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穗花马先蒿对小菜蛾的生物活性



全 文 :第47卷第3期
2008年3月
农 药
AGROCHEMICALS
Vol. 47, No. 3
Mar. 2008
穗花马先蒿对小菜蛾的生物活性
梁 瑞,杨敏丽
(宁夏大学 能源化工重点实验室,银川 750021)
摘要:研究了穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾的触杀、拒食和抑制生长的作用。 结果表明,穗花马先蒿乙醇
提取物对小菜蛾3龄幼虫具有较高的的触杀和拒食活性,浸渍法处理对小菜蛾3龄幼虫72 h的致死中浓度(LC50)
为4.663 g/L,24、48 h的拒食中浓度(AFC50)分别为8.238、9.185 g/L ;乙醇提取物对小菜蛾的生长发育抑制作
用也明显,随施药剂量的增加,生长抑制率增大,化蛹率和羽化率降低,处理剂量为50.00 g/L时,生长抑制
率大于100%,化蛹率为41.11%,羽化率仅为12.22%。
关键词:穗花马先蒿;小菜蛾;杀虫活性
中图分类号:S482.3 文献标志码:A 文章编号:1006-0413(2008)03-0228-03
Insecticidal Activity of Pedicularis spicata Pall against Plutella xylostella
LIANG Rui, YANG Min-li
(Key Laboratory of Energy Sources & Chemical Engineering, Ningxia University, Yinchuan 750021, China)
Abstract: Contacting, antifeeding and inhibition of growth and development on 3th instar larvae of Plutella xylostella
were determined. The results showed that ethanol extract possessed high effectiveness of contacting and antifeeding
against 3th instar larvae of Plutella xylostella. The LC50 was 4.663 g/L by dipping method and the AFC50 of complete
antifeeding activity were 8.238, 9.185 g/L in 24, 48 h, respectively. Ethanol extracts also had strong effect on the
growth and development of Plutella xylostella. The treated larvae showed big reduction on body weight, pupation rate,
adult emerging rate and relative growth rate comparing with control. The higher the concentration of the extracts was,
the more severe the effect on the pest was. When treated with concentration of 50.00 g/L, growth inhibition rate was
more than 100%, with pupation rate and adult emerging rate were 41.11%, 12.22%.
Key words: Pedicularis spicata Pall; Plutella xylostella; insecticidal activities
穗花马先蒿(Pedicularis spicata Pall.)是玄参科马先
蒿属一年生草本植物。 它具有很高的药用价值,性温,
味甘微苦,其根可入药,有大补元气、生津安神、强心
之功效[1]。 目前对穗花马先蒿的研究主要集中在化学成
分[2]和药理活性[3]的研究,而对其用于农业害虫防治至今未
见报道。 本课题组在研究中发现,穗花马先蒿对几种常见
农业害虫,尤其是小菜蛾有较高的活性。 为了进一步探索
其作用方式和作用机理,本文采用不同的活性测试方法,
分别研究了穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾的触杀、拒食
和抑制生长发育作用,结果表明,其乙醇提取物对小菜蛾
3龄幼虫不仅具有较高的触杀、拒食活性,而且能很好抑制
其生长发育。 研究结果为穗花马先蒿的进一步开发和应用
以及新型植物源农药的研究提供一定的参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物
穗花马先蒿采自宁夏六盘山大水沟(海拔1 300~2 800 m)。
主要利用其花和花序部分,将其与其他部位分开,阴干,
放入恒温箱烘干(40 ℃~45 ℃)。 磨碎,过425 mm筛,装入
保鲜袋密封贮于冰箱中备用。
1.1.2 供试昆虫
小菜蛾(Plutella xylostella L.)采自宁夏大学试验田,羽
化后的成虫喂以蜜糖水,产卵材料为盆栽油菜苗,幼虫用
油菜苗饲喂,选择健康均匀的3龄幼虫供试(养虫室温度:
18 ℃~23 ℃,湿度75%~80%,光照L∶D=12∶12)。
1.2 提取方法
称100 g 穗花马先蒿的花和花序粉末,装入1 000 mL锥
形瓶中,加入10倍量的95%乙醇,室温浸泡48 h后超声提
取40 min,过滤,滤液减压浓缩后得乙醇提取物。 将乙
醇提取物用50%丙酮稀释成系列质量浓度,置于4 ℃冰箱
中备用。
1.3 生物活性测定
1.3.1 触杀作用测定
采用浸渍法[4-5]:将小菜蛾3龄幼虫放入圆桶状滤网
收稿日期:2007-10-25,修返日期:2007-12-28
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20565003) ;宁夏自然科学基金资助项目(NZ0719)
作者简介:梁瑞(1982-),女,宁夏银川人,硕士研究生,从事天然产物分析和农药化学研究。 E-mail :lr_y2005@nxu.edu.cn。
通讯作者:杨敏丽,教授,博士。 Tel :0951-2062861, E-mail :yml@nxu.edu.cn。
应用技术-
第3期 229
中,浸于不同梯度乙醇粗提物处理液,10 s后迅速取出,
用滤纸吸干多余药液,置于有新鲜甘蓝叶并垫有保湿滤纸
的培养皿(直径为9 cm)中,每处理30头,重复3次,对照用
50%丙酮做同样处理。 将培养皿置于24 ℃的智能人工气
候培养箱内观察,于24、48、72 h后观察试虫的死亡情
况,并计算死亡率、校正死亡率和致死中浓度(LC50)。
死亡率(%) = 死亡虫数 ×100
供试总虫数
校正死亡率(%) =
处理组死亡率-对照组死亡率
×100
1-对照组死亡率
1.3.2 拒食作用测定
采用浸叶法[6]:将新鲜的甘蓝叶用打孔器打成叶碟
(ö=1.6 cm),放入供试样品内浸渍5 s,取出晾干后放入滤
纸保湿的培养皿中,每皿一片叶碟,接入已饥饿6 h的3龄小
菜蛾幼虫1头,每处理10头试虫,重复4次,对照用50%丙酮
做同样处理。 将培养皿置于24 ℃的智能人工气候培养箱
内观察,于24 h后用坐标纸测定取食面积,更换新鲜处理
叶碟, 48 h后再次调查取食面积。 根据平均取食面积计
算出拒食率和拒食中浓度(AFC50)。
拒食率 (%)=
对照平均取食面积-处理平均取食面积
×100
对照平均取食面积
1.3.3 生长发育抑制作用测定
采用饲喂称重法[7-8]:叶片处理同拒食作用,每皿2片
叶碟,接入1头已饥饿6 h的3龄小菜蛾幼虫,每处理10头试
虫,重复4次,对照用50%丙酮作同样处理。 处理后第0、
24、48 h分别称虫体质量(每天更换新鲜处理叶碟)。 连续饲
喂48 h后换新鲜无毒甘蓝叶继续饲养至幼虫化蛹、羽化。 处
理前和处理后每隔24 h记录虫重、死亡个数、蛹数及蛾数,
计算生长抑制率、累计死亡率、化蛹率和羽化率。
抑制率(%)=
对照组平均体重增加量-处理组平均体重增加量
×100
对照组平均体重增加量
2 结果与分析
2.1 触杀作用
用1.3.1的方法测定了不同质量浓度乙醇提取物对小菜
蛾的触杀作用,见表1 。
表1 不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的触杀作用
质量浓度
24 h 48 h 72 h
/(g·L-1) 死亡率 校正死亡率 死亡率 校正死亡率 死亡率 校正死亡率
/% /% /% /% /% /%
25.0094.45 a94.4595.56 a95.5196.67 a96.56
12.5063.34 b63.3478.89 b78.6580.00 b79.31
6.25031.11 c31.1148.89 c48.3257.78 c56.33
3.12512.22 d12.2224.45 d23.6037.78 d35.64
1.5638.89 de8.8911.11 e10.1118.89 e16.10
对照 0.00 e 1.11 e 3.33 f
注:每处理30头,重复3次;同列数据后标不同字母者表示经Duncans新复极
差测验差异显著(P<0.05) ;同列数据后字母相同者表示经DMRT法检测差
异不显著(P<0.05)。
由表1可以看出乙醇提取物对小菜蛾有较好触杀作
用:随着质量浓度的增大和时间的延长,小菜蛾的校正
死亡率都在升高;质量浓度为25.00 g/L,其72 h校正死亡
率可以达到96.56%,毒力回归方程为y =3.485 5x +2.264 9,
LC50=4.663 g/L,r = 0.991 7。 虫体接触药剂后,先是经历短时
间剧烈摆动,然后虫体瘫痪、麻痹,部分虫体不能恢复,
直接死亡,死亡状态成C型或V型;部分虫体虽经历一段时
间后还可以恢复,但取食量明显减少或不吃直至死亡。
2.2 拒食作用
用1.3.2的方法测定了不同质量浓度乙醇提取物对小菜
蛾的拒食作用,结果见表2。
表2 不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的拒食作用
质量浓度 24 h 48 h
/(g·L-1) 取食面积/mm2 拒食率/% 取食面积/mm2 拒食率/%
50.00 3.60±3.57 e 93.98 15.75±8.19 f 88.43
25.00 12.00±5.37 e 79.93 31.00±6.59 e 77.23
12.50 23.30±7.67 d 61.04 54.63±7.89 d 59.87
6.250 36.10± 3.03 c 39.63 83.63±1 .73 c 38.57
3.125 45.60±14.32b23.75 106.88±16.10 b 21.49
对照 59.80±1 .16 a 136.13±14.14 a
回归方程 y=1.872 6x +3.285 0 r= 0.996 4 y=1.662 3x +3.399 0 r = 0.999 5
注:每处理10头,重复4次;表中数据为平均数±标准误差,同列数据后标不
同字母者表示经Duncans新复极差测验差异显著(P<0.05)。
由表2可看出乙醇提取物对小菜蛾有较好拒食作用:随
着质量浓度的增大其拒食率在增大,小菜蛾幼虫在处理叶
片上的取食面积比在对照叶片上显著减少,在高质量浓度
的处理叶片又比低质量浓度的处理叶上显著减少,24、48 h
的AFC50值分别为8.238、9.185 g/L ;不同处理时间的拒食率
不一样,24 h的拒食活性明显高于48 h的拒食活性。
2.3 生长发育抑制作用
用1.3.3的方法测定了不同质量浓度乙醇提取物对小菜
蛾的生长发育抑制作用,结果见表3、4。
表3 不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的
生长发育抑制作用 ⑴
质量浓度 幼虫体重/(mg·头-1) 生长抑制率/%
/(g·L-1) 0 d 1 d 2 d 1 d 2 d
50.00 2.80±0.25 a 2.45±0.30 f 2.75±0.28 f 116.91 101.38
25.00 2.93±0.20 a 3.22±0.28 e 3.53±0.21 e 85.99 83.43
12.50 2.92±0.17 a 3.54±0.25 d 4.07±0.42 d 70.05 68.23
6.250 2.90±0.27 a 3.91±0.33 c 4.71±0.37 c 51.21 50.00
3.125 2.87±0.23 a 4.36±0.23 b 5.56±0.31 b 28.02 25.69
梁 瑞,等: 穗花马先蒿对小菜蛾的生物活性
230 第47卷农 药 AGROCHEMICALS
间的生长抑制率不一样,24 h的生长抑制作用明显高于48 h
的生长抑制作用。 同时,不同质量浓度的乙醇提取物对
小菜蛾3龄幼虫也有一定的胃毒作用。
表4 不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的
生长发育抑制作用 ⑵
质量浓度/(g·L-1) 累计死亡率/% 化蛹率/% 羽化率/%
50.00 58.89±3.33 a 41.11±3.33 f 12.22±4.41 f
25.00 46.67±5.00 b 53.33±5.00 e 37.78±6.67 e
12.50 35.56±5.27 c 64.44±5.27 d 46.67±7.07 d
6.250 27.78±4.41 d 72.22±4.41 c 53.33±5.00 c
3.125 18.89±3.33 e 81.11±3.33 b 64.44±5.27 b
CK 14.44±5.27 f 85.56±5.27 a 78.89±7.82 a
注:每处理10头,重复4次;表中数据为平均数±标准误差,同列数据后标不
同字母者表示经Duncans新复极差测验差异显著(P<0.05)。
3 结果与讨论
试验结果表明,穗花马先蒿乙醇提取物对小菜蛾幼虫
具有多种作用方式,主要表现在对幼虫的触杀、拒食、抑
制生长发育作用。 72 h触杀的LC50值为4.663 g/L,部分试
虫虽未死亡,但取食量明显较对照少,过早进入蛹期,而
且不能正常羽化。 在拒食和生长发育抑制试验中,24 h的
拒食和生长发育抑制效果都略高于48 h,可能是由于小菜
蛾持续地暴露于乙醇提取物的环境后感受器对乙醇提取物
的敏感性下降的缘故;也有可能是由于小菜蛾因极度饥饿
而取食乙醇提取物处理过的叶碟所致。 在生长发育抑制
试验中,处理组试虫体重的增加量均小于对照组,处理组
试虫累计死亡率均大于对照组,而且处理组试虫的化蛹
率、羽化率均小于对照组,可能是因为拒食作用而引起体
内代谢失调而使生长发育受抑制,导致化蛹和羽化受阻。
目前,国内外对马先蒿属植物的生物活性的研究未见
报道。 由于对小菜蛾幼虫具有多种作用方式,这为进一
步研究和利用穗花马先蒿,从中寻找出高活性的杀虫物
质,将其开发成新型的植物源农药提供一定的参考价值。
参考文献:
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责任编辑:赵平
3 结论与讨论
仙客来叶斑病病原菌以菌丝或分生孢子的形式在病残
体上越冬成为该病的主要初侵染源,其次是种子带菌,主
要是种子表面带菌。 由病株上采的种子较由健株上采的
种子带菌率高。 关于种子带菌检测方法很多,如电镜检
测、直接分离培养、致病性测定,主要根据研究目的不
同而采取不同的检测方法,本研究方法较为简便直观,
有待于在种子带菌部位、病菌在种子上存活时间等方面
进一步研究。
根据仙客来叶斑病发病规律的研究,提出了选用抗病
品种,种子消毒,消除田间病残体、进行轮作或深翻、加
强栽培管理、合理施肥、及时进行药剂防治等综合防治措
施,此综合防治措施虽经小面积示范,取得较好的效果,
但是由于病害发生及防治工作的复杂性,大面积的应用还
有待于在生产中进一步完善。 其次在种子处理方面,本
论文只采用了种子消毒试验,但种子处理防治病虫害的方
法还有很多,如薄膜包衣、种子丸粒化、生防制剂的种子
处理等方面的方法研究还有待于进一步探讨。
参考文献:
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责任编辑:赵平
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巴西对中国草甘膦征收反倾销税税率下调
巴西外贸委员会(CAMEX)2月21日决定,继续对从中国进口的草甘膦征收反倾销税,但反倾销税率从原来的35.8%降至11.7%。
自2003年开始,巴西对从中国进口的草甘膦征收35.8%的反倾销税,有效期5年,按规定应于今年2月12日结束。 此前,巴西
对中国草甘膦进口实行南共市场共同对外关税(TEC),进口税率在12%至14%之间。 (ZP)