全 文 ：天等 ( 1 9 83 )用当试剂分析法可检 出食品小
于 o. lng 的内毒素 , 整个检测过程 能在 3 小
时内完成 。 为提供食品卫生 质量 的可 靠 评
价 , 此法不失为一快速 、 灵敏 、 简易的筛选
检柳!方法 。
九 、 发光分析法
微生物的 A T P 十 荧光素— 荧光 素酶复合物一 ,生物性发光反应 。 细菌的 叶 哪 一钦
( F e
、 入 i 、 C o 、 C u 、 拜 a 等 ) + 氨基苯二
既一 , 化学性发光反应 。 光强度与食品中微生
物的 A 『f P 和 ”卜啡盐含量成正比 。 细菌 A T P
含从不卜J的种 、 生 一长条件 、 菌龄 , 抑制剂或
有害化学物质存在有很大变化 。
十 、 其它生化分析法
不同的微生物其酶的种类和活性不同 。
用连续流动法 ( B al · c o m b , 1 9 7 6 ) 把某菌
慧液注八酶 自动分析仪 , 在一小时内测出各
种酶活性数据 , 并自动绘成活性曲线 。 可用
于微生物定性分析 。 该仪器一般能侧出某种
组!菌 1 8种酶的活性 。
菌体蛋白的凝胶电泳和细菌代谢降解产
物的圆盘薄层层析也能有效地快速鉴定微生
物 。 尤其适用于肠道细菌的鉴定 。
特定的抗生剂 ( 或其它化学抑制剂 ) 对
不同微生物的生 关可产生不同的抑制效果 。
因而易建立计算机模型 、 绘制 出各种微生物
特征性的抑制曲线 ,对微生物进行鉴定分种 。
参 考 资 料
[ 1 〕 D a n l e l 丫 . C . F u n g & H . M i e h a e l
w e h ,
1
.
2 0 7。 , R a P 一d m e 七h o d s a ; z d a u Lo -
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.
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.
N o 3
.
P 34 一 56
〔 3 〕 N . A . C o x & A . J . M a r e u r i . l o 7 9 . l乙a , i d
b i o e h e l n l e a l Le s t i n g P ;
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L j 」 F J e e 丈Tl a xl . J . \ V , 1` . \’ . R o w l a 几 d s . 3 .
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及 D , 丫 . C . F u n g , 1 9 8 5 . l d e n it f切 叭 { 。 n
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尸: a 七. V o / 48 . N o i . P 14 7 ~ 1 4 9
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7 1 朱培坤 《 免疫酶技术 》 ( 1 9 8 3 少P t 01 一 { 巧
〔 名 J 何晓青等 1 9 8 4应 用肠杆菌科四个属的诊断 i兹海
体快速诊断沙门氏菌 、 《 微 生物学 报 》 , ( :仲
2 82 一 2 8 9
仁。 l 汪诚天伟 1 9 8 2 《 鼓试验应 川于 食品 卫生快
速检侧 》
毛 华 菊 浸 膏 的 毒 性 研 究
#}1 北省 卫 生防疫站 李新兰
毛 华菊 ( D e n d r a n L士z e m a V e s t i t 、 : n 、
( n
一 e m 。 王 ) 七 : n g ) 系菊科菊属多年 生 草
本植物 , 高约 60 ~ 80 厘米 , 它的花 、 叶 、 一奥
含有菇类化合物 , 具有浓郁的香气 , 民间将
它作为草药使用 。 为开拓天然食品香料 , 中
国科学院武汉植物研究所提取毛华菊浸膏作
为食用香料用 , 为确保其安全性 , 我们对毛
华菊浸膏进行 了毒理试验 , 报告如下 :
方法和结果
一 、 急性毒性试验 :
陈永德 路光仲 张国斌
选本站动物房繁殖的 ( 体重 18 一 2 2克 )
成年健康小白鼠 20 只及W招 t a r 大白 鼠 ( 体
垂 6 0 ~ 8 0克 ) 20 只 , 随机分为 5 组 , 1 个对
照组和 4 个试验组 ; 每组动物 4 只 , 雌难各
半 。 对照组动物灌 胃小麻汕 , 每公斤体重灌
胃 2 0毫升一 ; 4 个剂量组灌胃 20 m l / k g 体 成
含有不同浓度的毛华菊 浸膏 的小 麻汕 i齐液
( 相当于每公斤体重灌胃 2 . 1 5 、 4 . 6 4 、 {. 。 、
刽 。 5 、 4 6 . 4克毛华菊 ; 毛华菊浸膏是在热 长
浴上溶于小麻油中的 ) 。 观察并记录抓报功
物的中毒表现及 2 周内动物死亡的情况 。 按
霍恩 ( H o rn ) 氏法 ` ” 测定半 数致 死亡量
( L D 5 o )
, 其结果如表 1 、 2 所示 。
毛华菊漫膏对大鼠的急性毒性 表 1
灌胃毛 华菊 }
组别
}役膏齐叮量
}
l克 ,公斤 、
动物数
(只 )
死亡数
(只 )
中 毒 表 现
刘 : 。 。 )
, ` 。 …试验组动物灌胃后 , 用前竺 }一一上二 }_二画胸部 , 饮水 量 增 加 , _1 { } { }“ 一 ”小时后无其它症状 。 高
) l } 之· 工5 { 4 } 1 }剂量组动物灌胃后 5 ~ 8小 时试 { , } }
.
}
_
}开始出现死亡 , 动物主要表
妇` { ` ’ 七` } 魂 { ` }现呼吸短促 , 气管有呼吸杂
{ 3
} 10
. 。
}
4
}
3
{音 , 胸部着地向前爬行 ; 剖圳 } _ _ _ } } !检见 胃内漪留浸膏凝块 , 胃
{
4
}
之` ’ b
j
`
1
`
},` 胀气 粘膜壁变薄透明
毛华菊浸膏对小鼠的急性赛性 表 2
组 别 灌 胃毛华菊浸膏剂量
(克 /公斤 )
动物数
(只 ) 死亡数(只 )
中毒
表现
同大
白鼠
结果表明 : 试验大鼠在第 1 ~ 4天 、 5 ~
8天 、 9 ~ 28 天分别用上述 3种浓度的溶液
按每公斤体重 5 毫升的溶积进行灌胆 , 相当
于每公斤体重每天灌 胃 1 . 50 、 2 . 25 、 .3 30
克 。 当试验动物灌 胃至 14 天时 , 其剂量已达
到大白鼠 L D 50 的 6 倍 , 仅有 3只 动物死亡 ,
对照组亦死亡 1 只 , 剖检所见主要为肺组织
广泛出血坏死 , 少数大鼠有肺脓肿形成 ; 其
它脏器未见异常发现 。 当灌 胃到28 天时 , 试
验组动物雌性死亡 12 只 , 雄性死亡 5 只 , 占
试验动物总数的 47 % , 大体解剖所见同前 ,
经病理组织学切片观察 , 镜下可见肺泡间质
有广泛的炎性浸润 , 肺泡壁变薄 , 断裂并互
相融合形成肺气肿 , 部分肺抱实化 , 肺支气
管及细支气管周 围有成纤维细胞及炎性细胞
浸润 , 结缔组织增生等病变 。 此外 , 可见胃
内赌留毛华菊浸膏凝块并有刺鼻的樟脑及薄
荷味 。 其它脏器未见异常改变 。
根据蓄积系数计算公式 :
K =
刃 L D 5 0 ( 作 )
L D 5 0 ( 1 )
按小白鼠 L D 50 = 1 4 . 7克 /公 斤计 算 K
一.64。?
。一?刊扎。ù .一咖出
查表 L D 50 = 6 . 81 克 /公 斤 可 仅 限为
3
.
9 6 ~ 1 1
.
7克 /公斤
查表 L D 50 = 14 . 7 克 /公 斤 可 仅 限为
8
.
5 3 一 2 5 . 3克 /公斤
结果表明 : 毛华菊浸膏经口半数致死量
均大于 5克 /公斤 , 按毒性分级的规定属实际
无毒 。
二 、 蓄积性毒性试验 ` 刁 ’ ` ’
取W i s t a r 大白鼠 5 8只 (雌 3 4 、 雄 2 4 ) ,
体重 2 0 克左右 ,随机分组 ; 对照组雌 16 只 ,
雄 6 只 , 实验组雌雄各 18 只 , 将毛华菊浸膏
用小麻油溶解稀释成每毫 升 含 3 0 0 、 4 5 0 、
6 60 毫克的溶液 ( 此浓度为 浸膏实际 能溶于
小麻油的最大浓度 ) 。 实验组动物以剂量定
期递增法灌胃 5 毫升小麻油 。 试验结束后取
心 、 肝 、 脾 、 肾 、 肺肾上腺作病理组织学检
查 , 并取附翠进行精子崎变分析 。
值为书。 5.闷一 二 5 . 6 1. f
按大白鼠 L D 50 二 6 。 81 克 /公 斤 计算K
值为 8 2
。
5
6
。
8 1
二 1 2 . 1 ( 共中 8 2 . 5为实际经 口灌
胃给予的总剂量克 /公斤 ) 毛华菊 浸膏蓄积
系数 ( K ) 均大于 5 , 属弱蓄积物质 。
三 、 致突变试验 :
( 一 ) 骨髓细胞微核试验
选健康小白鼠 ( 体重 2 5 ~ 5 0克 ) 5 5只 ,
随机分成 6 组 , 除阳性对照组 5 只外 , 其它
各组均为 10 只 , 雌雄不分 。 根据小 白鼠急性
试验的 L D 5 o按 1 / 3 0 、 z / 2 0 、 1 / 1 0和 i / S L D
5 0分成 4 个不同剂量组 , 用小麻油稀释配制
成每毫升含 0 。 o 凌、 o 。 0 6 、 0 . 2 1 、 0 . 2 2克毛华
菊浸膏的溶液 , 相当于 每 公 斤 体 重 灌 胃
。 . 50 、 。 . 7 5 、 1 . 5 0 、 3 . 。 克毛华菊浸膏 。 阴
性对照组灌胃不含毛华菊浸膏的小麻油 , 以
上各种油溶液的灌胃容积均为 0 . 2毫升八 。克
体重 ; 阳性对照组按每 5 毫升 /公斤 体 重皮
下注射纯苯 。 灌胃前停食 12 小时 , 不断水 ,
采川一次灌 胃给药 ; 灌胃 2 4小时后颈椎脱臼
处死动物 , 立即取出股骨 , 用 小牛 血 清冲
洗 , 收集洗液 、 离心 、 涂片 、 染色 、 镜检 ,
每只小鼠观察 50 0 个嗜多染红细 胞 的 微 核
数 , 试验结果见表 3 。
结果表明 : 阳性对照组微核 出 现 率 为
1 1
.
2场 , 试验组灌胃不同浓度的毛华菊浸膏
小麻油溶液的微核出现率为 0 . 6 ~ 2编 , 阴性
对照组的微核出现率为 1 . 4%。 , 以 上结果表
明毛华菊浸膏不引起小自鼠骨髓嗜多染红细
胞微核的异常形成 。
( 二 ) 精子畸变试验 〔 5 ’ :
选用健康雄性小 白鼠25 只 , 体重 23 ~ 27
克 , 随机分成 4 组 , 每组 5 只动物 ( 另外 5
只动物备用 ) , 将毛华菊浸膏溶于小麻油配
成每毫升含 0 . 5 0 、 0 . 2 5 、 0 . 1 2 5克的溶液 , i火
验组灌胃相当于每公斤体重 1 0 . 0 、 5 . 0 、 2 . 5
克的毛华菊浸膏 ; 阴性对照每公斤体重灌胃
2 0毫升小麻油给动物连续灌胃 5 天 , 再喂 养
3 0大 , 然后 , 用须椎脱臼方法处死动物 , 取
两侧附翠放入盛有 2 毫升生理盐 水 的 平 眼
中 , 用剪刀剪碎组织 , 然后过滤 , 涂片 、 固
定 , 用 0 . 5%伊红染色 , 在镜下观察后 , 派
只动物观察 l , 0 0 个精子 , 记 录畸变精子数
( 少己勾 、 小头 、 香蕉形 、 无定形等类型 ) 结
果 见表 4 :
表 4 结果表明 : 各剂量组之间精子畸变
率与对照组基本一致 , 说明毛华菊浸膏对小
自鼠精子畸变无影响 。 同时 , 我们在大鼠蓄
积性试验处死动物时取附翠进行精子畸变分
析 , 亦未见到不良影响 。
( 三 ) 翠丸细胞染色体畸变试验 ` 纽 、 3 ’ :
取健康雄性小 白鼠 20 只 ( 体 重 2 4 ~ 2 6
克 ) , 随机分为 4 组 , 按小 白鼠 L D 5 0的口
5
,
t / 5 0
、
l / 5 0 0分为 3 个试验组及 1 个阴性
对照组 ( 对照组按每公斤体重灌胃 10 毫升不
毛华菊浸膏对小 白鼠骨髓细胞微核形成的影响 表 3
核次 阶数核个微组 别
1 灌胃毛华菊瞪裔剂量
{ (克 /公斤 )
动 物 数
( ;毛)
咯 多染红细胞数
(个 )
试州 …一 : . 份… ,… , 井厂 一…一泣一…- - -一一一一一-一 ,_一、 一 _毛华菌浸膏对小 白鼠精子畸变的影响 表 4` 匆 ~ . .~ . . .一 ., . . 自 . . . . 阅 . . . . . . . 口 . . .州 . . . . - 一 . . . . . . . , . . . . . . . . . . 曰 . . . 州 . . . . . . . 口 . . . . . . . . . . . 曰 . . . .一 ~ 、 . . . . . . . . .
怂少
灌胃剂量 动物数
组 另11
类
克 夕
精子数
( 个 ) 小 头 { ,洲 无勺
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, 。 o 香焦形 一。 0 ! 不定 形 }。 0
又寸 , l“ 全f [ 2 2
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试 验 组 5 ` O
10
。
f )
1
1 3
{
气一
5 3 }
,
}
只 ! { 、 . 珍
毛华菊漫膏对小鼠精细胞染色体的影响 表 5
组 别 动物数
(只)
每只鼠灌胃毛 华菊浸膏总量
(克)
每只鼠每公斤体重灌胃剂量
(克)
观察细胞数 }常染色体
(个) }早 熟分 离
性 染色体
早熟分离 易位 }断片
对 照 组
试验组
0
.
0 0 3
0
.
0 3 8
7 0 0 3
0
。
2 6 8
0
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“
}
“
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}
”
!
“
!
” }` 5
含毛华菊浸膏的小麻油) 。 试验组按对照组
的灌胃容积将毛华菊浸膏用小麻油配制成每
毫升含 30 0 、0 3、 3毫克的溶液; 相当每公斤
体重灌胃0 0 3、0 .0 3、0 。0 3克毛华菊浸膏 。
连续给药 5天后至第n 一1 2天再给药 2天 ,
第 13 天用颈椎脱臼方法处死动物 ; 动物处死
前 6 小时腹腔注射 4毫克 /公斤秋水仙素 , 取
出处死动物的一侧翠丸放人盛有低渗溶液的
平皿内4 0 ~ 5 0分钟 , 然 后 用 甲醇 : 冰 醋 酸
( 3
, 1 ) 固定 20 分钟 ,再用 60 %冰醋酸软化 、
制片 、 染色 , 在油镜下观察 , 每只动物观察
1 0 个初级精母细胞 ( 20 士 1 ) 并记录其畸变
细胞数 ; ( 如性染色体或常染色体早熟分离
等畸变类型 ) 结果见表 5 :
从表 5 可见 , 与对照组比较 , 毛华菊三
个剂量组的性染色体和常染色体早熟分离细
胞数并不显著增多 , 均属正常畸变范围 , 说
明毛华菊浸膏对初级精母细胞不显示致突变
作用 。
毒理学评价
武汉植物研究所提取的毛华菊浸膏 , 共
主要化学成份是菇类化合物 。 从急性毒性试
验结果证明 : 该浸膏属基本无毒 , 蓄积性试
验连续灌胃后每只鼠每天达 1 . 50 克时无不良
反应 , 表示该物质无明显蓄积作用 。 当大鼠
蓄积系数 ( 尤值 ) 达 12 小时 , 存活的动物音lJ
检及病理切片镜检 , 除肺部有炎症浸润外其
它实质脏器均无异常变化 。 但当动物灌 胃剂
量达到 6 . 81 一 14 . 7克 /公斤时 , 死 亡的大小
鼠剖检所见 , 主要为胃内沸留有毛华菊浸膏
凝块 , 且可闻到刺鼻的薄荷及樟脑香味 , 凝
块颜色与毛华菊浸膏样品相同 , 这说明毛华
菊浸膏在胃内不能被消化分解 。 根据武汉植
物研究所分析所得其净油含量仅占 35 写共它
部分是含有不易被分解的长链脂肪酸成份蜡
质及其它高分子物质 。 另外 , 由于灌胃剂量
大 , 形成的凝块堵露胃肠道 , 致使产生肠胃
胀气 , 充盈 、 胃肠壁变薄透明 , 致使动物迸
食量降低 , 抵抗力下降 , 感染肺炎 , 导致动
物死亡 。 由病理检查来看 , 尚难认为动物的
死亡原因是 由于毛华菊浸膏的毒性所致 。
毛华菊浸膏在食品中作为香料使用 , 对
其安全性的基本估价 : 根据武汉饮料二厂用
毛华菊浸膏试产的固体饮料菊花晶 , 所含该
成份为万分之 5 , 若每人每天饮用 25 一 30 克
该饮料 ( 相当 5 0 毫升用量 ) , 含 毛华菊浸
膏仅论 . 5 ~ 15 毫克 , 与毛华菊同科属的植物
杭白菊为已经批谁使用的天然食用香料 , 杭
白菊浸膏加入固体饮料中的数量 为 4 . 4% ,
超过毛华菊浸膏的用量 。 杭白菊浸膏的化学
性质与毛华菊浸膏的化学性质相似 , 我们用
小鼠对杭白菊浸膏作 了急性毒性试验 , 其经
口 L D 50 大于 15 克 /公斤 , 与 毛华菊浸膏 的
结果相似 , 故毛华菊浸膏用于食品应该说与
杭白菊一样安全 ; 同时 , 致突变试验均未见
异常反应 , 由于与毛华菊浸膏性质相似的杭
白菊浸膏国家已正式批准其作为 食 品 用 香
料 。 根据我国 《 食品安 全 性 毒理 学评价程
序 》 ( 试行 ) 的要求 , 我们认为可以不必进
行亚慢性及慢性毒性试验 。
小结
本文研究了毛华菊授膏的急性毒性 、 蓄
积性毒性和致突变作用( 微核试验 、 精子畸
变试验 、 攀丸细胞染色体试 验 ), 结 果 表
明 , 毛华菊浸膏属基本无毒物质 , 为弱蓄积
性 ; 未发现有致突变作用 , 与已被国家正式
批谁的食用香料杭白菊浸膏比较 , 我们认为
作食品香料是安全的 。
[ 2 」
仁 3 〕
〔 4 〕
贮5 」
海第一医院主编 1 9了8
《 科研资料 汇编 》 北京市卫生防疫站 l 公7 9 ~
工9 8 ]
《 卫生研究 》 第三期 1 9 7 9
《 南京医学院学报 》 第三期 1 9 8 5
伏环境化学物致突变 、 致畸 、 致癌试验方法 》
新江医科大学 1 9 8 5 . 2
参考文献
[ 」 〕 《 食 品毒理学 》 中国医学科学院卫生研究所上
食品包装的热塑薄膜材料一羚丙基纤维素
杨湘庆
在食品包装薄膜的系列产品中 , 最吸引
人的是用食品或食品添加剂为基质制成的可
食性包装纸 , 例如 , 江米 (糯米 )纸 、 琼脂 -
淀粉纸 、 海藻酸盐可食纸… …等等 。 但是 ,
具有热塑薄膜特性的经丙基纤维素薄膜却为
可食性包装纸另立了一个里程碑 , 它为食品
的热塑包装 、 防止食 品的手工污染 、 食品包
装 自动化创造 了有利的条件 。
度 ; 在抗氧化剂的存在下使碱催化水解也降
至最低程度 。 紫外线照射 H P C 水溶液引起
的光致降解可用避光容器或紫外线吸收容器
来解决 。 加防腐剂可抑制 H P C 水溶液的微
生物和酶降解 。 用交联树脂在一定 的 p l l值
和温度下 处理 H P C , 可降低 H P C 的水溶
性 , 提高 H P C的不溶性 。
一 、 化学性质
经丙基纤维素是一种在室温或人体温度
下能溶于水及部分有机溶剂 , 高表面活性和
具有热塑性的非离子型纤维素醚 。
经丙基纤维素的分子式可以写成
十 C 。 H , 。一 。 O : ( C H : C H O H C H 。 ) n于 x
式中 n 为取代度
二 为聚合度
= 3 ~ 4
。
5
= 1 5 0 e 3 0 0 0
经丙基 纤维 素 ( I l y d r o x y P r o P y l
C el l u l o s e ) 简称为 H P C , 其 日本 商品名
为N i 8 8 o H P C , 美国 商品名为 K l u c el ,
共分子量约为 6 0 0 0 0 ~ 1 2 0 0 0 0 0。 分子中的经
基具有一定的化学活性 。
H P C在水溶液中遇酸易 水解 和在氧存
在下的碱催化水解 。 在低温下的 p H 缓冲体
系中 ( p H = 6 ~ 8 ) , 酸水解可 降至 最低程
二 、 化学性质
H P C粉末的松密度 为 0 . 5克 /毫升 , 其
于品纯度高达 9 . 5写 以上 , 含湿量 < 5 肠 ,
外观为白色 、 无臭 、 无味的粉末 。
室温时空气的相对湿度为 20 一 70 %时 ,
平衡含湿量为 1 . 5 一 8 . 5% 。
H P C在水中的溶解度有 独特 的特点 ,
在 4 0 0 0 以下 , 无限溶于水的 H P C 可形成均
匀溶液 , 把此溶液加热到 45 O C以上 ,则 H P C
从溶液中沉淀出来 。
H P C水溶液的性质如表一 。
对于 2肠的 溶液 H P C的良 溶剂 除水以
外 , 还有 :
2一氯乙醇 、 甲醇 、 8 写甲酸 、 2一甲城
基 乙 醇 一 〔 1 ] 、 N , N ’ 一 二 甲 基甲 酞 胺
( D M F )
、 二甲基亚矾 、 丙二醇 、 9 5%异
丙醉 、 氯仿 、 环己酮 、 乙烷 、 咄咤 、 四氛吠