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滇桂艾纳香对动物离体及在体子宫平滑肌作用的影响



全 文 :收稿日期:2012-06-30; 修订日期:2012-11-27
基金项目:广西自然基金资助项目( No. 2010GXNSFA013195) ;
广西教育厅资助项目( No. 200911MS126)
作者简介:姜建萍( 1965-) ,女( 汉族) ,广西桂林人,现任广西中医药大学
教授,博士学位,主要从事中药、民族药成分与药效研究工作.
滇桂艾纳香对
动物离体及在体子宫平滑肌作用的影响
姜建萍1,陈美安2,马雯芳1,2,甄汉深1,陈 晨1,刘喜华1
(1.广西中医药大学,广西 南宁 530001;2.成都中医药大学,四川 成都 610075)
摘要:目的 观察滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑肌、大鼠在体子宫平滑肌运动的影响。方法 运用 BL - 420 生物信号
系统记录子宫平滑肌的活动,观察不同剂量滇桂艾纳香水提液及含药血清对子宫平滑肌的影响。结果 滇桂艾纳香水提
液、含药血清均可显著提高小鼠离体子宫的收缩频率( P < 0. 05) ,且水提液能提高在体子宫的收缩强度( P < 0. 05) 及收
缩频率( P < 0. 05) 。结论 滇桂艾纳香可增强离、在体子宫平滑肌的收缩频率及收缩力。
关键词:滇桂艾纳香; 子宫平滑肌; 收缩
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2013. 02. 026
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 02-0312-02
Research of the Effect of Blumea Riparia ( BI. ) DC. on Uterine Smooth Muscle in Vitro
and Vivo
JIANG Jian-ping1,CHEN Mei-an2,MA Wen-fang1,2,ZHEN Han-shen1,CHEN Chen1,LIU Xi-hua1
( 1. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanning Guangxi 530001,China; 2. Chengdu Universi-
ty of Traditional Chinese Medicine,Chengdu Sichuan 610075,China)
Abstract: Objective The purposes of the paper were to research on the effect of Blumea riparia( BI. ) DC. on the movements of
uterine smooth muscle of mice in Vitro and rat in Vivo. Methods The spontaneous activity of uterine smooth muscle was observed
with BL - 420 biological signal system when different dosages of water extracts and serum containing were given. Results Water
extracts and serum containing of Blumea riparia( BI. ) DC. could increase the contractile frequency of the isolated uterine smooth
muscle of mice( P < 0. 05) ,the water extracts could increase contractile intensity( P < 0. 05) and contractile frequency( P < 0. 05)
in vivo. Conclusion Blumea riparia ( BI. ) DC. could enhance the contraction frequency and contractile intensity of uterine smooth
muscle in Vitro and Vivo.
Key words: Blumea riparia( BI. ) DC; Uterine smooth muscle; Contraction
滇桂艾纳香为菊科艾纳香属植物假东风草 Blumea riparia
(BI.)DC.的干燥全草[1],其味微苦淡、性微温,具有活血调经、祛
风除湿、止血、利水等作用,可用于经期提前、产后流血不止、产后
浮肿、不孕症、阴疮、风湿骨痛等症[2 ~ 4]。滇桂艾纳香主要产于广
西西南部和云南东南部,在广西百色地区有悠久的使用历史,现
在已成功开发成现代制剂在临床上有广泛使用[5,6]。研究表明,
滇桂艾纳香水提物及醇提物可缩短动物出血时间及凝血时间发
挥凝血作用[7],但目前未见有滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑
肌、大鼠在体子宫平滑肌作用影响的报道。笔者以子宫收缩频
率、收缩强度为指标对这方面作一探讨,为进一步研究滇桂艾纳
香发挥止血作用的机理提供实验依据。
1 仪器与材料
1. 1 动物 昆明种小鼠,Wistar 大鼠,雌性,清洁级,由广西医科
大学实验动物中心提供,动物许可证号:SCXKG桂 2003 - 0003。
1. 2 仪器 BL - 420 生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公
司) ;HW -400S恒温平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司) ;JH - 2
肌张力传感器(北京航天医学工程研究所) ;LD4 - 18 型台式低
速离心机(北京离心机有限公司)。
1. 3 药品与试剂 缩宫素注射液[福建佳星动物药业有限公司,
兽药字(2008)130101571];己烯雌酚(合肥久联制药有限公司,
20090316) ;硫喷妥钠注射液 (上海新亚药业有限公司,
H31021846)。
滇桂艾纳香提取物:称取滇桂艾纳香药材 2 950 g,用水浸泡
过夜后,水煎煮三次,每次 1. 5 h,每次加水以没过药材 2 cm 为
度。合并三次水提液,浓缩成浓度为 4. 025g(生药)· ml -1的供
试液。
2 方法
2. 1 滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑肌的影响
2. 1. 1 滇桂艾纳香水提液对小鼠离体子宫平滑肌的影响 参照
文献方法[8],未孕雌性小鼠于实验前 3 天,每天各鼠灌胃己烯雌
酚水溶液 0. 6 mg,造成人工动情期,以提高子宫对药物的敏感
性。第 4 天,用颈椎脱臼法迅速处死小鼠,剖腹取出子宫,立即浸
入盛有乐氏液的培养皿中,漂净,剥离附着于子宫角的结缔组织
和脂肪组织,在子宫颈处剪为两段,制成子宫平滑肌条。实验时
将其置于含有 20 ml 乐氏液的恒温浴槽中,温度设为(37 ±
0. 5)℃,同时通入混合气,待子宫活动稳定后,从浴槽上方加入药
液,观察并记录子宫收缩频率、强度的变化。
2. 1. 2 滇桂艾纳香含药血清对小鼠离体子宫平滑肌的影响 雌
性小鼠 40 只,随机分为含药血清组和空白血清组,每组 20 只。
含药血清组连续 7 天灌服滇桂艾纳香水提液 0. 014 31 g·g -1体
质量,第 7 天灌胃 1h 后,摘眼球取血,放置 30 min 使其凝结,
3 000 r·min -1离心 10 min,取上层血清。合并血清,放入冰箱保
存备用,制得含药血清。空白血清组,连续 7 d 给小鼠灌服生理
盐水 0. 02 ml·g -1,制得空白血清。小鼠离体子宫标本的制备,
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 2
子宫收缩情况的测定和各药物的滴加同“2. 1. 1”项。
2. 2 滇桂艾纳香对大鼠在体子宫平滑肌的影响 参照文献方
法[8],未孕雌性大鼠实验前 3 天,每天各鼠灌胃己烯雌酚水溶液
2. 0mg,造成人工动情期,以提高子宫对药物的敏感性。第 4 天,
称重后用 0. 7%硫喷妥钠腹腔注射麻醉(10 ml·kg -1) ,仰卧固
定,下腹做一切口分离显露子宫,剥离周围组织,将子宫远端与肌
张力换能器连接,固定子宫保温筒在大鼠腹部的位置。往保温筒
上孔处加入(37 ± 1)℃的乐氏液,使子宫浸于乐氏液中。经十二
指肠给药,观察并记录大鼠在体子宫平滑肌的收缩频率及收缩强
度。
2. 3 数据处理 所有数据采用 SPSS13. 0 进行统计学处理,实验
数据以 珋x ± s表示,组间比较采用两样本均数的 t检验。
3 结果
3. 1 滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑肌的影响
3. 1. 1 滇桂艾纳香水提液对小鼠离体子宫平滑肌的影响 实验
结果表明,滇桂艾纳香水提液低、中剂量均可显著提高小鼠离体
子宫的收缩频率和收缩强度(P < 0. 05)。结果见表 1。
表 1 滇桂艾纳香水提液对小鼠离体子宫平滑肌的影响(珋x ± s)
组别 剂量
收缩频率 /次·min - 1
给药前 给药后
收缩强度 /g
给药前 给药后
低剂量 30mg 1. 10 ± 0. 32 1. 60 ± 0. 52* 1. 31 ± 0. 48 1. 72 ± 0. 38*
中剂量 50mg 1. 00 ± 0. 47 1. 70 ± 0. 67* 1. 88 ± 0. 38 2. 27 ± 0. 28*
高剂量 80mg 1. 10 ± 0. 57 1. 40 ± 0. 52 1. 95 ± 0. 67 2. 28 ± 0. 64
缩宫素 0. 0025U 1. 40 ± 0. 70 2. 40 ± 1. 07* 2. 15 ± 0. 66 3. 00 ± 0. 95*
与给药前比较,* P <0. 05;n =10
3. 1. 2 滇桂艾纳香含药血清对小鼠离体子宫平滑肌的影响 实
验结果表明,与含药血清组给药前比较,滇桂艾纳香含药血清中
剂量能显著增强小鼠离体子宫的收缩频率(P < 0. 05) ,含药血清
低、高剂量能极显著增强小鼠离体子宫的收缩频率(P < 0. 01) ,
滇桂艾纳香含药血清对小鼠离体子宫平滑肌收缩强度有加强趋
势但给药前后无显著性差异。结果见表 2。
表 2 含药血清对小鼠离体子宫平滑肌的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/μl
收缩频率 /次·min - 1
给药前 给药后
收缩强度 /g
给药前 给药后
空白血清 10 1. 30 ± 0. 67 1. 20 ± 0. 63 3. 35 ± 1. 24 3. 29 ± 1. 26
20 1. 40 ± 1. 17 1. 80 ± 0. 63 2. 26 ± 1. 71 2. 23 ± 1. 70
50 1. 30 ± 0. 48 1. 50 ± 0. 85 2. 58 ± 1. 11 2. 58 ± 1. 09
含药血清 10 0. 80 ± 0. 63 1. 80 ± 0. 79** 1. 74 ± 0. 63 1. 89 ± 0. 67
20 1. 30 ± 0. 67 2. 10 ± 0. 57* 1. 68 ± 0. 61 1. 86 ± 0. 57
50 1. 40 ± 0. 70 2. 50 ± 0. 85** 2. 10 ± 0. 92 2. 47 ± 0. 91
与含药血清组给药前比较,* P <0. 05,**P <0. 01;n =10
3. 2 滇桂艾纳香对大鼠在体子宫平滑肌的影响 实验结果表明,
滇桂艾纳香水提液的低剂量能提高大鼠的收缩强度(P < 0. 05) ,
中剂量能提高大鼠在体子宫的收缩频率(P < 0. 05)。结果见表
3。
表 3 滇桂艾纳香水提液对大鼠在体子宫平滑肌的影响(珋x ± s)
组别 剂量
收缩频率 /次·min - 1
给药前 给药后
收缩强度 /g
给药前 给药后
低剂量 71. 6g·kg - 1 5. 60 ± 2. 46 7. 50 ± 2. 90 1. 31 ± 0. 29 1. 68 ± 0. 34*
中剂量 143. 1g·kg - 1 4. 00 ± 1. 76 5. 90 ± 2. 18* 1. 56 ± 0. 64 2. 08 ± 0. 82
高剂量 286. 2g·kg - 1 4. 00 ± 1. 70 5. 60 ± 2. 17 1. 58 ± 0. 45 1. 99 ± 0. 46
缩宫素 1U 5. 40 ± 2. 32 8. 70 ± 2. 91* 1. 37 ± 0. 78 2. 95 ± 1. 24**
与给药前比较,* P <0. 05 **P <0. 01;n =10
4 讨论
在对子宫收缩影响实验中发现,滇桂艾纳香水提液对小鼠离
体子宫平滑肌有收缩作用,其中低、中剂量组均能提高小鼠离体
子宫的收缩频率和收缩强度而促进止血。为进一步考察滇桂艾
纳香经胃肠道消化吸收,在体内生物转化后,是否仍然能发挥止
血作用,本文采用含药血清给药,并以空白血清为对照,以排除血
清故有活性成份的干扰,实验结果表明,滇桂艾纳香含药血清低、
中、高剂量组均能提高小鼠离体子宫的收缩频率,进一步证实滇
桂艾纳香有助于加强局部血管的压力,而促进子宫内血管收缩,
促进止血。此外,还考察了滇桂艾纳香对大鼠在体子宫平滑肌的
影响,结果表明滇桂艾纳香对大鼠在体子宫平滑肌有收缩作用,
能减少子宫出血。
本文从滇桂艾纳香对小鼠离体子宫平滑肌、大鼠在体子宫平
滑肌运动的影响探讨滇桂艾纳香止血作用的途径,可为该药物的
进一步开发利用提供实验依据。
参考文献:
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 2 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期