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蓼子朴提取物对小菜蛾生物活性的初步研究



全 文 :第 13 期
收稿日期:2010-12-31
基金项目:国家自然科学基金项目(20565003);宁夏自然科学基金项目(NZ1013)
作者简介:赵 堂(1961-),男,宁夏中卫人,副教授,硕士,从事天然产物分析和农药化学研究工作,(电话)18995165005(电子信箱)
xiaoxiao211abc@163.com。
植物源农药以其高效、低毒、低残留、对环境安
全友好而备受人们的关注,成为农药发展的一个方
向,越来越受到广大农药研究者的青睐。 从植物中
提取、分离新的天然活性化合物是新农药创制开发
的研究热点[1]。
蓼子朴(Inula salsoloides Ostenf.)是菊科(Com-
positae)旋覆花属多年生草本植物,分布于宁夏、内
蒙古、辽宁、河北、山西、陕西、甘肃、青海和新疆等
省(区),花及全草都可入药。 已有文献报道蓼子朴
具有一定的抑菌杀虫活性,如李玉平等 [2]报道蓼子
朴对小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、辣椒疫霉病菌、
玉米大斑病菌具有很强的抑菌活性;屈秋耘等 [3]报
道蓼子朴对大皱鳃金龟、蒙古丽金龟、八字白眉天
蛾有较高的毒杀效果;张宏利等 [4]报道蓼子朴对粘
虫有较好拒食和毒杀效果。
蓼子朴在宁夏盐池县被作为农田杂草处理 [5]。
研究其杀虫活性,可为蓼子朴的综合利用及无公害
植物源农药的开发提供科学依据,开辟新的虫害防
治途径,变废为宝。 本研究以小菜蛾(Plutella xy-
lostella L.)为试虫,对蓼子朴不同部位乙醇提取物
蓼子朴提取物对小菜蛾生物活性的初步研究
赵 堂 a,林 坤 b,杨敏丽 b
(宁夏大学,a.化学化工学院;b.能源化工重点实验室,银川 750021)
摘要:以小菜蛾为试虫,对蓼子朴(Inula salsoloides Ostenf.)不同部位乙醇提取物进行杀虫活性比较,筛
选出活性最高部位,然后采用不同溶剂对其进行萃取分离,得到不同溶剂萃取物,测试各萃取物对小菜
蛾的触杀和拒食活性。结果表明,蓼子朴全草提取物活性最高,浓度为 50 g / L 时,对小菜蛾 3 龄幼虫 72 h
的触杀校正死亡率和 24 h 的非选择性拒食率分别可达 96.67%和 100.00%;不同溶剂萃取物中,氯仿萃取
物的活性最高,对小菜蛾 3 龄幼虫 72 h 的触杀校正死亡率和 24 h 的非选择性拒食率分别达到 80.00%和
96.46%。
关键词:蓼子朴(Inula salsoloides Ostenf.);小菜蛾;杀虫活性
中图分类号:S482.3 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2011)13-2655-03
Preliminary Study on Bioactivity of Extracts from Inula salsoloides Ostenf. against
Plutella xylostella
ZHAO Tanga,LIN Kunb,YANG Min-lib
(a.College of Chemistry & Chemical Engineering; b.Key Laboratory of Energy Sources & Chemical Engineering,
Ningxia University,Yinchuan 750021, China)
Abstract: The ethanol extracts of different parts of Inula salsoloides Ostenf. against Plutella xylostella was compared;and the
part with the highest insecticidal activity was screened out. Different solvent was used for extractive separation. Then the ex-
tracts were tested for contact toxicity and antifeedant effect against 3rd instar larve of Plutella xylostella. The results showed
that extracts from the whole plant of Inula salsoloides Ostenf. had the highest activity. At the concentration of 50 g / L, the
corrected mortality by contacting in 72 h and nonselective antifeedant rates in 24 h reached 96.67% and 100.00% respectively.
The chloroform extracts had the best insecticidal activity among different solvent extracts. The corrected mortality within 72 h
and nonselective antifeedant rates within 24 h were 80.00% and 96.46% respectively.
Key words: Inula salsoloides Ostenf.; Plutella xylostella; insecticidal activity
第 50卷第 13期
2011年 7 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 50 No.13
Jul.,2011
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.13.038
湖 北 农 业 科 学 2011 年
及不同溶剂萃取物的触杀活性及拒食活性进行比
较,筛选出活性较高的部位,为下一步提取分离其活
性成分奠定基础, 同时为更好地开发利用蓼子朴植
物资源提供参考。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物 蓼子朴采自宁夏中宁县境内。 采
集全草,自然条件下阴干。 将部分全草按照根、茎、
叶、花分离归类。 植物阴干后粉碎,过 40目筛(粒度
为 420 μm),低温保存备用。
1.1.2 供试昆虫 小菜蛾: 室内人工继代饲养(饲
养环境:温度 23~25 ℃,湿度 60%~70%,每天光照
14 h),试验时挑取健康均匀的 3龄幼虫供试。
1.2 方法
1.2.1 不同部位提取物的制备 [6] 采用乙醇浸渍超
声法:分别称取一定量蓼子朴全草、根、茎、叶、花的
粉碎物,每克样品加 8 mL 体积分数为 95%的乙醇,
室温浸泡 24 h 后超声提取 40 min,过滤,滤渣再加
溶剂浸提,重复提取 3次,合并 3次滤液。 滤液用旋
转蒸发仪减压浓缩,蒸干溶剂,得乙醇提取物,称重
后置于 4 ℃冰箱中保存备用。 根据下列公式计算出
浸膏得率。
浸膏得率=
蓼子朴粗提取浸膏质量
蓼子朴干粉质量
×100%
1.2.2 不同溶剂萃取物的制备 将蓼子朴乙醇提
取物浸膏加 10 倍体积的蒸馏水热溶, 超声波助溶
悬浮后,装入分液漏斗中,依次用等体积石油醚、氯
仿、乙酸乙酯、正丁醇各萃取 3次。 将各萃取液及剩
余水相分别在旋转蒸发仪中减压浓缩至稠膏,并称
重,记录各相萃取物质量。 并按下列公式计算各相
萃取物的得率。
萃取相浸膏得率=
萃取物浸膏质量
乙醇提取物浸膏质量
×100%
1.2.3 供试药液配制 称取一定量浸膏, 用 50%
(体积分数,下同)丙酮溶液配成所需浓度的药液,
置于 4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.4 生物活性测定
1)触杀活性测定。 采用浸渍法[7,8]:用圆形打孔
器(直径 1.5 cm)将新鲜甘蓝叶打成叶碟,十字交错
放入培养皿(直径 7 cm)中,将小菜蛾 3 龄幼虫放入
圆桶状滤网中,浸于蓼子朴乙醇提取液中,10 s 后迅
速取出,用滤纸吸干多余药液,置于叶碟上,每处理
10头,重复 6次。对照用 50%丙酮溶剂作相同处理。
将培养皿置于人工气候箱中 (温度为 24℃±1 ℃,相
对湿度为 65%±5%,光照为 14 h / d,下同)观察,处理
24、48、72 h 后观察试虫的死亡情况,计算死亡率及
校正死亡率。
死亡标准:虫体失水皱缩,无法取食,触之不
动。
死亡率=
死亡试虫数
供试总虫数
×100%
校正死亡率=
处理死亡率-对照死亡率
1-对照死亡率
×100%
2)非选择性拒食活性测定。采用浸叶法[9]:用圆
形打孔器(直径 1.5 cm)将新鲜甘蓝叶打成叶碟,放
入供试药液中浸渍 5 s(对照叶碟仅以 50%丙酮作相
同处理),取出晾干放入培养皿中(内垫滤纸,用棉
花球吸蒸馏水保湿)。 每皿中放入 4 片相同处理叶
碟,叶碟十字交错放置,每皿接入 10 头饥饿 6 h 的
3龄小菜蛾,每组重复 6次。将培养皿置于人工气候
箱中观察, 于 24、48 h 后用坐标方格纸测定取食面
积,计算拒食率。
非选择性拒食率=
对照组平均取食面积-处理组平均取食面积
对照组平均取食面积
×100%
1.2.5 数据处理 用 DPS7.05专业统计软件对试验
数据进行系统分组分析, 数据之间的差异用 Dun-
cans新复极差法进行比较。
2 结果与分析
2.1 蓼子朴不同部位乙醇提取物的杀虫活性比较
采取乙醇浸渍超声法分别对蓼子朴的花、 叶、
茎、根及全草进行提取,浸膏得率由高到低依次为:
叶(22.18%)>茎(16.11%)>根(15.13%)>花(10.43%)
>全草(10.22%)。
分别对小菜蛾 3 龄幼虫进行触杀和非选择性
拒食活性测定,结果(表 1、表 2)表明,蓼子朴全草
乙醇提取物对小菜蛾具有明显的触杀和拒食活性,
在浓度为 50 g / L 时,72 h 的触杀校正死亡率和 24 h
的非选择性拒食率分别为 96.67%、100.00%。
表 1 蓼子朴不同部位乙醇提取物对小菜蛾 3 龄幼虫的
触杀活性
供试样品
全草




24 h
90.00±5.77 a
43.33±6.67 cd
33.33±1.82 d
73.33±3.33 ab
63.33±2.02 bc
48 h
93.33±3.33 a
43.33±6.67 cd
36.67±6.67 d
76.67±3.33 ab
63.33±2.02 bc
72 h
96.67±3.33 a
60.00±5.77 bc
40.00±1.73 c
80.00±5.77 ab
66.67±2.30 bc
浸膏得率
%
10.22
10.43
22.18
16.11
15.13
校正死亡率//%
注:同列数据后不同小写字母表示差异达显著水平(P<0.05)。
2656
第 13 期
表 2 蓼子朴不同部位乙醇提取物对小菜蛾 3 龄幼虫的
非选择性拒食活性
供试样品
CK
全草




平均取食面积
mm2
82.33±1.45
0.00
24.67±1.15
0.00
20.91±2.00
11.12±1.38
拒食率
%
100.00
70.00
100.00
74.60
86.49
平均取食面积
mm2
104.00±2.52
5.64±1.04
35.20±2.40
6.33±1.40
31.58±2.57
25.26±2.12
拒食率
%
94.58
66.15
93.91
69.63
75.71
24 h 48 h
2.2 蓼子朴不同溶剂萃取物对小菜蛾的杀虫活性
比较
依次用不同极性溶剂对蓼子朴全草乙醇浸膏
进行液-液分配萃取[8]分离,得不同溶剂萃取物。 不
同溶剂萃取物得率由高到低依次为 : 水萃取物
(38.83%)>石油醚萃取物 (14.75%)>氯仿萃取物
(14.28%)>正丁醇萃取物 (14.21%)>乙酸乙酯萃取
物(4.36%)。
分别测试各萃取物对小菜蛾的触杀活性和拒
食活性,结果(表 3、表 4)表明,触杀活性由高到低
依次为:氯仿萃取物>石油醚萃取物>乙酸乙酯萃取
物>水萃取物>正丁醇萃取物;触杀活性随着处理时
间的延长而逐渐增大。 拒食活性由高到低依次为:
氯仿萃取物>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物>正丁
醇萃取物>水萃取物,24 h 的拒食效果高于 48 h 的
拒食效果。氯仿萃取物的活性最高,当浓度为 25 g / L
时, 处理 72 h 的触杀校正死亡率和 24 h 的非选择
性拒食率分别为 80.00%和 96.46%。
3 结论与讨论
蓼子朴全草的乙醇提取物对小菜蛾 3 龄幼虫
的活性最高, 对小菜蛾具有显著的拒食和触杀活
性。 氯仿萃取物对小菜蛾的活性最好,表明蓼子朴
氯仿萃取物中活性组分较多。 触杀试验中,触杀活
性随着处理时间的延长而逐渐增大。 在非选择性拒
食试验中,24 h的拒食效果高于 48 h的拒食效果。
蓼子朴全草较其他各部位对小菜蛾的触杀和
拒食活性高,这可能是蓼子朴各部位所产生的协同
效果比其中任何单一部位的效果好,即各部位在一
起所产生的增效作用。 拒食活性随着处理时间的延
长而呈减弱趋势,可能是蓼子朴中有拒食活性的成
分易挥发,活性持续期短;也可能是长时间喂养下
小菜蛾的感受器对该环境敏感性下降的缘故。 本研
究中出现了同一供试样品的触杀和拒食活性强弱
不同的现象,可能与不同成分及不同作用方式对小
菜蛾的作用机理不同有关,此问题有待进一步研究
探讨。
参考文献:
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表 3 不同溶剂萃取物对小菜蛾 3 龄幼虫的触杀活性
供试样品
石油醚萃取物
氯仿萃取物
乙酸乙酯萃取物
正丁醇萃取物
水萃取物
24 h
16.67±1.33 b
70.00±5.77 a
16.67±1.67 b
3.33±0.58 b
6.67±0.33 b
48 h
26.67±3.33 b
73.33±3.33 a
20.00±1.57 bc
3.33±0.58 d
10.00±0.00 cd
72 h
40.00±5.77 b
80.00±5.77 a
26.67±2.67 bc
6.67±0.33 d
13.33±2.33 cd
萃取物浸
膏得率//%
14.75
14.28
4.36
14.21
38.83
校正死亡率//%
注:各萃取物药液浓度均为 25 g/L。 表 4 同。
表 4 不同溶剂萃取物对小菜蛾 3龄幼虫的非选择性拒食活性
供试样品
CK
石油醚萃取物
氯仿萃取物
乙酸乙酯萃取物
正丁醇萃取物
水萃取物
平均取食面积
mm2
89.00±2.32
14.52±1.12
3.15±0.56
12.66±0.78
18.98±1.57
45.81±1.42
拒食率
%
83.69
96.46
85.78
78.67
48.53
平均取食面积
mm2
136.07±3.38
45.11±2.04
10.04±1.02
26.36±1.34
52.22±2.46
108.24±2.78
拒食率
%
66.85
92.62
80.63
61.62
20.45
24 h 48 h
(责任编辑 王贵春)
赵 堂等:蓼子朴提取物对小菜蛾生物活性的初步研究 2657