全 文 ：第 31卷　第 4期
2011年　7月
河北大学学报(自然科学版)
Journal of Hebei Univer sity (N atural Science Edi tion)
Vol.31 No.4
Jul.2011
杜鹃兰 Cremastra append iculata 化学成分的分离
秦新英 ,申勇
(河北大学 化学与环境科学学院 , 河北 保定　071002)
　　摘　要:采用硅胶 、凝胶柱色谱及 HPLC 对杜鹃兰(Cremastra appendiculata)的干燥假磷茎 ———山慈
菇进行化学分离 ,根据化合物波谱数据鉴定其结构.结果表明 ,从山慈菇乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分中分
离得到 4个化合物 ,分别为 7-羟基-2 ,4-二甲氧基菲(7-hydroxy-2 ,4-dimethoxyphenanthrene , Ⅰ), 24-甲基环
菠萝蜜醇(cyclolaudanol ,Ⅱ), N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇(aurantiamide acetate , Ⅲ),
1-(4-羟苄基)-2 , 7-二羟基-4 甲氧基菲(1-(p-hydro xybenzy l)-2 , 7-dihydroxy-4-methoxyphe-nanthrene , Ⅳ),
4 个化合物均为首次从该种植物中分离得到.
关键词:山慈菇;杜娟兰;化学成分
中图分类号:O 621.4　　　文献标志码:A　　　文章编号:1000-1565(2011)04-0393-04
Separation of Chemical Constituents from Cremastra appendiculata
QIN Xin-ying , SHEN Yong
(College o f Chemist ry and Environmental Science , Hebei U niversi ty , Baoding 071002 ,China)
Abstract:Compounds w ere separated by HPLC o r co lumn chromatog raphy wi th si lica gel , and Sepha-
dex LH-20 , and identified by spect ral analy sis respectively.T he results show ed that four compounds w ere
isolated f rom the ethano l ex t ract of the tubers of Cremastra appendiculata .Their st ructure s were deter-
mined as 7-hydro xy-2 , 4-dimethoxyphenanthrene(Ⅰ), cyclo laudanol(Ⅱ), aurantiamide acetate (Ⅲ)and
1-(p-hydro xybenzy l)-2 , 7-dihydroxy-4-methoxyphe-nanthrene (Ⅳ).Four compounds we re iso lated f rom
tubers of Cremastra appendiculata for the fi rst time.
Key words:Shancigu;Cremastra ap pend iculata ;chemical consti tuents
杜娟兰属于兰科 ,分布于我国陕西 、四川 、甘肃 、云南等省.山慈菇系兰科植物独蒜兰 P leione bulboco-
d iodes(Franch.)Ro fe 、云南独蒜兰 P.yunnanensis Rolfe 、杜鹃兰 Cremastra appendiculata(D.Don)Maki-
no 的干燥假磷茎 ,被中华人民共和国药典目录收载为常用中药.据史料记载山慈菇化学成分临床上具有清
热解毒 ,化痰散结等功效 ,可用来治疗肝病 、乳腺癌 、食道癌等多种肿瘤疾病.最近十几年 ,国内外对独蒜兰
P.bulbocodiodes的化学成分研究报道逐渐增多 ,报道了从中分离得到的包括木脂素类 、黄烷醇类 、二氢菲
类 、联苄类 、二苄醚衍生物等近 30个化合物[ 1-8] .但对杜鹃兰 C.appendiculata的化学成分及生物活性的
　收稿日期:2010-10-15
　基金项目:河北省科技厅资助项目(10967126D);河北省教育厅基金资助项目(2008307)
　第一作者:秦新英(1978-), 男 ,河北邯郸人 , 河北大学讲师 ,主要从事化学分析研究.
E-mail:qinxy@hbu.edu.cn
河北大学学报(自然科学版) 2011 年
研究报道较少 ,仅有一项日本专利中报道了 2个化合物 ,具有显著降压活性 ,分别命名为 cremastosine Ⅰ和
Ⅱ[ 9] ;此外还有从该植物中分离得到一个生物碱 cremast rine ,实验证实其具有抑制氘代 N-甲基东莨菪碱对
毒蕈碱 M3受体的键合作用[ 10] .张金超等[ 11] 首次从山慈菇乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分中分离得到 4 个化
合物 , 5-hydro xymethy lfurfural , 3′, 5′, 3″-t rihy-droxybibenzy l , 3 , 3′-dihydro xy-2(p-hydroxybenzyl)-5-me-
thoxybibenzyl ,3′,5-dihydro xy-2-(p-hydro xybenzyl)-3-methoxybibenzyl.迄今为止 ,从杜鹃兰中已分离得到
包括菲类[ 12 , 15] 、苷元[ 13] 、生物碱[ 10] 和黄烷酮类[ 14] 在内的 20 余个化合物 ,研究的空间还很广泛.为了更加深
入地探索和应用中药资源 ,寻找与其功能主治相对应的化学有效成分 ,为其应用提供科学准确的实验依据 ,
作者对杜鹃兰 C.appendiculata的干燥假磷茎进行了分离纯化和结构鉴定 ,从乙醇提取物的乙酸乙酯萃取
部分分离得到 4个化合物 ,分别为 7-羟基-2 , 4-二甲氧基菲(7-hydroxy-2 , 4-dimethoxyphenanthrene , Ⅰ),
24-甲基环菠萝蜜醇(cyclolaudanol , Ⅱ), N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇(auran-
tiamide acetate , Ⅲ), 1-(4-羟苄基)-2 , 7-二羟基-4 甲氧基菲(1-(p-hydro xybenzy l)-2 , 7-dihydro xy-4-me-
thoxyphe-nanthrene , Ⅳ),其结构见图 1.4 个化合物均为首次从该种植物中分离得到.
Ⅰ .7-羟基-2 , 4-二甲氧基菲;Ⅱ.24-甲基环菠萝蜜醇;
Ⅲ.N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇;Ⅳ.1-(4-羟苄基)-2 , 7-二羟基-4甲氧基菲.
图 1　化合物结构
Fig.1　Structure of compounds
1　仪器与材料
Bruke r AV-400 NMR 型核磁共振仪;Thermo Finnig an-LCQ 型质谱仪;FTIR 8400 型红外光谱仪
(KBr压片);HITACHI U-2800型紫外光谱仪;X-5A 型显微熔点测定仪(温度未校正);日本 YMC 公司
YMC-Pack C18 柱(250 mm ×10 mm ,5 μm).
杜娟兰块茎 ,2008年购自广东省广州市中药材市场;葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)购自保定市华欣试
剂仪器有限公司 ,为 Pharmacia 公司产品;层析用硅胶(41.5 ～ 75 μm),购自保定市华欣试剂仪器有限公司 ,
为青岛海洋化工厂产品.化学试剂为分析纯.
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第 4 期 秦新英等:杜鹃兰 Cremastra a ppendiculata 化学成分的分离
2　化合物的提取与分离
取杜娟兰 C.appendiculata的干燥假磷茎9.5 kg ,研磨粉碎后用体积分数为 80%的乙醇回流提取1 h.
回收合并提取液 ,60 ℃减压浓缩得深棕色干浸膏(300 g),在水中悬浮规定时间后 ,依次用石油醚 、乙酸乙
酯 、正丁醇萃取 ,得到各部位的萃取物.石油醚 、乙酸乙酯萃取物(82.4 g)与柱层析硅胶(41.5 ～ 75 μm)拌样
进行硅胶柱层析 ,用石油醚-乙酸乙酯(0 ～ 100%)梯度洗脱 ,经硅胶 TLC 分析合并相同组分 ,共合并 15个部
分.第 6部分经硅胶柱层析 ,V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=5∶1进行洗脱得Ⅰ的粗品 ,再经 Sephadex LH-20
层析(甲醇洗脱)纯化得到化合物 Ⅰ ,第 3 部分经过 T LC (V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=10∶1)洗脱后经
Sephadex LH-20反复柱层析得 Ⅱ的粗品 ,再经 V(氯仿)∶V(甲醇)=1∶1洗脱得到化合物 Ⅱ.第 9 部分经
过硅胶柱层析 , V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=4∶1洗脱后得到 a1 , a2 , a3 3个成分 ,成分 a3经过 Sephadex
LH-20层析(甲醇洗脱)纯化得到Ⅲ.第 11部分经硅胶柱层析 ,V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=3∶1洗脱得粗
品 ,经 Sephadex LH-20柱纯化(甲醇洗脱)得化合物Ⅳ,通过1H NMR , 13 C NMR , H MQC , H MBC 确证其
结构 ,并对文献中未归属的13C NMR数据进行准确归属.
3　化合物的鉴定
化合物Ⅰ:白色针状晶体 (Me2CO), C16 H14O 3 .mp159 ～ 160 ℃.HREI-MS m/z:254.092 9 (calcd.
254.093 7).UV(MeOH)λmaxnm(logε):220(3.19),276.5(0.94),297.5(0.44);IR(KBr)υmax(cm-1):3 274.9 ,
1 685.7 ,1 612.4 , 1 581.5 ,1 542.9 ,1 458.1 ,1 361.7 ,1 269.1 , 1 164.9 ,941.2;13C NMR(MeOD-d4)δ:102.6
(C-1), 160.5(C-2), 100.2(C-3), 158.9(C-4), 130.3(C-5), 117.4(C-6), 155.6(C-7), 112.2(C-8), 128.6
(C-9), 128.3(C-10), 135.0(C-10a), 117.1(C-4a),125.4(C-4b), 135.6(C-8a), 56.0(4-OCH 3), 55.8
(2-OCH3).1H NM R(MeOD-d4)δ:6.92(1H , d , J =2.4 Hz , H-1), 6.79(1H , d , J =2.4 Hz , H-3), 9.35
(1H ,d , J =9.2 Hz , H-5), 7.09(1H , dd , J =9.2 , 2.8 Hz , H-6), 7.16(1H , d , J =2.8 Hz , H-8), 7.53
(1H ,d , J =8.8Hz ,H-9),7.56(1H , d , J =8.8 Hz , H-10), 3.91(3H , s , 2-OCH 3), 4.06(3H , s , 4-OCH 3).通
过1H NMR , 13C NMR ,H MQC ,H MBC确证其结构为 7-羟基-2 ,4-二甲氧基菲.
化合物 Ⅱ:白色粉末 ,C31H 54O.EI-MS m/z:442[ M] + .13C NM R(CDCl3)δ:78.9(C-3), 36.6(C-20),18.3
(C-21),34.0(C-22), 31.4(C-23),39.1(C-24),30.9(C-25),20.6(C-31),17.5(C-26), 15.4(C-27).1H NMR
(CDCl3)δ:3.29(1H ,m , H-3), 0.96(3H , s ,H-18), 0.33(1H ,d , J =4.4 Hz , H-19 ax or eq),0.55(1H ,d , J =
4.4 Hz , H-19ax o r eq),0.87(3H , d , J =2.4 Hz ,H-21), 0.77(3H ,d , J =1.6 Hz , H-26),0.79(3H , d , J =
1.6 Hz , H-27),0.89(3H , s , H-28), 0.97(3H , s ,H-29), 0.81(3H , s ,H-30),0.84(3H ,d , J =2.8 Hz , H-31).
实验数据与文献[ 16]报道的 24-甲基环菠萝蜜醇数据一致.
化合物 Ⅲ:白色粉末 ,C27H28N 2O4 .ESI-MS m/z:467.2[ M+Na] + ,911.1[ 2M+Na] +.13C NMR(DMSO-d6)
δ:171.1(C-1), 54.8(C-2), 37.2(C-3), 138.2(C-4), 129.1(C-5 ,9 , 4” ,8”),128.1(C-6 ,8), 126.2(C-7 , 6”),166.1
(C-1 ),133.9(C-2 ),127.3(C-3 ,7 ),128.0(C-4 ,6 ), 131.3(C“5 ),49.1(C-1”),36.5(C-2”), 137.9(C-3”),
128.2(C-5” ,7”),64.6(C-9”), 170.3(-COMe), 20.5(-Me).1H NMR(DMSO-d6)δ:4.68(1H , m , H-2), 2.99
(2H ,m ,H-3),7.22(4H ,d , J =7.6 Hz ,H-5 ,9 ,4” ,8”),7.25(2H , t , J=7.6 Hz , H-6 ,8),7.14(2H , t , J =7.6 Hz ,
H-7 ,6”),4.17(1H ,m , H-1”),2.78(2H ,m ,H-2”),7.31(2H , t , J =7.6 Hz , H-5” , 7”),7.78(2H ,d , J =7.8 Hz ,
3 ,7 ),7.44(2H , t , J =7.8 Hz ,H-4 ,6 ), 7.51(1H , t , J =7.2 Hz , H-5 ),3.86(1H , dd , J =6.8 , 6.8 Hz , H-9”
ax), 4.01(1H ,dd , J =4.8 , 4.8 Hz , H-9”eq),1.98(3H , s , -CH3), 8.12(1H ,d , J =8.0 Hz ,α-NH),8.49
(1H , d , J =8.4 Hz , β-NH).实验数据与文献[ 17]报道的 N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯
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丙氨醇数据一致.
化合物 Ⅳ:白色粉末 ,C22H18O4 .EI-MS m/z:346[ M] + .13 C NMR(DMSO-d6)δ:113.2(C-1), 152.6
(C-2), 99.4(C-3),156.7(C-4), 128.8(C-5), 116.7(C-6), 154.1(C-7), 110.9(C-8), 127.1(C-9), 123.2
(C-10),132.2(C-10a),114.4(C-4a), 123.5(C-4b), 132.0(C-8a),55.4(-OCH 3), 29.1(-CH 2 -), 131.8
(C-1 ),128.8(C-2 , 6 ),114.8(C-3 ,5 ),155.0(C-4 ).1H NMR(DMSO-d6)δ:9.62(1H , s , -OH),9.56
(1H , s , -OH),9.31(1H , d , J =9.2 Hz ,H-5), 9.03(1H , s , -OH),7.72 (1H , d , J =9.2 Hz ,H-10),7.52
(1H ,d , J =9.2 Hz , H-9),7.11(1H ,d , J =2.0 Hz , H-8), 7.07(1H , dd , J =9.2 , 2.0Hz , H-6),6.95(2H ,
d , J =8.4 Hz , H-2 ,6 ),6.93(1H , s , H-3), 6.59(2H , d , J =8.4Hz , H-3 ,5 ), 4.21(2H , s , -CH 2 -),
4.03(3H , s , -OCH 3).以上数据与文献[ 18]报道的 1-(4-羟苄基)-2 ,7-二羟基-4甲氧基菲数据一致.
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(责任编辑:梁俊红)
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