全 文 ：土沉香的组培快繁技术研究
徐强兴 , 吴妃华 , 周立赖
(湛江市农业技术推广中心 , 广东 湛江　524043)
　　摘　要:利用土沉香幼芽茎段进行组培快繁技术研究 ,结果表明:MS +BA 0.2 mg/ L 培养基比较适合芽的诱导培
养;连续在 1/ 2 MS+BA 0.1 mg/ L培养基中培养的丛生芽 , 增殖率高 ,且玻璃芽率低;间接生根法培养的生根效果较好 ,
其中以接入 1/2 MS+NAA 5.0 mg/ L 培养基 、培养 2天后移至不加任何外源激素的 1/ 2MS 培养基中培养的试管苗生根
率最高;试管苗假植于椰壳基质中 ,成活率可达 73.2%。
关键词:土沉香;茎段;组培快繁
中图分类号:S567.1+9　　文献标识码:A　　文章编号:1004-874X(2006)08-0044-03
　　土沉香〔Aqui laria sinensis(Lour.)Gilg〕,又称白
木香 ,为瑞香科(Thymelaceae)植物 ,是一种热带亚热
带常绿乔木 ,也是我国生产沉香的唯一植物资源[ 1] ,现
列为国家保护三级濒危植物[ 2] 。
多年来 ,人们对沉香进行了掠夺式的开采 ,致使沉
香资源短缺 。因此 ,如何恢复沉香资源 ,已迫在眉睫 。
土沉香原属于自然野生 ,主要通过种子繁殖 ,但野生成
年树现今已极其稀少 ,无法得到大量的种子 ,大面积推
广种植极其困难;而且通过种子繁殖的种苗容易变异 ,
不易保留良种优势。生产实践证明 ,组织培养方法是
快速繁殖种苗和保持良种优势的有效途径 ,对于恢复
沉香资源有着重要的意义 。
1　材料与方法
1.1　诱导培养试验
供试材料为湛江市吴川的野生土沉香 ,选择性状
优良的成年树 ,在距地面约 20 cm 处砍断 ,待幼芽长出
后 ,于干旱晴天切取幼芽 ,用 0.05%HgCl2加少许吐温
-20消毒 10 min ,无菌水冲洗 4 ～ 5次后 ,切成带 1 ～ 2
个芽的茎段 ,接入不同浓度激素配比的诱导培养基(表
1)中 ,每个处理 30瓶 ,每瓶接种 1段。诱导试验以MS
为基本培养基 ,附加 30 g/L 蔗糖 、6 g/ L琼脂 , pH 值为
5.8。接种后置于培养室中培养 ,培养温度为 23 ～
25℃,以日光灯为光源 ,光照强度为 1 500 lx ,每天连续
光照 10 h 。
1.2　增殖培养试验
试验以前代增殖芽接种于没有添加任何外源激素
的1/2MS培养基中培养出的丛芽作材料 ,切取高约
收稿日期:2006-04-20
作者简介:徐强兴(1969-), 男 ,农艺师
2 cm 、生长正常 、大小基本一致的单芽 ,接入不同无机
盐浓度培养基(MS 、1/2MS 、1/3M S 、1/4MS)和不同激
素配比培养基(不添加激素 、6-BA 0.05 mg/L 、6-BA
0.1 mg/L 、6-BA 0.25 mg/L 、6-BA 0.5 mg/ L 、6-
BA 0.1 mg/L +NAA 0.1 mg/ L 、6-BA 0.1 mg/L +
NAA 0.3 mg/ L)中 ,每个处理 6瓶 ,每瓶接种 5株 。接
种后置于培养室中培养 ,培养条件与诱导培养相同 ,培
养周期为 40天。培养 40天后调查各处理的诱导率和
芽生长情况 。
1.3　生根培养试验
直接生根诱导试验以 1/2MS为基本培养基 ,设附
加 NAA 0.05 、0.1 、0.25 、 0.5 、 1.0 mg/L , IBA 0.05 、
0.1 、0.25 、 0.5 、 1.0 mg/ L , NAA 0.1 mg/L+IBA 0.
1 mg/L ,NAA 0.5 mg/L +IBA 0.5 mg/ L 及不加任何
激素(CK)等 13个处理 ,切取高约 2 cm 、大小基本一致
的不定芽接入各种培养基中培养 ,每个处理 5瓶 ,每瓶
接种 4株 。培养 50天后观察各处理组培苗的生根情
况 。
间接生根诱导试验以 1/2MS为基本培养基 ,设附
加 NAA 3.0 、 5.0 、 7.0 mg/L 及 IBA 3.0 、 5.0 、7.0
mg/L等 6 个处理 ,切取大小基本一致 、生长正常 、高
约 2 cm 的不定芽接入各种培养基中 ,培养 2天后移入
不加任何外源激素的 1/2MS培养基中继续培养 ,每处
理 6瓶 ,每瓶接种 5株 。培养 50天后观察各处理组培
苗的生根情况。
1.4　假植试验
当土沉香生根苗长至 3 ～ 4 cm 高时 ,将培养瓶从
培养室中移到散射光较强处炼苗 ,约 10天后植入椰壳
基质中 ,25天后观察组培苗的假植成活率。
2　结果与分析
2.1　丛芽的诱导
44 广东农业科学　2006 年第 8 期　
DOI :10.16768/j.issn.1004-874x.2006.08.018
据观察 ,经过消毒处理的土沉香幼芽茎段接种于
不同浓度外源激素的培养基中培养 ,约 10天后叶腋间
开始长出基部带组织的单芽 ,再经过 30天培养 ,单芽
周围长出丛芽。
从表 1可以看出 ,培养 40天后各诱导培养基处理
的芽均生长正常 ,但随着 6-BA 浓度的升高 ,芽基部
的愈伤组织增多 ,阻碍了芽的诱导和增殖 ,加入 NAA
后其愈伤组织明显增多 。从表 1还可以看出 ,当外源
激素 6-BA 浓度为 0.2 mg/L 时 ,愈伤组织较少 ,芽诱
导率和诱导芽数最高 ,比较适合用于土沉香芽的诱导
培养。
将诱导出的芽连同基部组织切下 ,接种于 1/2MS
+6-BA 0.1 mg/ L培养基中 , 培养 40天后发现每个
芽的基部和叶腋间又长出 3 ～ 4个新芽 ,经过不断的切
割培养可得到大量的丛芽。
2.2　芽的增殖
表 1　不同激素配比对芽诱导的影响
处　理　　　　　 外植体数(个)
诱导芽数
(个)
诱导率
(%) 芽生长状况
6-BA 0.05 mg/ L 25 1.0 44.0 生长正常 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.1 mg/ L 20 1.5 55.0 生长正常 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.2mg/ L 23 2.4 73.9 生长正常 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.5 mg/ L 18 1.7 66.7 生长正常 ,基部愈伤组织较多
6-BA 1.0 mg/ L 16 0.8 37.5 生长正常 ,基部愈伤组织较多
6-BA 0.2 mg/ L+NAA 0.1 mg/ L 21 1.4 52.4 生长正常 ,基部愈伤组织较多
　　注:因接种后部分外植体污染 , 故各处理调查的外植体数少于 30 个。
2.2.1　不同无机盐浓度对芽增殖和玻璃芽率的影响
　土沉香在增殖培养过程中 ,很容易产生水渍状透明
的玻璃芽 ,严重影响了芽的增殖和质量 ,这是木本植物
组培快繁中的共同弊病。不同无机盐浓度培养基试验
结果(表 2)表明 , 在外源激素 6 -BA 添加浓度为
0.1 mg/ L的条件下 ,不同无机盐浓度对土沉香的芽增
殖和玻璃芽率有不同的影响 。其中 ,全量 MS 培养基
易产生玻璃芽 ,严重阻碍了芽的增殖 ,不适合作增殖培
养基;在 1/2MS 培养基中培养的芽生长正常 、健壮 ,增
殖率较高 ,且玻璃芽率较低 ,比较适合用于芽的增殖培
养;随着无机盐浓度的继续降低 ,玻璃芽率有下降的趋
势 ,即 1/3MS 、1/4MS培养基中的玻璃芽率较低 ,但芽
的长势较差 ,增殖率较低 ,均不适合作增殖培养基 。另
据观察 ,增殖芽若连续在全量 MS培养基中培养 ,玻璃
芽的发生会逐渐加重;而连续在 1/2MS 培养基中培
养 , 玻璃芽率则保持在较低的水平 , 说明1/2MS 培养
表 2　不同无机盐浓度对芽增殖和玻璃芽率的影响
处理 增殖倍数 玻璃芽率(%) 芽生长状况
MS 1.8 58.6 浓绿 ,长势好 , 基部有少量愈伤组织 , 玻璃化严重
1/2MS 3.5 19.0 淡绿 ,长势稍差 , 基部有少量愈伤组织 , 玻璃化较轻
1/3MS 2.5 16.4 淡绿 ,长势稍差 , 基部有少量愈伤组织 , 玻璃化较轻
1/4MS 1.3 10.2 淡黄 ,长势差 , 基部有少量愈伤组织 , 玻璃化较轻
基适宜于土沉香增殖芽的连续培养 。
2.2.2　不同激素配比对芽增殖和玻璃芽率的影响　
从表 3可以看出 ,土沉香芽增殖对细胞分裂素 6-BA
的浓度要求较低 ,当 6-BA浓度小于 0.1 mg/L 时 ,增
殖倍数随着浓度的加大而升高 , 当 6 -BA 为
0.10 mg/L时其增殖倍数达到最大值 , 之后随着 6-
BA浓度的继续升高 ,增殖倍数反而下降 ,并且随着 6
-BA浓度的升高 ,芽玻璃化有加重的趋势 。从表 3还
可以看出 ,在 6-BA的基础上添加 NAA ,对芽玻璃化
未产生太大的影响 ,但芽的基部明显膨大并产生较多
的愈伤组织 ,阻碍了芽的增殖 ,增殖效果明显降低 。
试验结果表明 ,在土沉香组织培养过程中 ,采用配方
1/2MS+6-BA 0.1 mg/L 作为芽的增殖培养基 ,其效
果最佳 ,增殖率最高 ,芽生长正常 ,玻璃芽率最低。
2.3　根的诱导
直接生根诱导培养 50天后的调查结果显示 ,各培
养基处理的组培苗均无法生根 ,除不加任何激素的对
照培养基外 , 其他培养基处理的组培苗基部均伴有愈
45
表 3　不同激素配比对芽增殖和玻璃芽率的影响
处　理　　　 增殖倍数 玻璃芽率(%) 芽生长状况
不加任何激素(CK) 1.5 10.1 浓绿 ,健壮 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.05 mg/ L 3.0 15.4 浓绿 ,健壮 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.1 mg/ L 3.7 16.7 浓绿 ,健壮 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.25 mg/ L 3.0 30.2 浓绿 ,健壮 ,基部有少量愈伤组织
6-BA 0.5 mg/ L 2.1 48.9 浓绿 ,健壮 ,基部愈伤组织较多
6-BA 0.1 mg/ L +NAA 0.1 mg/ L 2.0 18.1 浓绿 ,健壮 ,基部愈伤组织较多
6-BA 0.1 mg/ L +NAA 0.3 mg/ L 1.0 19.2 浓绿 ,健壮 ,基部愈伤组织较多
伤组织产生 ,且随生长素浓度的升高 ,愈伤组织发生越
严重 。可见 ,土沉香组培苗较难直接生根。
　　间接生根诱导培养后 50 天的调查结果见表 4。
从表 4可见 ,间接生根诱导培养的效果较好 ,生根率明
显提高 ,其中以接种于 1/2MS +NAA5.0 mg/L 培养
基中 ,培养 2天后移至不加任何外源激素的 1/2MS 培
养基中培养 ,组培苗的生根率最高 ,平均根数最多 ,且
幼苗生长正常 ,基部没有愈伤组织 。这种分阶段间接
生根法在一些果树和油料木本植物浩浩巴[ 3]的组织培
养中已有采用 ,是木本植物生根的一种有效途径。
表 4　不同种类和浓度生长素对根诱导的影响
处 理　 生根率(%) 生根数(条/株)
NAA 3.0 mg/ L 　　15.7 0.30
NAA 5.0 mg/ L 86.7 2.30
NAA 7.0 mg/ L 64.0 1.60
IBA 3.0 mg/ L 9.6 0.17
IBA 5.0 mg/ L 59.3 1.40
IBA 7.0 mg/ L 52.1 1.10
2.4　假植效果
　　当土沉香生根苗长至 3 ～ 4 cm 高时 , 将苗瓶从培
养室中移到散射光较强处炼苗约 10天 ,然后从瓶中取
出生根苗 ,洗净培养基 ,植入椰壳基质中 ,淋足定根水 ,
用薄膜覆盖保湿 ,外用黑网遮阴 ,25天后移去薄膜 ,保
留黑网 ,然后保持间干间湿管理 。据对 82株组培苗的
调查 ,成活率达 73.2%。成活的小苗生长旺盛 、正常 ,
没有出现变异现象。
3　结语
在植物微体快速繁殖过程中 ,玻璃苗的出现已成
为一种很普遍的现象 ,这种玻璃苗有时多达 50%以
上 ,严重影响了繁殖率的提高 ,因而成为茎尖脱毒 、工
厂化育苗和材料保存等的严重障碍 ,造成人 、财 、物的
极大浪费[ 4] 。影响芽玻璃化的因素很多 ,同时也较复
杂 。本试验结果证明 ,在土沉香的组培快繁中 ,适当降
低无机盐的浓度可有效地降低玻璃化率 ,明显提高增
殖率和芽的质量。同时 ,木本植物的组培苗往往较难
生根 ,间接生根法有时可收到意想不到的效果 ,其可能
是木本植物生根的一种合适途径 。
参考文献:
[ 1] 　中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第二册)
[ M] .北京:科学出版社 , 1972:948.
[ 2] 　中国科学院植物研究所.中国植物红皮书———稀有濒危
植物.[ M] .北京:科学出版社 , 1992:670-671.
[ 3] 　姚军 ,张燕玲 , 林荣.浩浩巴组织培养和快速繁殖[ J] .广
西植物 , 1996 , 16(1):73-76.
[ 4] 　曹孜义 ,刘国民.实用植物组织培养教程.[ M] .兰州:甘
肃科技出版社 , 1999:69.
“荔枝烈酒生产技术”通过成果鉴定
　　由广东省农业科学院 、华南理工大学轻工与食品学院和广
东帝浓酒业有限公司共同承担的 2005 年度粤港关键领域重点
突破招标项目“岭南特色水果酿造优质果酒核心技术研究及产
业化”子项目“荔枝烈酒生产技术” , 于 2006 年7 月 28 日通过成
果鉴定。省科技厅 、揭阳市及惠来县等 40 多位有关负责人和
广东卫视等近 10 家媒体参加了鉴定会。
鉴定会专家组成员包括原张裕葡萄酒公司总经理 、中国食
协葡果酒专业委员会主任陈泽义 ,天津王朝酒业有限公司常务
副总经理 、中国酒协葡果酒专业委员会主任王树生及中国葡萄
酒检测中心主任朱济义等国内果葡酒领域专家。专家组听取
了有关汇报 , 审查了鉴定资料 , 认为该成果以岭南地区的特色
水果荔枝为研究对象 , 通过发酵后蒸馏酿造荔枝烈酒 , 在产品
设计 、基酒酿造等多方面具有明显创新。所研制产品具有荔枝
蒸馏酒的典型风格。技术达到国际领先水平。
46