全 文 ：坡柳种子提取物对小菜蛾的拒食活性＊
秦小萍＊＊　赵红艳　杨美林＊＊＊
(云南农业大学植物保护学院　昆明　650201)
Antifeeding activities of Dodonaea viscose seed extracts against Plutella xylostella .QIN Xiao-Ping＊＊ , ZHAO
Hong-Yan , YANG Mei-Lin＊＊＊(College of Plant Protection Yunnan Agriculture University , Kunming　650201 , China)
Abstract　Antifeeding activities of extracts of Dodonaea viscose(L.)Jacq seeds against Plutella xylostella (L.)were
bioassayed.Petroleum , chloroform , ethyl acetate , and ethanol were used as extraction solvents.All four extracts had
high antifeeding effect against the 3th instar larvae.The activity of the ethanol extract was significantly higher than that
of other extracts.The relative activity of the four extracts was ethanol>ethyl acetate > chloroform>petroleum.The
AFC50 of the ethanol extract was 321.19 mg·L-1 in 24 hours and 650.27 mg·L-1 and in 48 hours in no choice , and
1 808.62 mg·L-1 in 24 hours and 2 813.34 mg·L-1 in 48 hours in choice test.
Key words　Dodonaea viscose , Plutella xylostella , antifeeding activity
摘　要　测定坡柳(Dodonaea viscose (L.)Jacq.)种子石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯和乙醇提取物对小菜蛾
Plutella xylostella (L.)的生物活性。结果表明:它们对小菜蛾均有较高的拒食活性 ,乙醇提取物的拒食活
性明显高于其他提取物。4 种提取物对小菜蛾的毒力顺序为:乙醇提取物>乙酸乙酯提取物>氯仿提
取物>石油醚提取物。坡柳种子乙醇提取物对小菜蛾 24 h , 48 h 非选择性拒食的 AFC50值分别为 321.19
mg·L-1 , 650.27mg·L-1 ;而 24 h , 48 h 选择性拒食的 AFC50值分别为1 808.62 和 2 813.34 mg·L-1 。
关键词　坡柳 ,小菜蛾 , 拒食活性
＊国家自然科学基金(30660108), 云南省教育厅科研基金
(06Y031B)资助。
＊＊E-mail:qxp99@163.com
＊＊＊通讯作者 , E-mai l:yangmeilin@ynau.edu.cn
收稿日期:2007-10-12 ,修回日期:2007-11-08
　　小菜蛾 Plutella xylostella (L.)属鳞翅目菜
蛾科 ,是世界性十字花科蔬菜的重要害虫 。由
于其世代重叠严重 ,加之长期单一使用化学药
剂 ,其抗药性不断增强 ,开辟小菜蛾防治新途径
成为当前蔬菜生产亟待解决的问题[ 1 ,9 , 10] 。植
物源杀虫剂由于作用机制特殊 ,靶标选择性强 ,
安全性高等特点成为研究开发的热点。
坡柳(Dodonaea viscose (L.)Jacq.)又名车
桑子 、明油子 、透骨草 ,属无患子科的灌木或小
乔木 ,是一种恶性杂草 ,分布于我国西南和南部
地区 ,耐旱 ,一般生长在干旱的山坡 、沙地和小
树丛间[ 2] ,并引起草原的退化 ,严重影响牧业的
发展 。这种杂草生长力顽强 ,且少有昆虫取食 ,
国内外关于坡柳活性成分的研究少有报道[ 3] 。
本研究就坡柳不同溶剂提取物对小菜蛾幼虫的
拒食活性进行了测定 ,为坡柳的综合利用 、变废
为宝及无公害植物农药的开发提供科学依据 。
1　材料和方法
1.1　供试昆虫与饲养
小菜蛾幼虫:从实验室自养的接有小菜蛾
的甘蓝上收集小菜蛾成熟的蛹 ,放入三角瓶中 ,
待羽化后向瓶中插入涂有甘蓝汁液的自制吹塑
纸产卵板 ,并用 10%的蜂蜜水饲喂成虫 ,每天
更换产卵板及蜂蜜水 ,并将产卵板放入(26±
1)℃的温箱内保湿孵化 。将已经孵化的产卵板
放在菜苗上 ,幼虫在植株上自主取食 ,待其发育
到 3龄时进行拒食活性的测定。
1.2　坡柳种子提取物的制备
坡柳种子(购自云南生态公司)在 45℃恒
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温干燥箱内烘干 ,用植物粉碎机粉碎 ,过 40 目
筛。称取 100 g 干粉放入 1 000 mL 三角瓶中 ,
加入 500 mL石油醚溶剂 ,室温下浸提 24 h ,再
经超声波提取 30 min ,过滤 ,滤液用旋转蒸发仪
减压浓缩 ,蒸干溶剂 。滤渣再依次用氯仿 、乙酸
乙酯 、乙醇按上述方法浸泡 、超声波提取和浓
缩 ,即得石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯和乙醇提取物 。
称重 ,保存于冰箱中备用 。
1.3　拒食活性测定
采用叶碟法[ 4] 。在预试基础上 ,用丙酮将
提取物溶解 ,配置成 5 ～ 6个浓度的药液。将新
鲜较平整均一的甘蓝叶片用圆形打孔器(Υ1.8
cm)打成叶碟 ,放入提取物药液中浸渍 2 ～ 3 s
(对照用相应溶剂)。室温下晾干 ,放入直径 9
cm的培养皿中(内垫滤纸 , 加少量蒸馏水保
湿),每皿内等距离放 4个叶碟。非选择性拒食
作用试验中 ,每皿内等距离放入4个处理叶碟 ,
十字交叉型排列 ,4 个对照叶碟另皿放置 。选
择性拒食试验中 ,每皿内放对照 、处理叶碟各 2
个。接入饥饿4 h的小菜蛾3龄幼虫 ,每皿3头
作为 1次重复 ,每处理设 20个重复。供试幼虫
在温度(25±1)℃、相对湿度 75%～ 85%,每日
光照 16 h的光照培养箱中饲养 ,24 h 、48 h后用
方格纸测定所剩下的叶面积 ,根据下式计算拒
食率[ 5] 。然后参照陈力等的方法[ 6] ,将拒食率
转化为几率值 ,浓度转化为对数后进行线性回
归 ,根据回归方程计算拒食中浓度(AFC50)。
非选择性拒食率(%)=
对照取食面积 -处理取食面积对照取食面积 ×100 ,
选择性拒食率 =
对照取食面积 -处理取食面积(%)对照取食面积 +处理取食面积 ×100。
1.4　数据处理
用SPSS11.0 和 EXCEL2003软件对试验数
据进行系统分组分析 , 数据之间的差异用
DMRT法进行比较 。直线回归的参数采用最小
二乘法估计。
2　结果和分析
2.1　4种提取物对小菜蛾拒食作用筛选
坡柳种子的石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯和乙醇
提取物对小菜蛾的非选择性拒食作用结果见表
1。各提取物在浓度为 5 000 mg·L-1时 ,对小菜
蛾均有一定程度的拒食作用 。其中乙醇的效果
最好 ,24 h 和 48 h 的拒食率分别为 91.14%和
88.54%;乙酸乙酯提取物的拒食率分别为
88.19%和 76.43%;氯仿和石油醚提取物的效
果较差 。另外 ,每种提取物 24 h的拒食活性均
高于 48 h。
表 1　坡柳种子提取物在 5 000 mg·L-1对小菜蛾
的非选择性拒食作用
处理
24 h 48 h
取食面积
(mm2)
拒食率
(%)
取食面积
(mm2)
拒食率
(%)
乙醇 0.21±0.03e 91.14 0.70±0.07e 88.54
乙酸乙酯 0.28±0.07d 88.19 1.44±0.09d 76.43
氯仿 1.56±0.05c 34.18 4.28±0.12c 29.95
石油醚 1.72±0.17d 27.43 4.77±0.15b 21.93
CK 2.37±0.12a - 6.11±0.18a -
注:表中数据为平均数±标准误, 同列数据后随相同小写字母
者示方差分析差异不显著(P<0.05 , DMRT法)。下同。
2.2　乙醇提取物对小菜蛾的拒食作用
坡柳种子乙醇提取物对小菜蛾 3龄幼虫的
非选择性拒食作用见表 2和表3。
表 2　非选择性试验中小菜蛾 3龄幼虫 24 h
和 48 h的取食叶面积及拒食率
乙醇浓度
(mg·L-1)
24 h 48 h
取食面积
(mm2)
拒食率
(%)
取食面积
(mm2)
拒食率
(%)
5 000 0.23±0.06e 91.25 0.42±0.04e 89.18
2 500 0.31±0.03e 88.21 0.65±0.05e 83.24
1 250 0.61±0.04d 76.81 1.38±0.09d 64.43
625 0.89±0.04c 66.16 2.02±0.11c 47.94
312.5 1.43±0.15b 45.63 2.61±0.19b 32.73
CK 2.63±0.14a - 3.88±0.31a -
在非选择性条件下(表 2),叶片经过处理
后 ,取食面积比在对照叶片上显著减少 ,浓度增
高后 , 取食面积同样显著减少 , 24 h , 48 h 的
AFC50分别为 321.119 mg·L-1(y =1.231 5x +
1.903 91 r =0.9885)和 650.27 mg·L-1(y =
1.456 9x+0.901 6 r=0.9954)。
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表 3　选择性试验中小菜蛾 3 龄幼虫 24 h 和 48 h 的取食叶面积及拒食率
乙醇浓度
(mg·L-1)
24 h取食面积(mm2) 24 h拒食率 48 h取食面积(mm2) 48 h拒食率
处理 对照 (%) 处理 对照 (%)
5 000 0.31±0.16a 1.68±0.13a 68.84 0.82±0.22a 3.44±0.18a 61.5
2 500 0.43±0.17a 1.42±0.08a 53.51 1.26±0.38a 3.51±0.32a 47.16
1 250 0.51±0.28a 1.10±0.11a 36.65 1.46±0.37a 3.07±0.43a 35.54
625 0.55±0.18a 1.12±0.14a 34.13 1.69±0.47a 2.67±0.43a 22.48
312.5 0.65±0.14a 1.25±0.06a 31.58 2.17±0.50a 3.08±0.35a 17.33
　　选择性条件下(表 3),幼虫在处理叶上的
取食量随提取物浓度的升高而减少 ,但取食量
在各浓度间差异不显著 。24 h ,48 h 的AFC50分
别为1 808.62 mg·L-1(y =0.813 2x+2.352 3 r
=0.935 5), 2 813.34 mg·L-1 (y =1.048x +
1.385 2 r=0.995 2)。
坡柳种子乙醇提取物对小菜蛾幼虫表现出
较强的拒食作用 ,且随着施用浓度的增加其拒
食率增大 。不同处理间的非选择性和选择性具
有明显的一致性 ,且 48 h 的拒食活性都明显低
于24 h ,但从两者的相对值比较来看 ,非选择拒
食活性明显大于选择拒食活性 。
3　讨论
坡柳种子用不同溶剂进行提取的提取物对
小菜蛾幼虫的非选择性拒食率明显不同 ,乙醇
提取物效果最好 。乙醇提取物对小菜蛾幼虫具
有显著的拒食作用 ,且拒食活性 24 h明显大于
48 h 。可能存在以下两方面的原因 ,一是有效
成分可能不稳定 ,持效期短 ,二是与试虫对坡柳
种子提取物的适应性有关 ,对拒食剂不敏感 ,这
也是拒食剂所特有的应用问题之一[ 7] 。在选择
性取食条件下 ,随着提取物浓度的增加 ,试虫的
取食量虽在减少 ,但总取食量并无显著差异 ,这
一结果与蔡霞等报道的水葫芦(Eichhornia
crassipes(Mart.)solms.)乙醇提取物对小菜蛾幼
虫的拒食作用的结果相同[ 8] 。可能是由于小菜
蛾幼虫持续暴露于提取物的环境后 ,感受器对
提取物的敏感性下降所致。坡柳提取物对小菜
蛾的这种拒食作用的有效成分及作用方式 、作
用机理还有待于进一步研究 。
参　考　文　献
1 　刘又高 ,王根锷 ,厉晓腊 ,等.昆虫知识 , 2007 , 45(5):653～
656.
2 　江苏新医学院.中药大词典.上海:上海人民出版社 ,
1977.127.
3 　杨美林 , 周天雄 ,顾芳.云南农业大学学报 , 2003 , 18(4):
354～ 357.
4 　张宗炳.杀虫剂的毒力测定.北京:科学出版社 , 1988.123
～ 128.
5 　慕立义.植物化学保护研究方法.北京:中国农业出版社.
1994.76～ 79.
6 　陈力 ,徐汉虹 ,赵善欢.华南农业大学学报 , 2000 ,21(1):44
～ 46.
7 　杨振德 ,朱麟 ,赵博光 , 等.林业科学 , 2005 , 41(4):106 ～
111.
8 　蔡霞 ,施祖华 ,施英利.浙江大学学报 , 2005, 31(5):567～
571.
9　韩招久 ,王宗德 ,姜志宽 ,等.昆虫知识 , 2007 , 44(6):863 ～
867.
10　赵晓燕 ,侯有明.昆虫知识 ,2006 , 43(1):57～ 60.
全球十大活化石物种排行之五———格拉西利德瑞斯蚁
　　格拉西利德瑞斯蚁是一种夜晚活动的蚂蚁 ,科学家认为它是一种灭绝已久的蚂蚁物种 , 事实上 , 之前科学家对
它的了解仅来自于一块包裹着格拉西利德瑞斯蚁的琥珀化石。 有报道称 ,发现存活的格拉西利德瑞斯蚁 , 但是至
今很少人知道这种蚁类的存在和历史。它们生活在较小的蚁群 , 蚁巢位于土壤之中。(来源:科学网)
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