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抱茎苦荬菜质量标准研究



全 文 :收稿日期:2011 - 09 - 13
基金项目:沈阳市科学技术计划资助项目(1063308 - 1 - 00)
作者简介:胡德奇(1964 -) ,男,辽宁沈阳人,高级工程师、副教授,
研究方向:药品生产、教学和科研工作。
可降低菌群失调小鼠的 pH 值,白术、三补治疗组的 pH
值与正常对照组的相近。正常对照组小鼠肠黏膜上皮
吸附的细菌数明显多于菌群失调组。中药白术、三补治
疗组吸附的大肠埃希菌、双歧杆菌数与自然恢复组相比
有显著性差异。可见,肠道微环境 pH 的改变、双歧杆菌
黏附性的改变是影响肠道菌群失调的原因之一。
在人或动物的各个解剖部位都有明显的微生物环
境,在肠道内,同一生境可分为三个范围:肠腔内、上皮
表面及隐窝内。微生物在上皮细胞及表皮细胞的接触、
黏附与定植,是连续的过程。康白[3]等认为微生物黏附
分为两步:第一步是非特异性的,物理学上的接触,第二
步是特异性的,即在非特异性的基础上,菌体的特殊配
体进一步与受体细胞相应的受体之间特异性结合。
Reid等[4]进一步研究了双歧杆菌、乳酸杆菌黏附素的性
质及黏附机制,证明其黏附素是某种蛋白质物质。郑跃
杰等[5]针对体外 SUB - MIC 的抗生素能影响细菌黏附
素的表达与功能,来调节细菌对宿主细胞表面的吸附能
力方面,观察了次最低抑菌浓度抗生素对细菌黏附的影
响时,提出抗生素抑制双歧杆菌的黏附可能是其引起肠
道菌群失调的另一条途径。中药在扶植正常菌群调整
微生态失调时是否消除和修复了由于抗生素脱污染造
成细菌黏附的改变,是否是中药扶植正常菌群生长的原
因,还有待于进一步研究。
参考文献
[1] 潘晓川.回春生及其中药合剂对脾虚动物肠道双歧杆菌的调
整作用.中国微生态学杂志[J]. 1991,3(2) :16.
[2] 李丽秋.树舌中药复方煎剂对小鼠肠道菌群及体液免疫的调
节作用.中国微生态学杂志[J]. 1997,9(6) :24.
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intestinal epithelical calls. Microbiology[J]. 1993,7(5) :57 -
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[5] 郑跃杰.次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌黏附的影响[J].
中国微生态学杂志,1996,8(5) :4.
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抱茎苦荬菜质量标准研究
胡德奇1,邹春阳1,刘志梅1,蔡丹梅2
(1.辽宁卫生职业技术学院,辽宁 沈阳 110101;2.辽宁省中药研究所,辽宁 沈阳 110161)
摘 要:目的:研究制定(提高)抱茎苦荬菜药材的质量标准。方法:采用性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱鉴
定、定量分析与药材资源调查研究、文献考证等方法,按照《中华人民共和国药典》(2010 年版)一部中药材质量标
准模式研究制定抱茎苦荬菜药材的质量标准。结果:制定了新的抱茎苦荬菜药材质量标准。结论:明显提高了抱
茎苦荬菜药材的质量标准,对于控制抱茎苦荬菜药材质量具有显著意义。
关键词:抱茎苦荬菜;质量标准
中图分类号:R93 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2012)02 - 0395 - 03
Study on the Quality Standard of Ixeris Sonchifolia
HU De-qi1,ZOU Chun-yang1,LIU Zhi-mei1,Cai Dan-mei2
(1. Liaoning College of Health Vocational Technology,Shenyang 110101,Liaoning,China;
2. Liaoning Institute of Traditional Chinese Medicine;Shenyang 110161,Liaoning,China)
Abstract:Objective:To determine a quality standard for Ixeris sonchifolia. Method:By character identification,mi-
croscopic identification,TLC identification,quantitative analysis and literature research of natural resources,the standard
was obtained according to the quality standard model in the Chinese Pharmacopoeia (2010 version). Result:New quality
standard of Ixeris sonchifolia was established. Conclusion:The quality standard of Ixeris sonchifolia was significantly im-
proved and meaningful for quality control.
Key words:Ixeris sonchifolia;quality standards
抱茎苦荬菜为菊科植物抱茎苦荬菜 Ixeris sonchifolia
(Bunge)Hance的干燥地上部分。夏季花开时采收,除去
根及杂质,晒干。原植物主要分布于我国的东北、内蒙古、
河南、河北、山东等省区。抱茎苦荬菜收载于卫生部药品标
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DOI:10.13193/j.archtcm.2012.02.173.hudq.060
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准中,由内蒙古自治区药品检验所起草。标准中收载了品
名、来源、性状鉴别、显微鉴别等内容。根据我们对抱茎苦荬
菜药材进行资源调查和定性、定量分析研究,我们对原标准
补充了性状鉴别、显微鉴别部分内容,增加了薄层色谱鉴别、
含量测定等内容,制定了新的抱茎苦荬菜药材质量标准。
1 材料与仪器
1. 1 药材
抱茎苦荬菜采自辽宁省、吉林省、河南省、山东省等地
区。经本院刘颖副教授鉴定为菊科植物抱茎苦荬菜 Ixeris
sonchifolia (Bunge)Hance。
1. 2 试药
腺苷对照品:中国药品生物制品检定所(批号:110879
- 200202) ;芦丁对照品:中国药品生物制品检定所(批号:
100080 - 200707) ;试剂均为分析纯。
1. 3 仪器与设备
Tu1810 紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限公
司) ;CSF - 1A型超声波发生器(上海精密仪器有限公司) ;
分析天平(日本岛津 AEL - 40SM,上海精密科学仪器有限
公司 FA2004B) ;FW100 型高速万能粉碎机(天津市泰斯特
仪器有限公司)。
2 试验方法与结果
2. 1 性状鉴别
补充了关于药材长度的标准描述:本品长 30 ~ 50cm。
图 1 气孔
图 2 导管
2. 2 显微鉴别
补充了气孔的类型 -不定式,见图 1;补充了导管的类
型 -网纹导管,见图 2。
2. 3 薄层色谱鉴别
我们以腺苷为对照品,采用薄层色谱法鉴别抱茎苦荬
菜中腺苷的存在。
取本品粉末 20g,加水 200mL,煎煮 1h,滤过,滤液浓缩
至约 40mL,放至 40℃以下,搅拌下加 10%氧化钙乳调 pH
至 10,放置 12h,离心,沉淀物悬浮于 5. 3 倍 95%乙醇中(使
含醇量达 80%)。用 50%硫酸调 pH3 ~ 4,充分搅拌使反应
完全,离心,离心液用 40%氢氧化钠中和 pH 至 7,滤过,滤
液回收乙醇,蒸干。残渣加 50%乙醇 1mL 使溶解,作为供
试品溶液。另取腺苷对照品,加 50%乙醇制成每 1mL 含
0. 6mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取
上述两种溶液各 1μL,分别点于同一以 0. 05mol /L 磷酸氢
二钠溶液制成的硅胶 GF254薄层板上,以氯仿 -醋酸乙酯 -
异丙醇 -水 -氨水(8 ∶ 2 ∶ 6 ∶ 0. 4 ∶ 0. 6)为展开剂,展开,取
出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在
与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。见
图 3。
1.供试品 2.对照品
图 3 薄层色谱图
展距:150mm,Rf = 36 ÷ 150 = 0. 24;展开时温度:
20℃;相对湿度 60%(自然)。
2. 4 含量测定
2. 4. 1 对照品溶液的制备 精密称取 120℃干燥至恒重
的芦丁对照品 25mg,置于 50mL的量瓶中,用乙醇稀释至刻
度,摇匀,备用。
2. 4. 2 供试品溶液的制备 取抱茎苦荬菜药材,粉碎,过
30 目筛。取粉末 1g,精密称定,置索氏提取器中,加氯仿约
85mL,加热提取,至无色(约 3h) ,回收氯仿液,药渣挥去氯
仿,加甲醇约 85mL继续提取至无色(约 4h) ,提取液蒸干,
残渣加稀乙醇溶解,转移至 50mL 量瓶中,加稀乙醇至刻
度,摇匀,作为供试品储备液。
2. 4. 3 检测波长的选择 本试验采用紫外分光光度法测
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定了总黄酮〔以无水芦丁(C27H30O16)计〕的紫外光谱,结果
显示,其紫外最大吸收波长为 515nm,见图 4。
图 4 芦丁的紫外吸收光谱图
2. 4. 4 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液 0. 00mL,
1. 00mL,2. 00mL,3. 00mL,4. 00mL,5. 00mL,6. 00mL 于
25mL量瓶中,分别加水至 6mL,分别加 5% NaNO2溶液
1mL,放置 6min,加 10%Al(NO3)31mL,放置 6min,加 NaOH
试液 10mL,加水至刻度,摇匀,放置 15min后在 515nm立即
测定各溶液的吸光度,以吸光度值 A 为纵坐标,对照品溶
液的浓度为横坐标,求得标准曲线的回归方程为:A =
0. 01195C - 0. 01281,R2 = 0. 9999。结果表明芦丁对照品在
8. 00 ~ 48. 00μg的范围内呈良好的线性关系,见图 5。
图 5 芦丁的标准曲线
另外,我们对上述测定方法进行了方法学考察,其精密
度试验、重复性试验、稳定性试验和回收率试验均符合有关
规定(本处内容略)。
2. 4. 5 样品的测定及结果 测定不同地区采收的抱茎苦
荬菜药材中总黄酮的吸光度,计算其含量,结果见表 1。
由以上测定结果可以看出,即墨、田横岛、淄博样品中
总黄酮含量明显偏低,可能是因为我们在采收药材后遭受
雨淋,有部分发霉导致,同时也说明抱茎苦荬菜药材雨淋发
霉可以导致总黄酮含量降低。因此,我们将总黄酮含量按
原标准合格品,测定含量下限为准定为:本品按干燥品计
算,含总黄酮以无水芦丁(C27H30O16)计,不得少于 2. 9%。
3 结 论
本标准在原标准基础上补充了性状鉴别、显微鉴别部
分内容,增加薄层色谱鉴别和含量测定项。本标准对于控
制抱茎苦荬菜药材质量具有显著意义。
4 讨 论
我们采用高效液相色谱法对抱茎苦荬菜中主要有效成
表 1 不同地区抱茎苦荬菜药材中总黄酮的含量测定结果
地区 样品
总黄酮的含量
(mg /g)
(%)
辽宁 宽甸 43. 69 4. 37
通远堡 44. 20 4. 42
海城下林 42. 32 4. 23
海城东四 51. 93 5. 20
海城牛庄 58. 59 5. 86
锦州青岩寺 52. 19 5. 22
锦州史家 37. 98 3. 80
锦州义县 53. 94 5. 40
朝阳上河首 52. 24 5. 23
叶百寿老西店 54. 35 5. 43
怀仁 29. 46 2. 95
吉林 蛟河碾子沟 42. 74 4. 27
蛟河西岭子 46. 30 4. 63
拉法山 40. 71 4. 07
镇西山坡 36. 75 3. 68
口前镇 41. 31 4. 13
松源 31. 71 3. 17
靠山屯 38. 15 3. 82
松江镇 41. 22 4. 12
帽儿山 42. 18 4. 22
河南 南阳西山屯 53. 21 5. 33
洛阳栾川南 43. 62 4. 36
洛阳栾川北 36. 49 3. 65
洛阳白士乡 48. 68 4. 87
义马 43. 60 4. 36
汝阳 39. 18 3. 92
山东 济南 29. 70 2. 97
潍坊 28. 99 2. 90
即墨 19. 48 1. 95
田横岛 16. 20 1. 62
平度市 31. 57 3. 16
淄博 23. 37 2. 34
分腺苷的含量测定进行研究,通过精密度、稳定性、回收率
等相关试验,证明所建立的方法可行。测定结果显示:不同
地区抱茎苦荬菜中腺苷的含量极低并且差异显著(另文报
道)。我们认为采用该法测定抱茎苦荬菜中腺苷的含量不
适于作为抱茎苦荬菜药材的质量标准。因此,我们将腺苷
测定采用薄层色谱法鉴别。
参考文献
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