全 文 :白玉簪离体快速繁殖的研究
顾德峰1 , 王 刚2 , 高晶芳1 , 赵和祥1 , 郭太君1
1.吉林农业大学园艺学院 , 长春 130118;2.吉林省白河林业局两江林场 , 白河 133600
摘 要:以白玉簪(Hosta plantaginea Aschers)茎芽为外植体 ,MS 为基本培养基 ,通过添加不同质量浓度的细胞
分裂素(6-BA、ZT)和生长素(NAA)进行离体繁殖。结果表明:培养基中添加 6-BA 2.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L不
定芽增殖率最高 ,增殖倍数达到 3.9 ,玉米素(ZT)对幼芽的增殖效果不如 6-BA;NAA 质量浓度 0.05~ 1.0 mg/ L
都能诱导白玉簪生根 ,生根率达 93%以上。
关键词:白玉簪;茎芽;组织培养
中图分类号:S682 文献标识码:A 文章编号:1000-5684(2009)02-0161-03
Study on Rapid Propagation in vitro of Hosta plantaginea
GU De-feng1 , WANG Gang2 , GAO Jing-fang1 , ZHAO He-xiang1 , GUO Tai-Jun1
1.College of Horticulture , Jilin Agricultural University , Changchun 130118 , China;2.Liangjiang
Forestry Center , Baihe Forestry Bureau of Jilin Province , Baihe 133600 , China
Abstract:A study was conducted on tissue culture and rapid propagation in vitro of the Hosta plan-
taginea , which took stem bud as explants and was cultured on the MS added with different concentration
of the cytokinin(6-BA ,ZT)and the auxin(NAA).The results indicated that the most suitable culture
condition of adventitious bud was 6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L , rather than ZT , propagation multi-
ple amounts to 3.9.Root can be induced within concentration of NAA 0.05—1.0 mg/L , rooting rate
was over 93%.
Key words:Hosta plantaginea Aschers;stem bud;tissue culture
白玉簪(Hosta plantaginea Aschers)别名玉春
棒 、白鹤仙 、白萼花 ,属百合科多年生草本花卉。
白玉簪原产我国 ,是古老而名贵的观赏花卉 ,除可
观赏外 ,鲜花还含芳香油 ,可提取制作芳香浸膏。
同时 ,玉簪的嫩芽可食 ,全草入药[ 1-2] 。近年来 ,玉
簪已成为极具开发前景的野生花卉和药用植物。
由于白玉簪从播种到开花至少需 3 年时间 ,且种
子繁殖的后代一般不能保持亲本的优良性状 ,因
此生产中一般不用种子繁殖。分株是生产中常用
的繁殖方法 ,但繁殖速度较慢 ,年增殖系数仅为
3 ~ 4 ,而且不能进行周年生产 。因此 ,组培快繁是
白玉簪大量生产的一种有效途径[ 3-6] 。
1 材料与方法
1.1 试验材料及接种
春季取白玉簪萌动的幼芽 ,去除顶部叶片 ,剪
成约 1 cm2 大小 ,实验室中无菌条件下以 0.1%
HgCl2 溶液灭菌 5 min ,无菌水冲洗6次 ,滤纸吸干
后接种于诱导培养基(表 1)中 。
1.2 培养基及培养条件
培养基:选用MS为基本培养基 ,添加不同质
量浓度的细胞分裂素和生长素 ,蔗糖30 g/L ,琼脂
8 g/L , pH 5.6 ~ 5.8 ,分别制成不定芽诱导 、增殖继
代和生根培养基(表 1)。
基金项目:吉林省科技发展重点项目(20060224)
作者简介:顾德峰 ,男 ,硕士 ,副教授 ,研究方向:观赏植物育种及组织培养。
收稿日期:2008-07-14 修回日期:2008-11-12
吉林农业大学学报 2009 ,31(2):161 ~ 163 http:// xuebao.jlau.edu.cn
Journal of Jilin Agricultural University E-mail:jlndxb@vip.sina.com
培养条件:温度 25 ~ 27℃,光照 14 ~ 16 h/d , 光强 2 000 ~ 3 000 lx 。
表 1 培养基成分组成
Table 1.Medium component
不定芽诱导培养基
Induction of adventitious bud 增殖继代培养基 Subculture and multiplication 生根培养基 Rooting medium
MS+6-BA 3.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L MS+NAA 0.05 mg/ L
MS+ZT 2.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L MS+6-BA 2.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L MS+NAA 0.1 mg/ L
MS+6-BA 3.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L MS+NAA 0.2 mg/ L
MS+ZT 0.5mg/L+NAA 0.2 mg/ L MS+NAA 0.5 mg/ L
MS+ZT 1.0mg/L+NAA 0.2 mg/ L MS+NAA 1.0 mg/ L
MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/ L
1.3 移栽
试管苗经 40 d 的培养长成完整植株时 ,苗
高>5 cm便可出瓶移栽 。移栽前 ,在温室内去掉
培养瓶上的塑料瓶塞练苗 3 ~ 5 d。将组培苗从瓶
内取出 ,洗去沾附在根部的琼脂培养基 ,将其栽入
以草炭为基质的一次性纸杯中 ,上套塑料袋保湿。
2 结果与讨论
2.1 不定芽的诱导 、增殖与继代
将白玉簪的幼芽接种到诱导培养基后约 10 d
外植体开始萌动 ,17 d 后茎部位开始伸长并有小
叶长出 ,30 d 后形成芽丛 。在加有 6-BA和 ZT 2
种细胞分裂素的诱导培养基中均有大量的不定芽
形成(表 2)。可见 ,对于不定芽的诱导而言 , 2种
植物激素的作用相似 。
将诱导培养基中分化出的不定芽分切后转入
增殖培养基中进行继代培养。经 30 d的培养后 ,
在供试的几种培养基中 ,新芽的增殖倍数以及小
植株的生长状况有明显的不同。由表 2 可以看
出 ,添加 6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L 的培养
基增殖效果最好 ,增殖倍数近 4倍 ,幼苗长势良
好 ,而添加 ZT 的培养基中幼芽的增殖倍数明显
不及添加 6-BA的培养基 。而且 ,随着 ZT 浓度的
增高 ,幼芽的叶片出现细长 、卷曲等不健康状态 ,
这说明较高浓度的 ZT 不适合白玉簪的增殖继代
培养 。
表 2 白玉簪不定芽的增殖及植株生长状况
Table 2.Condition of adventitious bud subculture and plant growth of Hosta plantaginea
培养基
Culture medium
接种芽数
No.of buds inoculated 培养后芽数No.of buds af ter culture 增殖倍数Propagation multiple 植株生长情况Total condition of plants
MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 35 77 2.2 生长良好
MS+6-BA 2.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 33 129 3.9 长势正常
MS+6-BA 3.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 42 126 3.0 长势较弱 ,叶片变窄
MS+ZT 0.5 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 45 86 1.9 长势正常
MS+ZT 1.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 39 98 2.5 长势较弱
MS+ZT 2.0 mg/ L+NAA 0.2 mg/ L 31 65 2.1 叶片较窄 、稍卷曲
2.2 不同培养基对白玉簪试管苗生根的影响
选取继代培养基中生长健壮的幼苗转接到生
根培养基中进行生根培养 。分别于培养 30 , 50 d
时调查其生根状况。结果见表 3 ,表 4。从表 3的
结果中可以看出 ,诱导生根 30 d 时 ,不同培养基
中的生根率有一定的差异 ,以添加 NAA 0.5 mg/L
的培养基较佳 ,生根率达 87%,而较低浓度水平
的NAA(0.05mg/L)生根率仅为 65%。但是 ,随着
诱导生根培养时间的延长 ,这种差异逐渐消失(表
4)。诱导生根 50 d后 ,各培养基中的幼苗生根率
均达 93%以上。由此可见 , NAA 的添加浓度在
0.05 ~ 1.0mg/L 时 ,不同的添加量只是在一定的
培养时间范围内对白玉簪生根率的影响才有一定
的差异。因此建议在白玉簪组织培养规模化生产
162 吉林农业大学学报 2009年 4月
Journal of Jilin Agricultural University 2009 , April
中 ,如果为降低生产成本 、缩短生产周期 ,可将生
根培养基中的NAA浓度适当提高;如果为提高试
管苗的生长质量 ,不急于出瓶移栽 ,可降低 NAA
的使用浓度。
表 3 培养 30 d后白玉簪的生根情况
Table 3.Rooting condition of Hosta plantaginea after 30 d
culture
培养基
Culture medium 外植体数Explants
生根株数
Rooting
numbers
生根率/ %
Rooting
rate
MS+NAA 0.05 mg/ L 52 34 65
MS+NAA 0.1 mg/ L 50 37 74
MS+NAA 0.2 mg/ L 49 38 78
MS+NAA 0.5 mg/ L 52 45 87
MS+NAA 1.0 mg/ L 49 37 76
表 4 培养 50 d后白玉簪的生根情况
Table 4.Rooting condition of Hosta plantaginea after 50 d
culture
培养基
Culture medium 外植体数Explants
生根数
Rooting
numbers
生根率/ %
Rooting
rate
MS+NAA 0.05 mg/ L 32 30 94
MS+NAA 0.1 mg/ L 35 33 94
MS+NAA 0.2 mg/ L 30 28 93
MS+NAA 0.5 mg/ L 38 36 95
MS+NAA 1.0 mg/ L 29 27 93
2.3 试管苗移栽
选取生长健壮且已生根的试管苗(图 1-a ,
b)出瓶移栽 。30 d 后调查 ,其成活率达 90%,根
系和幼苗生长健壮 ,叶片明显变宽 、变绿 ,并有新
叶长出(图 1-c)。移栽过程中发现 ,只要在移栽
初期保持一定的空气湿度 ,白玉簪试管苗移栽就
比较容易成活 。
图 1 白玉簪试管菌及移栽幼苗
Fig.1.Test tube plantlet and seeding transplanted of Hosta plantaginta
参考文献:
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163顾德峰等:白玉簪离体快速繁殖的研究
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