全 文 ：基金项目：新疆维吾尔自治区科技支撑计划（２０１１３３１２７）
作者简介：常军民（１９６５－），男，博士，教授，硕士生导师，研究方向：天然药物研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｊｍｃｊｎ２４７１＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ。
天山花楸药材质量标准研究
常军民１，向　阳２，李毓斌１，何家伟１
（新疆医科大学１药学院，乌鲁木齐　８３００１１；２第一附属医院检验科，乌鲁木齐　８３００５４）
摘要：目的　制定天山花楸药材质量标准，为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法　以《中国
药典》２０１０版为依据，采用ＴＬＣ方法对天山花楸药材中金丝桃苷进行定性鉴别；采用反相高效液相色谱法，梯度洗
脱，测定天山花楸药材中金丝桃苷、苦杏仁苷的含量。结果　天山花楸药材以正丁醇－乙酸乙酯－冰醋酸－水（９∶６
∶３∶４）为展开剂，天山花楸中金丝桃苷薄层色谱鉴别，分析显示检查项中暂定天山花楸药材水分不得过８．０％，总
灰分不得过９．０％、酸不溶性灰分不得过０．７０％。醇溶性浸出物不得少于３０％。结论　实验方法简单、准确，可
用于天山花楸药材的质量控制。
关键词：天山花楸；质量标准；金丝桃苷；苦杏仁苷
中图分类号：Ｒ９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１３）０６－０７８５－０４
Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．
ＣＨＡＮＧ　Ｊｕｎｍｉｎ１，ＸＩＡＮＧ　Ｙａｎｇ２，ＬＩ　Ｙｕｂｉｎ１，ＨＥ　Ｊｉａｗｅｉ　１
（１　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ；
２　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｅｔ　ｕｐ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｃｒｉｔｅｒｉａ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｓｃｉｅｎ－
ｔｉｆｉｃ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｃｈｉ－
ｎｅｓｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ（２０１０），ｔｈｉｎ　ｌａｙｅｒ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＴＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ
Ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ｉｎ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．，ａｎｄ　ｒｅｖｅｒｓｅｄ　ｐｈａｓｅ　ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
（ＲＰ－ＨＰＬＣ）ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ　ａｎｄ　Ａｍｙｇｄａｌｉｎ　ｉｎ　Ｓｏｒｂｕｓ
ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．ｂｙ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｍｏｄｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ
Ｒｕｐｒ．ｗａｓ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ＴＬＣ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎ－ｂｕｔｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ－ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ－
ｉｃｅ　ｖｉｎｅｇａｒ－ｗａｔｅｒ（９∶６∶３∶４）ａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｓｏｌｖｅｎｔ，ｔｅｍｐｏｒａｒｉｌｙ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｎｇ　ｍｏｉｓｔｕｒｅ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｏｖｅｒ　８．
０％，ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ａｓｈｅｓ　ｗａｓ　９．０％，ａｃｉｄ－ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ　ａｓｈｅｓ　ｗａｓ　０．７０％，ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ－ｓｏｌｕｂｌｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｒｏｄｕｃｔ　ｗａｓ
ｎｏｔ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　３０％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ
ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．；ｑｕａｌｉｔｙ　ｓｔａｎｄａｒｄ；Ｈｙｐｅｒｏｓｉｄｅ；Ａｍｙｇｄａｌｉｎ
　　天山花楸系蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａ）花楸属（Ｓｏｒｂｕｓ）
植物天山花楸 （Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．）的干燥
嫩枝叶，主要分布在从哈密至伊犁的天山山脉，海拔
１　８００～２　８００ｍ［１－２］。天山花楸为维吾尔和哈萨克
族民间习用药材之一，于明等［３］报道，天山花楸含有
多种具有生物活性的物质（包括黄酮类、生氰苷类等
多种化合物）及各种微量元素，其主要用于治疗慢性
支气管炎、肺结核、哮喘、咳嗽、水肿、胃炎、维生素Ａ
和维生素Ｃ缺乏症等［４－６］。为了更好地开发利用这
一药用植物资源，本实验参照《中国药典》２０１０版对
　第３６卷　第６期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３６　Ｎｏ．６
　２０１３年６月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｎ．２０１３
天山花楸的水分、灰分、酸不溶性灰分、重金属、砷
盐、浸出物进行测定，采用ＴＬＣ法和 ＨＰＬＣ方法进
行定性、定量研究，为制定天山花楸药材的质量标
准、开发新药奠定基础。
１　仪器与试药
１．１　仪器　ＬＣ－２０Ａ型高效液相色谱仪（日本岛
津），ＳＰＤ－Ｍ２０Ａ型二极管阵裂检测器（日本岛津），
ＳＩＬ－２０Ａ型自动进样器（日本岛津），ＣＡＭＡＧ　ＬＩ－
ＯＮＭＡＴ　５薄层色谱半自动点样仪（瑞士ＣＡＭＡＧ
（卡玛）公司），ＣＡＭＡＧ　ＲＥＰＲＯＳＴＡＲ　３薄层色谱
数码 成 像 系 统 （瑞 士 ＣＡＭＡＧ（卡 玛）公 司），
ＳＫ８２１０ＨＰ型超声波清洗器（功率５００ Ｗ，频率
５９Ｈｚ，上海科导），ＢＳ１１０Ｓ电子分析天平（北京赛
多利斯天平有限公司，ｄ＝０．１ｍｇ），ＴＤＡ－８００２型恒
温水浴锅。
１．２　试药　金丝桃苷对照品购于中国生物制品检
定所（批号：１１１５２１－２００３０３），苦杏仁苷对照品购于
中国生物制品检定所（批号：１１０８２０－２００４０３），甲醇
（Ｂｕｒｄｉｃｋ＆Ｊａｃｋｓｏｎ色谱纯），水为超纯水，其他试剂
为分析纯；本实验所用天山花楸（１０批）来源于采自
不同产地、不同采摘时间，经新疆医科大学药学院生
药／天药教研室帕丽达·阿不力孜教授鉴定为天山
花楸 （Ｓｏｒｂｕｓ　ｔｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ　Ｒｕｐｒ．）的干燥嫩枝叶。
２　方法与结果
２．１　天山花楸的性状与显微特征
２．１．１　天山花楸的性状 天山花楸为奇数羽状复
叶，连叶柄长１４～１７ｃｍ，小叶片１１～１５片，卵状披
针形，长３～６ｃｍ，宽１～１．８ｃｍ，先端渐尖，基部偏
斜圆形。叶缘锯齿状，近基部全缘，两面无毛，上表
面黄绿色，下表面略浅。质脆，味微苦。天山花楸枝
叶见图１。
图１　天山花楸枝叶上、下表面对照
２．１．２　天山花楸显微特征　草酸钙簇晶较少，棱角
宽钝；导管主为螺纹导管，导管分子较细；不定式气
孔，副卫细胞３～４个。天山花楸枝叶粉末显微特征
见图２。
　　　　　 草酸钙簇晶（Ｘ　１００） 　　　　　 非腺毛（Ｘ　１００） 　　　　 不定式气孔（Ｘ　１００）
　　　　　 表皮细胞顶面观察（Ｘ　１００）　　　　 叶脉导管１（Ｘ　１００）　 　　　　 叶脉导管２（Ｘ　１００）　
图２　天山花楸叶粉末显微结构
２．２　水分检查　照水分测定法（中国药典２０１０版
一部附录ＩＸ　Ｈ）测定１０批样品水分。结果表明不
同批次天山花楸药材的水分含量最高值为７．２０％，
最低值为６．３８％，平均值为６．８８％，故将天山花楸
药材的水分暂定为不得过８．０％。
２．３　总灰分　照灰分测定法（中国药典２０１０版一
６８７ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷　
部附录ＩＸ　Ｋ）测定１０批样品总灰分。结果表明不
同批次的天山花楸总灰分含量最高值为８．４７％，最
低值为６．４０％，平均值为７．０４％，故总灰分定为不
得过９．０％。
２．４　酸不溶性灰分　照灰分测定法（中国药典
２０１０版一部附录ＩＸ　Ｋ）测定１０批天山花楸酸不溶
性灰分。结果表明不同批次天山花楸药材的水分含
量最高值为０．６５％，最低值为０．１３％，平均值为
０．３９％，故酸不溶性灰分暂定为不得过０．７０％。
２．５　重金属　按重金属检查法第二法（中国药典
２０１０年版一部附录ⅨＥ）操作，检测１０批天山花楸
的重金属含量。检测结果表明，天山花楸药材的重
金属含量不超过百万分之十，符合药典规定。
２．６　砷盐　按中国药典砷盐测定法检测１０批天山花
楸药材的砷盐含量低于百万分之一，符合药典规定。
２．７　醇溶性浸出物含量　照浸出物测定法（中国药
典２０１０版一部附录ＩＸ　Ａ）测定１０批天山花楸药材
的醇溶性浸出物。测定结果最高值为３９．７５％，最
低值为３０．１９％，平均值为３４．４５％，故暂定本品醇
溶性浸出物不得少于３０％。
２．８　薄层色谱鉴别
２．８．１　对照品溶液的制备　精密称取金丝桃苷对
照品０．１ｍｇ，加甲醇制成１ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液。
２．８．２　供试品溶液的制备　取１０个不同产地天山
花楸药材粉末各２ｇ，置１００ｍＬ的锥形瓶中，加甲
醇５０ｍＬ超声提取３０ｍｉｎ，过滤，作为供试品溶液。
２．８．３　薄层色谱条件及结果　吸取对照品溶液、供
试品溶液各２μＬ，分别点于同一聚酰胺薄层板上，
以正丁醇－乙酸乙酯－冰醋酸－水（９∶６∶３∶４）为展开
剂，展开，取出，立即喷以５％三氯化铝乙醇溶液，晾
干，电吹风加热至斑点显色清，晰紫外光灯（３６６ｎｍ）
下检视，供试品在与对照品色谱相应的位置处，显相
同颜色斑点，见图３。
１：供试品；２：金丝桃苷对照品溶液；３：供试品
图３　金丝桃苷对照品和天山花楸供试液薄层色谱图
２．９　有效成分的测定　按文献［７］方法测定样品中
苦杏仁苷和金丝桃苷的含量。
２．９．１　色谱条件　以十八烷基硅烷键合硅胶为填
充剂，以甲醇为流动相（Ａ），以水为流动相（Ｂ），以
０．１％磷酸溶液为流动相（Ｃ），按下表（表１）进行梯
度洗脱。检测波长苦杏仁苷为２１５ｎｍ，金丝桃苷为
３６０ｎｍ。
表１　甲醇（Ａ）－水（Ｂ）－０．１％磷酸溶液（Ｃ）梯度洗脱程序
时间／ｍｉｎ　 Ａ／％（ｖ／ｖ） Ｂ／％（ｖ／ｖ） Ｃ／％（ｖ／ｖ）
０　 １５　 ７０　 １５
１８　 １５　 ７０　 １５
２８　 ２５　 ６０　 １５
５１　 ３５　 ５０　 １５
６１　 ４０　 ４５　 １５
７５　 ５５　 ４０　 １５
２．９．２　对照品溶液的制备　精密称取苦杏仁苷对
照品、金丝桃苷对照品适量，加甲醇制成每１ｍＬ各
含苦杏仁苷２００μｇ、金丝桃苷４００μｇ的溶液即得。
２．９．３　供试品溶液的制备　取本品粉末约５ｇ，精
密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇５０ｍＬ，超声提
取３０ｍｉｎ，提取３次，合并提取液，４　０００ｒ／ｍｉｎ／离
心１５ｍｉｎ，取上清液将甲醇挥尽，用水溶解，再用乙
醚萃取，将水溶液浓缩至１０ｍＬ，摇匀，制成供试品
溶液。
２．９．４　测定结果　按“２．９．１”项下的色谱条件，分
别测定１０个批次天山花楸中苦杏仁苷和金丝桃苷
的含量测定，结果见表２。
表２　不同批次天山花楸中两种成分的含量
编号 取样量／ｇ 苦杏仁苷含量／（ｍｇ／ｇ） 金丝桃苷含量／（ｍｇ／ｇ）
１　 ５．０１４　４　 ０．０２５　７　 ０．５７３　１
２　 ５．０１３　８　 ０．０４６　３　 ０．６９１　４
３　 ５．０１２　６　 ０．０１７　８　 ０．７１１　４
４　 ４．９９７　１　 ０．０５２　１　 １．６４３　２
５　 ５．００６　２　 ０．０７５　４　 ２．３９８　３
６　 ４．９９４　０　 ０．０１１　２　 ２．３４５　１
７　 ５．００６　５　 ０．０４４　７　 ０．６２３　３
８　 ４．９８６　３　 ０．０６５　８　 ０．７９６　３
９　 ４．９８２　１　 ０．０５２　１　 ０．３３８　１
１０　 ５．０１１　３　 ０．０６１　３　 ０．５４５　３
平均值 ５．００２　４　 ０．０４５　２　 １．０６６　６
２．１０　指纹图谱的测定　按文献［８］进行测定天山
花楸１０批药材的指纹图谱。
２．１０．１　对照品溶液的配制　取苦杏仁苷对照品
５ｍｇ、金丝桃苷对照品１０ｍｇ，精密称定，分别置
２５ｍＬ容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
７８７　第６期 常军民，等：天山花楸药材质量标准研究
制成０．２０８ｍｇ／ｍＬ和０．４０８ｍｇ／ｍＬ的苦杏仁苷和
金丝桃苷对照品溶液。分别精密吸取苦杏仁苷和金
丝桃苷对照品溶液各５ｍＬ，混合均匀经０．４５μｍ微
孔滤膜过滤，作为混合对照品溶液。
２．１０．２　供试品溶液的配制　取天山花楸药材，粉
碎，过２０目筛，取药材粉末５．０ｇ，置１００ｍＬ具塞三
角瓶中，加甲醇５０ｍＬ超声提取（３０ｍｉｎ×３次），过
滤，合并提取液，将甲醇挥尽，用水溶解，再用乙醚萃
取，将水溶液浓缩至１０ｍＬ，摇匀，制成样品溶液。再
精密量取样品溶液１ｍＬ，置１０ｍＬ棕色容量瓶中，加
甲醇稀释至刻度，摇匀，经０．４５μｍ微孔滤膜滤过后
作为供试品溶液。
２．１０．３　测定结果　天山花楸药材的 ＨＰＬＣ图及
ＨＰＬＣ指纹图谱见图４、５。
６：苦杏仁苷；１３：金丝桃苷
图４　天山花楸药材ＨＰＬＣ图
图５　１０批天山花楸药材的ＨＰＬＣ指纹图谱
３　讨论
有关天山花楸药材醇溶性浸出物乙醇浓度的选
择，比较了３０％、５０％、７０％、９０％４个不同浓度，并
且比较冷浸法和热浸法浸提天山花楸的浸出物含
量，其结果５０％乙醇浓度（热浸法）的浸出物含量最
高，故选用了５０％的乙醇浓度。
砷盐为较易挥发的元素，照重金属药典处理方
法，直接干法灼烧会造成砷盐的损失。本实验采用
加入稳定剂硝酸镁，可与砷形成焦砷酸镁而被固定
住，而且硝酸镁可以起到氧化和疏松的作用，硝酸镁
干法灰化已收载于日本药局方，我国的食品、食品添
加剂中砷盐的检测［９］。
薄层色谱鉴别实验考查了展开剂、硅胶板和聚
酰胺薄层板，结果表明１０个不同产地天山花楸样
品，采用聚酰胺薄层色谱法检出金丝桃苷，操作简
便，专属性强，斑点清晰，分离度高，可作为天山花楸
药材的定性鉴别依据。
定量分析中采用 ＨＰＬＣ双波长法同时测定天
山花楸中苦杏仁苷和金丝桃苷含量，在该两类成分
的最大吸收处测定其含量，从而可消除干扰，方法更
灵敏，定量更为准确。由于不同产地的天山花楸所
处的地理条件、环境等因素的影响，所含有效成分的
含量有明显的差异。而由于同一产地不同采摘期的
天山花楸受气候和有效成分的稳定性等因素的影
响，含量差异则更大。从以上结果可以看出，药材质
量标准的确定是一项复杂的工作，仅以某种有效成
分的量难以全面反映药材质量，指纹图谱用以质量
标准的确定更客观。
通过实验研究暂定了天山花楸药材质量控制指
标的标准值，制订了质量标准草案，该质量标准可用
于评价天山花楸药材的质量，为天山花楸药材资源
的开发利用提供了科学依据。
参考文献：
［１］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第３６卷）
［Ｍ］．北京：科技出版社，１９７４：２８４－２８５．
［２］　新疆植物志编辑委员会．新疆植物志（第２卷第２分册）［Ｍ］．
乌鲁木齐：新疆人民出版社，１９７３：６２－６５．
［３］　于明，李铣．花楸属植物化学成分药理作用及其研究进展［Ｊ］．
辽宁中医学院学报，２００４，６（５）：６４．
［４］　新疆维吾尔自治区卫生厅．新疆自治区药品标准［Ｍ］．乌鲁木
齐：新疆人民卫生出版社，１９８７：１４．
［５］　李迪民，陈坚．天山花楸水提取液药理学研究［Ｊ］．中草药，
１９９５，２６（６）：３０２－３０４．
［６］　李迪民，陈坚，王岩．天山花楸醇提物药理作用研究［Ｊ］．西北
药学杂志，１９９９，１４（１）：１４－１５．
［７］　李毓斌，常军民，王岩．ＨＰＬＣ双波长测定天山花楸中苦杏仁
苷和金丝桃苷含量［Ｊ］．新疆医科大学学报，２０１０，３３（５）：５１４－
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［８］　李毓斌，常军民，王岩．天山花楸药材 ＨＰＬＣ指纹图谱的研究
［Ｊ］．中成药，２０１１，３３（５）：７４２－７４５．
［９］　赖宇红．中药砷盐检查有机破坏中存在的问题［Ｊ］．中国药品
标准，２００６，７（２），４８－５１．
［收稿日期：２０１３－０２－２６］
（本文编辑　施洋）
８８７ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３６卷