全 文 ：2016 年 5 月 第 18 卷 第 5 期 中国现代中药 Mod Chin Med May 2016 Vol. 18 No. 5
·中药农业·
△［基金项目］ 中国科学院藏药研究重点实验室项目(No. Y34291OZ1)
*［通信作者］ 马世震，研究员，研究方向:药材质量标准研究及产品开发;E-mail:szma@ nwipb. cas. cn
栽培甘松药材质量标准研究
△
张宇霞1，2，马世震1* ，冯海生1，李彩霞1，郑植元1，2，刘永玲1
(1. 中国科学院 西北高原生物研究所 /藏药研究重点实验室，青海 西宁 810001;
2. 中国科学院大学，北京 100049)
［摘要］ 目的:制定栽培甘松药材的质量标准。方法:按中国药典规定的方法对栽培甘松进行粉末显微观察及
薄层(TLC)鉴别，对其挥发油、水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、重金属、有害元素、有机氯类农药残留进
行测定;采用高效液相色谱法(HPLC)测定甘松新酮的含量。结果:栽培甘松的显微鉴别及 TLC 结果与中国药典甘
松一致;确定了水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、重金属、有害元素、有机氯类农药残留、挥发油、甘松新
酮的限度。结论:所测指标可以为完善甘松的质量标准提供依据。
［关键词］ 甘松;高效液相色谱法;甘松新酮;挥发油;质量标准
Study on Quality Standards of Cultivated Nardostachys chinensis Batal.
ZHANG Yuxia1，2，MA Shizhen1* ，FENG Haisheng1，LI Caixia1，ZHENG Zhiyuan1，2，LIU Yongling1
(1. Northwest Institute of Plateau Biology，Chinese Academy of Sciences / Key Laboratory of Tibetan Medicine Ｒesearch，
Xining 810001，China;
2. University of Chinese Academy of Sciences，Beijing 100049，China)
［Abstract］ Objective:To establish the quality standards for cultivated Nardostachys chinensis Batal. Methods:
According to the standards of Chinese Pharmacopoeia， the cultivated N. chinensis was identified by powder microscopic
observation and TLC，essential oil，water content，extract，total ash，acid-insoluble ash，heavy metals，harmful elements
and organochlorine pesticides residue were measured，nardosinone was determined by HPLC. Ｒesults:Powder microscopic
observation and TLC were consistent to the description of Chinese Pharmacopoeia. The limits of water content，extract，the
total ash， acid-insoluble ash， heavy metals， harmful elements， organochlorine pesticides residue， essential oil and
nardosinone were set up. Conclusion:The determined indicators can provide scientific basis for improving N. Chinensis .
quality standards.
［Keywords］ Nardostachys chinensis Batal.;HPLC;nardosinone;essential oil;quality standards
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2016． 5． 018
甘松为败酱科植物甘松 Nardostachys chinensis
Batal. 或匙叶甘松 N. jatamansi DC. 的干燥根及根
茎，药用历史悠久，具有理气止痛，开郁醒脾的功
能，可治胃痛、胸腹胀满、头痛、癔病、脚气等病
症［1］。现代研究表明，甘松具有抗抑郁、抗心律失
常、促进 PC12D 细胞中神经因子诱导的神经突生
长［2-4］等药理作用。
甘松被《中华人民共和国药典》自第二版起开
始收载至今，且藏药标准也有其收载。成都中医药
大学及北京中医药大学对甘松的质量标准进行了研
究［5-6］，《中华人民共和国药典》2010 版甘松规定项
目仅包括显微鉴别、性状、TLC、水分及挥发油含
量限定［7］，本研究拟在前人研究工作的基础上，以
野生甘松和市售甘松为对照药材，对甘松质量标准
进行研究，从而增加甘松标准规定项目，制定人工
规范化栽培的甘松药材质量标准，增加其质量可控
性。同时本方法尚可为其他药材质量标准的研究方
法提供借鉴，对规范性评价药材质量有重大的意义。
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2016 年 5 月 第 18 卷 第 5 期 中国现代中药 Mod Chin Med May 2016 Vol. 18 No. 5
1 仪器与材料
1. 1 仪器与试剂
美国 Waters 515 型高效液相色谱仪，包括溶剂
管理系统，二极管阵列检测器，Emprower 色谱工作
站(美国 Waters 公司) ;MAＲS 6 微波消解仪(美国
CEM公司) ;AA240Z 石墨炉原子吸收光谱仪(美国
Aligent公司) ;725 型 ICP-AES(美国 Aligent 公司) ;
AFS-8230 原子荧光光度计(北京吉天仪器有限公
司) ;挥发油提取器(上海玻璃仪器厂) ;7890B GC
气相色谱仪(美国 Agilent公司) ;ESJ182-4 型电子天
平(沈阳龙腾电子有限公司)。
HPLC色谱柱:Dikma Diamonsil C18(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ，Phenomenex Synergi 4μHydro-Ｒ
P80A(250 mm × 4. 6 mm，4 μm) ，HPLC-PCartridge
LIChrosp-1her 100 ＲP-180(5 μm)试剂:甲醇(色谱
纯，山东禹王实业有限公司化工分公司) ，超纯水为
实验室自制，其它试剂均为分析纯(天津市百世化工
有限公司)。
对照品:甘松新酮(成都曼斯特生物科技有限公
司，批次 MUST-13090901)。
1. 2 材料
第 1 ～ 10 批为栽培甘松，地点为青海省大通宝
库药材种植基地，海拔为 2890 m，引种种源为青海
省玉树藏族自治州巴塘乡野生种源，栽培种源为第
二代自繁种源，采集时间依次为 2013-07-01、2013-
07-31、2013-08-28、2013-09-18、2013-10-30、2014-
05-17、2014-06-15、2014-07-16、2014-08-15、2014-
09-13;第 11 批为野生甘松，2013 年 9 月采于青海
省玉树藏族自治州巴塘乡，海拔为 3800m;第 12 批
为市售甘松，2013 年 9 月购自西宁市八一路药材市
场。以上样品均经中国科学院西北高原生物研究所
卢学峰教授鉴定为甘松(Nardostachys chinensis Batal. )
的根茎。采回的甘松经除去泥沙等杂质后，室温下
阴干，经植物粉碎机粉碎，过标准药筛，待用。
2 方法与结果
2. 1 显微鉴别
显微观察结果与 《中华人民共和国药典》描述
基本一致(图 1)。
注:A. 石细胞(10 × 40) ;B. 导管 1(10 × 40) ;C. 导管 2(10 × 40) ;D. 木栓细胞(10 × 40) ;E. 基生叶残基碎片 1(10 ×
40) ;F. 基生叶残基碎片 2(10 × 40)
图 1 栽培甘松显微结构图
显微结构观察结果表明:甘松石细胞类圆形或
不规则多角形，偶见长方形，单个或成群，直径
33 ～ 64 μm，长可至 200 μm 或更长，壁甚厚，无
色，胞腔狭小。梯纹导管或网纹导管，直径 7 ～
40 μm，小型梯纹导管成束，其旁有时可见细长的
木纤维。木栓细胞多为不规则多角形，略暗棕色，
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较薄，内含黄色至棕黄色挥发油。基生叶残基碎片
较多，细胞呈长方形或长多角形，深黄色至棕色，
直径 20 ～ 31 μm，长 50 ～ 90 μm，壁呈念珠状增厚。
另一种碎片细胞呈长条形，长可达 200 μm，壁有时
呈念珠状增厚。
2. 2 薄层鉴别
参考《中华人民共和国药典》2010 版方法，以
野生甘松药材作为对照药材，对栽培甘松进行薄层
鉴别(图 2 及图 3)。从图 2 及图 3 中可看出，在与
野生药材及对照品一致的位置上，10 批栽培药材均
出现相同颜色的斑点。
注:1 ～ 5 及 8 ～ 12 为 10 批栽培甘松;6 为野生甘松;7
为甘松新酮对照品 (下同)。
图 2 甘松 254nm紫外灯下 TLC图
图 3 甘松 0. 5%香草醛硫酸溶液显色 TLC图
2. 3 检查
水分按照 《中华人民共和国药典》甲苯法测
定;浸出物按照 《中华人民共和国药典》稀乙醇、
热浸法测定［8］;总灰分、酸不溶性灰分、重金属及
有害元素、有机氯类农药残留均按照 《中华人民共
和国药典》测定。结果见表 1 ～ 3、图 4。
由表 1 及表 2 数据得出，建议甘松中水分不得
超过 5. 0%;浸出物不得少于 27. 0%;总灰分不得
超过 13. 0%;酸不溶性灰分不得超过 7. 0%;铅不
得过百万分之五，镉不得过千万分之三，砷不得过
百万分之二，汞不得过千万分之二，铜不得过百万
分之二十;由图 4 知，9 种有机氯类农药残留均未
检出，所以计算其检出限，结果见表 3。
表 1 甘松水分、浸出物、总灰分、酸不溶性灰分测定
(%)
样品批次 水分 浸出物 总灰分 酸不溶性灰分
1 4. 48 31. 04 6. 21 0. 63
2 3. 60 32. 60 5. 24 0. 80
3 4. 23 35. 39 6. 07 2. 00
4 4. 25 37. 66 7. 63 3. 43
5 3. 99 34. 99 10. 96 6. 03
6 4. 25 27. 37 10. 57 5. 37
7 4. 45 33. 41 12. 53 6. 68
8 5. 74 25. 94 15. 69 10. 14
9 3. 99 27. 41 13. 41 7. 00
10 3. 98 30. 97 8. 87 5. 45
11 3. 73 21. 66 6. 98 2. 49
12 4. 25 21. 06 17. 46 12. 68
平均值 4. 24 29. 96 10. 13 5. 23
表 2 甘松重金属及有害元素测定
/mg·kg －1
样品批次 Hg As Cd Pb Cu
1 0. 014 0. 18 0. 01 0. 22 10. 04
2 0. 004 0. 15 0. 02 0. 01 5. 78
3 0. 003 0. 13 0. 01 0. 27 20. 30
4 0. 002 0. 21 0. 01 0. 07 9. 27
5 0. 032 0. 32 0. 01 0. 16 21. 79
6 0. 010 0. 41 0. 02 0. 20 6. 48
7 0. 004 0. 48 0. 06 0. 34 6. 66
8 0. 048 0. 29 0. 01 1. 70 6. 02
9 0. 034 0. 13 0. 02 1. 64 8. 24
10 0. 077 0. 42 0. 01 2. 49 6. 45
11 0. 010 0. 28 0. 08 0. 19 8. 02
12 0. 003 0. 74 0. 03 0. 47 33. 77
平均值 0. 019 0. 29 0. 02 0. 60 11. 76
2. 4 含量测定
2. 4. 1 挥发油测定 称取甘松样品粉末约 10g，按照
《中华人民共和国药典》2010版第一部附录Ⅹ D甲法
测定挥发油含量，结果见表 4。《中华人民共和国药
典》规定甘松挥发油不得少于 2. 0%(mL·g －1) ，本
实验结果均符合该规定，且栽培甘松与野生、市售
甘松含量差异不大。但除第 6 批样品外，挥发油含
量均大于 3. 0%(mL·g －1) ，所以建议甘松药材质量
标准中挥发油含量不得少于 3. 0%(mL·g －1)。
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表 3 有机氯类农药残留检出限
有机氯类农药残留 LOD /mg·kg －1 有机氯类农药残留 LOD /mg·kg －1 有机氯类农药残留 LOD /mg·kg －1
α-BHC 0. 000 5 ζ-BHC 0. 000 6 OP-DDT 0. 000 9
β-BHC 0. 001 4 PP-DDE 0. 008 5 PP-DDT 0. 007 9
γ-BHC 0. 000 6 PP-DDD 0. 001 1 PCNB 0. 000 7
注:A. 混合对照品;B. 栽培甘松样品
图 4 有机氯类农药残留 GC图
2. 4. 2 甘松新酮测定 色谱条件:采用 HPLC法，色
谱柱为 Dikma Diamonsil C18(250 mm × 4. 6 mm，
5 μm) ，流动相为甲醇-水(65 ∶35) ，柱温为 30 ℃，
流速为 1. 0 mL·min －1，检测波长为 254 nm。对照品
和供试品色谱图见图 5。
注:A. 甘松新酮对照品;B. 栽培甘松供试品
图 5 对照品和供试品色谱图
对照品溶液制备:取甘松新酮对照品适量，精密
称定，加甲醇制成每 1mL含 1. 45 mg的溶液，即得。
置于冰箱中 4 ℃保存备用。
供试品溶液制备:取本品粉末(过四号筛)约
0. 25 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲
醇 25 mL，密塞，称定重量，超声处理 30 min
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(100W，40kHz) ，放冷，再称定重量，用甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜
(0. 45 μm)过滤，得供试品溶液。
所建立的方法已进行方法学考察，包括线性关
系、精密度、重现性、稳定性、加样回收率，均符合
方法学验证要求［9］。样品测定结果见表 4。表中数据
显示，除第 3、4批药材的甘松新酮低于 10. 0 mg·g －1，
其他批次均高于 10. 0 mg·g －1，所以建议甘松药材质
量标准中甘松新酮含量不得少于 10. 0 mg·g －1。
表 4 甘松挥发油及甘松新酮含量测定结果(n = 3)
样品
批次
挥发油
体积分数
(%)
甘松新酮
含量 /
mg·g － 1
样品
批次
挥发油
体积分数
(%)
甘松新酮
含量 /
mg·g － 1
1 4. 8 15. 05 7 3. 3 16. 19
2 5. 0 11. 90 8 5. 0 14. 91
3 5. 0 7. 33 9 3. 0 15. 22
4 3. 3 6. 78 10 3. 6 19. 39
5 3. 0 10. 55 11 5. 2 18. 24
6 2. 0 17. 05 12 3. 5 11. 13
平均值 — — — 3. 9 13. 65
3 小结和讨论
本文通过以野生及市售药材作对照，对 10 批栽
培甘松药材质量进行分析，初步制定了甘松浸出物、
总灰分、酸不溶性灰分、重金属及有害元素、有机氯
类农药残留及甘松新酮的含量限度，同时提高了对甘
松药材挥发油及水分的含量限度要求，可以为中国药
典甘松质量标准的提高提供借鉴。建议甘松药材质量
标准中规定:水分不得超过 5. 0%;浸出物不得少于
27. 0%;总灰分不得超过 13. 0%;酸不溶性灰分不得
超过 7. 0%;铅不得过百万分之五，镉不得过千万分
之三，砷不得过百万分之二，汞不得过千万分之二，
铜不得过百万分之二十;有机氯类农药残留由于未检
出所以暂不作规定;挥发油含量不得少于 3. 0%
mL·g －1;甘松新酮含量不得少于 10. 0 mg·g －1。
参考文献
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［9］ 张宇霞，马世震，董琦，等． 不同生长期甘松中甘松新酮
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141-143．
(收稿日期 2015-07-10)
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