全 文 ：4 结论
上述研究表明牛耳风在性状、显微方面有明显的特征，如小
茎表皮细胞有非腺毛;皮层薄壁细胞中有的含棕黄色分泌物质;
韧皮纤维与薄壁细胞之间形成层状;射线细胞内含有草酸钙小方
晶。粉末中韧皮纤维壁较厚，木纤维壁较薄;石细胞孔沟明显;有
草酸钙方晶和非腺毛等。这些特征在生药学上可作为牛耳风的
鉴别依据。
参考文献:
［1］ 广西区中医药研究所．广西药用植物名录［M］．南宁:广西人民出
版社，1986:54．
［2］ 《全国中草药汇编》编写组．全国中草药汇编，下册［M］．北京:人民
卫生出版社，1978:617．
［3］ 戴 斌． 中国现代瑶药［M］． 南宁:广西科学技术出版社，2009:
155．
收稿日期:2014-03-18; 修订日期:2014-07-12
基金项目:福建省中青年教师 A类科研资助项目(No． JA13415)
作者简介:朱扶蓉(1971-) ，女(汉族) ，福建福州人，福建卫生职业技术学
院副教授 ，在读硕士研究生，学士学位，主要从事中药鉴定与中药化学研
究工作．
闽产重瓣铁线莲的生药学鉴别研究
朱扶蓉，何舒澜，林贵灿
(福建卫生职业技术学院，福建 闽侯 350101)
摘要:目的 对闽产重瓣铁线莲进行生药学鉴别研究，为开发利用该资源提供参考依据。方法 采用性状鉴定与显微鉴定
的方法对重瓣铁线莲进行鉴别，并通过化学成分系统预试验鉴定其所含的化学成分，采用薄层色谱法进行了皂苷类和黄
酮类成分的定性鉴别。结果 重瓣铁线莲叶上、下表皮主要从气孔和非腺毛的类型进行鉴别;重瓣铁线莲根的粉末主要
从表皮细胞，导管和纤维进行鉴别;重瓣铁线莲根的横切面主要从木质部的排列方式进行鉴别。重瓣铁线莲根中可能含
有氨基酸、蛋白质、糖类、皂苷类、生物碱、黄酮类、有机酸、挥发油等化学成分。采用薄层色谱法检测其皂苷类与黄酮类
化合物，斑点清晰，重现性好。结论 研究结果可用于重瓣铁线莲质量标准研究的基础，也为该植物生物活性成分的进一
步研究提供实验依据。
关键词:重瓣铁线莲; 生药学; 鉴别
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2014． 11． 046
中图分类号:Ｒ282． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2014)11-2685-03
重瓣铁线莲 Clematis florida var． plena D．是福建闽东地区盛
产常用的一味草药，该药来源于毛茛科铁线莲属，以根和根茎入
药，民间常用其治疗腰腿疼痛、饮食胸膈饱胀等症。据《福建植
物志》记载，重瓣铁线莲在我国云南、浙江有野生，其余各地常有
栽培，福建古田等地偶有种植，供观赏用［1］。《中华本草》记载，
该药味苦，微腥，性温，小毒，归肝、脾、肾经、可利尿、通络，理气通
便，解毒，主治风湿性关节炎、小便不利、闭经、便秘腹胀、风火牙
痛、眼起星翳、虫蛇咬伤、黄疸［2］。现代关于重瓣铁线莲的研究
报道也基本是围绕其重瓣特性［3，4］，及园艺观赏价值展开［5］，有
关其生药学方面的研究资料极少［6］。该药具有较好的开发前
景。本文对其性状及显微特征进行了研究，并通过化学成分系统
预试验鉴定其所含的化学成分，采用薄层色谱法进行了皂苷类和
黄酮类成分的定性鉴别，为进一步开发利用闽产重瓣铁线莲资源
和重瓣铁线莲的质量标准研究提供科学依据。
1 仪器与材料
1． 1 仪器 德国 LeiCA DM3000 数码显微镜、LeiCA ＲM2245 石蜡
切片机、LeiCA TP1020 自动组织脱水机;SHB － I22 循环水式多用
真空泵(郑州长城科工贸有限公司);ＲE5298A旋转蒸发器(上海
亚荣生化仪器厂);HH － 6 数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华
仪器制造有限公司) ;“艾柯”牌超纯水机(唐宁科技发展有限公
司);T0 型电子天平(余姚市金诺天平仪器有限公司) ;HX － 1050
恒温循环器(北京德天佑科技发展有限公司) ;台式离心机(上海
安容科学仪器厂);薄层板(天津天河医疗仪器研制中心) ;
SY3200 － T 超声波清洗机(上海声源超声波仪器设备有限公
司);紫外分析仪:ZF － I 型(上海顾村电光仪器厂)。
1． 2 试剂与材料 实验试剂均为分析纯;供试药材由福建省宁德
市霞浦县畲族医药研究所副所长雷国胜提供，经鉴定该药材为毛
莨科植物重瓣铁线莲 Clematis florida var． plena D．的根，凭证标本
保存于福建卫生职业技术学院中药鉴定室;齐墩果酸对照品(批
号:110709 － 200304)、芦丁对照品(批号:100080 － 200707)均购
自中国药品生物制品检定所。
2 方法
2． 1 性状鉴别 通过对干药材重瓣铁线莲的根和根茎进行观察
和研究，描述其性状特征。
2． 2 显微鉴别 通过石蜡切片法制备重瓣铁线莲根横切面的永
久片，对重瓣铁线莲叶上、下表面及其根粉末进行稀甘油、水合氯
醛装片，置于数码显微镜下详细观察并描述重瓣铁线莲的根横切
面与粉末的显微特征，叶上下表面的显微特征。
2． 3 化学成分系统预试验 取一定量自然晒干的重瓣铁线莲根
及根茎，经粉碎后作为实验粗粉备用。
2． 3． 1 石油醚提取液的制备 称取样品粗粉 50 g，加入石油醚
(60 ～ 90 ℃)300 ml，于水浴锅上加热(80 ℃)回流(1． 5 h)2 次，
合并滤液。该供试液供挥发油、油脂、萜类、甾体化合物等成分检
查。
2． 3． 2 乙醇提取液的制备 称取样品粗粉 50 g，加入 95%乙醇
300 ml，于水浴锅上加热(80 ℃)回流(2 h)2 次，过滤，合并滤液。
该供试液滤液供黄酮、醌类物质，香豆素，有机酸，鞣质等成分检
查。
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2． 3． 3 酸性乙醇提取液的制备 取 20 ml乙醇提取液，加 1ml 盐
酸酸化，抽滤，滤液加 3 ml 浓氨水碱化，分次加 15ml 氯仿振摇，
取氯仿层，加 10 ml 2%盐酸，取水层。该供试液作生物碱检查。
2． 3． 4 冷水浸液的制备 称取样品粗粉 20 g，置于 500 ml锥形瓶
中，加蒸馏水 90 ～ 100 ml，室温浸泡过夜，过滤，收集滤液。该供
试液供氨基酸，蛋白质等成分检查。
2． 3． 5 热水提取液的制备 称取样品粗粉 50g，于水浴锅上加热
(80 ℃)回流(2 h)2 次，过滤，合并滤液。该供试液供糖类，苷
类，酚类，有机酸，皂苷类，鞣质等成分检查。
2． 4 薄层色谱鉴别
2． 4． 1 皂苷类成分薄层色谱鉴别 称取重瓣铁线莲粉末 1 g 置
于具塞锥形瓶中，加入 5%盐酸溶液 20ml超声提取 30 min抽滤，
滤液蒸至约 5 ml放冷，加入乙醇 20 ml溶解，滤过，滤液加石油醚
20 ml萃取 2 次，合并萃取液，蒸干，残渣加无水乙醇 2 ml溶解作
为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品加无水乙醇制成每毫升含
0． 45 mg的溶液作为对照品溶液。吸取对照品溶液及供试品溶
液各 3 μl 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 以甲苯 －乙酸乙酯 －
甲酸 (20∶ 3∶ 0． 2)为展开剂，上行展开约 8 cm，取出，晾干，喷以
10%硫酸乙醇溶液在 105℃加热至斑点显色清晰。
2． 4． 2 黄酮类成分薄层色谱鉴别 称取重瓣铁线莲粉末 2 g 加
石油醚(60 ℃ ～90 ℃)50 ml，密塞，超声处理 30min，放冷，过滤，
弃去石油醚液，药渣挥干溶剂，加 70%乙醇 30ml，加热回流 1 h，
放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解作为供试品溶液。
另取芦丁对照品，加甲醇制成每毫升含 0． 5 mg的溶液，作为对照
品溶液。吸取对照品溶液及供试品溶液 4 μl，分别点于同一以含
4%磷酸氢二钠溶液制备的硅胶 G薄层版上，以乙酸乙酯 －甲醇
－甲酸 －水(8∶ 1∶ 1∶ 1)为展开剂展开，取出晾干，喷以 3%三
氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。
3 结果
3． 1 性状鉴别 根茎不规则类圆柱形，表面浅棕褐色，直径约0． 2
～ 1 cm，根茎两侧及下方可见细根。根呈细长圆柱形，稍弯曲，多
数长 20 ～ 25 cm，直径 2 ～ 5 mm。表面红棕色或棕褐色，具多数细
密纵纹及突起的支根痕，质脆，易折断，断面不平坦，略呈纤维性，
木心较明显，气微，味淡。见图 1 ～ 2。
图 1 重瓣铁线莲原植物图 图 2 重瓣铁线莲的根及根茎
3． 2 显微鉴别
3． 2． 1 根横切面 表皮细胞一列，外壁增厚，皮层宽广，薄壁细胞
富含淀粉粒，内皮层、中柱鞘清晰可见，初生韧皮部与初生木质部
相间排列呈辐射状，初生木质部二原型，木化，导管管径较大，中
央无髓部。见图 3。
3． 2． 2 叶的上下表面制片 上、下表皮细胞均呈不规则形，垂周
壁波状弯曲。气孔不定式，直径 25 ～ 32 μm，副卫细胞 3 ～ 5 个。
非腺毛单细胞，多呈镰刀状弯曲，长约 468 μm，直径约 18 μm，叶
脉处较多。见图 4。
1．表皮 2．皮层 3．内皮层 4．中柱鞘 5．韧皮部 6．木质部
图 3 重瓣铁线莲根横切面显微特征图(左)及组织构造简图(右)
1．下表皮细胞 2．上表皮细胞 3．非腺毛
图 4 重瓣铁线莲叶表面显微特征图
3． 2． 3 根的粉末制片 粉末黄棕色。表皮细胞类长方形，外壁棕
黄色并增厚，有的表皮细胞细胞壁呈波状弯曲。纤维细长，单个
散在或数个成束，浅棕黄色，直径约 12 ～ 23 μm，长约 105 ～ 193
μm，纤维中可见纹孔。导管主要为具缘纹孔导管，管径约 15 ～
60μm。淀粉粒众多，单粒类球形，直径约 4 ～ 15 μm，脐点分叉状
或颗粒状，复粒由 2 ～ 8 个分粒组成。见图 5。
1．表皮细胞 2．波状弯曲的表皮细胞
3．外壁增厚的表皮细胞与薄壁细胞 4．淀粉粒
5．具缘纹孔导管 6．纤维
7．含淀粉粒的薄壁细胞 8．薄壁细胞
图 5 重瓣铁线莲根粉末特征
3． 3 化学成分系统预试验 实验结果可判断出重瓣铁线莲根中
可能含有氨基酸、蛋白质、糖类、皂苷、生物碱、黄酮、有机酸、挥发
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 11 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 11
油等化学成分(见表 1)。
3． 4 薄层色谱鉴别
3． 4． 1 皂苷类成分薄层色谱鉴别结果 供试品色谱中，在与齐墩
果酸对照品色谱相应位置上均有紫红色斑点(见图 6)。
3． 4． 2 黄酮类成分薄层色谱鉴别结果 供试品色谱中，在与芦丁
对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点(见图 7)。
4 讨论
研究结果表明，在重瓣铁线莲的生药学鉴别中，以根的性状
特征、横切面特征、粉末特征及叶的表面特征的鉴别意义较大。
性状鉴别中，作为入药部位的根主要特征是呈细长圆柱形，表面
红棕色或棕褐色，具多数细密纵纹及突起的支根痕，断面不平坦，
略呈纤维性，木心明显。显微鉴别中，根的横切面具有外壁明显
增厚的表皮，宽广的皮层，富含淀粉粒的薄壁细胞，清晰可见的内
皮层与中柱鞘，辐射排列的初生维管束，二原型的初生木质部，木
化，管径较大且木化的导管。根的粉末特征中，主要可见外壁棕
黄色并增厚的表皮细胞，浅棕色细长的纤维单个散在或数个成
束，导管大多为具缘纹孔导管，淀粉粒多，单粒类球形，脐点分叉
或颗粒状，复粒由 2 ～ 8 个分粒组成。叶的表面制片可见上、下表
皮细胞均呈不规则形，垂周壁波状弯曲。气孔不定式，副卫细胞
3 ～ 5 个。非腺毛单细胞，多呈镰刀状弯曲，叶脉处较多。重瓣铁
线莲根中主要化学成分可能含有氨基酸、蛋白质、糖类、皂苷、生
物碱、黄酮、有机酸、挥发油等。采用薄层色谱法进行皂苷类和黄
酮类成分的定性鉴别，显色灵敏，斑点清晰，重现性好。
图 6 皂苷类成分 TLC鉴别图 图 7 黄酮类成分 TLC鉴别图
表 1 重瓣铁线莲根化学成分鉴定结果
检验项目 提取液选择 试液或反应名称 现象 试验结果
蛋白质 冷水提取液 茚三酮试验 供试液颜色显紫色 +
氨基酸 冷水提取液 双缩脲试验 供试液颜色显红色 +
糖类 热水提取液 斐林反应 供试液产生砖红色沉淀 +
热水提取液 α －萘酚试验 供试液与硫酸的交界面产生紫红色环 +
皂苷类 热水提取液 泡沫试验 供试液振摇出现大量泡沫，15min内不消失 +
热水提取液 醋酐 －浓硫酸试验 供试液颜色由黄→红色，不呈污绿色 +
酚类和鞣质 热水及乙醇提取液 三氯化铁试验 供试液颜色无明显变化 －
热水及乙醇提取液 氯化铁 －铁氰化钾试验 滤纸中斑点呈蓝色 +
生物碱 酸性乙醇提取液 碘化铋钾试验 供试液出现桔红色沉淀 +
酸性乙醇提取液 碘化汞钾试验 供试液出现白色沉淀 +
有机酸 热水及乙醇提取液 pH试纸试验 pH ＜ 6 +
热水及乙醇提取液 溴酚蓝试验 滤纸在蓝色背景上显黄色斑点 +
黄酮类 乙醇提取液 盐酸 －镁粉试验 供试液显红色 +
乙醇提取液 氨熏试验
滤纸置于浓氨水瓶上熏半分钟，其斑点显黄色加深，而滤纸片离
开氨蒸汽数分钟后，黄色减弱
+
蒽醌类 乙醇提取液 碱液试验 供试液颜色不变 －
乙醇提取液 硼酸试验 滤纸片上无斑点 －
内酯、香豆素 乙醇提取液 开闭环试验
加 1%NaOH的供试液呈现澄清状，加 2% HCl的供试液呈现混浊
状
+
乙醇提取液 三氯化铁试验 混合溶液颜色无明显变化 －
挥发油 石油醚提取液 油斑试验 油斑在室温下可挥发不留痕迹 +
甾体和萜类 石油醚提取液 氯仿 －浓硫酸试验 反应液颜色由黄→红→紫→蓝→绿色 +
石油醚提取液 醋酐 －浓硫酸试验 混合溶液颜色无明显变化 －
在重瓣铁线莲根的横切面和粉末显微鉴别实验结果中均未
见韧皮纤维和石细胞，而在同属植物威灵仙根的横切面韧皮部外
侧可见韧皮纤维和石细胞［7］，且其原变种植物铁线莲 C． florida
的幼根和老根中也可见韧皮纤维［8］，分析原因可能是重瓣铁线莲
与其他铁线莲的鉴别特征区别，也可能是因为重瓣铁线莲入药的
根生长年限短，没有多年生的老根，故还应对其多年生老根的横
切面和粉末显微鉴别再作进一步深入研究和验证。
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