵御光质引起的氧化伤害中,起着
重要的调节作用。该试验表明RBG处理下的叶片可溶
性糖含量较对照降低,而蓝光照射下的叶片中可溶性糖
含量最高,但蛋白质含量较低。推测,复合光中较高的
蓝光比例可促进兰花碳代谢的增强,表现为转化酶活性
较高,叶片总碳,还原糖含量高;增加红光比例可能促进
兰花的氮代谢,使叶片总氮、蛋白质含量提高,总碳、还
原糖含量降低。
SOD、POD、CAT是植物细胞膜酶促防御系统的重
要保护酶。这些活性氧清除剂的含量水平可作为植物
衰老的生理生化指标。该试验结果表明,RBG光质能够
通过提高兰花SOD活性来有效地清除细胞中的超氧自
由基,从而缓解对细胞质的伤害;W2、R、1RB光质可以
通过提高兰花POD活性来抵御光质对植株的伤害;
RBW、1RB、R光质能够使兰花CAT活性增强,清除细胞
中的活性氧,而缓解光质对细胞质的伤害。
该研究表明,在LED红蓝绿组合光质(RBG)培养
下,碧玉兰(♀)×独占春(♂)组培苗各项形态指标综合
系数较高;LED复合光质对该种兰花光合潜力的影响较
单色光质敏感,促进了植物光合作用中的光吸收和光转
化;蓝光B有利于该种兰花光合产物可溶性糖的积累;
46
北方园艺2014(16):61~66 植物·园林花卉·
1RB、W1光质更利于促进该种兰花蛋白质的合成;LED
红光更有利于提高兰花SOD、POD、CAT活性,进而有效
地清除细胞中的超氧自由基,从而缓解对细胞质的
伤害。
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The Effect of LED Light Qualities on Physiological and Biochemical Characteristics of
the Orchid Hybrid(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)
Tissue Culture Plantlets
WANG Dan1,YANG Ai-kuan2,LI Guang-hong1,LI You1,ZHANG Xian-gui 1,LI Zhi-lin1
(1.Colege of Horticultural and Gardening,Yunnan Agriculture University,Kunming,Yunnan 650000;2.Dali Languo Flower Industry
Development Corporation,Dali,Yunnan 671000)
Abstract:Taking the orchid hybrid(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)tissue culture plantlets as
test materials,efects of the diferent light quality and ratio of light emitting diodes(LEDs)on the physiological and
biochemical of plantlets were studied.The results showed that under red-blue-green light,the indexes comprehensive
coeficient were higher.Red-blue-white light enhanced the contents of chlorophyl a,b and carotene.Under blue light,
content of soluble sugar of the plantlets significantly increased.W1and 1RB light treatments led to higher contents of
soluble protein.Under red light,contents of MDA of the plantlets increased.Red-blue-green light enhanced activities of
    
56
·园林花卉·植物 北方园艺2014(16):66~70
第一作者简介:王玉涛(1978-),女,博士,讲师,现主要从事树木栽
培生理生态学等研究工作。E-mail:ytw730@sina.com.
责任作者:刘平(1979-),男,博士,副教授,现主要从事森林培育等
研究工作。E-mail:lp_79@163.com.
基金项目:辽宁省教育厅资助项目(L2010503);沈阳农业大学青
年教师科研基金资助项目(20081014,20092004)。
收稿日期:2014-03-13
银杏和垂柳叶性状对温度和降水的响应研究
王 玉 涛,陈 思 思,张 晶 晶,刘   平
(沈阳农业大学 林学院,辽宁 沈阳110866)
  摘 要:为了建立植物与环境因子之间的关系,以2个分布较广泛的树种银杏和垂柳为研究
对象,通过研究银杏和垂柳功能性状随环境因子的变化,研究其叶性状在环境梯度上的变异性及
与环境因子的相关性,探索树木对环境变化的响应机制,以期为研究树木适应未来气候变化提供
一定理论基础。结果表明:银杏和垂柳叶功能性状在环境梯度上都存在一定变化。银杏各性状
变动幅度约在20%~329%之间,而垂柳变动幅度在16%~308%之间;银杏和垂柳的叶柄长度、
栅栏厚度、叶脉厚度和气孔面积与降水量的相关性大于年均温度。高温多雨会降低银杏和垂柳
单位面积氮素和磷素的含量,而对二者单位重量氮素和磷素的含量影响差异较大。
关键词:年均温度;降水量;气孔;营养含量;解剖结构
中图分类号:S 718.5 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2014)16-0066-05
  植物可以通过调整其形态、解剖结构和生理特性等
性状的可塑性来最大程度适应环境变化。近年来全球
气候不断变化,越来越多的证据表明气候变化显著影响
着森林的分布、结构和功能[1],因此,树木响应和适应未
来气候变化的能力,特别是主要树种功能性状对气候变
化的敏感性就格外受到人们关注。已有研究表明一些
地区由于温度和降水量发生变化,植物种群已经明显向
极地和高海拔地区扩展[2-3]。同时,植物的一些性状也
在不同程度上发生着改变,如叶形态、气孔密度等[2,4]。
一些研究者发现部分植物性状对环境变化有很好的响
应和适应表现[5],后来逐渐将植物性状与环境因子之间
关系进行量化。由于叶是暴露在环境中面积最大的器
    
官,可以最直接地反映外界环境变化。因此许多研究者
利用叶功能性状开展不同尺度上的气候变化的研究,如
温度可以影响植物的比叶面积和叶干物质含量[6],也可
以影响叶细胞排列和叶面积从而影响植物的光合作用
及水分利用效率[7];再如降水量的多少可以影响植物叶
同位素组成和比叶面积[8-10]、落叶[11]、成熟冠层高度[12]、
叶片形态和化学组成性状[13]。另外植物性状也可受到
气温和降水的共同作用。随着气候条件的变化,一些植
物性状随之变化,而一些则变化不明显,这可能与研究
范围和取样尺度不同有关。现通过银杏和垂柳叶功能
性状对温度和降水量变化的响应研究,分析其对环境因
子变化的适应方式和适应能力,以期为探索植物在未来
气候变化下的适应机制提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 研究区概况
根据银杏(Ginkgo biloba Linn.)和垂柳(Salix baby-
lonica Linn.)的地理分布,在地处南亚热带湿润季风气
候的四川的雅安和峨眉山地区、北亚热带季风性气候的
四川成都、湖北的武汉和安陆、河南信阳,暖温带季风气
    
SOD;under fluorescent lamp(W2),activity of POD increased;red-blue-white light enhanced activities of CAT.And it
concluded that RBG light could be used as the most suitable for growth of light quality of the orchid hybrid tissue culture
plantlets;LED compound light supported chlorophyl a,b and carotene synthesis;the blue light was in favour of the
accumulation of soluble sugar;1RB,W1compound light supported protein synthesis;the red light had important efect on
SOD,POD and CAT of the orchid hybrid,efectively eliminated the free radicals in cels,and helped aleviate the damage
on the cytoplasm.
Key words:light emitting diodes(LEDs);the orchid hybrid(♀:Cymbidium lowianum;♂:Cymbidium eburneumLindl)
tissue culture plantlets;physiological and biochemical characteristics
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