全 文 ：郝艳霜，魏 军，李树鹏． 藏蒲公英与河北蒲公英多糖的比较［J］． 江苏农业科学，2012，40( 7) : 286 － 288．
藏蒲公英与河北蒲公英多糖的比较
郝艳霜1，魏 军2，李树鹏1
( 1．河北农业大学中兽医学院，河北定州 073000; 2．西藏大学旅游与外语学院，西藏拉萨 850000)
摘要: 对藏蒲公英和河北蒲公英多糖含量、纯度、化学性质和紫外吸收等方面进行了研究。结果表明，水提醇沉
法得到的藏蒲公英多糖和河北蒲公英多糖含量分别为 16. 8%和 6. 31%，差异显著，所提取的 2 种蒲公英多糖制品中
均含有多糖、蛋白质和氨基酸，不含皂苷、黄酮类和生物碱等物质;硫酸 －苯酚法测得藏蒲公英和河北蒲公英多糖纯度
分别为 46. 37%和 33. 89%，差异显著，2 种蒲公英多糖的紫外图谱呈不规则双曲线型，均在 200 nm处有吸收峰，且其
单糖组成可能含有葡萄糖和半乳糖，不含阿拉伯糖和木糖。
关键词: 蒲公英; 多糖; 含量; 纯度; 紫外吸收
中图分类号: TS209 文献标志码: A 文章编号: 1002 － 1302( 2012) 07 － 0286 － 02
收稿日期: 2011 － 11 － 23
基金项目: 西藏自治区科技厅 2010 年重点科研计划 ( 编号:
N2010D16) ;河北省畜牧兽医局项目( 编号: 2010 － 1 － 10) 。
作者简介:郝艳霜( 1978—) ，女，河南安阳人，硕士，讲师，主要从事中
药多糖应用的研究。E － mail: lspeng2005@ 163. com。
通信作者:魏 军，副教授。E － mail: w. j. charles@ 126. com。
多糖是生物体内重要的生物活性物质，也是多种内源性
生物活性分子的组成成分［1］。近年来，从各种生物体内提取
的大量生物活性多糖均具有提高机体免疫力、抗菌、抗病毒、
抗寄生虫、抗肿瘤、延缓衰老等一系列作用［2 － 6］，在医药、食品
和保健品等领域得到广泛应用。蒲公英( Taraxacum mongoli-
cum) 别称黄花苗、婆婆丁、黄花地丁等，为菊科蒲公英属多年
生草本植物的带根全草，《中华人民共和国药典》( 2005 年版
一部) 记载其具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋等功效。研
究结果显示，蒲公英富含糖类成分［7 － 8］，自然界蒲公英资源十
分丰富，由此可以预见蒲公英多糖将是科研开发利用的焦点。
目前，对蒲公英多糖的研究还处于初级阶段，各地关于蒲公英
多糖的报道相对较少，因此本研究在前期有关蒲公英多糖研
究的基础上，比较了藏蒲公英与河北蒲公英的多糖在含量、纯
度、化学性质和紫外吸收等方面的差异，以期为中药蒲公英多
糖在西藏地区的进一步推广应用提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 试验药物 藏蒲公英，采自西藏大学校园内不同地
方;河北蒲公英，采自河北农业大学中兽医学院校园。
1. 1. 2 试剂和仪器 722 型紫外 －可见分光光度计，上海光
谱仪器有限公司;数显恒温水浴锅，江苏省常州市国华电器有
限公司;电子天平，上海第二天平仪器厂;电热恒温培养箱，湖
北省黄石市医疗器械厂; 自动平衡离心机，北京医用离心机
厂;微波炉( 美的牌) ，上海领普制冷设备有限公司;试验所用
化学试剂均为常规试剂( 分析纯) 。
1. 2 方法
1. 2. 1 多糖提取( 水提醇沉法) 材料预处理: 蒲公英使用
前 60 ℃烘干至恒重，粉碎，过 80 目筛，备用。热水提取:本试
验采用普通热水浸提，提取条件均为 30 倍水量、100 ℃提取
3 h，提取 2 次。浓缩: 60 ℃水浴对提取液进行浓缩。脱蛋
白: Sevag法，向提取液中加入 1 /4 体积的氯仿 －正丁醇溶液，
混合 20 min，3500 r /min离心 5 min，中层白色絮状沉淀为蛋
白质，故取上清; 重复离心 2 ～ 3 次，至中间没有明显沉淀为
止。醇沉:脱蛋白完毕，向提取液中缓缓加入无水乙醇，边加
边搅拌，使乙醇浓度为 60%，静置过夜，4 000 r /min 离心
5 min，弃上清，沉淀物用蒸馏水溶解，再用 80%乙醇沉淀 1
次，沉淀物 60 ℃干燥至恒重，即为蒲公英粗多糖。试验重复
3次，计算得到蒲公英多糖含量( 多糖含量 =粗多糖重量 /蒲
公英干重 × 100% ) ，以 LSD 法进行组间统计分析，比较 2 种
蒲公英多糖含量的差异。多糖提取的工艺流程如图 1 所示。
1. 2. 2 蒲公英多糖定性鉴定 α －萘酚试验: 取检品的水溶
液 1 mL，加入 5% α －萘酚试液数滴，振荡，沿管壁滴入 5 ～ 6
滴浓硫酸，使溶液分成 2 层，待 2 ～ 3 min 后观察液面分界处
是否有紫红色环出现。
斐林试验:取检品水溶液 1 mL，加稀盐酸 5 滴，置沸水浴
中 10 ～ 15 min，用 10% 氢氧化钠中和至中性，再加入新配的
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DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.07.019
碱性酒石酸铜试液 4 滴; 另取检液 1 mL，不加酸直接加入上
述试液 4 滴，2 管同时置水浴上煮沸 5 ～ 6 min。如果水解后
生成棕红色沉淀物的量比未经水解的多，说明有多糖。
氯仿 －浓硫酸反应:将检品溶于氯仿，加浓硫酸，氯仿层
呈红色或蓝色，浓硫酸层有绿色荧光，说明检品中有皂苷。
三氯醋酸反应:将含检品的氯仿溶液滴在纸上，滴三氯醋
酸试剂，加热，生成红色并渐变成紫色，说明检品中有皂苷。
茚三酮试验:取检品的水溶液 1 mL，加入茚三酮试液 2 ～
3 滴，加热煮沸 4 ～ 5 min，待其冷却，呈现红色、棕色或蓝紫
色，则检液中有蛋白质、肽类或氨基酸。
盐酸 －镁粉试验: 取检品的乙醇溶液 1 mL，加放少量镁
粉，然后加浓盐酸 4 ～ 5 滴，置沸水浴加热 2 ～ 3 min，如出现红
色，则表示有游离黄酮类( 以不加镁粉做对照) 。
碘化铋钾试验:取检品水溶液 1 mL，加盐酸酸化，滴加碘
化铋钾试剂，如有橘红色沉淀产生，说明可能含有生物碱。
1. 2. 3 多糖纯度的测定( 硫酸 －苯酚法) ［9］ 标准曲线的绘
制:精确称取于 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖 25 mg 于小烧杯
中，加水溶解并定量移至 100 mL 容量瓶中，稀释至刻度，混
匀，得 0. 1 mg /mL 标准品溶液; 分别精确吸取该溶液 1. 0、
2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0 mL置于 50 mL容量瓶中，加蒸馏水至
刻度;分别吸取以上各浓度的标准溶液 2 mL 于具塞试管中，
加 5% 苯酚试液 1 mL，摇匀，迅速加浓硫酸 45 mL，振摇
2 min，于沸水浴中加热 15 min，取出置冷水中冷却;以酚 －硫
酸溶液为空白，于 487 nm处测吸光度，经回归得线性方程: D
= 0. 0396C － 0. 021( r = 0. 9701) 。
多糖纯度的测定: 精确称取约 0. 1 g 粗多糖样品于小烧
杯中，加适量水溶解，定量转移至100 mL 容量瓶中，加水稀释
至刻度，混匀，得样品溶液，吸取该溶液 6. 0 mL 置于 100 mL
容量瓶中，加水至刻度，得供试品溶液;分别吸取该供试品溶
液各 2 mL于具塞试管中( 每组 3 个重复) ，按标准曲线项下
方法操作，以苯酚 －硫酸溶液为空白，在 487 nm 处进行比色
测定，按回归方程求得供试溶液中多糖纯度。
上述试验重复 3 次，得到的蒲公英多糖纯度以 LSD 法进
行组间统计分析，比较 2 种蒲公英多糖纯度的差异。
1. 2. 4 多糖的紫外光谱分析 多糖配成 0. 1%的水溶液，以
蒸馏水为空白，在紫外光谱仪上测定 200 ～ 1 000 nm 处的吸
光度;另取多糖水溶液 25 mL，加入 3 mol /L 浓硫酸 2 mL，置
沸水浴中加热 4 h，冷却，以饱和氢氧化钡溶液调 pH 值至中
性，离心，上清液浓缩即为多糖水解液，进行紫外扫描; 同时，
扫描葡萄糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖，以供参照。
2 结果与分析
2. 1 蒲公英多糖的提取、定性鉴定和含量测定
蒲公英多糖的提取是利用多糖溶于热水而不溶于乙醇的
特点进行的，用水提醇沉淀法得到粗多糖制品，所得蒲公英多
糖均为褐色固体，极易溶于水。计算得藏蒲公英多糖和河北
蒲公英多糖含量分别为 16. 8%和 6. 31%，经分析差异显著。
对所提藏蒲公英和河北蒲公英的多糖进行定性分析，结
果基本一致。水溶液经 α －萘酚试验在试管上下液面分界处
有紫红色环;斐林试验可见棕红色沉淀物显著增多;多糖制品
经氯仿溶解，取其上清加入浓硫酸以及三氯醋酸试剂，均无颜
色变化;多糖水溶液加入茚三酮试液，溶液呈现红色;多糖经
乙醇溶解后的上清液经盐酸 －镁粉试验，溶液未出现明显颜
色变化;多糖水溶液加入碘化铋钾试剂后没有出现沉淀;据此
初步判断所提取的 2 种蒲公英多糖制品中均含有多糖、蛋白
质和氨基酸，不含皂苷、黄酮类和生物碱等物质。
多糖含量测定采用硫酸 － 苯酚法。经测定，藏蒲公英
和河北蒲公英多糖纯度分别为 46. 37%、33. 89%，且差异
显著。
2. 2 蒲公英多糖的光谱分析
图 2 中 2 种蒲公英多糖含量的紫外图谱呈不规则双曲线
型，均在 200 nm 处有吸收峰，与其他报道的多糖紫外图谱基
本一致［10 － 11］，为多糖含量的典型图谱。2 种蒲公英多糖含量
260 nm处均无吸收峰，说明不含核酸类物质。本试验定性分
析结果为蒲公英单糖中含有蛋白质和氨基酸类物质，但在
280 nm 处并无蛋白质的特征吸收峰，陈洪亮认为蛋白质与多
糖处于紧密的结合状态［11］，但蛋白质含量与多糖含量在
270 ～ 280 nm 处应有一肩形峰［12 － 13］。
2 种蒲公英多糖水解液均在 250 nm 有最大吸收峰，
300 nm 处另有一肩形峰; 另外，本试验也对葡萄糖、半乳糖、
阿拉伯糖和木糖等几种常见单糖进行了紫外分析，其结果如
图 3 所示。图 3 中葡萄糖和半乳糖在 300 nm 处有最大吸光
度，而阿拉伯糖和木糖在 203 nm 处有末端吸收;蒲公英多糖
水解后在 300 nm 处和葡萄糖、半乳糖有相同吸收峰。说明 2
种蒲公英多糖水解液中可能为葡萄糖和半乳糖，而不含阿拉
伯糖和木糖，即本试验所提取的蒲公英多糖单糖组成单元可
能含有葡萄糖和半乳糖。另外，本试验中蒲公英多糖水解液
在250 nm 处的吸收峰尚不能确定为何种物质。
( 下转第 288 页)
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( 上接第 287 页)
3 结论
本试验水提醇沉法得到藏蒲公英多糖和河北蒲公英多糖
含量分别为 16. 8%、6. 31%，差异显著; 定性分析结果表明，
所提取的 2 种蒲公英多糖制品中均含有多糖、蛋白质和氨基
酸，不含皂苷、黄酮类和生物碱等物质;硫酸 －苯酚法测得藏
蒲公英多糖和河北蒲公英多糖纯度分别为 46. 37%、
33. 89%，差异显著; 2 种蒲公英多糖的紫外图谱呈不规则双
曲线型，均在 200 nm 处有吸收峰，且其单糖组成可能含有葡
萄糖和半乳糖，不含阿拉伯糖和木糖。
参考文献:
［1］Mina T. Inulin in medicinal planta［J］. Shoyakugaku Zaaahi，1985，
39: 154 － 155.
［2］驼和生 . 免疫中药学［M］. 北京:北京医科大学中国协和医科大
学联合出版社，1999: 188 － 191.
［3］薛 明，孟宪松 . 生物活性多糖的免疫研究进展与展望［J］. 中
兽医医药杂志，1996( 3) : 15 － 18
［4］Chen H L，Li D F，Chang B Y，et al. Effects of Chinese herbal poly-
saccharides on the immunity and growth performance of young broilers
［J］. Poult Sci，2003，82( 3) : 364 － 370.
［5］Bagni M，Archetti L，Amadori M，et al. Effect of long － term oral ad-
ministration of an immunostimulant diet on innate immunity in sea
bass( Dicentrarchus labrax) ［J］. J Vet Med B Infect Dis Vet Public
Health，2000，47( 10) : 745 － 751.
［6］Tokunaka K，Ohno N，Adachi Y，et al. Immunopharmacological and
immunotoxicological activities of a water － soluble ( 1→3) － beta － D
－ glucan，CSBG from Candida spp.［J］. Int J Immunopharmacal，
2000，22( 5) : 383 － 394.
［7］孔祥峰，胡元亮，李祥瑞，等 . 9 种中药成分对新城疫Ⅳ系疫苗免
疫雏鸡血清中血凝抑制抗体水平的影响［J］. 畜牧兽医学报，
2004，35( 4) : 468 － 472.
［8］储岳峰，李祥瑞，胡元亮 . 9 种中药成分对小鼠免疫细胞活性的影
响［J］. 南京农业大学学报，2004，27( 1) : 97 － 100.
［9］韦 丁，陈 健 . 香菇多糖含量测定过程中加样回收率的比较
［J］．食品研究与开发，2010，31( 10) : 155 － 157.
［10］吴亚林，黄 静，潘远江 . 无花果多糖的分离、纯化和鉴定［J］.
浙江大学学报:理学版，2004，31( 2) : 177 － 179.
［11］陈洪亮 . 植物多糖的制备及对肉仔鸡免疫功能影响的研究
［D］． 北京: 中国农业科学院，2002.
［12］余晓斌，尤 蓉 . 云芝菌丝体多糖的分离纯化研究［J］. 天然产
物研究与开发，2003，15( 1) : 29 － 31.
［13］陈文英，郝艳霜，何 欣，等 . 蒲公英多糖对雏鸡外周血 CD4
+和
CD8
+ T淋巴细胞亚群的影响［J］. 江苏农业科学，2011，39 ( 3 ) :
265 － 267．
梁亦龙，曾垂省，王 允，等． 茯苓多糖的抗氧化作用［J］． 江苏农业科学，2012，40( 7) : 288 － 289．
茯苓多糖的抗氧化作用
梁亦龙，曾垂省，王 允，张继承
( 重庆邮电大学生物信息学院，重庆 400065)
摘要: :以果蝇为动物模型，对茯苓多糖进行抗氧化防衰老的研究。给 30日龄果蝇饲喂茯苓多糖 10 d后处死，测定
果蝇匀浆的超氧化物歧化酶( SOD) 活性、过氧化氧酶( CAT) 活性和丙二醛( MDA) 含量。结果表明，各茯苓多糖处理组
的雌蝇 SOD活性上升，雄蝇MDA含量降低，雄蝇 CAT活力升高，与对照组相比差异显著; 0． 2 mg /g浓度组雌雄果蝇与对
照组比较可延长平均寿命和平均最高寿命。茯苓多糖可以提高果蝇的抗氧化能力，抑制脂质过氧化，延长果蝇寿命。
关键词: 茯苓多糖; 抗氧化; 寿命; 果蝇
中图分类号: S567． 3 + 20． 1 文献标志码: A 文章编号: 1002 － 1302( 2012) 07 － 0288 － 02
收稿日期: 2011 － 11 － 24
基金项目:重庆自然科学基金( 编号: D2009 － 17) 。
作者简介:粱亦龙( 1971—) ，男，湖南吉首人，博士研究生，副教授，研
究方向为生物工程。E － mail: liangyl1680@ 163． com。
茯苓( Wolfiporia cocos Wolf) 别名云苓、松苓，为寄生在松
树根上的菌类，属于非褶菌目( Aphyllophorales) 多孔菌科
( Polyporaceae) 茯苓属( Wolfiporia) ，其块茎药用。茯苓形状像
甘薯，外皮黑褐色，里面白色或粉红色;其原生物为多孔菌科
真菌茯苓的干燥菌核，多寄生于马尾松或赤松的根部。茯苓
味甘、淡、性平，入药具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功
用。茯苓多糖约占菌核的 70% ～ 90%，主要由线型 β ( 1，3 )
－ D －葡聚糖组成。现代医学研究表明，茯苓能增强机体免
疫功能，茯苓多糖有明显的抗肿瘤、抗衰老作用、保肝脏作
用［2］。本研究以野生型黑腹果蝇为试验对象，观察茯苓多糖
对其抗氧化能力和寿命的影响，以期茯苓能取代存在一定毒
性潜在致癌性的化学合成抗氧化剂，为保健食品的开发提供
数据，为茯苓的全方位开发应用积累有价值的资料，具有重要
的现实意义。
1 材料与方法
1． 1 材料
野生型黑腹果蝇( drosophila melanogaster) ，由重庆邮电大
学生物信息学院遗传教研组提供。收集 8 h内羽化未交配成
虫，雌雄分开，普通培养基培养，温度( 25 ± 1 ) ℃，相对湿度
—882— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 7 期