全 文 ：［收稿日期］ 2009-11-20
［基金项目］ 河南省科技厅重点科技攻关项目(062306100)
［通讯作者］ * 李喜凤，Tel:0371-65575823，E-mail:qtb2006 @
126. com
·化学与分析·
高效毛细管电泳法测定蒲公英中阿魏酸的含量
李喜凤 * ，邱天宝，胡亚楠，郝哲，余云辉
(河南中医学院，郑州 450008)
［摘要］ 目的:建立蒲公英中主要有效成分阿魏酸的高效毛细管电泳(HPCE)含量测定方法。方法:采用高效毛细管电
泳法，电泳条件:未涂层的弹性石英毛细管柱(75μm × 57 /50 cm)，电解质为 20 mmol·L － 1硼砂溶液(pH 9. 18)，分离电压 18 kV，
柱温 25 ℃，压力进样 5 s，检测波长 328 nm。结果:阿魏酸在 0. 002 ～ 0. 012 g·L － 1呈良好线性关系，r = 0. 999 8，平均回收率为
98. 22%，RSD 1. 78%。结论:本法专属性强，简便快速，结果准确可靠，重复性好，适用于检测蒲公英中阿魏酸的含量。
［关键词］ 蒲公英;阿魏酸;高效毛细管电泳;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2010)16-0027-03
Determination of Ferulic Acid in Dandelion by HPCE
LI Xi-feng* ，QIU Tian-bao，HU Ya-nan，HAO Zhe，YU Yun-hui
(Henan College of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450008，China)
［Abstract］ Objective:To establish a method for determining the contents of ferulic acid(FA)in dandelion
by high-performance capillary electrophoresis (HPCE). Method:Dandelion was determined at 328nm using high-
performance capillary electrophoresis (HPCE)，under the optimized conditions achieved with a elastic fused-sillia
capillary tube(75 μm × 57 /50 cm)and 20 mmol·L － 1 borate running buffer solution (pH 9. 18)at a constant voltage
of 18 kV and injecting pressure time of 5 s at 25 ℃ . Result:FA was linear within the range of 0. 002 to 0. 012 g·
L － 1(r = 0. 999 8). The average recovery 98. 22%，RSD 1. 78% . Conclusion:This method is simple，rapid，accurate
and good repeatability in separation and determination of FA in Dandelion.
［Key words］ dandelion;ferulic acid;HPCE;determination
蒲 公 英 为 菊 科 植 物 蒲 公 英 Taraxacum
mongolicumHand. -Mazz.、碱 地 蒲 公 英 T. sinicum
Kitag.或同属数种植物的干燥全草［1］;具有清热解毒、
消肿散结、利尿通淋的功效。其主要化学成分为:有
机酸类(咖啡酸、阿魏酸、绿原酸等)，皂苷类，黄酮类
及多糖等。阿魏酸作为蒲公英的主要有效成分之一，
其药理作用与蒲公英全草功能主治相关，具有抗菌消
炎、抗病毒、抗氧化等药理作用［2］。毛细管电泳是近
年来发展迅速的一项分析技术，具有灵敏度高，分析
速度快，样品用量少，运行费用低等优点，在中药及其
制剂分析中有着高效液相色谱无法比拟的优点。目
前，尚未见报道用毛细管电泳法测定蒲公英中阿魏酸
的含量，本文用毛细管电泳法对河南地区蒲公英中的
阿魏酸进行了含量测定，为蒲公英药材提供了一种科
学、快捷的全面质量控制方法。
1 仪器与试药
P /ACETM MDQ 毛细管电泳仪(美国 Beckman 公
司)，二极管阵列检测器(DAD)，Karat 32 系统软件，
未涂层石英毛细管柱 75 μm × 50 /57 cm(分离长度 /
总长，河北永年锐沣色谱器件有限公司)，PHS-2SB
型数字酸度计(上海大谱仪器有限公司)，KQ-100E
型超声波仪(昆山市超声仪器有限公司)，YUEPING
FA2 004 b 型电子天平(上海越平科学仪器有限公
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第 16 卷第 16 期
2010 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 16
Nov.，2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.16.024
司)。阿魏酸对照品购自中国药品生物制品检定所
提供(批号 0773-9809)。水为娃哈哈纯净水，所用
试剂均为分析纯。蒲公英药材采集于河南省内不同
地区，经河南中医学院药学院生药学科陈随清教授
鉴定均为菊科植物蒲公英 T. mongolicum Hand-
Mazz.的干燥全草。
2 方法与结果
2. 1 电泳条件 电压 18kV，压力进样 0. 5 psi，进样
时间 5 s，检测波长 328 nm，温度 25 ℃，硼砂浓度 20
mmol·L － 1，pH 9. 18。实验前依次用 0. 1 mol·L － 1
NaOH 溶液、水、缓冲液依次冲洗 10，10，20 min，进
样前分别用 0. 1 mol·L － 1 NaOH 溶液、水、缓冲液依
次冲洗 3，2，3 min，4 h 后更换缓冲液。实验结束后
用缓冲液 0. 1 mol·L － 1 NaOH 溶液、冲洗 10 min。所
用溶液进样前均用 0. 45 μm 的滤膜过滤，并经超声
波脱气 3 min。
2. 2 分离条件选择
2. 2. 1 检测波长选择 经 DAD 检测器所获 UV 光
谱图得到阿魏酸最大吸收波长为 328 nm，因此选择
328 nm 作为检测波长。
2. 2. 2 缓冲体系选择 以磷酸盐、硼酸、硼砂等缓
冲溶液体系对样品进行考察，结果表明用硼砂缓冲
体系的分离效果和重复性较好。
2. 2. 3 分离电压选择 实验考察了电压为 16 ～ 22
kV 时的试验效果，电压较低时，基线稳定，但样品分
析周期长;随着电压增加，样品分析时间缩短，峰形
尖锐，在 18 kV 时分离度最好，并且分离时间较短柱
效较高。因此选用 18 kV 作为分离电压。
2. 3 对照品溶液制备 精密称取阿魏酸对照品
0. 001 25 g 至 25 mL 棕色量瓶中，加 70%甲醇溶解
并稀释至刻度，摇匀;精密量取 1 mL，置 25 mL 棕色
量瓶中，加 70% 甲醇至刻度，摇匀，配制成浓度为
0. 006 g·L － 1的阿魏酸对照品溶液，用 0. 45 μm 滤纸
过滤，超声脱气，置冰箱 4 ℃保存。对照品 HPCE 电
泳图见图 1。
2. 4 供试品溶液制备 取蒲公英粗粉 1 g，精密称
定，加入 25 mL 1% NaOH 溶液浸泡过夜，避光，纱布滤
过，将滤液用 1 mol·L － 1 HCL 调 pH 3 ～ 5，滤过，滤液
用乙醚萃取 2 次，每次 20 mL;滤渣避光干燥，加乙醚
振摇 2 次，每次 10 mL，合并乙醚提取液，避光挥干，用
70%甲醇定容至 10 mL 棕色量瓶中，用 0. 45 μm 滤膜
过滤即得。供试品 HPCE 电泳图见图 2。
图 1 对照品 HPCE 图
1. 阿魏酸
图 2 供试品 HPCE 图
1. 阿魏酸
2. 5 线性关系 精密量取阿魏酸对照品溶液(0. 05
g·L － 1)1，2，3，4，5，6 mL 分别置 25 mL 量瓶中，各加
70%甲醇至刻度，摇匀。按 2. 1 项下条件进样，测定
各组分的峰面积，以浓度 X(g·L － 1)为横坐标，峰面
积 Y 为纵坐标计算回归方程 Y = 4. 95 × 105X －
1. 98 × 10，r = 0. 999 8，线性范围 0. 002 ～ 0. 012
g·L － 1。
2. 6 精密度试验 精密吸取阿魏酸对照品溶液，在
上述分离条件下连续进样 6 次，阿魏酸峰面积值的
RSD 1. 80%，表明仪器精密度良好。
2. 7 重复性试验 取同一批蒲公英样品 6 份，按
2. 4 项下制备供试品溶液，测得阿魏酸平均含量的
RSD 1. 76%，表明此方法重复性良好。
2. 8 稳定性试验 取上述对照品溶液，每隔 2 h 进
样，连续 10 h，结果阿魏酸的峰面积的 RSD 1. 9%，
表明阿魏酸在 10 h 内基本稳定。
2. 9 回收率试验 精密称取已知阿魏酸含量的蒲
公英样品 6 份，分别按 80%，100%，120% 3 个浓度
精密加入阿魏酸对照品适量，按照 2. 4 项下制备供
试品溶液，在上述电泳条件下进行测定。阿魏酸的
平均加样回收率为 98. 22%，RSD 1. 78%。见表 1。
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2010 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16，No. 16
Nov.，2010
表 1 阿魏酸加样回收率试验
样品取样量
/ g
样品中含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
1. 055 7
1. 046 6
1. 020 3
1. 028 6
1. 021 8
1. 032 1
0. 074 24
0. 073 6
0. 071 75
0. 072 33
0. 071 85
0. 072 58
0. 060 0
0. 060 0
0. 072 0
0. 072 0
0. 085 5
0. 085 5
0. 132 7
0. 133 0
0. 140 9
0. 143 0
0. 155 2
0. 159 1
97. 43
99. 00
96. 04
98. 15
97. 49
101. 19
98. 22 1. 78
2. 10 样品测定 取不同产地的蒲公英药材，按
2. 4 项下方法制备供试品溶液。在上述电泳条件下
进行测定并记录色谱图。以外标法计算 8 批供试品
的阿魏酸含量。结果见表 2。
表 2 不同产地蒲公英样品中阿魏酸含量测定
No 产地 平均含量 /mg·g － 1 RSD /%
1 济源水洪池 0. 058 15 2. 39
2 焦作博爱 0. 112 60 2. 05
3 焦作武陟 0. 093 70 2. 24
4 焦作温县 0. 092 37 0. 90
5 周口 0. 071 63 2. 35
6 南阳内乡 0. 066 27 1. 91
7 驻马店正阳 0. 071 17 0. 35
8 开封尉氏 0. 068 20 0. 67
3 讨论
本实验通过对蒲公英药材甲醇回流、乙醇回流
后滤液浓缩萃取，5%甲酸甲醇超声提取，甲醇超声
提取，碱液冷浸提取方法进行比较，结果发现采用碱
液冷浸法提取量最高，此法克服了阿魏酸在提取过
程中遇热、见光易分解的缺点。
电泳缓冲溶液的浓度对各个被分离组分的迁移
时间、分离度、柱效等均有较大影响。实验发现随着
硼砂浓度逐渐升高，硼砂与阿魏酸的配位使得阿魏
酸带电荷量增加，表观淌度减小，所以迁移时间增
加，分离度逐渐增大，柱效增高，但噪音也随之增大，
电流值上升较快，基线漂移现象比较严重，灵敏度下
降，检出限升高。如果硼砂浓度太低则缓冲容量不
够，出峰时间延迟，拖尾严重，分离度减小，柱效降
低，以 20 mmol·L － 1硼砂浓度为最佳。
［参考文献］
［1］ 中国药典 .一部［S］. 2005:244.
［2］ 赵东平，杨文钰，陈兴福 . 阿魏酸的研究进展［J］. 时珍
国医国药，2008，19(8):1839.
［责任编辑 顾雪竹］
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Nov.，2010