全 文 ：农业生物技术学报 J o u ma lo f A gn e u ltu ra lB io t e e h n o lo g y20 03 , 1 1 (6 ) : 57 7一 5 8 1
· 研究论文 ·
利用小麦微卫星引物建立堰麦草 eE 染色体组特异 S S R 标记
尤明山 ’ 李保云 ’ 田志会 ’ 唐朝晖 ’ 刘守斌 ’ 刘广田 ’
( 1
. 中国农业大学农学与生物技术学院 , 北京 1 00 094 ; 2 . 北京农学院园林系 , 北京 10 2206
摘要 : 选用 4 0 对小麦 S S R 引物对 17 份可匾麦草 ( 乃in q爪 ,钊 n , s P . ) 、 2 份刁、麦 ( 不厅百` “ 。 a se lt 、 u m )材料进行 J’ P C R 打卜增分
析 , 从中筛选到引物 X gw m 3 25 能在不同堰麦草材料中扩增出 4 条长度分别为 ! 4 0 、 4 40 、 120 和 10 bp 的特异 D N A 片段 , 可
以作为堰麦草种质的特异 S SR 标记。 利用小麦 一 二倍体长穗堰麦草 ( hT 刃人刀诊日tunI )异代换系和异附加系对引物 X g w ln3 25 进
行 了扩增鉴定 , 结果只有 10 bp 左右的片段出现在长穗堰麦草所有 eE 组染色体上 . 该 片段可以作为 E , 染色休组的特异 S SR
标记
关键词 : 堰麦草 ;染色体组 ;微卫星标记
D e v e l o Pm e n t o f S P e e i if e S S R M a kr e r fo r E
e 一
g e n o m e o f
hT 1’n 哪妙叹 I l n s P . b y U s i n g W ll e a t M i e r o s a te l l it e s
Y o u M i n g sh a n
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L i B a o yU
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( 1
.
C o ll e g e o f A g ro n o m y a n d B i o t e e h n o l o gy
,
C h in a A gn e u lut r a l U n i
v e r s iyt
,
B e ij i n g l 0 O09 4
,
C h in a : 2
.
D e Pa rt ll l e n t o f H o rt
l e t : It、: re a n d
Fo re s try
,
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,
B e ij i n g 10 22 06
,
C h in a )
周比恤以 : B e e a u s e o f h ihg m o pr h o lo gy er v e a l , n g e ap a b i liyt an d s im Ple n e s s in o Pe art i o n , s im P le s e q u e n c e r e Pe a t s ( S S R ) m a kr e r 15
a v e yr u s e fu l t o o l fo r g e n e t ic m a PP in g
,
g e n e tie d l v e r s iyt an a ly s is an d m a kr e卜 a s s isant t
一 s e le e t io n : o n l y ht e is o l a t i o n o f m ie or s a t e ll ite
D N A 15 a e o s t l y m a t e r
.
O n e o f ht e s o l u t i o n s fo r ht i s Por b le m 15 to us e m i e r o s a t e ll it e s t o er la t i v e s Pe e i e s
.
hT
e s u bj e e t o f th is s t u dy w a s
to e v a lu a t e ht e Po s s ib il iyt o f tr a n s fe ir n g w h e at m ic or sa t e ll ite s to hT 勿毋沙侧巾 s Pe c ie s , an d t o d e v e lo P s Pe e iif c SS R m a rk e rs of r
角 in 卑珍” Jm g e rm P la s m by c o n d u c ti n g P C R Por gr a m w iht w h e at S S R P ir m e r s to 17 a e e e s s io n s o f hT in O] 妙钊m s P e e i e s a n d Z e o m m o n
w h e a t (丁万才元um a es tl vum )
e u lt iv ar s
.
A l n o n g ht e u s e d 40 w h e a t S S R P ir m e r s
,
2 5 Pa i sr am P li if
e d P C R Pr o d u e t s i n m o s t o f th e a l ie n
s Pe e i e s
.
A n d m o er o v e r
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.
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e n st e o u l d b e u s e d a s s Pe e i if e S SR m a kr e r s fo r
角in OI )y 川m g emr P la s m . T o e o n if mr th e e o er c in e s s o f ht e s e m o le e u l ar m akr e r s , a fu hrt e r P C R Por gr am w i ht P ir m e r X g w m 32 5 w as
e o n du e t e d to a fu ll s e t o f w h e at
一
hT
. 。勿贝笋扭功 a li e n d is o m ie a dd it io n lin e s an d 1 5 a li e n d is o m i e s u b s t i ut ti o n l in e s , T h e er s u l t s h o w e d
ht a t o n ly th e l O0 bP far g
11 1e n t h a d b e e n a PP e aer d i
n a l l a lie n c h r o m o s o m e P o s s e s s e d m a te ir a l s
, a n d i n d ie a t e d t h a t th 一s afr g m e n t e o u ld
b e a m o l e c u la r m ark
e r of r e n ti r e g e n o m e o f hT
. 日卿笋勿用 , d e s P i te o f ht e e hor m o s o m e s Pe e iif e iyt o f S S R m a r k e sr i n w h e a t .
肠叮 , 国山 : hT 加哪沙川用 : 罗 n o m e: S S R m akr e r
.
微卫星 (m icr os at e lilt es )又称简单序列重复 is( m 一 于遗传图谱的构建 、 遗传多样性分析和标记辅助选
lP e se que cn “ er ep at s
,
S S )R
, 是分布在许多生物体整 择等领域【’ .2] 。 在小麦族植物中 , 已开发 J” 小麦 、 大
个基因组中的串联重复序列 ,通常以 2一 6 个核昔酸 麦 、披碱草等物种的 S SR 引物卜乃。 将现有的 S S R 引
为基本重复单元 。 微卫星数量丰富 , 因此 , S R 标记 物应用于同源物种分析已有许多先例`8一 ,刁。 本研究选
的最大优点是拥有大量的等位变异 ,多态性极高 。同 用 40 对小麦 S S R 引物对 18 份堰麦草材料进行了
时具有操作简单 ,稳定可靠等优点 , 因而被广泛应用 PC R 扩增 , 以研究小麦 S S R 引物应用 于堰麦草的可
* 墓金项目:国家自然科学基金重点项目 ( 3 9 3 01 1 0 )和北京市自然科学基金重大项目 ( 69 90 0 1 ) 。
尤明山 :男 , 19 6 7年生 ,博士 , 讲师 。 E一 m a i l : < m sy o u 6 7@ e a u 七 d u ` c n > .
收稿日期 : 20 3 一01 一 14 接受 日期 : 2 0 03 一4 一08
58 7农 业 生 物 技 术 学 报 20 03 年
能性 , 并希望从中建立堰麦草种质的特异 S S R 标
记 。
1 材料和方法
1
.
, 植物材料
8 份 长 穗 堰 麦草 ( hT in叼叮丁 ul n e l o几笋勿功 )
( P l 17 9 16 2
、
P U 5 14 3 3
、
P2I 7 6 7 0 9
、
P I3 0 8 5 9 1
、
P I3 0 8 5 9
2
、
PI3 s o 6 2 6
、
P I4 6 9 2 12 和 p I5 4 7 3 2 6 )引自美国国家
种质库 ;2 份长穗堰麦草 ( R M l l 23 和 R M 19 3 5 )和
4 份 中间堰麦草 ( hT . 勿把 m j e id u n , ) ( R M 1 130 、
RM 19 3 7
、
RM 19 4 1和 RM 19 4 4 ) 引自中国农业科学
院品种资源研究所 ; 孙善澄研究员和贾旭研究员分
别提供了其它 2 份中间堰麦草 ( 5 2 和 903 )和 1份
二倍体长穗堰麦草 ( 9 0 1 ) : 中国春 一 二倍体长穗堰
麦草的二体异附加系和异代换系材料分别由吉万全
研究员 和李振声院 上惠赠 。 两 个小麦 ( 了万百` um
a es it Vu n l )品种中国春和京 41 1 ( J4 l )来 自本实验
室 。
1
.
2 S S R引物
根据 R 6 de r 等侈!发表的小麦微卫星标记连锁图
和孙其信教授实验室研究结果 , 选用了普通小麦 4 0
对 S s R 引物 。 其中 25 对在堰麦草中有扩增产物的
引物名称 、 所在小麦染色体 、核昔酸序列 、 P C R 反应
时的退火温度和在 17 份堰麦草材料中扩增的等位
位点数列 于表 1 。 所有引物都由孙其信教授无偿提
供 。
1
.
3 实验方法
P CR 反应体 系为反应体积 25 林 L ; 内含 l x
b u fe
r ( 10 m m o F L T r i s
一
H C I ( PH 8
.
3 )
,
5 0 m m o F L
K C I )
,
1
.
5 m m o F L M g C 12
,
2 0 0 林 m o FL dN T P s , 4 0 n g
微卫星引物和 40 gn 模板 D N A : 扩增前 94 ℃预变
性 3 m i n ,每循环 9 4 ℃变性 1 m i n , 5 0 ℃ 、 5 5 ℃或 6 0
℃ ( 由所用引物确定 )退火 1 m in , 72 ℃延伸 Z m in ,
4 5 个循环后 , 72 ℃延伸 10 m in : 扩增产物在 8% 的
表 1 微卫星引物名称 、 位点 、 序列及退火温度
Ta b l e 1 N a m e s o f m ic r o s a t e ll一te s , s ite s
,
s e q u e
n e e s a n d a n n e a l t e m Pe r a tu r e s u s e d i n th is e x P e ir m e n t
引物
irP m
e rs
染色体位点
C h r o m o s o m e
序列
S e q u e n e e
退火温度 /T
A n n e a l
sl t c s _ _ _
_ _ _
t e m p e ra tu re
X g wl
n 3 12 2 A 5
’
A TC G C A T G A T G C A C G T A G A G 3
,
5
,
A C A T G C A T G C C T A C C T A A T G G 3
’
6 0
X g , 八n 2 6 8 I B S’ A G G G G A T A TG竹G T C A C T C C A 3’ 5 ’ T A T G T G A T G C G T A C G T A C C C 3’ 5 5
X g w ln 3 2 5 6 D 5
’了门 , C耳C T G T C GTF C T C叮C C C 3’ 5 『 l l l l l A C G C G TC A A C G A C G 3 ’ 6 0
X创四14 84 2 D 5 ’ A C A T C G C T CT C A C A A A C C C 3 ,5 , A G T C C G G T C A TG G C T A G G 3
’
5 5
X gwm 2 64 3 B 5
,
G A G A A A C A T G C C G A A C A A C A 3
,
5
,
( 3C A T G C A T G A G A A T A G G A A C T G 3
’
6 0
X g w n 1 4 6 7 B 5
’
G C A C G TG A A T G G A FT G G A C 3
,
5
,
T G A C C C A A T A G T G G T G G T C A 3
’
6 0
X g w m l 74 5 D 5
’
G G G竹 C C T A T C TG G T A A A T C C C 3 ,5 ,G A C A C A C A T G T T C C TG C C A C 3 , 55
X矛Vn l l 90 5 D 5 ,G T G CT G C T G A C C T A T G A G T C 3 , 5
’
G TG C C A C G T G G T A C C T汀G 3 6 0
X g w ln 4 6 9 6 D 5
,
C A A C T C A G T G C T C A C A C A A C G 3
`
5
,
C G A T A A C C A C T C A T C G A C A C C 3
,
60
X矛卯1 1 1 1 7 D 5 ’ T C T G T A G G C TC T C TC G A C T G 3, 5 ,A C C T G A T C A G A T C C C A C TC G 3 ’ 5 5
X g认 m 4 2 8 7 D 5
’
C G A G G C A G C G A G G A T T 】3 ,5 , fT C TC C A C T A G C C C C G C 3
’
6 0
X矛川1 194 4 D 5 ’ G A T C TG C T C T A C T C T C C T C C 3, 5 ’ C G A C G C A G A A C rT A A A C A A G 3
’
50
X g w n 3 14 3 D 5
’
A G G A G C TC C T C T G T G C C A C 3
,
5
,竹C G G G A C T C T C T T C C C T G 3 , 5 5
X g dm 3 3 I A
、
I D S
’
G G C T C A A fT C A A C C G竹 C T T 3’ 5 ,T A C G盯C T G G T G G C TG C T C 3 , 6 0
X g w n 1 5 2 3 D 5
,
C T A T G A G G C G G A G G T 」, G A A G 3 , 5 ,T G 〔 ,G G TG C T C 下T C C A T T I , 3` 6 0
X g 认” 1 44 7 D 5 ’G仃G A C C l l 一 I 一 l亡 A G T C G G C 3 , A C T G G 〔 A T C C A C TG A G C T G 3 ’ 6 0
X g 火 m 7 1 ZA 、 3 D 5 ,G G C A G A G C A G C G A G A C T C 3 ,5 ,C A A G TG G A G C A FT A G G T A C A C G 3
’
60
X g w l l l 4 9 3 3 B 5
,
T T C C C A T A A C T A A A A C C G C G 3
,
5
,
G G A A C A T C A fT C T G G A C一 T G 3 ’ 60
X创Vn 1 3 4 0 3 B 5 ,G C A A TC l l l l l l C TG A C C A C G 3 , 5 ’ A C G A G ( ;C A A G A A C A C A C A T G 3 ’ 60
X g认 111 4 9 4 6 A 5 , A T T G A A C A G G A A G A C A T C A G G G 3 , 5 ’ YT C C T G G A G C T G T C TG G C 3
’
6 0
X g w ll l64 2 1D S
,
A C G G C G A G A A C G T G C T C 3
,
5
,
C A T G A A A G G C A A G T T C G TC A 3
’
6 0
X g 、v ll l 5 3 8 4 B 5 ,G C A门丁 C G G G T G A A C C C 3 ,5 ,G FT G ( …A T G T A T A C G T T A A G C G G 3’ 6 0
X矛Vn l l 5 7 2 D 5 ,G T C G T C G C G G T A A G C fT G 3 ,5 ,G A G T G A A C A C A C G A G G C T T G 3’ 6 0
X g w ll l 3 8 2 2 D 5
,
G T C A G A T A A C G C C G T C C A A T 3
,
5
,
C T A C G T G C A C C A C C A T I门「TG 3 ’ 60
X g w m 2 3 2 I D S
’
A T C T C A A C G G C A A G C C G 3
,
5
,
C T G A T G G A A G C A A T C C A C C 3
,
5 5
等位 f立点数
N o
,
o f a l le 】C
5 l tC
6
5
第 6期 尤明山等 : 利用小麦微卫星引物建立堰麦草 E ” 染色体组特异 S R 标记
非变性聚丙烯酞胺凝胶上电泳
后 ,银染检测 。
2 结果和分析
2
.
1 S S R 引物对僵麦草材料的
扩增
利拜J 4 0 对小麦 S S R 引物 ,
对供试的 2 个小麦品种和 17 份
堰麦草进行 J’ PC R 扩一增 , 结果
有 25 对引物能在所有或绝大多
数堰麦草材料中扩增出 PC R 产
物 , 而其它 巧 对引物只在少数
外源材料中有 P C R 产物 。 对这
25 对引物在堰麦草和小麦中扩
增出的 P C R 产物在非变性聚丙
烯酞胺凝胶中的迁移带型进行
比较发现 , 扩增产物的迁移带型
在堰麦草和小麦之间存在较多 图 l · 引物 X g w m 3 25 在小麦和堰麦草中的扩增结果 (箭小特异片段 )
的变异类型 : 有些引物在堰麦草 F ig . l · A m p l ify in g re s u lt o f p ir m exr g w m 3 25 o n hT 功哪移刊 n , s p · a n d c o m m o n w h e a t
中扩增出 了与小麦一致的带型 ( Amr w s in d i c a te s p e c iif c far g m e n t s )
并能检测到堰麦草的多个等位 M , m a r k e r ; l , C h , n e s e S p r i n g ; 2 , J4 l l ; 3 · R M l l 2 3 ; 4 , MR 19 3 5 ; 5 , p l l 7 9 16 2 ; “ · p l 2 5 14 3 3 ; 7 ·
变异 : 有些在两类材料中能够扩 p I2 76 70 9 ; 8 , p I3 o 8 5 9 1 ; 9 , p l3 0 8 5 9 2 ; 一。 , P I3 s o 6 2 6 ; 一l , P I4 6 9 2 12 ; 12 , P一5 4 7 3 2 6 ; 13 , 9 0 1 , 一4 ,
增出一致的带型但只检测到少 -MR I 13 0 ; 15 , RM 19 3 7 ; 16 , MR 19 4 1 ; 1 7 , R M 19 4 4 ; 1 8 , 9 0 3 ; 19 · 5 2 ·
数变异 ;有些引物在堰麦草中扩
增的带型明显区别于小麦 , 但能够检测到堰麦草的 物种的分类和命名至今仍很混乱 , 因此只根据种名
多个等位变异 。 统计结果显示 , 25 对引物在 17 份堰 很难确定其染色体组成 { ,习。 在供试的惬麦草材料 「1, ,
麦草中 , 共扩增出 108 个位点 ,每个引物可扩增 1一 8 只 有 901 是确定 的二倍体 长穗 堰麦 草 ( 2n = 14 ,
个位点 ,平均为 4 . 3 个 。 上述结果表明 ,将小麦 S S R eE eE ) ,其它长穗堰麦草的染色体组成没有确定的信
引物应用于堰麦草的遗传研究是可行的。 息 。 4 4 0 b p 片段在除 901 ( 13 泳道 )之外的其它长穗
在 2 5 对引物中 , 引物 X gw m 325 在堰麦草中能 堰麦草中扩一增量很强 ,说明 4 4O bP 片段不是 cE 染色
够同时扩增出 4 条特异的 D N A 片段 , 而且在不同 体组的特异片段 , 而来源于堰麦草的其它染色体组 r
堰麦草之间 , 4 条 D N A 片段大小非常一致 , 可 以作 这一结果也同时表明供试的其它长穗堰麦草 ; 1能是
为堰麦草特异的 S S R 标记 。 引物 X g w m 325 的扩增 多倍体种 。 中间堰麦草的染色体组成一般认为是
结果如图 l 所示 。 E e E bs t , 而 4 4 0 b P 片段在 RM 19 3 7 ( 15 泳道 川 ,的扩
图 1 中箭头所指的分别是长度 1 4 0 0 、 4 4 0 、 12 0 增结果与在其它中间堰麦草中的结 果差别如此之
和 10 0 b p 左右的 4 个特异片段 。 其中 1 40 和 12 0 大 , 说明这一个种的命名可能有误 。
b p 的片段出现在所有堰麦草材料中 , 而科 O和 10 .2 2 僵麦草特异 S S R标记的代换系和附加 系鉴定
bP 的片段分别在少数堰麦草材料中缺失 。 这一结果 为了进一步验证 4 个特异 S R tJ/ 、记 , 利川引物
可能与供试材料的染色体组成有关 。前人研究表明 , X gw m 325 对一整套中国春 一 二倍体长穗很麦草异
长穗堰麦草 (二倍体 、 四倍体和十倍体等 )和中间堰 附加系和 巧 个异代换系材料进行了扩增 ,结果显不
麦草 (六倍体 )物种的基本染色体组是来 自二倍体 代换系和附加系材料中一改没有 440 bP 片段出现 ,
长穗僵麦的 eE 染色体组 、 来自比萨堰麦草 ( hT . 说明 4 O bP 片段非 eE 染色体所有 , 而存在似麦草
吞己双双习bl’c “ m ) 的 E ” 染 色体组 和 来 自拟鹅 冠草 其它染色体组上 。 这与上述在堰麦草材料 `1,的扩增
(凡 e u山 lor 咫 11已口 a s 1tP I’fo lIA )的 tS 染色体组 ,但堰麦草 结果相一致 。 1 40 和 12 0 bP 片段分散出现在儿个
农 业 生 物 技 术 学 报 .0 20 3 年
图 2 .引物 X g w m35 2在代换系和附加系中的扩一增结果 ( 箭不特异片段 )
Fig
.
2
.
A P mli尔 ng re s u lt oPri m fe r X gw m3 5 2 o nC hi ne s e P ri S ng 一乃功叼沙刊 me l o句笋勿。 d is omie s u bs t itu t i o n a nd d is omi c ad d it i o n
li ne s a nd Ch i ne s e P Sri ng (A r mw
s i nd ie at e s P e e ii fe r f ag me nt s )
M
,
m ark
e r : l
,
C h in e s e S P ir n g ; 2
,
3
,
D S I E ( I B
、
I D ) ; 4 一 6
,
D S Z E ( ZA
,
Z B
,
Z D ) ; 7一9 , D S 3 E ( 3 A , 3 B , 3 D ) ; 10
,
1 1
.
D S 4 E ( 4 A
,
4 D ) ; 12 一 14 , D S 6 E ( 6 A
,
6 B
,
6 D ) ; 15
,
16
.
D S 7 E ( 7 A
,
7 B ) ; 17一 2 3
,
D A I E
一
7 E ; 2 4
,
P l l 7 9 16 2
.
代换系和附加系中 , 说明这 2 个片段可能只存在于
堰麦草个别染色体上 ,而非整个染色体组共有 。 只有
10 0 bp 左右的片段稳定出现在含 eE 染色体的材料
中 , 而且在所有代换系和附加系中都扩增出了该标
记片段 , 表明该片段为堰麦草 eE 染色体组共有 , 可
以作为 eE 染色体组的特异 S S R 标记 。 其它堰麦草
染色体组中是否含有该片段有待进一步验证 。 扩增
结果如图 2 。
图 2 中 3 个箭头分别指示 了引物 X g w m 325 在
堰麦草中扩增出的 10 0 、 4 4 0 和 1 4 0 0 b P 3 条特异片
段 。 由图 2 还可以看出 , 由于引物 X g~ 325 是小麦
6D 染色体的特异引物 , 而代换系 D S 6E (6D )中小麦
的 6 D 染色体被堰麦草的 6 E 染色体代换 ,所以在该
材料中只扩增出了堰麦草的特异片段 , 小麦的目标
片段缺失 。 而在其它代换系 、附加系和小麦中都有小
麦的特异扩增片段 , 这验证 r S R 标记染色体特异
的特性 。但当该引物应 J月于外源物种时 ,这一特性已
经丧失 , 说明微卫星侧翼序列在不同物种中存在较
大差异 。 我们对 4 4 0 b p 的片段进行了克隆和测序 .
发现这一片段并非简单重复序列 , 说明 X g w m 32 5
引物在堰麦草中并非为微卫星侧翼序列 。
3 讨论
3
.
, 微卫星引物 P C R产物的数目
由于 S SR 引物是根据微卫星侧翼单拷贝序列
设计的特异引物 , 理论 「每一对引物只能扩增单一
位点 , 即只有单一的 P C R 产物 。 但在实际工作中 ,尤
其是当用非变性聚丙烯酞胺凝胶电泳对 P C R 产物
进行检测时 ,只有极少数引物具有这样的特点 。 根据
孙其信教授实验室的工作经验 , 在非变性聚丙烯酞
胺凝胶 `扣共同迁移的多条片段在变性聚丙烯酞胺凝
胶中有时只有一条片段 。 即使用变性胶检测 , R 6 d er
等间发现 , 在能够检测到做图群体两个亲本小麦品
种多态性的 S S R 引物中 ,大约只有 4 0%的引物只扩
增出 口标片段 , 而其它 6 0% 的引物扩增出多条片
段 , 其中 4 0%的引物扩增出一条或儿条并不表现多
态性的非 口标片段 , 而 2 0%的引物则扩增出一到多
条呈现多态性 的非口标片段 当将小麦 S SR 引物 J叔
用于外源物种时 , 这种情况更加突出 : 、 Sun 等 ’` 4]将小
麦 S S R 引物应用于披碱草属植物时 , 平均每个引物
扩增 出 19 . 3 个 D N A 片段 : 本实验中 , z】、 麦 S S R 弓!
物在堰麦草材料中的扩增 片段数日大多数情况 下多
于小麦 , 与前人研究结果相一致 。
.3 2 目标性状的微卫星标记
微 -IJ 星标记广泛的多态性 和染色体特 异J卜「的特
点 使其可以更方便地 )、划月 r 日标性状 分 r 标记建
第 6 期 尤明山等 : 利用小麦微卫星引物建立堰麦草 E e染色体组特异 s R 标记 58 1
立的工作中【’ 5, ’匀。 除了利用微卫星的目标位点外 ,一
些非目标片段也可以用作分子标记 。 iL u 等1n[ 用 S S R
引物 X g w m 159 标记了一个来自野生二粒小麦 C 20
的新抗自粉病基因 Pm 30 , 该基因的 3 个 SS R 标记
X g w m l 5 94/ 30
、
X g w l l l l 5 9 /4 6 0 和 X g w n 15 9 /5 00 全为
X g w m 159 的非目标位点 。 张增艳 1司也鉴定了一个与
大麦黄矮病 ( B Y D V ) 抗性基因连锁的 S S R 标记
x g w m 3 745 o
,这一标记片段也为该引物的非目标片
段 。 研究者还将该标记转化为 SC A R 标记 ,用于中
间堰麦草易位片段 7 XL 上的 B Y D V 抗性基因的标
记辅助选择 。 本研究鉴定 了一个小麦 S S R 引物
X gw m犯 5 , 能在不同堰麦草材料中扩增出 4 条特异
片段 , 并将其中一条定位到堰麦草 eE 染色体组的所
有染色体上 , 可以作为 eE 染色体组的特异 S S R 标
记 。
参 考 文 献
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