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蒙药芹叶铁线莲种子萌发特性研究



全 文 :作者简介:高优恒 (1988 -),女,蒙古族,内蒙古医科大学 2013
级在读研究生,e - mail:goyhen@ sina. com
蒙药芹叶铁线莲种子萌发特性研究
高优恒 刘 旭
(内蒙古医科大学药学院,内蒙古 呼和浩特 010059)
摘 要:目的:研究蒙药芹叶铁线莲种子的萌发特性,以期为铁线莲属植物种质资源保存、引种栽培、育种等提供依据。方
法:研究芹叶铁线莲种子的形态学、种子活力等特性及不同温度、不同低温层积天数、不同时间强酸处理对种子发芽率的影
响,运用 SPSS软件对数据进行分析和处理。结果:芹叶铁线莲种子最适发芽温度为 20℃,低温层积处理 60 天、浓硫酸浸泡
10s种子发芽率最高,分别达到:13. 33 ± 0. 387%和 15. 38 ± 2. 40%。结论:低温层积 50d ~ 60d,95%浓硫酸浸泡 10s,并在
20℃下萌发可以显著提高芹叶铁线莲种子的发芽率。
关键词:芹叶铁线莲;发芽特性;发芽率
中图分类号:R291. 2 文献标识码:B 文章编号:1006 - 6810(2014)06 - 0038 - 03
铁线莲属植物属毛茛科(Ranunculaceae),广泛分布于
世界各地。我国种质资源丰富,有 147 种,内蒙古有 16 种,
6 变种[1]。其中芹叶铁线莲(Clematis aethusifolia)入蒙药,
蒙名那林 -那布其特 -奥日牙木格,蒙药名查干牙芒,味
辛,微甘,性热、轻、锐、燥、糙,具有破痞,调温,燥“希日乌
素”、祛腐、消肿、止泻、排脓等功效。蒙医临床上主治寒
痞、积食、“希日乌素”症、疮疡 、水肿、寒泻、肠痈等疾
病[2]。现代药理学研究证明铁线莲属植物具有抗肿瘤、抗
炎镇痛等药理作用[3 - 5]。
近年,野生药用植物资源严重缺乏,而需求日益增加,
研究植物种子萌发特性,对于其种质资源保护以及可持续
利用具有重要意义。本研究旨在探讨芹叶铁线莲种子的萌
发特性,以期为蒙药铁线莲属植物种质资源保存,引种栽
培,育种及进一步深入研究提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料:芹叶铁线莲(Clematis aethusifolia)于 2012 年 9
月采自呼和浩特市小井沟,原植物经内蒙古医科大学药用
植物学教研室李骁副教授鉴定为毛茛科铁线莲属芹叶铁线
莲,种子采集干燥后保存备用。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 芹叶铁线莲种子形态学观察和千粒重测定:对芹
叶铁线莲种子的千粒重、外部形态进行描述。
1. 2. 2 芹叶铁线莲种子活力指标的测定研究:种子活力
用 TTC(四氮唑)染色法[6]测定。取自然状态下保存的芹
叶铁线莲种子 300 粒,用蒸馏水浸泡 24h,沿种子胚中心纵
切,使胚暴露,将其一半置于培养皿,每培养皿 100 粒,加入
0. 5% TTC 溶液,以覆盖种子为度。然后恒温 25℃染色
24h,胚全部被染色为有活力的种子,3 次重复,观察并记
录。
1. 2. 3 芹叶铁线莲种子吸水增重动态研究:取自然状态下
保存的芹叶铁线莲种子 300 粒,分为 3 组,分别放入 3 个烧
杯中,加入蒸馏水,以淹没种子为宜,25℃保温,每隔 2h 将
种子取出,擦干称重,3 次重复,绘制吸水曲线。
1. 2. 4 芹叶铁线莲种子萌发条件的研究:温度对芹叶铁线
莲种子萌发的影响:设置 4 个处理:15℃、20℃、25℃、30℃。
实验前种子用 0. 5%高锰酸钾溶液浸泡 5min 进行消毒处
理,之后将种子用蒸馏水洗净放入铺有两层滤纸的高压灭
菌培养皿中,每皿 50 粒,3 次重复,放入人工气候箱进行培
养,定期给种子浇水,并观察记录种子萌发时间和发芽数。
不同层积天数对芹叶铁线莲种子萌发的影响:低温 4℃处
理种子,处理:10d、20d、30d、40d、50d、60d。实验前种子用
0. 5%高锰酸钾溶液浸泡 5min 进行消毒处理,之后将种子
用蒸馏水洗净放入铺有两层滤纸的高压灭菌培养皿中,每
皿 50 粒,3 次重复,放入人工气候箱进行培养,定期给种子
浇水,并观察记录种子萌发时间和发芽数。强酸的不同处
理时间对芹叶铁线莲种子萌发的影响:设置 4 个处理:5s、
10s、15s、20s。实验前种子用 0. 5%高锰酸钾溶液浸泡 5min
进行消毒处理,之后将种子用蒸馏水洗净放入铺有两层滤
纸的高压灭菌培养皿中,每皿 50 粒,3 次重复,放入人工气
候箱进行培养,定期浇水,观察记录种子萌发时间和发芽
数。
1. 3 统计学方法:利用 SPSS19. 0 统计软件和 Microsoft Ex-
cel 2010 分析处理数据。发芽率(%)=(发芽种子粒数 /供
试种子粒数)× 100%。
2 结果与分析
2. 1 种子形态学和相关生理指标:芹叶铁线莲种子种皮棕
红色,被短柔毛,扁平,宽卵形或圆形,先端有宿存花柱,种
子长 3 ~ 5mm,宽 1. 6 ~ 2. 5mm,厚 0. 05 ~ 0. 07mm。干燥种
子千粒重约为 1. 4794g。吸水后呈红色。芹叶铁线莲种子
吸水动态规律结果,见图 1。
通过以上结果可以看出,芹叶铁线莲种子颗粒较小,不
够饱满,千粒重仅约 1. 48g,可能与它的生长环境有关。由
图 1 可知,芹叶铁线莲种子吸水过程较快,在 2h 后净吸水
83 中国民族医药杂志 2014 年 6 月第 6 期
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2014.06.004
量达总吸水量的 66. 8%,说明芹叶铁线莲种子种皮透性较
好。前 8h属于快速吸水阶段,8h后吸水速度逐渐变缓,吸
水在 26h后基本达到饱和,种子吸水量不再增加。
图 1 芹叶铁线莲种子吸水动态规律
2. 2 种子活力测定:测定种子活力能够准确的体现种子质
量的优劣,并且比发芽率更为敏感[7]。本实验采用 TTC染
色法测定种子活力,方法简便、准确,并且不受种子休眠的
影响。经测定,芹叶铁线莲种子活力为 54%,说明其种子
的生活力不高。低活力的种子在较为合适的环境中即使能
够发芽,也有发芽慢及发芽率低的问题。
2. 3 芹叶铁线莲种子的萌发条件
2. 3. 1 温度对芹叶铁线莲种子萌发的影响:由图 2 可知,
不同温度下培养的芹叶铁线莲种子,其发芽率有明显差别。
在 20℃条件下发芽率最高,达到 7. 14 ± 0. 768%。方差分
析表明,20℃条件下的芹叶铁线莲种子发芽率相较其他组
差异显著(P < 0. 05)。15℃、25℃、30℃条件下发芽率均
较低,说明种子在常温条件具有休眠现象。温度较高时芹
叶铁线莲种子一直未发芽,说明种子对温度变化敏感,并且
较高温度下相关酶类可能已失活。实验结果表明,芹叶铁
线莲种子的最适发芽温度为 20℃左右。
图 2 温度对芹叶铁线莲种子萌发的影响
2. 3. 2 不同层积天数对芹叶铁线莲种子萌发的影响:低温
层积可以显著地提高芹叶铁线莲种子的萌发率,不同层积
天数对芹叶铁线莲种子萌发的影响结果如图 3 所示,随着
层积天数的增加,种子发芽率也提高。方差分析表明,层积
30d以上种子发芽率可显著提高,层积 60 天,种子发芽率
可达到 13. 33 ± 0. 387%。
图 3 不同层积天数对芹叶铁线莲种子萌发的影响
2. 3. 3 不同时间的强酸处理对铁线莲种子萌发的影响 :
95%浓硫酸浸泡铁线莲种子时间对种子萌发结果如图 4 所
示。铁线莲种子种皮较薄,浓硫酸浸泡种子 10s 种子发芽
率最高,达到 15. 38 ± 2. 40%,与其他三组比较具有显著差
异(P < 0. 05)。说明用 95%浓硫酸浸泡铁线莲种子 10s
有助于提高短尾铁线莲种子发芽率。
图 4 不同时间的强酸处理对芹叶铁线莲种子萌发的影响
3 讨 论
随着人们对植物药材的需求逐年增加,单凭通过采集
野生资源已难以满足人们的需求,因此发展人工栽培已成
为必然。但很多药用植物种子存在休眠现象,导致发芽率
低、发芽不整齐等现象。不同药用植物有不同的休眠原因,
例如豆科植物山野豌豆种子存在硬实现象[8],导致种子不
透水,未经处理的种子发芽率仅为 8%。通过浓硫酸处理
后则可显著提高。唐古特白刺种子通过 40%浓硫酸浸泡
2h处理可以显著提高其发芽率。
铁线莲属植物种子有休眠现象,低温层积可以打破种
子休眠[9,10],提高发芽率。本实验中未经处理的芹叶铁线
莲种子在不同温度下发芽率均很低,20℃下发芽率最高,达
7. 14 ± 0. 768%。低温层积 50d ~ 60d 的种子发芽率达到
13. 33 ± 0. 387%。铁线莲种皮较薄,用强酸浸泡可以破坏
其种皮,但浸泡时间短不能完全破坏其种皮,浸泡时间过长
容易破坏到种子胚,使种子死亡。本实验中 95%的浓硫酸
浸泡芹叶铁线莲种子 10s可以显著提高种子发芽率。根据
实验结果,可以得出结论:低温层积 50 ~ 60d,浓硫酸处理
10s并在 20℃萌发可以显著提高短尾铁线莲种子发芽率。
本实验中低温层积处理、强酸处理虽可以部分解除种子休
眠以及种皮限制,但种子发芽率依然很低,说明未能完全解
除影响种子发芽的因素。有报道称吸水较快的植物种子虽
有助于早春迅速吸水而萌发,但是可能因环境水分不足而
引起种子无法正常萌发[11]。
参考文献
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2014 年 3 月 13 日收稿
Study on Seed Germination of Clematis aethusifolia
Gao You - heng Liu Xu
(Department of Pharmacy,Inner Mongolia Medical College,Hohhot 010059 China)
[Abstract]Objective:In order to provide the basis for germplasm resource preservation,introduction and culti-
vation and breeding,we investigate the seed germination of Clematis aethusifolia. Methods:We study the mor-
phology,seed vigor of Clematis aethusifolia seed,and the influence of different temperature,different days of
cold stratification plot and different concentrations of acid treatment on the germination rate of Clematis aethusifo-
lia seeds. The data were analyzed and processed using SPSS Software. Result:The optimal temperature for the
seed germination was 20 centigrade,being processed under cold stratification 60 days and soaked 10 second by
concentrated sulfuric acid have a germination rate of 13. 33 ± 0. 387% and. 15. 38 ± 2. 40% . Conclusion:The
best condition to the germination of the seeds is to be processed under cold stratification 50 - 60days and be
soaked 10second by concentrated sulfuric acid.
[Key words]Clematis aethusifolia;germination characteristics;germination rate
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