全 文 ：４　讨论
相对分子质量对多糖的生物活性具有一定的影
响。用氯磺酸－吡啶法进行硫酸化时，多糖的降解经
常发生［１３－１４］。有研究［１５］报道，反应温度是影响多糖
降解的重要因素，并且一个合适的反应溶剂可以阻
止降解的发生。本实验成功制备得到了ＰＲＰ的硫
酸酯衍生物而没有降解，可能与选用甲酰胺作为溶
剂、并且反应温度比较温和（３０℃）有关。
多糖经硫酸化后，阴离子的引入导致空间结构
的变化，可以影响多糖的活性或产生新的活性。
ＰＲＰ对肿瘤细胞无明显的影响，而经硫酸化后可以
显著抑制肿瘤细胞的生长，说明硫酸基的引入可以
导致多糖ＰＲＰ体外抗肿瘤活性的产生，其体内的抗
肿瘤作用实验正在进一步研究中。
参考文献：
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ｆａｔｅｄ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｗｏα－Ｄ－ｇｌｕｃａｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｇａｓｔｒｏ－
ｄｉａ　ｅｌａｔａ　Ｂｌ．ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉ－ｄｅｎｇｕｅ　ｖｉｒｕｓ　ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｃａｒ－
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［１５］Ｙａｎｇ　Ｊ，Ｄｕ　Ｙ，Ｙａｎ　Ｗ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｕｌｆａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｌａｃｑｕｅｒ　ｐｏｌ－
ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ ［Ｊ］．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ　Ｐｏｌｙｍ，
２００３，５２：３９７－４０３．
［收稿日期］２０１３－０９－０４
［基金项目］广东省自然科学基金项目（编号：Ｓ２０１２０４０００６８６９）；广东省医学科研基金项目（广东省卫生厅 Ａ２０１２２７３）；广州市科技计划项目
［穗科信字（２０１３）１６６号，２０１３Ｊ４１００１０２］　［作者简介］罗江秀，女，本科，主管药师，电话：０７５５－２７５４８７１３，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｏｊｉａｎｇｘｉｕ１９７５＠１６３．ｃｏｍ　
［通讯作者］夏承来，副教授，博士，硕士研究生导师，研究方向：抗炎免疫药理学，电话：０２０－８１２９２７０９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｃｈｅｎｇｌａｉ＠１２６．ｃｏｍ
蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织干扰素－γ表达的影响
罗江秀１，钟超１，夏承来２　 （１．深圳市光明新区人民医院药剂科，广东 深圳５１８１０６，２．广州医科大学附属第三医院药学
部，广东 广州５１０１５０）
［摘要］　目的：研究蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）表达的影响。方法：建立肺癌荷瘤小鼠动物模
型，处死小鼠，采用 Ｗｅｓｔｅｒ　ｂｌｏｔ和ＲＴ－ＰＣＲ研究不同质量浓度（０，３１．３，６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ·ｍｌ－１）的蒲公英以及５００ｍｇ·
ｍｌ－１蒲公英在不同时间（０，１２，２４，４８ｈ）对肺癌组织ＩＦＮ－γ表达的影响。结果：随着蒲公英质量浓度和作用时间的增加，肺癌
组织ＩＦＮ－γ表达降低。结论：蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织ＩＦＮ－γ表达呈现明显的时效－量效关系，提示蒲公英对
Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的抑制作用和ＩＦＮ－γ有关。
［关键词］　蒲公英；干扰素－γ；Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠；肺癌
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）０７－０５１２－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．０７．０３
Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ
ＬＵＯ　Ｊｉａｎｇ－ｘｉｕ１，ＺＨＯＮＧ　Ｃｈａｏ１，ＸＩＡ　Ｃｈｅｎｇ－ｌａｉ　２（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｍｉｎｇ　Ｎｅｗ　Ｄｉｓｔｒｉｃｔ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　５１８１０６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｈｅ　Ｔｈｉｒｄ　ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０１５０，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ．
·２１５· 中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ＲＴ－ＰＣＲ　ａｎｄ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　ｍｅｔｈｏｄｓ，ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ（３１．３，
６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ·ｍｌ－１）ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｃｔｉｎｇ　ｔｉｍｅｓ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ（２４，３６，４８ｈ）ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ
Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ａｌｏｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ
ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｃｏｕｌｄ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ　ｉｎ　ａ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ．ＣＯＮＣＬＵ－
ＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ，ｗｈｉｃｈ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｉｔｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘ－
ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ；ＩＦＮ－γ；Ｌｅｗｉｓ　ｍｉｃｅ；ｃａｎｃｅｒ
　　恶性肿瘤严重危害着人类的健康，尤其是肺癌，
位列致死病因的第２位，仅次于心血管疾病。世界
卫生组织（ＷＨＯ）的调查数据显示，全球新发恶性
肿瘤患者男性５３０万，女性４７０万，现患人数超过
２　２００万，死于这一疾病的６２０万，占总死亡人数的
１２．６％，预计到２０２０年每年新发生的病例数将达
１　５７０万，死亡１　０００万，在发展中国家癌症总数将
增加７３％，发达国家为２９％。我国的调查结果显
示，１９７０－１９９０年２０年间癌症调整死亡率上升
１２％，２０００年癌症发病人数１８０万～２００万，占世界
总数的１／５；死亡人数１４０万～１５０万，占世界总数
的１／４。在城市居民中，癌症已占死因的首位。
近年来的研究表明，蒲公英可以抑制体外培养
的肿瘤细胞生长［１－２］，蒲公英根提取物，蒲公英多糖
等均具有一定的防癌、抑癌作用以及抑制肿瘤引起
的炎症反应［３－４］。但是其抗肿瘤的机制并不明确。
在本实验中，我们以Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠为模型，观
察其对肿瘤组织ＩＦＮ－γ表达的影响，为开发本方药
新用途提供实验依据。
１　材料与方法
１．１　实验药物　药用蒲公英（产地新疆）购自老百
姓大药房，由深圳市光明新区人民医院药剂科钟超
副主任药师鉴定。本文所选用的药用蒲公英是蒲公
英全草经热水提取，减压浓缩后喷雾干燥过８０目筛
而制成粉末，得率为９０％。
１．２　实验动物　ＳＰＦ级近交ｅｓ７ＢＬ／６纯系小鼠６０
只，６～８周龄，雄性，体质量１６～２０ｇ，购于中山大
学实验动物部，合格证号：粤实动证字２００９１３９号，
饲养于中山大学实验动物学部ＳＰＦ级动物实验室
内。实验动物采用随机数字表的方法，随机分成正
常对照组、模型对照组、药物处理组。
１．３　细胞培养　Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞为本研究室保留
所得。将Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞置于含１０％小牛血清，
１００Ｕ·ｍｌ－１青霉素，１００Ｕ·ｍｌ－１链霉素的ＤＭＥＭ
培养基中，置于含５％ＣＯ２，饱和湿度、３７℃恒温培
养箱中培养，每日观察细胞情况，及时更换培养液。
细胞状态和总数达到要求后，台盼蓝拒染法测定活
细胞数大于９５％，用无血清培养基调节细胞密度为
１×１０７个／ｍｌ，制成细胞悬液备用。
１．４　试剂　ＤＭＥＭ 培养基购自Ｇｉｂｃｏ公司；小牛
血清和胰蛋白酶购自杭州四季青生物技术公司；
ＭＴＴ（四甲基偶氮唑蓝）、ＤＭＳＯ（二甲基亚砜）和
Ｃｏｎ－Ａ购自美国ＡＭＲＥＳＣＯ公司；ａｎｔｉ－ＩＦＮ－γ抗体
购自美国ＲＤ公司。
１．５　Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠模型的建立　无菌条件下，给
小鼠体内接种细胞悬液。皮下接种后，待瘤体形成，
可以触及皮下直径３～６ｍｍ肿块后，开始给药，腹
腔注射，分为荷瘤对照组及不同质量浓度蒲公英提
取物处理组，每组１０只。荷瘤组为灭菌水，不同质
量浓度蒲公英提取物（３１．３，６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ
·ｍｌ－１），连续１４ｄ。每天密切观察小鼠生活状态
（精神、进食、毛发色泽、活动、聚集现象）和体质量变
化，并用游标卡尺测量肿瘤最长径（ａ）和最短径（ｂ），
做详细记录。处死小鼠，分离肿瘤组织备用。正常
对照组不接种细胞悬液。
１．６　ＲＴ－ＰＣＲ　按常规方法提取组织总ＲＮＡ，严格
按照逆转录试剂盒说明书将总 ＲＮＡ 反转录为
ｃＤＮＡ，－２０℃备用。根据ＧｅｎＢａｎｋ中公布的基因序
列，通过Ｐｒｅｍｉｅｒ　５．０软件设计ＰＣＲ特异性引物，聚
合酶链反应引物由上海生物工程有限公司合成。扩
增条件为：９４℃预变性５ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，退火
３０ｓ，７２℃４５ｓ，共３０个循环，７２℃延伸７ｍｉｎ。ＰＣＲ
产物分析及半定量计算。ＰＣＲ扩增产物通过１．５％琼
脂糖凝胶电泳，计算ＴＮＦ－α和ＧＡＰＤＨ条带密度比
值（ＴＮＦ－α／ＧＡＰＤＨ），作为各基因相对表达强度。引
物序列如下：ＩＦＮ－γ（５１４ｂｐ）ｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ：５’－ＣＡＣＴＣ－
ＧＡＣＣＴＴＡＡＴＣＴＡ－３’；ａｎｔｉ－ｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ：５’－ＣＴＣＴＴ－
ＧＡＴＴＣＡＡＴＧＣＴＴＣＡ－３’。ＧＡＰＤＨ （３０２ｂｐ）ｓｅｎｓｅ
ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＧＴＣＧＣＴＧＴＴＧＡＡＧＴＣＡＧＡＧ－３’；ａｎｔｉ－
ｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＣＡＣＣＡ　ＴＣＴＴＣＣＡ　ＧＧＡＧＣＧ　ＡＧ－
３’。
１．７　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ　按常规方法提取组织蛋白，
ＢＣＡ法进行蛋白质定量，取３０μｇ蛋白质加入１×
ＳＤＳ凝胶加样缓冲液中，在１００℃加热１０ｍｉｎ以使
蛋白质变性，聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，转ＰＤ－
ＶＦ膜，丽春红染色观察转移效果，并确定蛋白质分
·３１５·中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
子质量标准位置。封闭液封闭２ｈ，按１∶１　０００加入
一抗，４℃孵育过夜，ＴＢＳＴ洗３次，按１∶１　０００的稀
释倍数加入辣根过氧化物酶标记二抗，室温孵育１
ｈ，ＴＢＳＴ洗３次，用蛋白质印迹荧光检测试剂盒显
示于Ｘ线片。结果用 Ｇｅｎｉｕ凝胶图像分析系统对
胶片扫描，以对照组的面积灰度值为１００％与实验
组进行比较和半定量分析。
１．８　统计学分析　所有数据采用ＳＰＳＳ　１３．０统计
软件进行分析。计量资料以珚ｘ±ｓ表示，两组间比较
采用ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。两
变量的相关程度采用Ｓｐｅａｒｍａｎ秩相关分析法。
２　结果
２．１　蒲公英提取物对荷瘤小鼠体质量的影响　由表
１可见，小鼠初始体质量及终末体质量在各组间无明
显差异，蒲公英提取物不影响小鼠的体质量增长。
表１　蒲公英提取物对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠体质量的影响
（珚ｘ±ｓ）
Ｔａｂ　１　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｅ　ｏｆ
ｍｉｃｅ　ｂｅａｒｉｎｇ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ（珚ｘ±ｓ）
组别
药物剂量
／ｍｇ·ｍｌ－１
＊动物数
／只
初体质量
／ｇ
＊动物数
／只
终体质量
／ｇ
正常对照组 ０　 １０　 １８．２２±０．１６　 １０　３３．１２±０．２１
模型对照组 ０　 １０　 １８．６２±０．４６　 ９　 ３２．６２±１．４６
药物处理组 ３１．３　 １０　 １８．５９±０．４５　 ８　 ３２．５９±１．５３
６２．５　 １０　 １８．５８±０．３９　 ９　 ３１．６４±０．９６
１２５　 １０　 １８．５３±０．４６　 ８　 ３３．５７±１．３７
２５０　 １０　 １８．６１±０．３１　 ９　 ３１．５１±０．７２
５００　 １０　 １８．５３±０．３６　 ８　 ３０．８２±２．４８
注：＊表示各组给药后存活的小鼠数
２．２　蒲公英提取物对小鼠瘤重及抑瘤率的影响　
由表２可见，与对照组相比，各剂量组瘤重减轻，抑
瘤率增加。
表２　蒲公英提取物对小鼠瘤重及抑瘤率的影响（珚ｘ±ｓ）
Ｔａｂ　２　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｗｅｉｇｈｔ
ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｉｏ　ｉｎ　ｍｉｃｅ（珚ｘ±ｓ）
组别 药物剂量／ｍｇ·ｍｌ－１＊动物数／只 瘤重／ｇ 抑瘤率／％
正常对照组 ０　 １０　 ０　 ０
模型对照组 ０　 １０　 １．２６±０．３９　 ０
药物处理组 ３１．３　 １０　 １．０６±０．２２ａ １５．８
６２．５　 １０　 ０．９６±０．１８ａ ２３．８
１２５　 １０　 ０．８３±０．２５ａ ３４．１
２５０　 １０　 ０．７６±０．１５ａ ３９．７
５００　 １０　 ０．６７±０．１２ａ ４６．８
注：＊表示存活小鼠数；与模型对照组比较，ａＰ＜０．０１
２．３　不同质量浓度的蒲公英提取物对荷瘤小鼠肿
瘤组织ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达的影响　分别用不同质
量浓度（０，３１．３，６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ·ｍｌ－１）的蒲
公英提取物处理小鼠后，分离瘤体，提取组织总
ＲＮＡ，与正常及模型对照组比较，随着蒲公英提取
物质量浓度的增加，ＩＦＮ－γ的表达明显下降。说明
蒲公英提取物抑制ＩＦＮ－γ的表达，并且呈质量浓度
依耐性（图１）。
２．４　不同质量浓度的蒲公英提取物对荷瘤小鼠肿瘤
组织ＩＦＮ－γ表达的影响　分别用不同质量浓度（０，
３１．３，６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ·ｍｌ－１）的蒲公英提取物
处理小鼠后，分离瘤体，提取组织总蛋白，与正常及模
型对照组比较，随着蒲公英提取物质量浓度的增加，
ＩＦＮ－γ的表达明显下降。说明蒲公英提取物抑制
ＩＦＮ－γ的表达，并且呈质量浓度依耐性（图２）。
图１　不同质量浓度的蒲公英提取物对荷瘤小鼠肿瘤组织ＩＦＮ－γ
ｍＲＮＡ表达的影响
Ｆｉｇ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｍＲＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｍｉｃｅ
图２　不同质量浓度的蒲公英提取物对荷瘤小鼠肿瘤组织ＩＦＮ－γ表
达的影响
Ｆｉｇ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｍｉｃｅ
２．５　５００ｍｇ·ｍｌ－１的蒲公英提取物处理荷瘤小鼠
肿瘤组织不同时间后，ＩＦＮ－γ的表达情况　小鼠肿
瘤形成后，分别于不同时间（０，１２，２，４８ｈ）用５００
ｍｇ·ｍｌ－１的蒲公英提取物处理荷瘤小鼠，与对照组
比较，随着蒲公英提取物处理时间的延长，ＩＦＮ－γ的
表达明显下降。说明蒲公英提取物抑制ＩＦＮ－γ的
表达，并且呈时间依耐性（图３）。
图３　蒲公英提取物在不同时间下对荷瘤小鼠肿瘤ＩＦＮ－γ的表达的
影响
Ｆｉｇ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｍｉｃｅ
·４１５· 中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
３　讨论
在全球工业化发展的今天，恶性肿瘤的发病率，
尤其是肺癌也呈现不断上升的趋势［５－６］。虽然外科
技术和放、化疗技术的迅猛发展，为治愈肿瘤提供了
可能，但是外科手术的局限性和化疗药物诸多不良
反应，对患者的恢复极其不利。生物治疗肿瘤方案
也因价格昂贵，使之发展遭遇到了瓶颈。近年来，中
医在防治肿瘤方面的逐步体现了它的优势。
由于现在医疗模式的转变，开发特异性强、高
效、不良反应小的抗肿瘤药物已经迫在眉睫。与其
他的抗肿瘤药物相比，天然植物的化学成分对肿瘤
细胞的多靶点效应成为其抗肿瘤作用的重要特点和
优势。
有研究表明，蒲公英提取物对人黑色素瘤细胞
的生长具有一定的抑制作用［７－８］。同时，蒲公英的倍
半萜内酯糖苷水解产物吉玛酸可诱导人急性早幼粒
白血病 ＨＬ－６０细胞向单核细胞系／巨噬细胞系分
化［９］，提示蒲公英可能在人急性早幼粒白血病治疗
方面很有研究前景。并且我们的研究也发现，蒲公
英提取物可以抑制小鼠体内肺肿瘤的生长。但是其
治疗机制目前仍不清楚。ＩＦＮ－γ是机体防御系统
的重要组成部分，其可与多种免疫细胞包括白细胞
和血小板、免疫分子相互协同，相互制约，促成了机
体最佳的抗肿瘤免疫状态。本实验通过将不同质量
浓度的蒲公英提取物处理Ｌｅｗｉｓ荷瘤小鼠肿瘤组织
后，发现该组织的ＩＦＮ－γ表达下调，并且呈现质量
浓度和时间依赖性，提示该药物抗肿瘤的机制可能
和抑制ＩＦＮ－γ表达有关。作为一种无毒且具有多
种活性的抗肿瘤成分，蒲公英极具开发潜力，其分子
结构可以作为抗肿瘤新药设计的结构基础。但其是
否能作为治疗肿瘤的临床药物，还需进一步研究以
及在大规模、严密的实验中得到证实。
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［收稿日期］２０１３－０６－０３
［基金项目］广西中医药管理局中医科技专项（编号：ＧＺＺＹ１２－２１）　［作者简介］宋飞，女，主管药师，学士，研究方向：中药民族药研究，电话：
０７７２－３８３７２４１，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｏｎｇｘｕｅｌｚ＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］曾瑜，女，药师，硕士，研究方向：新药研究与开发，电话：０７７２－３８３７２４１，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｙｇｒｙｙ
＠２１ｃｎ．ｃｏｍ
华凤仙总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨
宋飞，曾瑜　 （广西医科大学第四附属医院，广西 柳州５４５００５）
［摘要］　目的：研究华凤仙总黄酮（ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｅｓ　ｏｆ　Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ，ＴＦＩＣ）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机
制。方法：采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法，建立心肌缺血再灌注损伤模型。取７２只ＳＤ大鼠随机分为假手术组，模型组，
阳性对照组，ＴＦＩＣ低、中、高剂量组，每组１２只。术前１０ｄ，ＴＦＩＣ组灌胃给予不同剂量ＴＦＩＣ（５０，１００，２００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），模
型组（普萘洛尔２５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），其余２组给予生理盐水２０ｍｌ·ｋｇ－１。测定术后２ｈ心肌酶谷草转氨酶（ＡＳＴ）、肌酸磷酸激
酶（ＣＫ）、肌酸激酶同功酶 ＭＢ（ＣＫ－ＭＢ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平，以及血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧物酶
（ＧＳＨ－Ｐｘ）、丙二醛（ＭＤＡ）的含量，以ＲＴ－ＰＣＲ半定量检测细胞凋亡蛋白酶（Ｃａｓｐａｓｅ－３）、腺嘌呤核苷酸转位酶１（ａｄｅｎｉｎｅｎｕ－
·５１５·中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７