全 文 :是在碱性条件下用硝酸铝做显色剂,芦丁的质量浓度在
16. 336 ~ 49. 008μg·mL -1范围内吸光度与质量浓度呈良好
的线性关系,r = 0. 9993,加标回收率 98. 47%;紫外法测黄酮
在 358nm 处芦丁为最大吸收,芦丁的质量浓度在 8. 618 ~
49. 008μg·mL -1范围内吸光度与质量浓度呈良好的线性关
系,r = 0. 9992,加标回收率为 97. 10%,两种方法的加标回收
率较高。从表 1 中可以看出可见分光法测得的含量比紫外分
光法要测得的要低一点,可能是莲子心含了其他的酚类物质,
酚羟基在该条件下也能够与铝离子结合,在 510nm 处也被吸
收,导致测定结果偏高。
3. 3 在研究过程中发现显色后的对照品和供试品不是很稳
定,2h后测定的吸光度要下降了 20%,这是由于二氢酮在碱
性条件下逐渐开环,导致颜色变浅。在对照品和样品浓度相
同时,紫外分光法测得的吸光度比可见光法测得吸光度要大
得多。为了使吸光度控制在 0. 3 ~ 0. 8 之间,用紫外分光法测
定时要把样品和对照品的浓度适当降低。
4 小结
紫外光谱分析操作简便快捷,重现性好,且准确度能达到
实验要求,广泛应用天然药物中总黄酮的测定〔6〕。可见分光
法操作较麻烦,使用试剂多,显色时间也难以准确控制,显色
稳定性差,最好在 30min测定。而紫外分光法稳定性好,精密
度也较高,不受放置时间的影响,步骤简单、快速、直接,放置
时间对测定结果无较大影响,可用于莲子心中总黄酮的含量
测定。
参考文献
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畲药铁线莲提取物的生物活性初步研究
叶丽颖1,腾春福2,吴 楠2,朱扶蓉1* (1. 福建卫生技术职业学院 福州 350003;2. 福建农林大学生命科学学
院 福州 350101)
摘要:目的 研究铁线莲的生物活性,寻找药理活性成分。方法 通过测定铁线莲石油醚提取物、乙醇提取物和水提取物的总还原力、对超氧
阴离子(O -2 )的清除率、对脂质体过氧化的抑制率来探讨铁线莲提取物的抗氧化作用;通过测定提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢
杆菌的抑制作用探讨铁线莲提取物的抑菌作用。结果 铁线莲提取物对超氧阴离子有一定的清除能力,对脂质体过氧化有较强的抑制能力;
乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑菌效果,最低抑菌浓度分别为 1、0. 25、1mg·mL -1;水提取物对大肠埃
希氏菌和枯草芽孢杆菌也有较好的抑菌效果,最低抑菌浓度分别为 1、1mg·mL -1。结论 铁线莲提取物具有一定的抗氧化能力和抑菌能力。
关键词:铁线莲;提取物;生物活性
中图分类号:R282. 71 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2015)-02-1199-0041-05
作者简介:叶丽颖,女(1987 -)。学历:硕士研究生。研究方向:天然药用植物活性成分提取、分离、测定及生物活性。
通讯作者:朱扶蓉。联系电话:18960875288,E-mail:674747600@ qq. com
Studies on Biological Activities of Crude Plant Extracts from Clematis Hyb-
ridas
YE Li-ying1,TENG Chun-fu2,WU-nan2,ZHU Fu-rong1* (1. Fujian health college,Fuzhou 350003 China;
2. College of Life Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350101,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the biological activities and the activite constituents of clematis hybrid-
as. METHODS The total antioxidant capacity of clematis hybridas petroleum ether extract of,ethanol extract and
water extract was determined by Optimized Ferricyanide /Prussian Blue Method,the superoxide anion radical scaven-
ging by ways of pyrogallol oxidation systems,lipid peroxidation by means of 2-thiobarbituric acid(TBA);The bacteri-
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 27 No. 2 2015
ostatic circle diameter size of clematis hybridas extract was determined by filter method,the minimal inhibitory con-
centrations (MIC)of clematis hybridas extract was determined by the growth rate method. RESULTS The results
showed that the clematis hybridas extract have an effective antioxidant capacity as well as the power of reducing the
activity of free radicals O2-and the capable of inhibiting lipid peroxidation,and have a good dose-effect relationship
between the antioxidant activity and its concentration;The clematis hybridas alcohol extract can inhibit staphylococcus
aureus,bacillus subtilis,e. coli,. the minimal inhibitory concentration of extracts is 1、0. 25、1mg·mL -1 respectively;
and water extract can inhibit bacillus subtilis,e. coli,. the minimal inhibitory concentration of extracts is 1、1mg·
mL -1 respectively. CONCLUSION The clematis hybridas extract shows a certain extent antioxidant effect and bac-
teriostasis in vitro. respectively.
KEY WORDS:Clematis hybridas;Extracts;Biological activities
铁线莲属植物属于毛茛科,广泛分布于亚热带和热带地
区。我国拥有相当丰富的铁线莲属植物资源,共有 147 种,主
要分布于华中和西南地区,花期较长,是优良的垂直绿化材
料,有“攀援植物皇后”美称〔1〕。此外,该属植物自古就以其
药用价值而被广泛使用,我国原产的铁线莲属植物中可供药
用的有 85 种,民间常将其作为利尿通淋及祛风止痛药物〔2〕。
铁线莲属药用植物在临床上也有广泛应用,因其具有抗肿瘤
等作用而使该属植物倍受关注。目前对于铁线莲属的其他药
用植物的研究仍然较少,因此进一步挖掘铁线莲属药用植物
资源,扩大药源,拯救濒危野生药材,是十分迫切极其重要的。
活性氧自由基(Reactive Oxide Species,ROS)是生物氧化
代谢产物,也是有氧生命和新陈代谢的重要组成部分。正常
的生理状态下,体内 ROS生成系统和内源性清除 ROS的抗氧
化系统处于动态平衡。由于某些因素诱导,如吸烟、辐射、环
境污染等,使体内 ROS生成过多或清除 ROS 能力下降,体内
氧化增强系统与抗氧化系统之间的平衡向氧化增强方向倾
斜,导致体内氧化应激,造成 ROS 过度累积而引起蛋白质、
DNA等生物大分子损伤,从而产生各种疾病如中风、肺气肿、
炎症、老年性痴呆、帕金森氏病、白内障、糖尿病、动脉粥样硬
化等〔3,4〕。
抗氧化剂是指能够延缓衰老、使自由基失去活性的化合
物。目前用于医疗和食品领域的多是合成抗氧化剂,如 2,6-
二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)和丁基羟基茴香醚(BHA),但对
生物体存在着安全隐患。因此,人们将目光转移到从中草药
中寻找天然、高效、低毒的抗氧化剂。本试验测定畲药铁线莲
的石油醚提取物、乙醇提取物和水提取物的还原力与清除超
氧阴离子自由基以及抑制脂质过氧化的能力。此外还测定铁
线莲的石油醚提取物、乙醇提取物和水提取物分别对不同菌
的抑菌效果,为铁线莲的进一步开发利用提供了实验基础。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 试剂与药品:铁线莲(购于宁德市福安赛岐镇大象
村)、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、三(羟甲基)氨基甲烷
(Tris)、邻苯三酚、卵磷脂、硫代巴比妥酸(TBA)、维生素 C
(Vc)、蛋白胨、牛肉膏、琼脂等,其他未注明试剂均为生化试
剂或分析纯试剂。
1. 1. 2 供试细菌:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌
由福建农林大学微生物实验室提供。
1. 1. 3 主要仪器:高速粉碎机、HH-6 数显恒温水浴锅(江苏
省金坛市荣华仪器制造有限公司)、RE-52A 旋转蒸发仪(上
海亚荣生化仪器厂)、超净工作台(苏净集团苏州安泰技术有
限公司)等。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 铁线莲的提取物的制备:将粉碎过的铁线莲根茎粉末
80g置于 500mL圆底烧瓶中,依次用石油醚、95%乙醇和蒸馏
水使其浸没,80℃回流浸提 2h,过滤,滤渣重复浸提 1 次,合
并两次滤液,将滤液减压浓缩使其成浸膏,并采取真空干燥分
别得石油醚、乙醇和蒸馏水提取物。
1. 2. 2 铁线莲提取物溶液与对照品溶液的制备:将石油醚提
取物、乙醇提取物和水提取物分别用无水乙醇、蒸馏水、蒸馏
水溶解,定容于 50mL容量瓶中,配置成 0. 5mg·mL -1的各提
取物储备液,然后准确移取 2、4、6、8、10mL 于 10mL 容量瓶
中,定容,配置成溶度为 0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5mg·mL -1的石
油醚提取物、乙醇提取物和水提取物工作液,备用。2,6-二叔
丁基-4-甲基苯酚(BHT)溶液的制备:准确称取 50mg BHT,用
无水乙醇溶解,定容于 50mL容量瓶中,配制成 1mg·mL -1的
BHT储备液,然后准确吸取 1、2、3、4、5mL 于 l0mL 容量瓶中
定容,配置成浓度为 0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5mg·mL -1的 BHT
工作液,备用。
1. 2. 3 铁线莲提取物抗氧化力的测定:采用普鲁士兰法测定
铁线莲提取物的总还原力〔5〕。以 BHT 为对照,取 2mL 不同
浓度(0. 00、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5mg·mL -1)的铁线莲各提
取物和 BHT溶液(二者浓度相同)于具塞试管中,然后分别加
入 2. 0mL 0. 2mol·L -1 pH 6. 6 磷酸缓冲溶液及 1%铁氰化钾
溶液,50℃水浴反应 20min 后冰浴迅速冷却,加入 2. 0mL
10%的三氯乙酸溶液,摇匀,离心(3000r·min -1,10min)。取
上清液 2. 0mL,加 2. 0mL双蒸水和 0. 5mL 0. 1% FeCl3,摇匀,
反应 10min后,测定 710nm处的吸光度。
1. 2. 4 铁线莲提取物超氧阴离子清除率的测定:采用邻苯三
酚自氧化法测定铁线莲提取物超氧阴离子(O -2 )清除率
〔6〕,
分别测定加入样品前后的邻苯三酚每分钟吸光度的增加率,
计算邻苯三酚自氧化时反应速率、加入样品后邻苯三酚自氧
·24·
海峡药学 2015 年 第 27 卷 第 2 期
化速率,然后代入公式计算出铁线莲提取物对 O -2 清除率的
大小。
操作步骤:在空白管和测定管中分别依次加入 4. 5mL
50mmol·L -1 Tris-HCl 缓冲液(pH = 8. 2) ,0. 2μL 25mmol·
L -1邻苯三酚(37℃预热) ,蒸馏水和样液各 1. 3mL,迅速摇
匀,325mn处,测定每 1min的吸光度,反应时间为 5min。
超氧阴离子 (O -2 )清除率 = (△A0 /△t-△A1 /△t)/
(△A0 /△t)× 100%
注:△A0 /△t为邻苯三酚自养化时反应速率,△A1 /△t
为加入样品液后邻苯三酚自养化速率。
1. 2. 5 铁线莲提取物对脂质体抗氧化活性的测定:采用 TBA
检测铁线莲提取物对脂质体过氧化的抑制率〔7 ~ 9〕。分别吸取
1. 0mL卵黄悬液(LLS)(600mg 卵磷脂溶于 60mL 10mmol·
L -1 pH 7. 4 的磷酸缓冲液中) ,1. 0mL 不同浓度(0. 0、0. 1、
0. 2、0. 3、0. 4、0. 5mg·mL -1)的铁线莲提取物和 BHT 溶液,
1. 0mL 0. 4μmol·L -1三氯化铁溶液,1. 0mL 0. 4μmol·L -1 Vc
溶液于具塞空白和样品试管中,摇匀,避光于 37℃ 水浴
60min。各加入三氯乙酸-硫代巴比妥酸-盐酸(TCA-TBA-
HCl)混合液(15g三氯乙酸,0. 37g硫代巴比妥酸,2. 1mL浓盐
酸依次加入 100mL 水中)2. 0mL,100℃水浴 15min,迅速冷
却,以 2000r·min -1离心 10min,取上清液在 532nm处测吸光
值。
样品对卵黄脂蛋白脂质过氧化的抑制率表示样品的抗氧
化活性的能力,即:抑制率 I(%)= Ac - As /Ac × 100%。
Ac-对照管的吸光度;As-样品的吸光度
1. 2. 6 铁线莲提取物的抑菌活性试验:①铁线莲药液、培养
基及菌液的制备:铁线莲药液的制备:准确称取一定量的铁线
莲各提取物(石油醚提取物、乙醇提取物和水提取物),用生
理盐水溶解,过 0. 22μm 的微孔滤膜,除菌,分别配制成浓度
为 40mg·mL -1的各提取物储备液,密封待用。营养琼脂培
养基、营养肉汤培养基的制备:按配方〔10〕配置好,121℃下高
压灭菌 20min,备用。菌液制备:无菌操作分别将大肠杆菌、
金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌接种至装有 5mL的营养肉汤
培养基的试管中,37℃培养 18h。②铁线莲药液抑菌圈测定:
将高压灭菌过的营养琼脂培养基倒入培养皿中,每皿大约
20mL。待培养基冷却凝固后,用移液枪分别吸取 0. 1mL不同
菌液加到平板上,涂布均匀。将蘸有药液的滤纸片润湿后沥
去多余溶液,放在已涂布好的平板上,每个平板上放 3 个蘸有
药液的滤纸片和一个蘸有庆大霉素(单位为 10 -4)的滤纸片。
做好标记。每个菌做 3 次平行。以在平板上贴有无菌蘸有药
液的滤纸片为空白对照〔11〕。以上所有操作必须为无菌操作。
将上述的平板放入 37℃生化培养箱倒置培养 24h。观察并测
量抑菌圈的大小。不加菌液的培养皿应没有抑菌圈。有抑菌
圈的说明药液对该菌有抑制作用。③铁线莲提取物的最低抑
菌浓度(MIC)测定:分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草
芽孢杆菌接种至装有 5mL的营养肉汤培养基的试管中,37℃
培养 18h后,用生理盐水校正浓度至 0. 5 麦氏比浊标准,约含
1 ~ 2 × 108 cfu·mL -1。再用 MH 肉汤将上述菌液进行 1∶ 100
稀释成菌悬液后备用。采用 2 倍稀释法测定最低抑菌浓度
(MIC):取高压灭菌过装有营养肉汤培养基的试管 30 支,排
成 5 排,除第 1 列的管加入 1. 6mLMH 肉汤外,其余每管加入
MH肉汤 1mL。在第一 ~三排的第一列管分别加入乙醇提取
物溶液(浓度为 40mg·mL -1)0. 4mL 混匀,然后每一排第一
管依次吸取 1mL至每排的第二管,混匀后再吸取 1mL至每排
的第三管,如此连续倍比稀释至第六管,并从第六管中吸取
1mL弃去;同理,在第 4 ~ 5 排将水提取物溶液(浓度都为
40mg·mL -1)按上述方法操作。此时各管药物浓度依次为
8、4、2、1、0. 5、0. 25mg·mL -1。然后在每管内加入相应的上
述制备好的接种物各 1mL。第一管至第六管药物浓度分别为
8、4、2、1、0. 5、0. 25mg·mL -1。阳性对照为只加菌液不加药
液,阴性对照为只加药液不加菌液。37℃恒温培养振荡器培
养 18h后,肉眼观察试管里是否浑浊。如果试管里透明澄清,
说明无菌生长;如果试管内浑浊,说明有菌生长。以肉眼所见
试管内不浑浊的最低楮头红药液浓度为铁线莲提取物的最低
抑制浓度(MIC)。
2 结果与分析
2. 1 铁线莲提取物体外总抗氧化力 铁线莲提取物和 BHT
体外总抗氧化力的结果(见图 1)。从图 1 可知,铁线莲中的
石油醚提取物、乙醇提取物、水提取物和 BHT 的吸光值分别
随着其浓度的增加而增加,总抗氧化力也在提高,说明浓度和
还原力之间呈现出量效关系。此图同时也表明,当石油醚提
取物、乙醇提取物、水提取物和 BHT的浓度相同时,铁线莲提
取物的还原力低于 BHT。
图 1 铁线莲提取物和 BHT总抗氧化力
2. 2 铁线莲提取物对超氧阴离子的清除率 邻苯三酚自氧
化速率△A0 /△t 在时间 2min、3min、4min、5min 时分别为
0. 458、0. 398、0. 364、0. 331,加入不同浓度的各提取物后,反
应在第 2min、3min、4min、5min 邻苯三酚的自氧化率(△A1 /
△t)(见表 1) (乙醇提取物)、(见表 2) (水提取物)和(见表
3) (石油醚提取物)。对 O -2 清除率(见表 4 ~ 6)。
表 1 加入乙醇提取物后邻苯三酚的自氧化率
浓度
(mg·mL -1)
自氧化率(△A1 /△t)
2min 3min 4min 5min
0. 1 0. 445 0. 383 0. 347 0. 312
0. 2 0. 441 0. 380 0. 343 0. 308
0. 3 0. 437 0. 376 0. 338 0. 302
0. 4 0. 432 0. 371 0. 332 0. 295
0. 5 0. 426 0. 365 0. 325 0. 285
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 27 No. 2 2015
表 2 加入水提取物后邻苯三酚的自氧化率
浓度
(mg·mL -1)
自氧化率(△A1 /△t)
2min 3min 4min 5min
0. 1 0. 443 0. 384 0. 349 0. 315
0. 2 0. 441 0. 382 0. 347 0. 312
0. 3 0. 438 0. 379 0. 343 0. 309
0. 4 0. 434 0. 375 0. 339 0. 305
0. 5 0. 430 0. 371 0. 335 0. 300
表 3 加入石油醚提取物后邻苯三酚的自氧化率
浓度
(mg·mL -1)
自氧化率(△A1 /△t)
2min 3min 4min 5min
0. 1 0. 450 0. 389 0. 350 0. 313
0. 2 0. 448 0. 386 0. 347 0. 309
0. 3 0. 445 0. 381 0. 341 0. 303
0. 4 0. 442 0. 375 0. 333 0. 292
0. 5 0. 439 0. 367 0. 323 0. 281
表 4 乙醇提取物对超氧阴离子的清除率
浓度
(mg·mL -1)
清除率(%)
2min 3min 4min 5min
0. 1 2. 84 3. 77 4. 67 5. 74
0. 2 3. 71 4. 52 5. 77 6. 95
0. 3 4. 59 5. 53 7. 14 8. 76
0. 4 5. 68 6. 78 8. 79 10. 87
0. 5 6. 99 8. 29 10. 71 13. 90
表 5 水提取物对超氧阴离子的清除率
浓度
(mg·mL -1)
清除率(%)
2min 3min 4min 5min
0. 1 3. 28 3. 52 4. 12 4. 83
0. 2 3. 71 4. 02 4. 67 5. 74
0. 3 4. 37 4. 77 5. 77 6. 65
0. 4 5. 24 5. 78 6. 87 7. 85
0. 5 6. 11 6. 78 7. 97 9. 37
表 6 石油醚提取物对超氧阴离子的清除率
浓度
(mg·mL -1)
清除率(%)
2min 3min 4min 5min
0. 1 1. 75 2. 26 3. 85 5. 44
0. 2 2. 18 3. 02 4. 67 6. 64
0. 3 2. 83 4. 27 6. 32 8. 46
0. 4 3. 49 5. 78 8. 52 11. 78
0. 5 4. 15 7. 79 11. 26 15. 12
从表 4、5、6 可以看出,铁线莲中乙醇提取物、水提取物、
石油醚提取物都具有清除超氧阴离子的活性。在每 1min 时
间段里,随着其浓度增加,其体外清除超氧阴离子能力也在增
加,其浓度与超氧阴离子-清除率间存在量效关系。浓度相同
时,随着反应时间的增加,对超氧阴离子-清除率显著提高。
其中石油醚提取物对超氧阴离子的清除率相对较强,乙醇提
取物次之,水提取物较低。
2. 3 铁线莲提取物在卵磷脂脂质体中抗氧化活性 铁线莲
提取物和 BHT对脂质体过氧化的结果(见图 2)。
图 2 铁线莲提取物和 BHT对脂质体过氧化的抑制率
由图 2 可知,在试验的浓度范围内,铁线莲石油醚提取
物、水提取物和 BHT对脂质体氧化的抑制能力随着浓度的增
加而提高,且浓度与抑制率之间呈现出量效关系。浓度相同
时,BHT对脂质体氧化的抑制能力大于各提取物,乙醇提取
物抑制能力最小。石油醚提取物对脂质体氧化的抑制能力在
高浓度时显著提高,接近 BHT。
2. 4 铁线莲提取物抑菌效果 铁线莲各提取物对不同菌株
的抑菌结果(见表 7)。在同一浓度范围内,乙醇提取物对枯
草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌,水提取物对枯
草芽孢杆菌和大肠埃希氏菌都有明显的抑菌作用。而水提取
物对金黄色葡萄球菌,石油醚提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色
葡萄球菌和大肠埃希氏菌抑菌作用不明显。
表 7 铁线莲提取物对不同菌株的抑菌情况
菌株
抑菌圈直径(mm)
石油醚
提取物
乙醇
提取物
水
提取物
庆大霉素
(10 -4)
金黄色葡萄球菌 6. 66 ± 0. 05 17. 36 ± 0. 62 6. 12 ± 0. 15 27. 63 ± 0. 11
大肠埃希氏菌 6. 73 ± 0. 09 18. 80 ± 0. 40 10. 93 ± 0. 19 29. 16 ± 0. 05
枯草芽孢杆菌 6. 63 ± 0. 11 13. 10 ± 0. 20 12. 50 ± 0. 20 26. 13 ± 0. 11
2. 5 铁线莲提取物的最低抑菌浓度(MIC) 用 2 倍稀释法
确定铁线莲中水提取物对大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌,乙
醇提取物对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌
的 MIC分别为 1、1、1、0. 25、1mg·mL -1。
3 结论
铁线莲中石油醚提取物、乙醇提取物、水提取物对超氧阴
离子和脂质体过氧化均有一定的清除和抑制能力。说明铁线
莲提取物具有一定的抗氧化活性。铁线莲中乙醇提取物对金
黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌以及水提取物
对大肠埃希氏菌和枯草芽孢杆菌都有较好的抑菌效果。可见
铁线莲提取物具有较好的抑菌活性。
参考文献
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海峡药学 2015 年 第 27 卷 第 2 期
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高效液相法测定中药健胃愈疡片中延胡索乙素的含量
马 荔,滕再进,王志强,戴 青* (南京圣和药业股份有限公司 南京 210038)
摘要:目的 建立高效液相方法测定健胃愈疡片中延胡索乙素的含量。方法 色谱柱:Luna C18(5μm,250 × 4. 6mm)柱;流动相:0. 1%磷酸溶
液(三乙胺调 pH至 6. 0)-甲醇(45∶ 55)为流动相;流速为 1. 0mL·min -1;检测波长为 280nm。结果 平均回收率为 96. 44%,RSD 为 0. 70%。
结论 本方法测定延胡索乙素的含量精密度好,准确性高,可作为健胃愈疡片的质量控制指标。
关键词:健胃愈疡片;高效液相色谱法;延胡索乙素
中图分类号:R927. 2;R282. 71 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2015)-02-1188-0045-03
作者简介:马 荔,女(1983 -)。南京大学硕士研究生在读。职称:
执业药师。从事药品检验与质量标准的研究与制定。联系电话:025-
85802828,E-mail:mali@ sanhome. com
通讯作者:戴 青,女(1987 -)。毕业于南京理工大学本科。职称:
助理工程师。从事药品质量管理及注册工作。联系电话:025-
85802828,E-mail:nidaisy@ sina. cn
Determination of Tetrahydropalmatine in Jianwei Ulcer Tablets by RP-
HPLC
MA Li,TENG Zai-jin,WANG Zhi-qiang,DAI Qing(Nanjing SAN pharmaceutical CO. ,LTD,Nanjiang
210038,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To develop a HPLC method for quantitative determination of Tetrahydropalmatine in
Jianwei ulcer tablets. METHODS HPLC was performed on a luna C18(4. 6mm ×250mm,5μm)column;With mo-
bilephase of 0. 1%H3PO4(adjust to pH 6. 0 with Triethylamine)-MeOH(45∶55);The flow rate was 1. 0mL·min
-1;
The detective wavelength was 280nm. RESULTS The average recovery for Tetrahydropalmatine was 96. 44% with
a RSD of 0. 70%. CONCLUSION The method is simple,accurate and can be used to control the quality of Jianwei
ulcer tablets.
KEY WORDS:Jianwei ulcer tablets;HPLC;Tetrahydropalmatine
健胃愈疡片由柴胡、党参、白芍、延胡索等药材组成的复
方制剂,在国内应用十分广泛,对胃脘胀痛,嗳气吐酸,烦躁不
食,腹胀便溏等病症效果显著,深受临床医师与患者的欢迎。
本品现执行标准为卫生部标准(ws3 - 106(Z - 31)- 94(Z)),
标准中仅测定了白芍的含量,为进一步提高完善标准,使其能
更好地控制药品的内在质量,需增加主要药味含量测定,本文
采用 HPLC法测定健胃愈疡片中延胡索乙素的含量。
1 材料与试药
1. 1 仪器 日本岛津 SIT-HTC 自动高效液相色谱仪,LC-
10AD输液泵,SPD-10A紫外检测器,CTO-10AS 柱箱;KQ2200
型超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司。
1. 2 试药 健胃愈疡片为南京圣和药业有限公司提供(批号:
200501111、200501101、200502231、200503241);延胡索乙素对
照品由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯;其余为
分析纯。
2 方法与结果
2. 1 供试品和对照品的制备 取延胡索乙素对照品适量,精
密称定,加甲醇制成每 1mL 中含延胡索乙素 4μg 的溶液,作
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 27 No. 2 2015