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西南红山茶组培快繁过程中初代培养基的筛选



全 文 :试验研究 现代园艺 2010年第 5期
西南红山茶组培快繁过程中初代培养基的筛选 *
冉 华 王 东 何静茹 李小平
(四川农业大学生态林业工程省级重点实验室,雅安 625014)
摘 要:山茶花是我国十大传统名花之一,具有很高的观赏价值和园林应用前景。本试验以西南红山茶带芽茎
段为材料,在MS培养基上添加不同浓度的 6- BA和 NAA,研究不同培养基配方对外植体启动率的影响。结
果表明:在初代MS培养基中,当 NAA为 0.2 mg/ L,6- BA为 2.0 mg/ L时,启动率最高,为 71.1%;且侧芽高度
最高,平均高度为 1.73cm,启动效果最好。单独分析了 6- BA与 NAA不同浓度分别对外植体启动率和侧芽高
度的影响,得出 6- BA对外植体侧芽高度具有显著的影响,而 NAA对外植体的启动率具有显著的影响。
关键词:西南红山茶;组培快繁;初代培养基
℃,光照强度 1500~2000 Lx,光照时间每天 12h[4]。
数据采用 Excel 2003和 SPSS 16.0进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 不同生长调节剂浓度对外植体启动率的影响
茎段接种约 10d后开始出现基部膨大现象,
同时顶端切口处开始出现愈伤组织,30d左右顶
端愈伤组织开始分化出不定芽,50d左右基本能
形成 1~4个不定芽。试验比较结果表明,5号处理
(NAA 0.2mg/L,6- BA 2.0mg/L)诱导率为 71.1%,
诱导率最高,诱导效果最佳,显著高于其它各处
理;3 号处理(NAA 0.1mg/L,6- BA 1.0mg/L)诱导
率为 30.0%,诱导效果最差,显著低于其它各处
理。由图 1可知,4号处理(NAA 0.2mg/L,6- BA
3.0mg/L) 和 6 号处理 (NAA 0.2mg/L,6- BA
1.0mg/L) 诱导效果也较好,分别为 54.5%和
57.8%,仅低于 5号处理。
注:不同小写字母表示在 5%水平差异显著,下同。
图 1不同处理号下启动率柱状图
2.1.1 不同 NAA浓度对启动率的影响。由图 1可
知,5号处理诱导率为 71.1%,明显高于 2号处理
(NAA 0.1 mg/L,6- BA 2.0mg/L) 的 46.7%和 8号
处理(NAA 0.3mg/L,6- BA 2.0mg/L)的 51.1%,说
明在 6- BA浓度一定时,NAA浓度对外植体的启
山茶花传统的繁殖方法主要有播种、嫁接、扦
插及压条等,但因其生根较困难和繁殖率低等原
因,很难进行大规模地开发推广[1];且品种退化现
象非常严重。将植物组织培养技术应用于攀西西
南山茶的快速繁殖,对保护攀西地区野生西南山
茶种质资源,丰富园林植物多样性,缓解优质种苗
供应紧张的状况,具有十分重要的意义。鉴于此,
本文对西南红山茶进行组织培养初步研究,力求
为西南红山茶的推广利用和工厂化育苗提供一些
理论依据。
1 材料与方法
本次试验以生长旺盛且无病虫害的西南红山
茶新梢顶端作为材料,截取 2.0~5.0cm的带芽半
木质化茎段,用 1%洗衣粉水漂洗 10min,漂洗 2
次,用自来水冲洗干净,然后再用自来水冲洗 2 h,
滤干水,于超净工作台上,无菌条件下用 0.1%升
汞溶液进行浸泡,摇动消毒 6 min,最后用无菌水
冲洗 4~5次[2]。将已消毒好的茎段从原切口处剪
掉,使之露出新切口,同时剪切成 1.0~2.0cm长的
小段,每一小段都带有 1个茎节,这样有利于侧芽
长出[3]。将切出的小段,于芽朝上接入附加不同浓
度的 6- BA(1.0 mg/L、2.0 mg/L、3.0 mg/L)和 NAA
(0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L)的 MS启动培养基
上进行初代培养,MS 中添加琼脂 7g/L、蔗糖
30g/L,pH 5.8~6.0。本试验设置 9个处理,每个处
理接种 30个外植体,重复 3次。外植体以插入培
养基刚稳为宜,每瓶接种 1个外植体,迅速系好试
管,移至培养室内培养。培养条件为:温度 24~28
基金项目:“十一五”育种攻关课题(2006YZGG- 10),中国
科学院知识创新工程重大项目 (kzcx2- yw- 406- 2,
kzcx2- yw- 312)资助。

DOI:10.14051/j.cnki.xdyy.2010.05.028
2010年第 5期 现代园艺 试验研究
动率有一定的影响。经方差分析可知,见图 2(A),,
NAA浓度对诱导率的影响呈正态分布趋势,NAA
浓度为 0.2mg/L时,平均启动率最高,为 61.13%,
明 显 高 于 0.1mg/L 的 39.27% 和 0.3mg/L 的
44.82%,差异显著。
图 2不同 NAA (A)和 6- BA (B)浓度的启动率柱状图
2.1.2 不同 6- BA浓度对启动率的影响。由图 1可
知,5号处理诱导率为 71.1%,显著高于 4号处理
的 54.5%和 6号处理的 57.8%,说明 6- BA的浓度
对外植体的诱导率也有影响。由图 2 (B) 可知,
6- BA浓度为 2.0 mg/L时,平均启动率最高,为
56.3%,分别高于 1.0mg/L的 47.4%和 3.0mg/L的
41.5%,处理间差异显著。
2.2 不同生长调节剂浓度对侧芽高度的影响
经方差分析可知,不同生长调节剂浓度对侧
芽高度的影响差异显著(F=8.193,Sig=0.000)。由
图 3可知,5号处理侧芽高度最高,平均高度为
1.73 cm,8号处理和 2号处理侧芽高度也较高,分
别为 1.60cm和 1.50cm,且此 3个处理之间的差异
不显著,说明三者都具有明显侧芽高度优势;1号
处理和 3号处理侧芽高度最低,都为 1.10cm。
2.2.1 NAA浓度对侧芽高度的影响。由图 4(A)可
知,当 NAA浓度为 0.2 mg/L时,平均侧芽高度为
1.41cm,相较于 0.1mg/L时的 1.24cm和 0.3mg/L
时的 1.34 cm,平均侧芽高度最高,而由图 3可以
看出,2号处理和 8 号处理侧芽高度明显高于 4
号处理和 6 号处理,造成当 NAA 浓度不为
0.2mg/L 时侧芽高度反而高于 NAA 浓度为
0.2mg/L时的原因是 6- BA浓度不同。通过方差分
析,得出各处理间差异不显著(F=1.004,
Sig=0.381),说明 NAA浓度对侧芽高度的影响还
受到 6- BA浓度的制约。当 6- BA浓度一定时,
NAA浓度对于侧芽高度起决定作用,即当 NAA
浓度为 0.2mg/L时,侧芽高度比 NAA其它浓度下
的侧芽高。
图 4不同 NAA (A)和 6- BA (B)浓度下侧芽高度柱状图
2.2.2 6- BA浓度对侧芽高度的影响。由图 4(B)可
以看出,6- BA浓度为 2.0mg/L时,平均侧芽高度
为 1.62cm,相较于 1.0mg/L 时的 1.16 cm 和
3.0mg/L时的 1.21cm,侧芽高度最高。通过方差分
析得知,6- BA 浓度对侧芽高度影响差异显著
(F=27.013,Sig=0.000)。总体说来,当 NAA浓度
一定时,6- BA浓度对侧芽高度起决定作用,通过
对以上数据进行分析得出,6- BA浓度对侧芽高
度的影响大于 NAA浓度对侧芽高度的影响。
3 讨论
6- BA为细胞分裂素,促进芽丛生长;NAA为
生长素,低浓度时促进腋芽的生长,在组织培养
中,是培养基中不可缺少的物质,常在初代培养中
用来诱导外植体分化[5]。不同激素的配比是影响外图 3不同处理下的侧芽高度柱状图

试验研究 现代园艺 2010年第 5期
植体能否成功启动的关键因素之一,而 NAA浓度
过大将会抑制植物生长,因此本试验在 NAA浓度
范围选择中,选用较低的浓度。本试验结果表明:
当 NAA 0.2mg/L,6- BA 2.0mg/L时,对西南红山茶
外植体的诱导效果最佳,而袁颖在进行攀西西南
山茶幼叶愈伤组织诱导的研究时指出:NAA 1.0
mg/L,6- BA 1.0mg/L时诱导效果最佳。产生此差异
的原因可能是袁颖选用的外植体为幼嫩叶片,而
本试验材料为半木质化茎段,植物不同器官对于
最佳诱导浓度需求不尽相同;为避免 NAA对于植
物的抑制作用,本次试验选用的 NAA浓度范围为
0.1~0.3mg/L,而袁颖的研究中选择 NAA的浓度范
围为 0.5~4.0mg/L,植物激素浓度范围的选择不同
也会造成试验结果有所不同。
山茶繁殖的传统方法有:种子繁殖、扦插、压
条等,但西南红山茶育性差,一般不结种子,扦插
繁殖生根率很低,品种退化现象非常严重。而组织
培养技术获得材料容易,植株变异率低[6],且不受
季节和环境限制,每年能以数万倍、数十万倍乃至
百万倍的速度增加[7],将植物组织培养技术应用于
攀西西南红山茶的快速繁殖,对保护攀西地区野
生西南山茶种质资源,丰富园林植物多样性以及
缓解优质种苗供应紧张的状况等具有十分重要的
意义。
4 结论
通过观察不同 NAA和 6- BA浓度配比对西
南红山茶外植体启动率和侧芽高度的影响,得出
5号处理(NAA 0.2 mg/L,6- BA 2.0 mg/L)在西南
红山茶初代培养中,侧芽启动率最高,侧芽高度最
高,且死亡数和污染数都相对其它培养基较低,是
西南红山茶初代培养基的最佳配方选择。4号处
理和 6号处理启动率较高,而 8号处理和 2号处
理侧芽高度较高,通过显著性分析,得出 NAA浓
度对外植体启动率有显著的影响,最佳浓度为 0.2
mg/L,而 6- BA对外植体侧芽高度具有显著的影
响,最佳浓度为 2.0mg/L。
(收稿:2010- 01- 16)
作者简介:冉华(1954- ),女,实验师,主要从事林业生态工
程及生物技术方面研究,电话:13648151486。
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园艺, 2008, 11(3): 12- 13
干旱和盐度对甜菜发芽和生长的影响
王俊强
(黑龙江省农业科学院齐齐哈尔分院,齐齐哈尔 161006)
摘 要:通过经 NaCl处理的盐胁迫和 PEG处理的水分胁迫下,甜菜种子发芽和幼苗生长情况,明确盐胁迫和
水分胁迫对甜菜种子发芽和幼苗生长的影响。结果表明:甜菜在干旱以及盐碱的土壤条件下生长,其生长状态
受到明显影响,生长指标明显减弱,其成活率降低,有一定的耐盐性,而对干旱更为敏感。
关键词:高盐;干旱;甜菜;发芽率
输、离子流等,导致细胞膜的正常功能受损,进而
使细胞的代谢及生理功能受到不同程度的破坏。
干旱胁迫和盐碱地使幼苗生长受阻,芽势弱,发根
量少且根短,苗弱,成活率低,严重影响以后的生
长发育及产量。
PEG (聚乙二醇)作为理想的渗透压剂,能保
甜菜是我国北方一种主要的糖料作物,属于
嗜盐作物。对于植物生长来说环境胁迫是最重要
的限制因素,其中以盐渍化和干旱最为严重。北方
干旱地区和盐碱地区分布广泛。据报道盐渍化的
影响涉及 40%的灌溉土地,对农作物的减产应负
70%的责任。盐胁迫影响到质膜的组分、透性、运
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